CN108220203A - 一种类球红细菌的发酵培养基 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种类球红细菌的发酵培养基，其配方如下：乙酸钠2.0～6.0g/L、酵母膏1.0‑3.0g/L、氯化铵1.5‑2.5g/L、蛋白胨2.0‑4.0g/L、氯化钠1.15‑1.35g/L、硫酸镁0.1‑0.3g/L、磷酸二氢钾0.1‑0.3g/L、碳酸氢钠0.5‑1.5g/L，其余为水；各组分的浓度以所述发酵培养基的总体积为基准。本发明的类球红细菌发酵培养基的成分简单，配制过程方便，培养基整体成本较低，但增菌效果显著，性价比显著高于市售的通用培养基和常规培养基。

Description

一种类球红细菌的发酵培养基
技术领域
本发明涉及一种类球红细菌的发酵培养基，属于微生物发酵培养技术领域。
背景技术
随着化肥和农药(例如水产养殖环境中使用的杀虫剂)的广泛使用，加重了环境污染和对人类的健康危害，人们希望能够开发出改善环境的微生物。
类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)是目前研究最深入的光合微生物之一，不仅能够产生类胡萝卜素、辅酶Q10、超氧化物歧化酶、5-氨基乙酰丙酸和氢气，而且能够降解农药残留、有机废水和多环芳烃等有毒有害物质，对于环境、尤其是水产养殖水体的解毒具有重要意义，由此，类球红细菌已得到广泛地应用(陈琳，李祖明，类球红细菌研究进展，微生物学杂志，2016，36(3)：105-108.)。
此外，本申请的发明人在研究中意外地筛选出一种可以降低敌百虫毒性的类球红细菌XR12(在中国典型培养物保藏中心的保藏号为：CCTCC M2017826)，不仅有显著的降低敌百虫毒性的效果，而且具有无副作用、无残留、无污染、不产生耐药性等特点，是减弱水产养殖中敌百虫毒性效应、预防敌百虫中毒的理想微生物制剂。
然而，目前市面上的通用培养基以及类球红细菌常规培养基都存在一些不足，如培养基的成本太高，成分复杂，配制繁琐，而且细菌增殖效果不佳，这些均难以满足类球红细菌工业化生产对培养基成本低、配制简单、增菌浓度高的要求。
发明内容
鉴于相关技术的上述问题和/或其他问题，本发明一方面提供了一种类球红细菌的发酵培养基，其中，所述发酵培养基的配方如下：乙酸钠2.0～6.0g/L、酵母膏1.0-3.0g/L、氯化铵1.5-2.5g/L、蛋白胨2.0-4.0g/L、氯化钠1.15-1.35g/L、硫酸镁0.1-0.3g/L、磷酸二氢钾0.1-0.3g/L、碳酸氢钠0.5-1.5g/L，其余为水；各组分的浓度以所述发酵培养基的总体积为基准。
优选的，所述发酵培养基的配方如下：乙酸钠4.0g/L、酵母膏2.0g/L、氯化铵2.0g/L、蛋白胨3.0g/L、氯化钠1.25g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾0.2g/L，碳酸氢钠1.0g/L，其余为水。
优选的，所述发酵培养基的pH值为7.0～7.5。
本发明的类球红细菌发酵培养基的成分简单，配制过程方便，培养基整体成本较低，但增菌效果显著，性价比显著高于市售的通用培养基和常规培养基。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的说明，但本发明并不限于这些具体实施方式。
在本发明的一个具体实施方案中，一种类球红细菌的发酵培养基，该发酵培养基的配方如下：乙酸钠2.0～6.0g/L、酵母膏1.0-3.0g/L、氯化铵1.5-2.5g/L、蛋白胨2.0-4.0g/L、氯化钠1.15-1.35g/L、硫酸镁0.1-0.3g/L、磷酸二氢钾0.1-0.3g/L、碳酸氢钠0.5-1.5g/L，其余为水；各组分的浓度以所述发酵培养基的总体积为基准。
关于适合类球红细菌培养的发酵培养基，本发明的发明人做了大量的研究和实验，分别考察了碳源、复合氮源以及复合无机盐对于各种类球红细菌的生长的影响，发现当采用乙酸钠作为碳源，且采用特定浓度的酵母膏、氯化铵和蛋白胨作为复合氮源时，能够更好地促进类球红细菌的生长；尤其是，当采用特定浓度的氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾与碳酸氢钠的组合作为复合无机盐时，能够满足类球红细菌快速、大量增殖的需求，与常规培养基相比在同等条件下发酵获得的类球红细菌的菌浓度更高。
实施例1
实施例1的类球红细菌的发酵培养基的配制过程如下：
步骤1)：在无菌条件下，将4.0g乙酸钠、2.0g酵母膏、2.0g氯化铵、3.0g蛋白胨、1.25g氯化钠、0.2g硫酸镁、0.2g磷酸二氢钾和1.0g碳酸氢钠置于三角烧瓶内，充分混匀；
步骤2)：过滤灭菌，再采用10％氢氧化钠溶液调节pH值至7.0～7.5，最后加入纯化水将体积调节至10L；
步骤3)：培养基配制完成后，过滤灭菌，分装、封口，最后冷藏(-20℃环境)备用。
应用例1
