CN108264540A - 一种西曲瑞克的制备方法 - Google Patents

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condensation
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章方良
刘文玉
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Abstract

本发明公开了一种西曲瑞克的制备方法，包括以下步骤：(1)采用树脂为载体，与西曲瑞克C端氨基酸酯化，制备氨基酸‑树脂复合物；(2)采用Fmoc策略固相多肽合成方法，制备保护的西曲瑞克‑树脂复合物；(3)TFA脱除侧链保护基，制备脱保护的西曲瑞克‑树脂复合物；(4)氨解法得到西曲瑞克粗品；(5)采用高效液相法纯化粗品，得到西曲瑞克精品。本发明适合简便、高效制备西曲瑞克。本发明解决了现有方法副反应多、产率低、成本高的问题。

Description

一种西曲瑞克的制备方法
技术领域：
本发明属多肽化学领域，特别涉及一种西曲瑞克的固相制备方法。
背景技术：
西曲瑞克是德国Asta Medica公司研制的一种LHRH拮抗剂，能控制卵巢的刺激作用，预防不成熟卵泡过早排出，帮助受孕。大量研究表明，西曲瑞克对卵巢癌、前列腺癌、子宫纤维瘤、子宫内膜异位等疾病有较好的疗效，而且对良性前列腺肥大和卵巢过度刺激综合征有预防和改善作用。西曲瑞克的结构为十肽:AC-D-2-Nal-D-4-Cl-Phe-D-3-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2；其结构式如下式所示：
西曲瑞克的制备采用化学法合成。
专利CN 101863960 B采用王树脂和Boc策略合成西曲瑞克，存在问题是：每一步采用TFA脱Boc均会使部分多肽被切除，导致产率下降。Pd/H2脱除侧链保护基需要特殊装置，增加危险性。专利CN 101284863 B使用侧链无保护的Cit，会导致杂质[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克的产生。专利CN 104086632 A采用侧链用Dde保护的鸟氨酸为原料，避免了[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克的产生，但是由鸟氨酸转变为Cit则需要繁琐的操作，增加生产成本。
专利CN 104610433 A采用Ac-D-2-Nal-OH为原料，省略了乙酰化操作，避免了杂质[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克的产生。但是采用切割试剂脱除侧链保护基的同时，多肽也将从树脂上被切割到溶液中，保护基及切割试剂产生的杂质将提高纯化的难度。
发明内容
本发明的目的是提供一种简便、高效的西曲瑞克制备方法，解决目前西曲瑞克制备繁琐、合成及酸解时副反应多的问题。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种西曲瑞克的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物：用二甲基甲酰胺溶解C端氨基酸Fmoc-D-Ala-OH及酯化试剂后，加入到用二甲基甲酰胺浸泡处理后的树脂中进行酯化反应，反应结束后，用二甲基甲酰胺洗涤树脂，得到Fmoc-D-Ala-树脂复合物；
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物：向步骤(1)得到的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入Fmoc脱保护试剂进行Fmoc脱保护反应，反应结束后过滤并用二甲基甲酰胺洗涤树脂，然后向脱保护的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入西曲瑞克的C端第二个氨基酸和缩合试剂进行缩合反应，缩合反应结束后用二甲基甲酰胺洗涤树脂；按照西曲瑞克从C端到N端的顺序，更换氨基酸，重复Fmoc脱保护反应和缩合反应，得到保护的西曲瑞克-树脂复合物；
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物：向保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入切割试剂，脱除多肽侧链保护基；反应结束后过滤，并加入洗涤溶剂洗涤树脂，过滤，得到脱保护的西曲瑞克-树脂复合物；
(4)制备西曲瑞克粗品：向脱保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入氨解试剂，反应结束后，过滤，收集滤液，旋蒸后得到西曲瑞克粗品；
(5)制备西曲瑞克精品：采用反相高效液相色谱分离纯化西曲瑞克粗品，得到西曲瑞克精品。
步骤(1)中所述的树脂为Merrifield树脂、羟甲基树脂、4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂或4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂。
步骤(1)中所述的酯化试剂包含N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑和二甲氨基吡啶；
