CN108272890A - 一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取酚酸类成分的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取得到酚酸类化合物的制备方法。其特征在于制备方法包括杨树皮脱脂后再用70‑85%醇提取，经大孔树脂柱层析，得到酚酸类化合物集中的活性部位。本发明的提取工艺及方法获得的杨树皮有效酚酸类成分得率及纯度高，主要活性成分白杨素、高良姜素、山柰酚之和不少于15%。化合物白杨素、高良姜素、山柰酚的结构式如右图所示。

Description

一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取酚酸类成分的制 备方法

技术领域

本发明涉及一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取酚酸类成分的制备方法，属于天然药物化学领域。

背景技术

杨树产业是江苏省农民增收的重要渠道，主要产区在苏北的泗阳等地区，品种主要有I-69杨和I-72杨等。全省以杨树为主要加工原料的企业共有6000多家，全省人造板产量达3639万立方米，占全国的17.4%，位居全国第二；地板产量1.83亿平方米，占全国的29%，居全国第一。全省年可提供杨木635万立方米，企业每年收购消耗省内枝桠材达400多万吨。2011年杨树等林板纸一体化产值达1704亿元，占全省林业总产值2291亿元的74.4%，其中木材制品出口额达33亿美元。目前全省杨树产业直接带动全省农民就业1400万人，促进主产区农民人均年增收3000元，其中仅枝桠材就帮助农民增收10亿元以上。目前全省杨树林下经济面积近500万亩，产值182亿元。

杨树皮中含有对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、绿原酸、水杨酸、对羟基肉桂酸及咖啡酸等酚酸类化合物。绿原酸具有显著的抗菌、利胆、止血、升白和抗脂质过氧化的药理作用并且能增加胃肠蠕动、促进胃液和胆汁分泌，临床上用于治疗各种感染疾病及放射治疗、化学治疗所致的白细胞减少症。咖啡酸是绿原酸的水解产物，也具有升白、止血、利胆、镇咳、祛痰作用。阿魏酸和香草酸对维生素C、Fe²⁺/半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化都有较好的抑制活性。此外，杨树皮中还有洋芹素、槲皮素、山柰酚等，黄酮类化合物具有多种多样的药理作用，主要对心血管疾病和气管炎有疗效。有抗炎、祛痰解热、抑制血小板聚集与提高机体免疫功能的作用，并具有一定的抗肿瘤和保肝等作用，在防治高血压及动脉硬化方面是很好的辅助治疗剂。临床上用以治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤、肝脓肿。

传统杨树皮化学成分的提取分离主要是用热水提取，水提液或水提液的乙酸乙酯萃取部位加入过量的碱式醋酸铅，分为沉淀和水液两部分，沉淀脱铅后和水液分别用聚酰胺柱层析法或逆流分配法进行分离。发现碱性环境易引起苯甲酰基的转移，并且用和不用铅盐处理分得的成分相同，这些方法应用酸碱处理，环境污染大。因此开发简便、准确、环保的制备方法从木材加工副产物杨树皮脱脂后提取活性酚酸类成分具有重要意义。

发明内容

本发明目的是从从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取酚酸类成分的制备方法，该方法可用于酚酸类成分的工业化生产，制备方法简单，有机溶剂用量少。

本发明将脱脂后的杨树皮经70%-85%乙醇溶液提取，再经聚酰胺柱层析得到杨树皮总酚酸，杨树皮总酚酸的得率提高10%以上，对各种型号、极性的聚酰胺柱进行中试规模的制备工艺研究，优选出最适合提取杨树皮总酚酸的材料以及最佳上样量、上样浓度、洗脱溶剂、洗脱体积、流速等参数，优选出最佳的杨树皮总酚酸提取工艺，所得的总酚酸中含主要活性成分白杨素、高良姜素、山柰酚之和不少于15%。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

1、一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取杨树皮活性酚酸类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：