按5％接种量接种浓度为1×108cfu/mL的类球红细菌XR1(由上海海洋大学水生动物病原库提供)，然后分别于35℃、180r/min摇床振荡培养24h，采用稀释涂布平板法测定类球红细菌XR1的菌浓度(cfu/mL)。
应用例2
按5％接种量接种浓度为1×108cfu/mL的类球红细菌XR12(在中国典型培养物保藏中心的保藏号为：CCTCC M2017826)，然后分别于35℃、180r/min摇床振荡培养24h，采用稀释涂布平板法测定类球红细菌XR12的菌浓度(cfu/mL)。
效果数据
对比例1-3：分别采用市售的类球红细菌的常规发酵培养基(常规培养基1购自宜春强微生物科技有限公司，产品品牌：强微99；常规培养基2购自河南智牧商贸有限公司，产品品牌：智牧666；常规培养基3购自无锡中意生物技术有限公司，产品品牌：中意和)培养类球红细菌XR1，培养过程和培养条件与应用例1完全相同，具体不再赘述。
对比例4：采用市售的通用培养基(营养肉汤，购自北京陆桥技术有限责任公司，产品型号：CM142)培养类球红细菌XR1，培养过程和培养条件与应用例1相同，具体不再赘述。
在相同条件下培养一天后，检测对比例1-4以及应用例1的类球红细菌XR1的增菌浓度；另注：对比例1-4与应用例1均有三个平行试验组；培养前的起始浓度相同，检测培养后比培养之前增加的菌浓度为增菌浓度。
检测结果参见下表1。
表1
增菌浓度(cfu/mL)
应用例1 2.808-4.45×1011
对比例1 5.2-7.6×109
对比例2 2.8-5.2×109
对比例3 5.1-7.1×109
对比例4 2.06-3.06×108
从表1的结果可以看出，应用例1的增菌浓度数据远高于对比例1-4，这说明，在相同条件下培养类球红细菌XR1，本发明的发酵培养基的增菌浓度是常规培养基的几十倍，是通用培养基的1000倍；本发明的发酵培养基更适合培养类球红细菌XR1，增菌效果显著。
对比例1’-3’：分别采用市售的类球红细菌的常规发酵培养基(常规培养基1购自宜春强微生物科技有限公司，产品品牌：强微99；常规培养基2购自河南智牧商贸有限公司，产品品牌：智牧666；常规培养基3购自无锡中意生物技术有限公司，产品品牌：中意和)培养类球红细菌XR12(在中国典型培养物保藏中心的保藏号为：CCTCC M2017826)，培养过程和培养条件与应用例2完全相同，具体不再赘述。
对比例4’：采用市售的通用培养基(营养肉汤，购自北京陆桥技术有限责任公司，产品型号：CM142)培养类球红细菌XR12，培养过程和培养条件与应用例2相同，具体不再赘述。
在相同条件下培养一天后，检测对比例1’-4’以及应用例2的类球红细菌XR12的增菌浓度；另注：对比例1-4与应用例2均有三个平行试验组；培养前的起始浓度相同，检测培养后比培养之前增加的菌浓度为增菌浓度。
检测结果参见下表2。
表2
从表2的结果可以看出，应用例2的增菌浓度数据远高于对比例1’-4’，这说明，在相同条件下培养类球红细菌XR12，本发明的发酵培养基的增菌浓度是常规培养基的几十倍，是通用培养基的1000倍；本发明的发酵培养基更适合培养类球红细菌XR12，增菌效果显著。
综上结果可以看出，本发明的类球红细菌发酵培养基的成分简单，配制过程方便，培养基整体成本较低，但增菌效果显著，性价比显著高于市售的通用培养基和常规培养基。
应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施方式中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施方式的具体说明，它们并非用以限制本发明的保护范围，凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施方式或变更均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种类球红细菌的发酵培养基，其中，
所述发酵培养基的配方如下：
乙酸钠2.0～6.0g/L、酵母膏1.0-3.0g/L、氯化铵1.5-2.5g/L、蛋白胨2.0-4.0g/L、氯化钠1.15-1.35g/L、硫酸镁0.1-0.3g/L、磷酸二氢钾0.1-0.3g/L、碳酸氢钠0.5-1.5g/L，其余为水；各组分的浓度以所述发酵培养基的总体积为基准。
2.如权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于：
所述发酵培养基的配方如下：乙酸钠4.0g/L、酵母膏2.0g/L、氯化铵2.0g/L、蛋白胨3.0g/L、氯化钠1.25g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾0.2g/L，碳酸氢钠1.0g/L，其余为水。
3.如权利要求1或2所述的发酵培养基，其特征在于：
所述发酵培养基的pH值为7.0～7.5。
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