所述的Fmoc-D-Ala-OH、N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺两者中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑的物质的量的比例为1：1.2～1：1.2～1；所述的Fmoc-D-Ala-OH与树脂的物质的量的比例为7～3：1；所述的二甲氨基吡啶与树脂的物质的量的比例为0.5～0.1：1；所述酯化反应的温度为20℃～60℃，反应时间为3小时～20小时。
步骤(2)中所述的Fmoc脱保护试剂是体积比为1：1～4的哌啶与二甲基甲酰胺，所述Fmoc脱保护反应的温度为20℃～60℃，反应时间为10min～60min。
步骤(2)中所述的氨基酸依次分别为：N-芴甲氧羰酰基-脯氨酸，N-芴甲氧羰-2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-精氨酸，N-芴甲氧羰酰基-亮氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-瓜氨酸盐酸盐，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-酪氨酸，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-丝氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-3-吡啶-丙氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-4-氯-苯丙氨酸，以及乙酰基-D-3-(2-萘基)-丙氨酸。
步骤(2)中所述缩合试剂的组分为以下(1)和(2)两种情况中的任意一种：
(1)所述的缩合剂为缩合试剂1和缩合试剂2的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：氨基酸：缩合试剂1：缩合试剂2：树脂＝6～3：6～3：6～3：1；
(2)所述的缩合剂为缩合试剂4、缩合试剂2和缩合试剂3的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：氨基酸：缩合试剂4：缩合试剂2：缩合试剂3：树脂＝6～3：6～3：6～3：12～6：1；
所述的缩合试剂1为N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)或N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)；
所述的缩合试剂2为1-羟基苯并三氮唑(HOBt)或N-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAt)；
所述的缩合试剂3为二异丙基乙胺(DIEA)；
所述的缩合试剂4为苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、卡特缩合剂(BOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)；
所述缩合反应的温度为20℃～60℃，反应时间为1小时～4小时。
步骤(3)中所述的切割试剂为重蒸水、三乙基硅烷、1,2二硫苏糖醇、苯酚、苯甲硫醚、三异丙基硅烷、苯甲醚和乙二硫醇中的至少一种与三氟乙酸的混合液，所述的混合液中三氟乙酸的体积比不小于80％；向保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入切割试剂进行反应的温度为0℃～60℃，反应时间为1小时～4小时。
步骤(3)中所述的洗涤溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、水中的一种。
步骤(4)中所述的氨解试剂为氨的饱和水溶液或饱和四氢呋喃溶液，所述反应的条件为：0℃～30℃下反应1小时～24小时。
步骤(5)中所述的纯化条件为：制备柱填料为碳载硅胶类型，流动相为含0.1％(w/w)TFA的水、含0.1％(w/w)TFA的乙腈和含0.1％(w/w)TFA的甲醇中的一种或几种。
本发明优选技术方案的详细步骤为：
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物
向带有过滤装置的反应容器中加入树脂。向所述容器中加入溶剂DMF，浸没树脂，静置1小时，过滤。
用DMF溶解Fmoc-D-Ala-OH和酯化试剂后，加入到树脂中，在20℃～60℃下反应3h～20h。反应结束后，过滤并加入溶剂DMF，洗涤树脂三遍，过滤。所述的酯化试剂包含DCC(或DIC)、HOBt和DMAP，其中各反应物物质的量之比为n(Fmoc-D-Ala-OH)：n(DCC或DIC)：n(HOBt)＝1：1.2～1：1.2～1；n(Fmoc-D-Ala-OH)：n(树脂)＝7～3：1；n(DMAP)：n(树脂)＝0.5～0.1：1。
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物
在上述的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入体积比为1：1～4的PIP/DMF溶液，进行脱保护反应，20℃～60℃下反应10min～60min。反应完毕后，过滤。然后加入DMF洗涤树脂，过滤。
向反应器中加入西曲瑞克的C端第二个氨基酸(Fmoc-Pro-OH)和缩合试剂。20℃～60℃下反应1h～4h。反应结束后加入DMF洗涤树脂，过滤。所述缩合试剂的组分为以下(1)和(2)两种情况中的任意一种：(1)所述的缩合剂为缩合试剂1和缩合试剂2的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：n(Fmoc-Pro-OH)：n(缩合试剂1)：n(缩合试剂2)：n(树脂)＝6～3：6～3：6～3：1；(2)所述的缩合剂为缩合试剂4、缩合试剂2和缩合试剂3的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：n(Fmoc-Pro-OH)：n(缩合试剂4)：n(缩合试剂2)：n(缩合试剂3)：n(树脂)＝6～3：6～3：6～3：12～6：1；
