CN108210538A - 一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法，(1)粉碎：称取50g的洋甘菊干花，利用粉碎设备将干花粉碎；(2)浸泡：将粉碎后的洋甘菊干花按1：10‑15的比例投入到常温蒸馏水中(20‑25℃)，浸泡2h；(3)将已浸泡的洋甘菊干花粉末进行超声处理，超声功率160W，强化时间20min，液固比10‑15:1，温度25‑30℃，水蒸气蒸馏2小时；(4)分离：将超声强化后的液体固液分离；(5)蒸发：将分离后的纯露置于旋转蒸发仪内，温度50℃转速100r/min(转数/分钟)旋转蒸发至生药浓度为5g/mL。本发明的提取方法在原有提取的基础上，通过超声强化，提高了精油得率的同时，纯露中有效成分具有明显的抗真菌作用，不含任何辅助的化学添加剂。

Description

一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法

技术领域

本发明涉及医疗领域，具体是一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法。

背景技术

白色念珠菌，广泛存在于自然界及人体的口腔、呼吸道、消化道及阴道黏膜中，为条件致病性真菌，正常情况下不会导致疾病发生。当某些因素破坏了机体内菌群平衡，白色念珠菌则转变为致病菌，在局部大量生长繁殖，引起局部甚至全身性疾病。近年来，由于广谱抗菌药物、激素、免疫抑制剂等药物的大量应用，介入手术的普及，恶性肿瘤、艾滋病等疾病发病率逐年上升等因素，使得念珠菌感染发病率逐年升高。目前抗此类真菌的药物种类繁多，但副作用大，且容易复发。因此，具有抗真菌作用的中药及民族药作为纯天然、无污染药物，具有价格低廉，毒副作用小，不易产生耐药性等特点越来越受到人们的关注。

洋甘菊属菊科植物，原产欧洲。德国洋甘菊是其中的一种，又称为母菊。20世纪90年代，母菊的保健祛病作用为越来越多的人所认识。在美国则被有关专家推荐为“100种热门药草”之一。并以其为原料在欧洲开发出茶、浸膏或胶囊等系列保健品。在我国黑龙江地区，也具有规模化的种植基地。相关研究认为，母菊中的酚类或黄酮类物质可有效的抵抗紫外线引起的皮肤衰老/损伤；而其水提物则对过敏性皮炎具有极好的皮肤修复功能；另外，医学科研人员发现母菊水煎剂可作为功能性饮料调节肥胖、高血糖和高血脂症；同时对酒精引起的胃粘膜损伤也就有较好的保护性作用。现代药理研究也表明洋甘菊中的黄酮类成分具有抗菌、抗氧化、消炎效果，具有较强的清除自由基的能力，可预防体内形成过多活性氧自由基，达到抗癌、抗心血管病的目的。

此外，由洋甘菊提炼出来的洋甘菊精油也是非常流行的保键和药物制品。因其精油可放松身心，药用止痛，因此被称为天然镇静剂；可治疗风湿病，消除背痛，缓解皮肤过敏症状，养护晒伤的肌肤。精油呈深蓝色，因为在蒸馏萃取过程中，植物的天然成分与蒸气混合，产生一种"蓝甘菊油烃"，才出现罕见的蓝色。洋甘菊蒸馏萃取的产物除精油外，还有一种极具开发价值的植物纯露。

近年来研究表明，以唑类药物为代表的治疗和预防念珠菌感染的药物，在有效治疗念珠菌感染的同时，又使得念珠菌的耐药性逐步升高，尤其是白色念珠菌。白色念珠菌感染引起念珠菌病，根据侵犯部位分为皮肤白色念珠菌病、粘膜念珠菌病和内脏及中枢神经念珠菌病。因洋甘菊纯露为天然植物提取物，无任何毒副作用且价格低廉，为皮肤和粘膜念珠菌病治疗和预防的新产品研发提供实验基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法，包括以下步骤：

