CN108158841B - 鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏中的应用。通过小鼠PCA模型的被动皮肤过敏反应研究发现，鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白具有抗过敏效果。使用RBL‑2H3细胞系研究鹌鹑蛋中活性成分ovoinhibitor糖蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响，表明鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白与化学抗过敏药物联用具有协同抗过敏效果。将鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于具有抗过敏作用的食品、化妆品、日用品及药品中，更为安全、副作用更低、且不易复发。

Description

鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏中的应用

技术领域

本发明涉及一种抗过敏物质，特别是涉及一种鹌鹑蛋及鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏中的应用。

背景技术

食物过敏是人体对无毒害物质所产生的异常反应，是由免疫系统针对一些过敏源所引起的反应。目前食物过敏发病率在世界范围内逐渐上升，对世界卫生保健体系产生着深远的影响。食物过敏源包括分子量在5-100kDa的蛋白质或糖蛋白及有交联IgE能力的受体。尽管许多潜在的过敏源在胃的酸性环境中经酶消化会变性，但有一些过敏源不受这些条件的影响。动物及人经口服用某些食物后，可以在血清中检测到完整的食物过敏源。

研究已报道了多种类型的食物过敏源。粮农组织(FAO)已提到八大类易过敏食物：牛奶、鸡蛋、鱼、甲壳贝类、坚果、花生、小麦和大豆。由这些易致敏食物导致的过敏反应约占世界上所有食物过敏的90％。花生是最常见的食物过敏源之一，且能诱导严重的速发型超敏反应，是很多致命性过敏反应发生的原因。通常，人们认为食物过敏是一种食物不良反应。大多数研究报道的食物过敏基本都是IgE介导的超敏反应，属于I型超敏反应。但是最近有研究报道，在遗传性过敏人群体内，食物过敏也能引起迟发型超敏反应，属于IV型超敏反应。相反，属于II或III型超敏反应的食物过敏鲜有报道。

利用不同的合成剂或药物可以治疗一些患者的过敏反应。据研究报道，全球约有22％的人患有过敏性疾病，中国则约有2亿多人患有过敏性疾病，并且发病率呈逐年上升趋势。到目前为止，没有任何治疗方法可以完全治愈过敏性疾病，即使药物治疗也很难保证不再复发。并且化学药物一般都有强烈的副作用，会对人体产生不利影响。因此，为了抑制过敏性疾病发病率的增加，开发新的有助于预防过敏性疾病的功能成分来替代药物已经引起了许多科学家的关注。许多研究发现一些具有抗氧化、抗炎等生物活性的成分对过敏疾病的治疗也发挥着作用，如黄酮类、多酚类物质。过敏反应与炎症反应有着紧密的关系，食物抗原引发的过敏反应会释放炎性介质(如组胺、类胰蛋白酶等)和促炎细胞因子，导致机体发生炎症反应。一些发挥抗炎功能的成分通过抑制肥大细胞颗粒从而抑制炎性介质的分泌。

到目前为止，对于抗过敏成分的研究越来越多，研究发现许多天然化合物都具有抗过敏作用，除多酚类、黄酮类、多糖类之外，在实验中发现益生菌也可以发挥抗过敏的作用。另外，研究发现，一些食物也中具有抗过敏活性成分，如n-6和n-3系多价不饱和脂肪酸、多酚类化合物(例如茶多酚、类黄酮)等。多价不饱和脂肪酸通过抑制4-系列淋巴毒素(4-LT)的合成抑制I型过敏反应的发生。多酚类化合物的抗过敏作用也是同样的机理，抑制炎症细胞分泌化学介质，如组胺等。而且，目前研究已显示天然活性成分也具有抗过敏作用，可以抑制免疫球蛋白IgE的产生，保护和稳定炎症细胞及靶细胞膜等。