所述的缩合试剂1为N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)或N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)；所述的缩合试剂2为1-羟基苯并三氮唑(HOBt)或N-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAt)；所述的缩合试剂3为二异丙基乙胺(DIEA)；所述的缩合试剂4为苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、卡特缩合剂(BOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)；
按照西曲瑞克C端到N端的顺序，更换氨基酸，循环脱保护反应和缩合反应的操作，合成保护的西曲瑞克-树脂复合物。其中所述的反应物物质的量之比以及反应条件同于Fmoc-Pro-OH。其中所述的氨基酸为：Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-D-Cit-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-D-Cpa-OH，Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH，Ac-D-2-Nal-OH。
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物
在上述树脂中加入切割试剂，反应条件为0℃～60℃下反应1小时～4小时。所述的切割试剂为重蒸水、三乙基硅烷、1,2二硫苏糖醇、苯酚、苯甲硫醚、三异丙基硅烷、苯甲醚和乙二硫醇中的至少一种与三氟乙酸的混合液，混合液中三氟乙酸的体积比不小于80％。反应完后过滤，并加入洗涤溶剂(水、THF、DCM)洗涤树脂，过滤。
(4)制备西曲瑞克粗品
向脱保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入氨的饱和水溶液或氨的饱和四氢呋喃溶液，0℃～30℃下反应1小时～24小时。反应结束后，过滤，收集滤液，旋蒸后得到保护的西曲瑞克粗品。
(5)制备西曲瑞克精品
将西曲瑞克粗品用体积比为5％的甲醇水溶液或5％的乙腈水溶液溶解，采用制备型高效液相色谱纯化，得到西曲瑞克精品。制备柱为C4/C8/C18类型反相色谱柱，流动相为含0.1％TFA的水、含0.1％TFA的乙腈和含0.1％TFA的甲醇中的一种或几种。
本发明采用Merrifield树脂、羟甲基树脂、4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂或4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂中的任意一种为固相载体，可以在固相上脱除侧链保护基，通过洗涤的方式除去保护基杂质以及切割试剂引入的杂质，降低纯化的难度；并且采用Ac-D-2-Nal-OH为原料，省略了乙酰化操作，避免了杂质[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克的产生。
本发明的有益效果是：
本发明采用Merrifield树脂、羟甲基树脂、4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂或4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂中的一种为固相载体，可以在固相上脱除侧链保护基，通过洗涤的方式除去保护基杂质以及切割试剂引入的杂质，降低纯化的难度；并且采用Ac-D-2-Nal-OH为原料，省略了乙酰化操作，避免了杂质[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克的产生。
本发明中一些常用的缩写具有如下含义：
Fmoc:芴甲氧羰酰基
TFA：三氟乙酸
EDT：乙二硫醇
Phenol：苯酚
Thioanisole：苯甲硫醚
TES：三乙基硅烷
TIS：三异丙基硅烷
DTT：1,2二硫苏糖醇
Anisole：苯甲醚
MeOH：甲醇
DCM：二氯甲烷
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
PIP：哌啶
Cetrerelix：西曲瑞克
Pam resin：4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂
HMBA resin：4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂
DMAP：二甲氨基吡啶
DIEA：N,N-二异丙基乙胺
BOP：卡特缩合剂
HOBt:1-羟基苯并三氮唑
DIC：N,N-二异丙基碳化二亚胺
DCC：N,N-二环己基碳二亚胺
HOAt：N-羟基-7-偶氮苯并三氮唑
HBTU：苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
HATU：2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯
PyBOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷
Fmoc-D-Ala-OH：N-芴甲氧羰酰基-D-丙氨酸
Fmoc-Pro-OH：N-芴甲氧羰酰基-脯氨酸
Fmoc-Arg(pbf)-OH：N-芴甲氧羰-2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-精氨酸
Fmoc-Leu-OH：N-芴甲氧羰酰基-亮氨酸
Fmoc-D-Cit-OH：N-芴甲氧羰酰基-D-瓜氨酸盐酸盐
Fmoc-Tyr(tBu)-OH：N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-酪氨酸
Fmoc-Ser(tBu)-OH：N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-丝氨酸
Fmoc-D-Cpa-OH：N-芴甲氧羰酰基-D-3-吡啶-丙氨酸
Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH：N-芴甲氧羰酰基-D-4-氯-苯丙氨酸
Ac-D-2-Nal-OH：乙酰基-D-3-(2-萘基)-丙氨酸
具体实施方式
本发明通过以下实例作进一步举例说明，这些实例不应解释为对本发明的限制。实施例1：制备西曲瑞克
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物
向带有过滤装置的反应器中加入HMBA resin(1.0mmol/g)1g，注入10ml DMF，静置1h，过滤。
取4mmol Fmoc-D-Ala-OH，4mmol DIC，4mmol HOBt及0.2mmol DMAP，溶于10ml DMF中并过滤，然后将所得滤液加入到反应器中，30℃下反应10h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物
向反应器中加入10ml体积比为1：4的PIP/DMF溶液，30℃下反应30min。反应完毕后，过滤。然后加入10ml DMF洗涤树脂三遍，过滤。
取4mmol Fmoc-Pro-OH，4mmol DIC，4mmol HOBt，溶于10ml DMF中，将所得溶液加入到反应器中，30℃下反应2h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
所述的各试剂的物质的量的比例为：氨基酸：DIC：HOBt：树脂＝4：4：4：1；所述缩合反应的温度为30℃，反应时间为2小时。
按照西曲瑞克C端到N端的顺序，更换氨基酸，分别为：Fmoc-Arg(pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-D-Cit-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-D-Cpa-OH，Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH，Ac-D-2-Nal-OH。循环脱保护反应和缩合反应的操作，合成保护的西曲瑞克-树脂复合物。
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物
向上述保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml切割试剂(按体积百分含量计，TFA:phenol:Thioanisole:EDT:H2O＝82.5％:5％:5％:2.5％:5％)，20℃下反应2h。过滤，然后加入10ml DCM，洗涤树脂三遍，过滤。
(4)制备西曲瑞克粗品
向上述的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml氨的饱和THF溶液，0℃下反应10h。反应结束后，过滤。然后加入10ml氨的饱和THF溶液，洗涤树脂三遍，过滤。旋蒸滤液得到保护的西曲瑞克粗品。
(5)制备西曲瑞克精品
将西曲瑞克粗品溶于体积比为5％的乙腈水溶液中，经高效液相色谱纯化得到西曲瑞克精品，冷冻干燥后得0.781g，纯度为98.9％。制备条件为：C18制备柱，两种流动相分别为含0.1％(w/w)TFA的水、含0.1％(w/w)TFA的乙腈。
实施例2：制备西曲瑞克
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物
向带有过滤装置的反应器中加入Pam resin(1.0mmol/g)1g，注入10ml DMF，静置1h，过滤。
取3mmol Fmoc-D-Ala-OH，3mmol DIC，3mmol HOBt及0.1mmol DMAP，溶于10ml DMF中并过滤，然后将所得滤液加入到反应器中，20℃下反应3h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物
向反应器中加入10ml体积比为1：3的PIP/DMF溶液，20℃下反应10min。反应完毕后，过滤。然后加入10ml DMF洗涤树脂三遍，过滤。
取3mmol Fmoc-Pro-OH，3mmol HBTU，3mmol HOBt及6mmol DIEA，溶于10ml DMF中，将所得溶液加入到反应器中，20℃下反应1h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