(1)粉碎：称取50g的洋甘菊干花，利用粉碎设备将干花粉碎；

(2)浸泡：将粉碎后的洋甘菊干花按1：10-15的比例投入到常温蒸馏水中(20-25℃)，浸泡2h；

(3)将已浸泡的洋甘菊干花粉末进行超声处理，超声功率160W，强化时间20min，液固比10-15:1，温度25-30℃，水蒸气蒸馏2小时；

(4)分离：将超声强化后的液体固液分离；

(5)蒸发：将分离后的纯露置于旋转蒸发仪内，温度50℃转速100r/min(转数/分钟)旋转蒸发至生药浓度为5g/mL，4℃冰箱保存备用，最终pH值为5.0-5.5。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的提取方法在原有提取的基础上，通过超声强化，提高了精油得率的同时，纯露中有效成分具有明显的抗真菌作用，不含任何辅助的化学添加剂。本方法衍生的相关产品，均达到临床应用级别；制备及购买价廉、方便、快捷。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例中，一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法，包括以下步骤：

(1)粉碎：称取50g的洋甘菊干花，利用粉碎设备将干花粉碎。

(2)浸泡：将粉碎后的洋甘菊干花按1：10-15的比例投入到常温蒸馏水中(20-25℃)，浸泡2h。

(3)超声强化：将已浸泡的洋甘菊干花粉末进行超声处理，超声功率160W，强化时间20min，液固比10-15:1，温度25-30℃，水蒸气蒸馏2小时。

(4)分离：将超声强化后的液体固液分离。

(5)蒸发：将分离后的纯露置于旋转蒸发仪内，温度50℃转速100r/min(转数/分钟)旋转蒸发至生药浓度为5g/mL，4℃冰箱保存备用，最终pH值为5.0-5.5。

本发明的提取方法在原有提取的基础上，通过超声强化，提高了精油得率的同时，纯露中有效成分具有明显的抗真菌作用，不含任何辅助的化学添加剂。本方法衍生的相关产品，均达到临床应用级别；制备及购买价廉、方便、快捷。

对洋甘菊纯露抗白色念珠菌的实验：

1、菌种的复苏与活化

试验菌株：白色念珠菌(ATCC10231)将试验所需菌种在新鲜培养基上接种进行活化，细菌37℃倒置培养24h，然后将细菌接种至液体培养基中进行摇床培养20h，即得到菌种母液。

2、抗菌实验操作过程

按照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4采用溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法。将试验菌24h斜面培养物用PBS洗下，制成菌悬液(要求的浓度为：100μL/菌于5ml样液内，回收菌数为1×104-9×104cfu/ml)。取被试样液(5ml)和对照样液四管。取上述菌悬液，分别在每个被试样液上滴加100μL，均匀涂布，开始计时，作用2、5、10和20min，用无菌镊分别将样液投入含5mL PBS的试管内，重复混匀，做适当稀释，然后取其中2-3个稀释度，分别吸取0.5mL，置于两个平皿，用两个凉至40-45℃营养琼脂培养基15mL做倾注，转动平皿，使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，35℃±2℃培养48h，做活菌菌落计数。实验重复三次，按式(C2)计数抑菌率：

X4＝(A-B)/A×100％

式中X4——抑菌率，％；

A——对照样品平均菌落数；

B——被试样品平均菌落数。

评价标准:根据GB 15979－2002附录C4.2，抑菌率≥50％-90％为产品有抑菌作用，抑菌率≥90％为产品有较强抑菌作用。

3、德国洋甘菊(Matricaria chamomilla L)干花提取纯露的抑菌效果观察。

试验结果表明，所试样品对白色念珠菌生长有不同程度的抑制，抑菌效果随作用时间延长而增强，作用10min抑菌率达90％以上，具有较强抑菌作用(见表一)。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (1)

1.一种抗白色念珠菌的洋甘菊纯露提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)粉碎：称取50g的洋甘菊干花，利用粉碎设备将干花粉碎；

(2)浸泡：将粉碎后的洋甘菊干花按1：10-15的比例投入到常温蒸馏水中(20-25℃)，浸泡2h；

(3)将已浸泡的洋甘菊干花粉末进行超声处理，超声功率160W，强化时间20min，液固比10-15:1，温度25-30℃，水蒸气蒸馏2小时；

(4)分离：将超声强化后的液体固液分离；

(5)蒸发：将分离后的纯露置于旋转蒸发仪内，温度50℃转速100r/min(转数/分钟)旋转蒸发至生药浓度为5g/mL，4℃冰箱保存备用，最终pH值为5.0-5.5。