（1）将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入3～10倍体积的低级醇进行提取，提取温度为30～70℃，提取时间为6～12 h，过滤得到滤液；按以上提取温度和时间反复提取1～4次，过滤，合并滤液得到粗提取液；所述低级醇为C1～C5的醇类，浓度为70-85%；

（2）将粗提取液进行减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa）），减压浓缩后的粗提取浸膏溶于30～70℃的热水中，粗浸膏与热水的体积比为1:2～3，抽滤，抽滤后的水溶液（滤去水不溶的固体）浓缩至干即得到杨树皮活性酚酸类化合物，该活性物的得率为0.8%～3重量%（即杨树皮活性酚酸类化合物的重量（g）÷杨树皮的重量（g）×100%），化合物A的含量为3-5%，化合物B含量为5-7%，化合物C的含量为7-9%。

2、一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取杨树皮活性酚酸类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：

（1）将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入3～10倍体积的低级醇进行提取，提取温度为30～70℃，提取时间为6～12 h，过滤得到滤液；按以上提取温度和时间反复提取1～4次，过滤，合并滤液得到粗提取液；所述低级醇为C1～C5的醇类，浓度为70-85%；

（2）将粗提取液进行减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa））至原来体积的1/3（约500 mL）后，利用大孔吸附树脂1 Kg进行吸附，先用1000 mL的水洗去水溶性杂质，再用浓度分别为30%、50%、70%、90%的乙醇各3000 mL进行梯度洗脱，收集50%、70%洗脱液；

（3）将50%、70%洗脱液减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa））至无有机溶剂味干固体，得到杨树皮活性酚酸类提取物；该杨树皮活性酚酸类化合物的得率为0.2%～2重量%（即杨树皮活性酚酸类化合物的重量（g）÷杨树皮的重量（g）×100%），化合物A的含量为7-9%，化合物B含量为5-7%，化合物C的含量为7-9%。

3、权利要求3中所用的大孔吸附树脂为D101或HP-20或AB-8。

本发明通过优化最适宜的工艺及参数条件，使产品中有效酚酸类成分白杨素、高良姜素、山柰酚的得率及含量高。

附图说明：

图1：白杨素结构

图2：高良姜素结构

图3：山柰酚结构

图4：待测溶液HPLC图

四、具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细说明，以助于本领域技术人员理解发明。

若无特殊说明，所用试验方法为常规试验方法；所用试剂材料可通过商业途径获得。

实施例1

将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入3倍生药体积的75%乙醇，室温下（25℃）提取3次，每次7天，粗提液抽滤合并。30℃减压旋转蒸发浓缩滤液，将所得浸膏分散于水中，浸膏体积/水体积为1：2.5，抽滤水可溶部分（除去水不溶物），减压浓缩、干燥得到杨树皮活性酚酸类成分。

实施例2

将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入6倍生药体积的85%乙醇，70℃的水浴中回流提取2次，每次2h，粗提液抽滤合并。70℃减压旋转蒸发浓缩滤液，将所得浸膏溶于热水中，浸膏体积/水体积为1：2，抽滤水可溶部分（除去水不溶物），减压浓缩、干燥得到杨树皮活性酚酸类成分。

实施例3

将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，用3倍生药体积的70%乙醇，室温（25℃）下，浸泡7天，过滤得到粗提取液，反复浸泡3次，合并滤液。在40℃减压旋转蒸发浓缩滤液至原来体积的1/3，将浓缩液经过大孔吸附树脂D101，使液体中的有效成分吸附于树脂上，弃去流出液，再用1倍柱体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去流出液，再用2倍柱体积的20%乙醇冲洗树脂柱，弃去流出液，续以30%、50%、70%、90%乙醇进行梯度洗脱，收集50%、70%乙醇洗脱液，减压浓缩后得到杨树皮活性酚酸类成分。

