CN108226538A

CN108226538A - 活化部分凝血活酶时间测定试剂

Info

Publication number: CN108226538A
Application number: CN201711481093.4A
Authority: CN
Inventors: 郭琳凤; 王继华
Original assignee: Guangzhou Wondfo Biotech Co Ltd
Current assignee: Guangzhou Wondfo Biotech Co Ltd
Priority date: 2017-12-29
Filing date: 2017-12-29
Publication date: 2018-06-29
Anticipated expiration: 2037-12-29
Also published as: CN108226538B

Abstract

本发明公开了一种活化部分凝血活酶时间测定试剂，包括缓冲液、激活剂、磷脂、抗氧化剂和稳定剂，pH值为7.0‑7.5；所述抗氧化剂包括虾青素，所述虾青素的添加量为0.1‑0.5g/L。上述试剂采用虾青素作为抗氧化剂能够有效的与过氧自由基发生反应，从而终止脂质的过氧化链反应，进一步提升了试剂的稳定性能。

Description

活化部分凝血活酶时间测定试剂

技术领域

本发明涉及凝血试剂技术领域，特别是涉及一种活化部分凝血活酶时间测定试剂。

背景技术

血液凝固，或称为凝血指的是血液由液体状态转变为不流动的凝胶状态的过程，是生理性止血的重要环节。血液凝固的实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原变成不可溶的纤维蛋白的过程。凝血实验对于临床各科的疾病诊断具有很大的意义，除了对出血性疾病的筛选与诊断外，还用于对于各种血栓性疾病与血栓前状态的检查和预测；弥散性血管内凝血(DIC)的实验室诊断以及对各种抗凝治疗患者的用药指导和预后估计等。血栓与止血不仅涉及基础医学，且与多个临床学科(包括血液科、呼吸消化科、心血管科、神经科、妇产科、普通外科等)的疾病密切相关。总之，在血液病、糖尿病、高脂血症、心脑血管病、外科手术治疗等领域的研究、诊断与治疗方面，血栓与止血检验均有重要意义。

活化部分凝血活酶时间(APTT)是检测内源性凝血途径凝血因子异常的一项最常用、最敏感的筛选试验，广泛用于出血疾病的初筛诊断，肝素抗凝治疗的检测，狼疮抗凝因子的检测，过筛测定内源途径凝血因子的缺陷等。其主要的测定原理是：在37℃条件下，以激活剂激活Ⅻ，以脑磷脂(部分凝血活酶) 代替血小板第三因子，在Ca²⁺参与下，观察血浆凝固所需的时间，即为活化部分凝血活酶时间。其常用的激活剂有硅藻土、高岭土、二氧化硅微粒、鞣花酸等。不同的激活剂和磷脂对各种凝血因子缺陷、对肝素和对狼疮抗凝物质的敏感性相差很大，如高岭土对凝血因子最敏感、鞣花酸对狼疮抗凝物质敏感性最高。活化部分凝血活酶时间(APTT)延长多见于内源系统因子先天性缺乏，例如血友病，Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺乏或缺陷，严重的因子V、X减少或凝血酶原和纤维蛋白原缺乏。内源系统因子获得性缺乏或异常多见于肝病、DIC、血循环中抗凝物质存在。缩短见于因子Ⅷ、V活性增高、DIC高凝期、血栓性疾病(如心肌梗塞、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成等)、血小板增多症等。

目前，APTT激活剂大多是表面活性材料。作为液体活性材料有鞣花酸和它的衍生物，此类活性材料对肝素的灵敏度低；作为固体活化材料如高岭土，硅藻土等，其缺点是活化需要较长的潜伏期，且其均一性及悬浮性较差，如果出现沉淀会影响凝血检测终点的判定。磷脂是含有磷酸的脂类，属于复合脂。作为血小板的替代物，磷脂参与内源性凝血途径。作为活化部分凝血活酶时间测定试剂的主要组分之一，磷脂富含不饱和脂肪酸，容易被氧化从而形成过氧化物、丙二醛、脂肪酸及溶血卵磷脂，从而影响了其生理活性。