鹌鹑蛋含有许多营养成分，被称为“卵中佳品”，富含多种维生素和矿物质，磷脂含量高，大部分鹌鹑蛋是蛋白质，脂肪，维生素E和矿物质(氮，铁和锌)的良好来源。鹌鹑蛋中的蛋白质主要有ovoinhibitor糖蛋白、溶菌酶、卵抑制剂等。ovoinhibitor糖蛋白是蛋清中的一种糖蛋白，热稳定性好，包含20％～25％的糖基部分，主要是由葡糖胺、甘露糖、半乳糖组成；溶菌酶在蛋清中含量丰富，具有较强的抗热性和抗菌能力，能水解致病菌中黏多糖；卵抑制剂的碳水化合物含量约为10％，远低于ovoinhibitor糖蛋白，卵抑制剂中存在三个糖基化位点，是丝氨酸蛋白酶如胰蛋白酶的特异性抑制剂。鹌鹑蛋是良好的营养物质来源。之前一直有研究提及，在一些药学理论不完善的国家，将来自日本鹌鹑的鹌鹑蛋作为一种营养疗法已有数百年的历史。

发明内容

针对目前化学抗过敏药物存在副作用，且在停止给药后容易出现病情复发的情况，本发明发现鹌鹑蛋中的ovoinhibitor糖蛋白具有抗过敏作用，进而获得一种来源于食品的、副作用更低、更为安全且不易复发的抗过敏成分。

本发明的第一个目的是提供鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏食品中的应用。

其中，所述食品包括油制品、奶制品、肉制品、海产品或坚果制品。

优选的，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在食品中的质量含量为10～40％。

本发明的第二个目的是提供鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏化妆品中的应用。

其中，所述化妆品包括化妆水、化妆乳液、面霜、口红、BB霜或面膜。

优选的，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在化妆品中的质量含量为5～15％。

本发明的第三个目的是提供鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏日用品中的应用。

其中，所述日用品包括洗发水、沐浴露或香皂。

优选的，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在日用品中的质量含量为1～10％。

本发明的第四个目的是提供鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白在制备具有预防和/或治疗过敏药品中的应用。

其中，所述药品的成分优选包括氯雷他定、西替利嗪或阿司咪唑。

优选的，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在药品中的有效含量为5～20％。

本发明通过小鼠PCA模型的被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋及其活性成分ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏作用。结果显示，相对于阳性对照组，鹌鹑蛋处理组耳部颜色变浅，其中活性成分ovoinhibitor糖蛋白组颜色明显变浅，证明鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应，其中的ovoinhibitor糖蛋白可能是抑制过敏的主要成分。鹌鹑蛋或鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白能够用于抗过敏食品、化妆品、日用品及药品中。

本发明在获得了鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白具有抑制过敏的基础上，将RBL-2H3细胞系用于研究鹌鹑蛋中活性成分ovoinhibitor糖蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响。通过体外肥大细胞脱颗粒水平来研究，鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白和其他抗过敏药物单独或联合使用的抗过敏效果。结果表明，鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏效果药弱于化学抗过敏药物，鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白与化学抗过敏药物联用具有协同抗过敏效果，不同的化学抗过敏药物协同作用强弱不同。

附图说明

图1被动皮肤过敏反应中鹌鹑蛋、ovoinhibitor糖蛋白处理后小鼠耳部颜色情况，从左到右依次为对照组、鹌鹑蛋组、ovoinhibitor糖蛋白组；

图2被动皮肤过敏反应中鹌鹑蛋、ovoinhibitor糖蛋白处理后小鼠耳部皮肤浸出液吸光值。

具体实施方式

本发明中所述鹌鹑蛋为本领域中所熟知的鹌鹑蛋，或称为鹑鸟蛋、鹌鹑卵，为鹌鹑(学名：Coturnix)所产。鹌鹑蛋呈白色或橄榄褐色，散布有褐色或锈色斑点，大小为25.6～33×19～25毫米，重5.6～7克。本发明对鹌鹑蛋的来源没有特殊限定，采用市售鹌鹑蛋即可。

本发明中所述ovoinhibitor糖蛋白特指鹌鹑蛋中的ovoinhibitor糖蛋白。本发明对ovoinhibitor糖蛋白的来源没有特殊限定，采用市售ovoinhibitor糖蛋白或本领域中的常规制备方法制备得到。在本发明具体实施例中采用自行制备得到ovoinhibitor糖蛋白，其制备方法优选为：将鹌鹑蛋蛋清在水中透析、离心并弃去沉淀，加入饱和硫酸铵使上清液达到0.40饱和，离心取沉淀物溶于水中。溶液通过Bio-Gel P-150柱进行分子筛，以254μm处监测的流出物显示分离为三个峰，经超滤将第二个峰浓缩，用硫酸铵使其达到0.30饱和并收集，得到ovoinhibitor糖蛋白。本领域技术人员可以根据本领域的常规技术对ovoinhibitor糖蛋白进行制备及分离纯化。