实施例4

将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，用6倍生药体积的85%乙醇，在70℃下加热回流提取2h，抽滤得到粗提取液，反复提取4次，合并滤液。在70℃减压旋转蒸发浓缩滤液至原来体积的1/3，将浓缩液经过大孔吸附树脂HP20，使液体中的有效成分吸附于树脂上，弃去流出液，再用1倍柱体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去流出液，继而分别用2倍柱体积的10%、30%、50%、70%、95%乙醇进行梯度洗脱，收集30%、50%、70%乙醇洗脱液，减压浓缩后得到杨树皮活性酚酸类成分。

实施例5

HPLC法测定杨树皮活性酚酸类成分中白杨素的含量

仪器与试剂

高效液相色谱仪Aglient 1100系列，四元泵，自动进样器，检测器：Aglient 1100 UV，254 nm，365 nm下检测，色谱柱：Aglient Zorbax SB-C₁₈柱（250×4.6 mm, 5.0μm），甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯。

色谱条件

流动相：0 min，甲醇：0.2%乙酸溶液维持比例（20：80），1-20 min，流动相比例由（20：80）线形改变到（40：60），21-50 min，流动相比例由（40：60）线形改变到（80：20），柱温30℃，流速0.8 mL/min。

对照品溶液的制备

分别精密称取经五氧化二磷干燥过夜的白杨素对照品，各加甲醇制成每1mL分别含0.05mg的溶液，作为对照溶液。

供试品溶液的制备：分别称取以上实施例1、2、3的杨树皮活性酚酸类成分提取物0.1ｇ至50 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度为待测溶液。

Claims (3)

1.一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取杨树皮活性酚酸类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：

（1）将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入3～10倍体积的低级醇进行提取，提取温度为30～70℃，提取时间为6～12 h，过滤得到滤液；按以上提取温度和时间反复提取1～4次，过滤，合并滤液得到粗提取液；所述低级醇为C1～C5的醇类，浓度为70～85%；

（2）将粗提取液进行减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa）），减压浓缩后的粗提取浸膏溶于30～70℃的热水中，粗浸膏与热水的体积比为1:2～3，抽滤，抽滤后的水溶液（滤去水不溶的固体）浓缩至干即得到杨树皮活性酚酸类化合物，该活性物的得率为0.8%～3重量%（即杨树皮活性酚酸类化合物的重量（g）÷杨树皮的重量（g）×100%），化合物A的含量为3-5%，化合物B含量为5-7%，化合物C的含量为7-9%。

2.一种从木材加工副产物杨树皮脱脂后再提取杨树皮活性酚酸类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：

（1）将木材加工副产物杨树皮经石油醚脱脂后的残渣置于提取釜中，加入3～10倍体积的低级醇进行提取，提取温度为30～70℃，提取时间为6～12 h，过滤得到滤液；按以上提取温度和时间反复提取1～4次，过滤，合并滤液得到粗提取液；所述低级醇为C1～C5的醇类，浓度为70～85%；

（2）将粗提取液进行减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa））至原来体积的1/3（约500 mL）后，利用大孔吸附树脂1 Kg进行吸附，先用1000 mL的水洗去水溶性杂质，再用浓度分别为30%、50%、70%、90%的乙醇各3000 mL进行梯度洗脱，收集50%、70%洗脱液；

（3）将50%、70%洗脱液减压浓缩（仪器：BÜCHI旋转蒸发仪R-210，水浴60℃，Vacuum PumpV-700减压泵，70-100 mbar（7 -10kPa））至无有机溶剂味干固体，得到杨树皮活性酚酸类提取物；该杨树皮活性酚酸类化合物的得率为0.2%～2重量%（即杨树皮活性酚酸类化合物的重量（g）÷杨树皮的重量（g）×100%），化合物A的含量为7-9%，化合物B含量为5-7%，化合物C的含量为7-9%。

3.权利要求3中所用的大孔吸附树脂为D101或HP-20或AB-8。