为了避免APTT测定试剂中磷脂的氧化，同时也为了制备稳定性较好的APTT 测定试剂，现有技术有加入氨基酸(甘氨酸)作为抗氧化剂。为了避免试剂中微生物和细菌的繁衍，有文献报道加入BHT和BHA作为抗氧化剂，主要是防止脂质的氧化，这两种物质都具有一定的毒性，尤其是BHT，因此在使用中受到限制；而叠氮钠的毒性较大，与铜管等接触容易引爆，增加了生产过程中原料的使用和控制难度。还有提出加入苯酚作为APTT试剂的稳定剂，但苯酚对于人体健康和环境都有破坏性的影响，也不利于安全生产，因此限制了其应用。另外，为了进一步提升APTT测定试剂的稳定性，还提出在试剂中加入多糖和多醇类聚合物，这类物质的加入，可以提高溶液的粘度，是胶体颗粒能够长期悬浮在溶液中不会沉降，然而，这类高分子化合物的加入，在提升混合液粘度的同时，也会降低采用光学法测定的APTT值的准确度。这些稳定剂的选择在液态凝血试剂方面，效果并不尽如意。

由于实验室使用APTT试剂质量上的不同，使得同一个患者在不同医院测定的结果相差悬殊，造成监测结果的不一致，影响对疾病的正确、及时诊断。因此APTT试剂的质量成了获得准确结果及诊断的关键。因此发明一种稳定性好、重复性佳、安全性高、能准确测量APTT的试剂很有必要，无疑将对临床诊断疾病有重要的作用。

发明内容

基于此，本发明的目的是提供一种稳定的活化部分凝血活酶时间测定试剂。

具体的技术方案如下：

一种活化部分凝血活酶时间测定试剂，包括缓冲液、激活剂、磷脂、抗氧化剂和稳定剂，pH值为7.0-7.5；所述抗氧化剂包括虾青素，所述虾青素的添加量为0.1-0.5g/L。

在其中一些实施例中，所述虾青素为天然虾青素。

在其中一些实施例中，所述抗氧化剂还包括原花青素，所述原花青素的添加量为1-10g/L。

在其中一些实施例中，所述激活剂包括胶体二氧化硅和硫脑苷脂，其中二氧化硅在所述中活化部分凝血活酶时间测定试剂中的浓度为0.09-0.6wt％，所述硫脑苷脂的添加量为0.02-0.06mg/L。

在其中一些实施例中，所述磷脂选自兔脑磷脂或牛脑磷脂，所述磷脂的添加量为1-4g/L。

在其中一些实施例中，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、甘氨酸、甘露醇和海藻糖中的至少一种；

所述牛血清白蛋白的添加量为2-10g/L；所述甘氨酸的添加量为5-15g/L；所述甘露醇的添加量为5-15g/L；所述海藻糖的添加量为2-10g/L。

在其中一些实施例中，所述活化部分凝血活酶时间测定试剂还包括ZnCl₂，所述ZnCl₂的添加量为1.5-4g/L。加入具有良好水溶性能的二价金属离子，能够缩短凝血时间实现快速检测。

在其中一些实施例中，所述缓冲液使用4-羟乙基哌嗪乙磺酸配制，其中4- 羟乙基哌嗪乙磺酸的添加量为5-20g/L。

在其中一些实施例中，所述活化部分凝血活酶时间测定试剂还包括聚乙烯吡咯烷酮和NaCl；所述聚乙烯吡咯烷酮的添加量为0.5-1.5g/L，所述NaCl的添加量为2-6g/L。使用NaCl后，在试剂中增加了Na离子，为凝血反应提供一定的离子强度。

在其中一些实施例中，所述活化部分凝血活酶时间测定试剂包括含 7.1-14.3g/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸的缓冲液，胶体二氧化硅，其中二氧化硅在所述活化部分凝血活酶时间测定试剂中的浓度为0.09-0.6wt％，0.02-0.06mg/L 的硫脑苷脂，1-4g/L的磷脂，0.2-0.4g/L的虾青素，4-6g/L的原花青素，5-15g/L 的甘氨酸，2-10g/L的BSA，5-15g/L甘露醇，2-10g/L海藻糖，1.5-4g/L的ZnCl₂， 0.5-1.5g/L的聚乙烯吡咯烷酮，2-6g/L的NaCl；pH值为7.30-7.5。