本发明通过以下研究证明鹌鹑蛋及其活性成分ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏作用。

1.被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏作用

研究被动皮肤过敏反应(PCA)是一种皮肤对抗原抗体IgE结合后产生应答的快速过敏反应，其特征在于皮肤内血管渗透性的增加。为了观察及量化分析PCA是否增强皮肤内血管的渗透性，利用能与血浆白蛋白结合的伊文思蓝染液进行实验。抗原抗体结合后刺激组胺释放，增强皮肤内血管渗透性，允许白蛋白结合渗漏的染料，并在皮内注射部位产生斑点。本发明使用小鼠PCA模型研究鹌鹑蛋及其活性成分ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏作用。结果显示，鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应，其中的ovoinhibitor糖蛋白是抑制过敏的主要成分。

2.鹌鹑蛋中ovoinhibitor糖蛋白和其他抗过敏药物联合抗过敏作用研究

肥大细胞在过敏性疾病如特应性鼻炎、哮喘和特应性皮炎中起关键作用。当肥大细胞被激活时，大量储存于颗粒中的炎症介质如组胺、蛋白酶和细胞因子被释放出来。在临床情况下，由于肥大细胞脱颗粒引起的超敏反应表现为荨麻疹、皮疹等，在极端情况下可能会成为危及生命的过敏性休克。RBL-2H3人白血病肥大细胞是过敏疾病研究中最常用的细胞模型，在过敏性疾病发病机理及药物抗过敏成分的研究中有着广泛的应用。

在过敏反应中，有多种化学介质参与其中，最主要的有组胺和白三烯等，导致肥大细胞脱颗粒的化学物质中最主要的是组胺。目前较为常用的抗组胺药即H1受体拮抗剂，H1受体拮抗剂的发展经历了第一代、第二代，第一代例如氯苯那敏、苯海拉明等，它们容易透过血脑屏障与相关受体发生亲和反应，致中枢镇静作用的发生率较高；第二代与第一代抗组胺药相比，第二代具有镇静作用小，几乎无抗胆碱作用的优点，而且作用时间长，减少了服药次数，用药剂量相对要少，提高了患者的顺应性，得到了广大医生和患者的欢迎，故在临床上得到了广泛使用，常用的包括氯雷他定、西替利嗪或阿司咪唑等。

在获得了鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白具有抑制过敏的基础上，将RBL-2H3细胞系用于研究鹌鹑蛋中活性成分ovoinhibitor糖蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响。通过体外肥大细胞脱颗粒水平来研究，以IgE介导的途径刺激RBL-2H3细胞，以β-氨基己糖苷酶作为脱颗粒检测指标。DNP-HSA用作阳性对照，观察鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白和其他抗过敏药物单独或联合使用的抗过敏效果。结果表明鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白与化学抗过敏药物具有协同抑制RBL-2H3细胞脱颗粒的作用。

由于鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白具有抗过敏作用，将鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于抗过敏食品、化妆品、日用品及药品中，使其具有一定程度的抗过敏效果。本发明中所述食品包括但不限于油制品、奶制品、肉制品、海产品及坚果制品中。本发明中，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在食品中的质量含量优选为10～40％，更优选为20～35％。本发明所述化妆品包括但不限于化妆水、化妆乳液、面霜、口红、BB霜及面膜。所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在化妆品中的质量含量优选为5～15％，更优选为10～13％。本发明所述日用品包括但不限于洗发水、沐浴露、香皂。所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在日用品中的质量含量优选为1～10％，更优选为5～8％。本发明所述药品包括但不限于氯雷他定、西替利嗪及阿司咪唑等过敏药品。本发明中，所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在药品中的有效含量优选为5～20％，更优选为10～15％。所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白添加入食品、化妆品、日用品及药品中，使食品、化妆品、日用品及药品具有一定的抗过敏效果。

