CN108277219A - 一种血液样本rna提取的试剂及提取方法 - Google Patents

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    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor

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Abstract

本发明公开了一种血液样本RNA提取的试剂及提取方法，包括以下重量份数的原料：苄基缩水甘油醚2‑8份、异佛尔酮二胺1‑5份、甘氨酸1‑5份、异丙醇5‑10份、十二烷基肌氨酸钠5‑10份、去离子水100‑200份，本发明成本低廉，操作简便，大大减少了操作时间，简化了操作步骤，降低了工作人员的劳动强度，利用本方法可以降低杂质含量、提高产物纯度，提纯效率更高。

Description

一种血液样本RNA提取的试剂及提取方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体是一种血液样本RNA提取的试剂及提取方法。
背景技术
RNA是以DNA的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录而形成的一条单链，主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达，是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。与DNA不同，RNA一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。
转运RNA是携带与三联体密码子对应的氨基酸残基与正在进行翻译的mRNA结合，而后核糖体RNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子，核糖核酸，存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。
近年来，在基因研究的相关技术中，作为生物体内重要遗传物质，RNA已越来越多的成为被研究的对象。RNA的提取是分子生物学研究的基础，然而现有的RNA提取过程操作复杂，提取时间较长，十分不便。
发明内容
本发明的目的在于提供一种血液样本RNA提取的试剂及提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种血液样本RNA提取的试剂，包括以下重量份数的原料：苄基缩水甘油醚2-8份、异佛尔酮二胺1-5份、甘氨酸1-5份、异丙醇5-10份、十二烷基肌氨酸钠5-10份、去离子水100-200份。
作为本发明进一步的方案：包括以下重量份数的原料：苄基缩水甘油醚5份、异佛尔酮二胺3份、甘氨酸2份、异丙醇8份、十二烷基肌氨酸钠8份、去离子水150份。
一种血液样本RNA的提取方法，包括以下步骤：（1）将血液样本15份放入离心机离心20min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为55-60℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌5-10min，静置2-4h，过滤得到RNA沉淀物。
作为本发明进一步的方案：步骤（1）中，离心转速为2500r/min。
作为本发明更进一步的方案：步骤（3）中，加热温度为58℃。 作为本发明更进一步的方案：步骤（5）中，搅拌时间为8min。
作为本发明更进一步的方案：步骤（5）中，静置时间为3h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明成本低廉，操作简便，大大减少了操作时间，简化了操作步骤，降低了工作人员的劳动强度，利用本方法可以降低杂质含量、提高产物纯度，提纯效率更高。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种血液样本RNA提取的试剂，包括以下原料：苄基缩水甘油醚2-8g、异佛尔酮二胺1-5g、甘氨酸1-5g、异丙醇5-10g、十二烷基肌氨酸钠5-10g、去离子水100-200g。
一种血液样本RNA的提取方法，包括以下步骤：（1）将血液样本15g放入离心机离心20min，离心转速为2500r/min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为55℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌5min，静置2h，过滤得到RNA沉淀物。
实施例2
一种血液样本RNA提取的试剂，包括以下原料：苄基缩水甘油醚5g、异佛尔酮二胺3g、甘氨酸2g、异丙醇8g、十二烷基肌氨酸钠8g、去离子水150g。
一种血液样本RNA的提取方法，包括以下步骤：（1）将血液样本15g放入离心机离心20min，离心转速为2500r/min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为60℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌10min，静置4h，过滤得到RNA沉淀物。
实施例3
一种血液样本RNA提取的试剂，包括以下原料：苄基缩水甘油醚5g、异佛尔酮二胺3g、甘氨酸2g、异丙醇8g、十二烷基肌氨酸钠8g、去离子水150g。
一种血液样本RNA的提取方法，包括以下步骤：（1）将血液样本15g放入离心机离心20min，离心转速为2500r/min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为58℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌8min，静置3h，过滤得到RNA沉淀物。
实施例4
一种血液样本RNA提取的试剂，包括以下原料：苄基缩水甘油醚6g、异佛尔酮二胺4g、甘氨酸3g、异丙醇6g、十二烷基肌氨酸钠7g、去离子水160g。
一种血液样本RNA的提取方法，包括以下步骤：（1）将血液样本15g放入离心机离心20min，离心转速为2500r/min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为56℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌7min，静置4h，过滤得到RNA沉淀物。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。

Claims (7)

1.一种血液样本RNA提取的试剂，其特征在于，包括以下重量份数的原料：苄基缩水甘油醚2-8份、异佛尔酮二胺1-5份、甘氨酸1-5份、异丙醇5-10份、十二烷基肌氨酸钠5-10份、去离子水100-200份。
2.根据权利要求1所述的血液样本RNA提取的试剂，其特征在于，包括以下重量份数的原料：苄基缩水甘油醚5份、异佛尔酮二胺3份、甘氨酸2份、异丙醇8份、十二烷基肌氨酸钠8份、去离子水150份。
3.一种根据权利要求1-2任一所述的血液样本RNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将血液样本15份放入离心机离心20min，离心完成后提取全血细胞，备用；（2）将苄基缩水甘油醚、十二烷基肌氨酸钠与去离子水混合，搅拌20min，得到混合液；（3）将混合液与全血细胞混合，震荡，水浴加热1h，加热温度为55-60℃，静置2h得到混合样本；（4）将异佛尔酮二胺、甘氨酸加入混合样本中，微波震荡20min，再放入离心机内离心30min，取上清液；（5）向上清液中加入异丙醇，搅拌5-10min，静置2-4h，过滤得到RNA沉淀物。
4.根据权利要求3所述的血液样本RNA的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，离心转速为2500r/min。
5.根据权利要求3所述的血液样本RNA的提取方法，其特征在于，步骤（3）中，加热温度为58℃。
6.根据权利要求3所述的血液样本RNA的提取方法，其特征在于，步骤（5）中，搅拌时间为8min。
7.根据权利要求3所述的血液样本RNA的提取方法，其特征在于，步骤（5）中，静置时间为3h。
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