本发明的原理及优点如下：

抗氧化的成分主要有：第一代抗氧化的成分是维生素类；第二代抗氧化是β-胡萝卜素、辅酶Q10、SOD之类；第三代抗氧化是花青素、葡萄籽、蓝莓提取物、绿茶素、硫辛酸、番茄红素之类；第四代抗氧化成分就是虾青素。

虾青素又名3，3′-二羟基-4，4′-二酮基β-胡萝卜素，分子式C₄₀H₅₂O₄，分子量为596.86，CAS No:472-61-7，不溶于水，易溶于部分有机溶剂，如二氯甲烷、氯仿等，微溶于大多说有机溶剂，如石油醚、甲醇、丙酮等。虾青素有两个异戊二烯单位组成的六元环通过一系列共轭双键连接而成，由于两端的羟基(-OH)旋光性原因，虾青素具有3S-3'S、3R-3'S、3R-3'R(也称为左旋、内消旋、右旋)这3种异构型态。藻源的虾青素是100％左旋(3S-3'S)结构，具有最强的生物学活性。天然虾青素(天然虾红素)世界上最强的天然抗氧化剂之一，其广泛存在于生物界中，主要以其脂肪酸酯的形式存在，目前天然虾青素主要从微藻中提取，因其具有多种生物活性如超强的超氧化活性剂、抗癌活性以及绚丽的色彩，被广泛的应用于医药、食品添加剂、化妆品及养殖工业中。

目前将虾青素作为凝血试剂的抗氧化剂还未有报道。原花青素有较强的抗氧化活性，对活性氧有很强的消除能力，摄入原花青素可以提高血浆对氧化应激的抵抗力。因此本发明采用虾青素和原花青素作为APTT试剂的混合抗氧化剂，以进一步提升APTT试剂的稳定性。

上述活化部分凝血活酶时间测定试剂采用胶体二氧化硅和硫脑苷脂作为激活剂，其均一性及悬浮效果好，有利于提高APTT检测的准确度。并提出以虾青素作为凝血试剂的抗氧化剂，以提升凝血试剂的抗氧化性能。弥补了现有APTT 测定试剂中稳定剂的不足，生产安全性更高、稳定性效果更强、检测准确度更高。本发明所述的虾青素可以配合其他抗氧化剂共同使用(原花青素)，以进一步提升凝血试剂的抗氧化能力，改善试剂的稳定性能。这样的混合抗氧化剂试剂效果明显优于一般稳定剂或虾青素单独做稳定剂时的效果。

本发明的有益效果：

1、采用虾青素作为抗氧化剂，虾青素能够有效的与过氧自由基发生反应，从而终止脂质的过氧化链反应，能够提升试剂的稳定性能。

2、虾青素还能够配合其他抗氧化剂共同使用(原花青素)，以进一步提升凝血试剂的抗氧化能力，改善试剂的稳定性能。原花青素的邻苯二酚结构降低了二价金属离子对氧化反应的催化作用，这样的混合抗氧化剂试剂效果明显优于一般稳定剂或虾青素单独做稳定剂时的效果。

3、剔除了一般稳定剂中毒性较大的组分，选用虾青素代替叠氮钠，使APTT 试剂的生产和使用过程更加安全。

4、采用胶体二氧化硅和硫脑苷脂作为激活剂，其均一性及悬浮效果好，有利于提高APTT检测的准确度。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

一、加入抗氧化剂对APTT试剂的稳定性的影响

1.不同浓度虾青素对活化部分凝血活酶时间测定的影响

对比例1、

称取11.9gHEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)和4.67gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加去离子水至500ml，搅拌溶解，调节pH为7.4，加入50ml浓度为6wt％纳米胶体二氧化硅和0.04mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀，加入2g磷脂(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，加入0.4gBHT，0.1g叠氮钠，5gBSA， 10g甘氨酸，2.1g ZnCl₂，8g甘露醇，5g海藻糖，1gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT测定试剂。