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋及活性成分ovoinhibitor糖蛋白的抗过敏作用

1、实验动物

实验所用的SPF级Balb/c小鼠购买自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于中国农业大学食品科学与营养工程学院SPF级动物实验室。饲养环境温度维持在22±1℃，湿度稳定在55±5％，每12小时昼夜气流交替一次，空气交换为15次/h。试验期间，动物可自行饮水摄食。小鼠日常饲料为商业化的SPF级大小鼠维持饲料，购自北京科澳协力饲料有限公司(Beijing,China)，饲料主要营养成分(水分、灰分、粗蛋白、脂肪、粗纤维、钙磷)满足Chinese Standard GB14924.3-2010要求，并且未检测出黄曲霉毒素(≤20μg/kg)。本研究中的动物实验已通过中国农业大学动物伦理委员会审查。

2、试验材料：鹌鹑蛋和ovoinhibitor糖蛋白

使用搅拌机分别将鹌鹑蛋或ovoinhibitor糖蛋白混合均匀，置于平板中。使用冻干机，-40℃，两天之内冻干，-20℃冰箱保存。

ovoinhibitor糖蛋白为实验室自行提取，具体方法如下：

取鹌鹑蛋蛋清(100ml)在4°去离子水中透析2天。将粘液状沉淀物离心(8000r/min,15min)并弃去，通过加入饱和硫酸铵使上清液达到0.40饱和。离心后，弃去上清液，将沉淀物溶于200-300ml水中，加入饱和硫酸铵至0.40饱和度再沉淀。沉淀物溶解于约50毫升水，溶液通过Bio-GelP-150柱(6×125厘米，100毫升/小时，0.1毫升KCl)，以254μm处监测的流出物显示分离为三个峰，1.0空隙体积的第一个峰是高分子量材料；第二个约1.5个空隙体积是ovoinhibitor；第三个2.5-3空隙体积是溶菌酶。通过超滤将第二个峰浓缩至约100ml，并用硫酸铵使其达到0.30饱和，收集ovoinhibitor的沉淀物。

3、实验方法

将小鼠按体重随机分为3组，分别为生理盐水组(C)、鹌鹑蛋处理组(Q)(15mg/kg)、ovoinhibitor糖蛋白处理组(O)(15mg/kg)。第0天到第10天分别给予上述三组，每天一次。第11天，对小鼠右耳部注射抗DNP-IgE致敏，24h后激发，激发前一小时进行灌胃处理，分别给予生理盐水，鹌鹑蛋粉和ovoinhibitor糖蛋白处理组，然后尾静脉注射抗原DNP-HSA与伊文思蓝染液的混合物，激发被动过敏反应，分别观察小鼠耳部颜色变化。

4、试验结果

抗原刺激后，观察小鼠耳部颜色变化。采血后处死小鼠，将耳朵剪下，剪碎后溶于甲酰胺溶液中，70℃、4小时后，进行比色分析，得到620nm处的吸光值，吸光值代表了溶液中耳部皮肤浸出的染料多少，即吸光值越大，被动皮肤过敏反应越强烈，数据处理采用GraphPadPrism统计分析软件的单因素方差分析(One-wayANOVA)多重比较，P<0.05表示有显著性差异，P<0.01表示有非常显著性差异。

在生理盐水处理组中，耳部的蓝色最深，而在鹌鹑蛋处理组和ovoinhibitor糖蛋白处理组中，耳部颜色都有肉眼可区分的差异，ovoinhibitor糖蛋白处理组比鹌鹑蛋处理组耳部颜色浅。图1结果表明，相比于生理盐水组，鹌鹑蛋处理组(Q)表现出较浅的颜色，吸光度较低，有显著性差异(P<0.05)，ovoinhibitor糖蛋白组(O)耳部颜色比对生理盐水组耳部颜色更浅，吸光度更低，有非常显著性差异(P<0.01)。

鹌鹑蛋通常是作为营养成分在人体内发挥作用，很少作为药物使用。因此，这本文提前进行灌胃处理，模拟食物摄入，对小鼠给予特定量的鹌鹑蛋营养成分，特异性处理一段时间，使得机体免疫能力增强。在给予抗原和染料静脉注射之后，肉眼观察各组小鼠耳部颜色，可以明显看到相对于阳性对照组，鹌鹑蛋处理组耳部颜色变浅，其中活性成分ovoinhibitor糖蛋白组颜色明显变浅，证明鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应，其中的ovoinhibitor糖蛋白可能是抑制过敏的主要成分。