按照西曲瑞克C端到N端的顺序，更换氨基酸，分别为：Fmoc-Arg(pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-D-Cit-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-D-Cpa-OH，Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH，Ac-D-2-Nal-OH。循环脱保护反应和缩合反应的操作，合成保护的西曲瑞克-树脂复合物。
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物
向上述保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml切割试剂(按体积百分含量计，TFA:phenol:H2O＝90％:5％:5％)，20℃下反应1h。过滤，然后加入10ml THF，洗涤树脂三遍，过滤。
(4)制备西曲瑞克粗品
向上述的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml氨的饱和水溶液，0℃下反应5h。反应结束后，过滤。然后加入10ml氨的饱和水溶液，洗涤树脂三遍，过滤。旋蒸滤液得到保护的西曲瑞克粗品。
(5)制备西曲瑞克精品
将西曲瑞克粗品溶于体积比为5％的甲醇水溶液中，经高效液相色谱纯化得到西曲瑞克精品，冷冻干燥后得0.612g，纯度为98.7％。制备条件为：C8制备柱，两种流动相分别为含0.1％(w/w)TFA的水、含0.1％(w/w)TFA的甲醇。
实施例3：制备西曲瑞克
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物
向带有过滤装置的反应器中加入羟甲基树脂(1.0mmol/g)1g，注入10ml DMF，静置1h，过滤。
取7mmol Fmoc-D-Ala-OH，7mmol DIC，7mmol HOBt及0.5mmol DMAP，溶于10ml DMF中并过滤，然后将所得滤液加入到反应器中，60℃下反应20h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物
向反应器中加入10ml体积比为1：1的PIP/DMF溶液，60℃下反应60min。反应完毕后，过滤。然后加入10ml DMF洗涤树脂三遍，过滤。
取6mmol Fmoc-Pro-OH，6mmol PyBop，6mmol HOBt及12mmol DIEA，溶于10ml DMF中，将所得溶液加入到反应器中，60℃下反应4h。反应结束后，过滤。然后加入10ml DMF，洗涤树脂三遍，过滤。
按照西曲瑞克C端到N端的顺序，更换氨基酸，分别为：Fmoc-Arg(pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-D-Cit-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-D-Cpa-OH，Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH，Ac-D-2-Nal-OH。循环脱保护反应和缩合反应的操作，合成保护的西曲瑞克-树脂复合物。
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物
向上述保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml切割试剂(按体积百分含量计，TFA:phenol:Thioanisole:H2O＝90％:5％:5％)，60℃下反应4h。过滤，然后加入10ml水，洗涤树脂三遍，过滤。
(4)制备西曲瑞克粗品
向上述的西曲瑞克-树脂复合物中加入10ml氨的饱和水溶液，30℃下反应24h。反应结束后，过滤。然后加入10ml氨的饱和水溶液，洗涤树脂三遍，过滤。旋蒸滤液得到保护的西曲瑞克粗品。
(5)制备西曲瑞克精品
将西曲瑞克粗品溶于体积比为5％的甲醇水溶液中，经高效液相色谱纯化得到西曲瑞克精品，冷冻干燥后得0.675g，纯度为98.5％。制备条件为：C4制备柱，两种流动相分别为含0.1％(w/w)TFA的水、含0.1％(w/w)TFA的甲醇。

Claims (10)

1.一种西曲瑞克的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物：用二甲基甲酰胺溶解C端氨基酸Fmoc-D-Ala-OH及酯化试剂后，加入到用二甲基甲酰胺浸泡处理后的树脂中进行酯化反应，反应结束后，用二甲基甲酰胺洗涤树脂，得到Fmoc-D-Ala-树脂复合物；
(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物：向步骤(1)得到的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入Fmoc脱保护试剂进行Fmoc脱保护反应，反应结束后过滤并用二甲基甲酰胺洗涤树脂，然后向脱保护的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入西曲瑞克的C端第二个氨基酸和缩合试剂进行缩合反应，缩合反应结束后用二甲基甲酰胺洗涤树脂；按照西曲瑞克从C端到N端的顺序，更换氨基酸，重复Fmoc脱保护反应和缩合反应，得到保护的西曲瑞克-树脂复合物；
(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物：向保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入切割试剂，脱除多肽侧链保护基；反应结束后过滤，并加入洗涤溶剂洗涤树脂，过滤，得到脱保护的西曲瑞克-树脂复合物；