实施例1：

实施例1-1：

称取11.9gHEPES和4.67gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加入去离子水至500ml，搅拌溶解，调节pH为7.4，加入50ml浓度为6wt％的纳米胶体二氧化硅和0.04mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀；加入2g磷脂(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，加入0.1g虾青素；5gBSA，10g甘氨酸，2.1gZnCl₂，8g甘露醇，5g海藻糖，1gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT 测定试剂(实施例1-1)。

分别配制实施例1-2、1-3、1-4、1-5，将实施例1-1中虾青素的含量分别改变为：0.2g、0.3g、0.4g、0.5g。

实施例1与对比例1的配制组成基本相同，区别在于实施例1中加入了虾青素取代叠氮钠和BHT。

将实施例1和对比例1配制的APTT测定试剂，用CA1500全自动血凝仪对正常质控血浆和异常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定，所用血浆为西门子的凝血质控水平1和凝血质控水平2，结果见表1。

表1不同浓度虾青素对活化部分凝血活酶时间测定的影响 (单位：秒)

由表1可知，所有检测值均位于标准的偏离区间内，实施例1-1至1-5与对比例1相比，在相同的测试条件下，测试结果没有明显差异，说明虾青素的加入对活化部分凝血活酶时间基本没有影响。

由实验结果可知，虾青素加入量为0.3g时对活化部分凝血活酶时间影响最小，因此加入0.3g的虾青素是最佳用量。

2、不同浓度原花青素对活化部分凝血活酶时间测定的影响

实施例2：

实施例2-1：

称取11.9gHEPES和4.67gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加去离子水至500ml，搅拌溶解，调节pH为7.4，加入50ml浓度为6wt％的纳米胶体二氧化硅和0.04mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀，加入2g磷脂酯化物(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，分别加入0.3g虾青素，向玻璃瓶中加入1g原花青素，5gBSA，10g甘氨酸，2.1g ZnCl₂，8g甘露醇，5g海藻糖，1gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT测定试剂。

分别配制实施例2-2、2-3、2-4，将实施例2-1中原花青素的含量分别改变为:3g、5g、10g。

实施例1与实施例2的配制组成基本相同，实施例2在实施例1-3基础上加入了原花青素，与虾青素形成混合抗氧化剂。

将实施例2配制的APTT测定试剂，用CA1500全自动血凝仪对正常质控血浆和异常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定，所用血浆为西门子的凝血质控水平1和凝血质控水平2，结果见表2。

表2不同浓度原花青素对活化部分凝血活酶时间测定的影响 (单位：秒)

样品	正常质控血浆	异常质控血浆
			实施例1-3	28.2±0.9	44.3±1.2
实施例2-1	27.4±0.7	44.2±1.1
			实施例2-2	27.7±1.0	44.5±0.9
实施例2-3	27.6±0.6	44.2±0.5
			实施例2-4	28.2±0.9	45.0±0.8

由表2可知，所有检测值均位于标准的偏离区间内，实施例2-1至实施例2-4 与实施例1-3相比，在相同的测试条件下，测试结果没有明显差异，说明原花青素的加入对活化部分凝血活酶时间基本没有影响

3、不同虾青素加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定性的影响

将实施例1和对比例1配制的APTT测定试剂，结合25mM氯化钙使用CA1500全自动血凝仪对正常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定。具体地，将实施例1和对比例1制备的APTT测定试剂，在37℃条件下保存，定时取样进行测试，结果见表3-1。

表3-1 37℃条件下虾青素的加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定性的影响(单位：s)

由表3可知，试剂在37℃条件下保存后进行测试，对比例1的CV值明显高于实施例1的CV值，说明实施例1试剂稳定性与对比例1相比明显提高；在APTT测定试剂中，当逐量加入虾青素后，将试剂在37℃条件下保存后进行测试，测试结果显示CV值逐渐降低，说明试剂的稳定性逐渐提高，当虾青素加入量为0.3g时， CV值最小，由此可知，虾青素加入量为0.3g时，APTT测定试剂的稳定性最佳。