实施例2

鹌鹑蛋中ovoinhibitor糖蛋白和其他抗过敏药物联合抗过敏作用研究

1、实验材料

细胞株：RBL-2H3细胞在含15％胎牛血清和1％三抗的MEM培养基中于37℃，5％(体积分数)CO₂的培养箱中培养，贴壁生长，当细胞生长至铺满约90％培养瓶底面积时传代。传代时，加入1mL 0.25％胰酶消化，当在显微镜下观察到细胞间有明显的间隙、大概有70％细胞明显变圆时，迅速加入含15％胎牛血清的MEM培养液终止消化，小心吹打后将细胞收集于离心管中，1500g，常温下离心5min，弃去离心管中液体，再加入新鲜MEM完全培养液，以吸管小心吹打使细胞重悬传代。传代比例为1：3-4，2天传代一次。

2、供试品组：

分成三个组：ovoinhibitor糖蛋白组(O)，化学抗过敏药物组(氯雷他定(L)，西替利嗪(C)，阿司咪唑(A))，ovoinhibitor糖蛋白组+化学抗过敏药物组(O+L/O+C/O+A)。使用搅拌机将各组分混合均匀后，放在平板里。使用冻干机，温度-40℃，在两天之内冻干，在-20℃冰箱保存。

3、实验方法：

将5×105/ml的RBL细胞系以200μL/孔接种到96孔细胞培养板上，孵育过夜。用PBS缓冲液洗涤后，加入1μg/ml抗DNP的IgE(100μL/孔，用不含胎牛血清的MEM培养液稀释，在培养箱中培养2h。然后加入100μL表1中不同浓度的各组处理30min，弃掉上清，再用Tyrode’s缓冲液洗涤2次，加入100ng/mL DNP-HSA(50μL/孔，Tyrode’s缓冲液稀释)。在37℃反应2个小时，将96孔板放在冰上冷却15min以终止反应。转移30μL上清液至另一个96孔板，加入50μL溶解1.3mg/mL4-硝基苯基N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷(PNAG)的柠檬酸溶液，37℃反应1h。加200μL碳酸钠缓冲液终止反应，测定405nm波长处吸光值。细胞脱颗粒以TritonX-100阳性组为百分比，对其他组进行换算，结果以β-氨基己糖苷酶释放率表示，β-氨基己糖苷酶释放率＝[(样品组吸光度-阴性对照组吸光度)/(阳性对照组吸光度-阴性对照组吸光度)]×100％。

表1各组分含量表(单位μg/mL)

4、结果判定

肥大细胞脱颗粒是过敏反应发生的关键，颗粒中的一些炎性介质可以作用于体内的其他组织，导致过敏症状。β-氨基己糖苷酶的释放水平是肥大细胞脱颗粒程度的关键指标。因此，为了检查鹌鹑蛋的潜在抗过敏活性，本发明使用RBL-2H3细胞系建立肥大细胞脱颗粒体外模型，利用DNP-HSA诱导抗DNP IgE致敏的RBL-2H3细胞脱颗粒，作为IgE介导的细胞脱颗粒。结果如表2所示。

表2各组分β-氨基己糖苷酶释放率

通过表2可以看出，各组中β-氨基己糖苷酶的释放水平随着浓度增加而减弱，可见：

1)ovoinhibitor糖蛋白组、化学抗过敏药物组以及ovoinhibitor糖蛋白组+化学抗过敏药物组都具有抑制RBL-2H3细胞脱颗粒的作用，并具有浓度依赖性的关系；

2)化学抗过敏药物组对RBL-2H3细胞脱颗粒的抑制作用普遍强于ovoinhibitor糖蛋白组；

3)ovoinhibitor糖蛋白组+化学抗过敏药物组对RBL-2H3细胞脱颗粒的抑制作用明显强于ovoinhibitor糖蛋白组、化学抗过敏药物组，二者组合具有协同抑制RBL-2H3细胞脱颗粒的作用；

4)ovoinhibitor糖蛋白组+氯雷他定组(O+L)对RBL-2H3细胞脱颗粒的抑制作用明显强于ovoinhibitor糖蛋白组+西替利嗪组(O+C)、ovoinhibitor糖蛋白组+阿司咪唑组(O+A)。

实施例3

鹌鹑蛋中ovoinhibitor糖蛋白应用于肉制品中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白；肠衣；大豆分离蛋白、面粉、食用淀粉、阿拉伯胶、食用盐、香精等辅料均为市售食品级产品。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