(4)制备西曲瑞克粗品：向脱保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入氨解试剂，反应结束后，过滤，收集滤液，旋蒸后得到西曲瑞克粗品；
(5)制备西曲瑞克精品：采用反相高效液相色谱分离纯化西曲瑞克粗品，得到西曲瑞克精品。
2.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的树脂为Merrifield树脂、羟甲基树脂、4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂或4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂。
3.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的酯化试剂包含N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑和二甲氨基吡啶；
所述的Fmoc-D-Ala-OH、N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺两者中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑的物质的量的比例为1：1.2～1：1.2～1；所述的Fmoc-D-Ala-OH与树脂的物质的量的比例为7～3：1；所述的二甲氨基吡啶与树脂的物质的量的比例为0.5～0.1：1；所述酯化反应的温度为20℃～60℃，反应时间为3小时～20小时。
4.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的Fmoc脱保护试剂是体积比为1：1～4的哌啶与二甲基甲酰胺，所述Fmoc脱保护反应的温度为20℃～60℃，反应时间为10min～60min。
5.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的氨基酸依次分别为：N-芴甲氧羰酰基-脯氨酸，N-芴甲氧羰-2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-精氨酸，N-芴甲氧羰酰基-亮氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-瓜氨酸盐酸盐，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-酪氨酸，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-丝氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-3-吡啶-丙氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-4-氯-苯丙氨酸，以及乙酰基-D-3-(2-萘基)-丙氨酸。
6.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述缩合试剂的组分为以下(1)和(2)两种情况中的任意一种：
(1)所述的缩合剂为缩合试剂1和缩合试剂2的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：氨基酸：缩合试剂1：缩合试剂2：树脂＝6～3：6～3：6～3：1；
(2)所述的缩合剂为缩合试剂4、缩合试剂2和缩合试剂3的组合；其中，缩合反应时各试剂的物质的量的比例为：氨基酸：缩合试剂4：缩合试剂2：缩合试剂3：树脂＝6～3：6～3：6～3：12～6：1；
所述的缩合试剂1为N,N-二环己基碳二亚胺或N,N-二异丙基碳二亚胺；
所述的缩合试剂2为1-羟基苯并三氮唑或N-羟基-7-偶氮苯并三氮唑；
所述的缩合试剂3为二异丙基乙胺；
所述的缩合试剂4为苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯、卡特缩合剂或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷；
所述缩合反应的温度为20℃～60℃，反应时间为1小时～4小时。
7.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的切割试剂为重蒸水、三乙基硅烷、1,2二硫苏糖醇、苯酚、苯甲硫醚、三异丙基硅烷、苯甲醚和乙二硫醇中的至少一种与三氟乙酸的混合液，所述的混合液中三氟乙酸的体积比不小于80％；向保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入切割试剂进行反应的温度为0℃～60℃，反应时间为1小时～4小时。
8.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的洗涤溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、水中的一种。
9.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(4)中所述的氨解试剂为氨的饱和水溶液或饱和四氢呋喃溶液，所述反应的条件为：0℃～30℃下反应1小时～24小时。
10.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(5)中所述的纯化条件为：制备柱填料为碳载硅胶类型，流动相为含0.1％TFA的水、含0.1％TFA的乙腈和含0.1％TFA的甲醇中的一种或几种。
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