将实施例1和对比例1配制的APTT测定试剂，结合25mM氯化钙，使用CA1500 全自动血凝仪对正常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定。具体地，将实施例1和对比例1制备的APTT测定试剂，在2-8℃条件下保存，每个月取出一瓶进行测试，连续测试18个月，结果如表3-2。

表3-2 2-8℃条件下虾青素的加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定

由表3-2可知，使用正常质控血浆对保存在2-8℃条件下的APTT测定试剂进行测试，本发明APTT测定试剂在2-8℃放置18个月后测试的APTT值变化较小，说明其稳定性较好，稳定期至少可以达到18个月，且实施例1-3测试值变化更小，说明实施例1-3的稳定性最优。而对比例1在12个月之后测值逐渐偏大，稳定性变差，稳定期约12个月，因此，本发明APTT测试试剂在2-8℃条件下可保存18个月，而对比例1在2-8℃条件下仅能保存12个月，本发明APTT 测试试剂稳定性能明显优于对比例1。

4、不同原花青素加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定性的影响

将实施例1的最佳实施方案实施例1-3和实施例2-1至实施例2-4配制的APTT 测定试剂，结合25mM氯化钙，使用CA1500全自动血凝仪对正常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定。具体地，将实施例1-3和实施例2制备的APTT测定试剂，在37℃条件下保存，定时取样进行测试结果见表4-1。

表4-1 37℃条件下原花青素的加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定性的影响(单位：s)

由表4-1可知，当向含有虾青素的APTT测定试剂中，加入一定量的原花青素， CV值逐渐降低，说明加入原花青素的APTT测定试剂的稳定性逐渐提高，原花青素加入量为5g时，CV值最小，由此可知，原花青素加入量为5g时，APTT测定试剂的稳定性最佳，且该混合抗氧化剂试剂稳定性的效果明显优于一般稳定剂或虾青素单独做稳定剂时稳定性的效果。

将实施例2和实施例1-3配制的APTT测定试剂，结合25mM氯化钙，使用CA1500 全自动血凝仪对正常质控血浆的活化部分凝血活酶时间进行测定。具体地，将实施例2和实施例1-3制备的APTT测定试剂，在2-8℃条件下保存，每个月取出一瓶进行测试，连续测试18个月，结果如表4-2。

表4-2 2-8℃条件下虾青素的加入量对活化部分凝血活酶时间测定试剂稳定

由表4-2可知，使用正常质控血浆对保存在2-8℃条件下的APTT测定试剂进行测试，与实施例1-3对比，实施例2的APTT测定试剂在2-8℃放置18个月后测试的APTT值变化不大，其稳定性有更一步提升。且实施例2-3测试值变化更小，说明实施例2-3的稳定性最优。而因此，本发明APTT测试试剂在2-8℃条件下保存18个月，其稳定性更优于实施例1-3。

二、本发明APTT试剂与对比例1试剂稳定性的对比试验

实施例3：称取7.1gHEPES和2.0gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加去离子水至 500ml，搅拌溶解，调节pH为7.0，加入50ml浓度为1.8wt％的纳米胶体二氧化硅和0.02mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀，加入1.0g磷脂(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，加入0.1g天然虾青素(购自SIGMA)，加入1g原花青素，加入2gBSA，5g甘氨酸，1.5g ZnCl₂，5g甘露醇，2g海藻糖，0.5gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT测定试剂。

实施例4:称取11.9gHEPES和4.67gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加去离子水至 500ml，搅拌溶解，调节pH为7.4，加入50ml浓度为6wt％的纳米胶体二氧化硅和 0.04mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀，加入2g磷脂(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，加入0.3g天然虾青素，加入5g原花青素，5gBSA， 10g甘氨酸，2.1g ZnCl₂，8g甘露醇，5g海藻糖，1gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT测定试剂。

实施例5:称取14.3gHEPES和6gNaCl于1.5L的玻璃瓶中，加去离子水至 500ml，搅拌溶解，调节pH为7.5，加入50ml浓度为12wt％的纳米胶体二氧化硅和0.06mg硫脑苷脂，在磁力搅拌器上搅拌混合均匀，加入4g磷脂(兔脑磷脂或牛脑磷脂)，搅拌1h，充分混匀后，加入0.5g天然虾青素，加入10g原花青素，10gBSA， 15g甘氨酸，4g ZnCl₂，15g甘露醇，10g海藻糖，1.5gPVP，搅拌均匀后定容至1L。放置2h后过滤后即为液态APTT测定试剂。

1.本发明APTT试剂与对比例1 37℃加速热稳定性的比较

本发明实施例3，4和5提供的APTT试剂与对比例1均保存在37℃条件下，，定期取样进行测试，测试使用仪器为CA1500全自动血凝仪，测试时使用正常质控血浆进行检测，结果如表5：

表5本发明APTT试剂与对比例1 37℃加速热稳定性的对比实验结果 (单位：s)

由表5可知，使用正常质控血浆对保存在37℃加速破坏条件下的APTT测定试剂进行测试，本发明APTT测定试剂在30天内的测试结果与对比例1测试结果相比，本发明APTT测定试剂测试结果基本保持稳定，且比对比例1测试结果更稳定，由此说明，APTT测定试剂在加入抗氧化剂天然虾青素和原花青素后，抗氧化性能优于对比例1的抗氧化性能，且实施例4稳定性最佳；对比例1在第10天开始发生试剂不稳定的变化现象。通过对比实验可知，本发明的APTT测定试剂在37℃加速破坏条件下的稳定性优于对比例1，且实施例4稳定性最佳。

2.本发明APTT试剂与对比例1在2-8℃稳定性的比较

本发明实施例3，4和5提供的APTT试剂与对比例1在2-8℃条件下保存，每个月取出一瓶进行测试，连续18个月，测试使用仪器为CA1500全自动血凝仪，测试时使用正常质控血浆进行检测，结果如表6：

表6本发明APTT试剂与对比例1 2-8℃稳定性的比较

由表6可知，使用正常质控血浆对保存在2-8℃条件下的APTT测定试剂进行测试，本发明APTT测定试剂在2-8℃放置18个月后测试的APTT值变化不大，说明其稳定性较好，稳定期至少可以达到18个月，且实施例4测试值变化更小，说明实施例4的稳定性最优。而对比例1在12个月之后测值逐渐偏大，稳定性变差，稳定期约12个月，因此，本发明APTT测试试剂在2-8℃条件下可保存 18个月，而对比例1在2-8℃条件下仅保存12个月，本发明APTT测试试剂稳定性能明显优于对比例1。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims

1.一种活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，包括缓冲液、激活剂、磷脂、抗氧化剂和稳定剂，pH值为7.0-7.5；所述抗氧化剂包括虾青素，所述虾青素的添加量为0.1-0.5g/L。

2.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述虾青素为天然虾青素。

3.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述抗氧化剂还包括原花青素，所述原花青素的添加量为1-10g/L。

4.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述激活剂包括胶体二氧化硅和硫脑苷脂，其中二氧化硅在所述中活化部分凝血活酶时间测定试剂中的浓度为0.09-0.6wt％，所述硫脑苷脂的添加量为0.02-0.06mg/L。

5.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述磷脂选自兔脑磷脂或牛脑磷脂，所述磷脂的添加量为1-4g/L。

6.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、甘氨酸、甘露醇和海藻糖中的至少一种；

7.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，还包括ZnCl₂，所述ZnCl₂的添加量为1.5-4g/L。

8.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，所述缓冲液使用4-羟乙基哌嗪乙磺酸配制，其中4-羟乙基哌嗪乙磺酸的添加量为5-20g/L。

9.根据权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，还包括聚乙烯吡咯烷酮和NaCl；所述聚乙烯吡咯烷酮的添加量为0.5-1.5g/L，所述NaCl的添加量为2-6g/L。

10.根据权利要求1-9任一项所述的活化部分凝血活酶时间测定试剂，其特征在于，包括：

含7.1-14.3g/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸的缓冲液，

胶体二氧化硅，其中二氧化硅在所述活化部分凝血活酶时间测定试剂中的浓度为0.09-0.6wt％，

pH值为7.30-7.5。