5kg猪肉经水洗净后，用绞肉机将其绞碎，以肉浆状为标准。然后将2kg鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、200g大豆分离蛋白、500g食用淀粉、200g阿拉伯胶、30g食用盐、30g香精等辅料搅拌混合均匀，将制备好的馅利用灌肠机灌入肠衣中，扎口，在100℃常压蒸煮30min或120℃高压蒸煮20min，冷却至室温，获得灌肠。对照组灌肠制品中除了用2kg面粉代替鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白外，其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天食用灌肠，7天后，两组对象接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中7人发生皮疹、腹泻等过敏症状，8人具有轻微过敏反应，25人未发生过敏反应。而对照组中26人发生较重过敏症状，10人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于肉制品中具有一定的抗过敏作用。

实施例4

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于奶制品中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白；纯牛奶、白砂糖(无吸潮现象)均为市售。焦磷酸钠：粉末状或小结晶，食品级。黄原胶、柠檬酸、香精：食品级。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

首先在溶解器中加入白砂糖6％、黄原胶0.5％和焦磷酸钠0.5％充分溶解20min，温度为80℃，然后冷却至室温(25℃)备用。将溶解的糖液10％和50％纯奶泵入配料罐(200L)，加入鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白至容量的80％左右，搅拌均匀后加入8％的柠檬酸溶液，再加入香精并添加净化水到容量值。在60℃，20MPa压力下均质，并通过135℃灭菌机进行超高温瞬时杀菌，冷却到室温罐装贮存。对照组样品中鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用净化水代替，其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天饮用牛奶，7天后，两组对象分别接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中有8人发生瘙痒、腹泻等过敏症状，9人具有轻微皮疹等过敏反应，23人未发生过敏反应。而对照组中24人发生较重过敏症状，11人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于乳制品中具有一定的抗过敏作用。

实施例5

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于化妆品中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、维生素E、硬脂酸、甘油三酯、黄原胶、海藻糖、丙二醇、白凡士林、甘油、乙二胺四乙酸二钠、苯甲酸钠。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

称取100g白凡士林、10g维生素E、30g硬脂酸、30g甘油三酯、80g甘油水浴加热溶化并恒温于80℃，构成油相；称取10g乙二胺四乙酸二钠、50g丙二醇、40g海藻糖加热溶解于1L净化水中保持80℃恒温，构成水相；在200rmp转速搅拌下将油相缓慢加入水相中，冷却至50℃时加入100g鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、20g黄原胶、20g苯甲酸钠，搅拌均匀，使其充分乳化。对照组缺少鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白成分之外其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天涂抹乳膏，7天后，两组对象分别接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中有10人发生瘙痒、皮疹等过敏症状，5人具有轻微皮疹等过敏反应，25人未发生过敏反应。而对照组中23人发生较重过敏症状，8人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于化妆品中具有一定的抗过敏作用。

实施例6

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于化妆品中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、硬脂酸、甘油三酯、十八醇、黄原胶、丙二醇、氢氧化钾、苯甲酸钠、香精。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

称取30g硬脂酸、5g甘油三酯、5g十六醇、10g丙二醇于100ml烧杯中水浴加热并恒温于80℃；称取1g氢氧化钾、5g黄原胶置于烧杯中，加水至100ml,水浴加热到80℃，充分溶化，在搅拌过程中将水相缓慢加入油相中，冷却至50℃加入25g鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、5g苯甲酸钠，5g香精，搅拌均匀，使其充分乳化，静置冷却至室温。对照组缺少鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白成分之外其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天涂抹样品，7天后，两组对象分别接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中有11人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状，8人具有轻微皮疹等过敏反应，21人未发生过敏反应。而对照组中23人发生较重过敏症状，6人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于化妆品中具有一定的抗过敏作用。

实施例7

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于洗发水中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、十二烷基硫酸钠、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠、十二烷基甜菜碱、皂角、柠檬酸、香精、黄原胶、NaCl、强力珠光剂。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

将500g皂角研磨成粉末，溶解在1L净化水，置于搅拌器中加热搅拌，充分溶解后过滤。称量50g月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠于烧杯中，加入适量的皂角水，加热搅拌，直至全部溶解。向烧杯中加入30g十二烷基硫酸钠和30g十二烷基甜菜碱，搅拌直至溶液混合均匀。向溶液中加入20g黄原胶，20g强力珠光剂后，升温至80℃，加入100g鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白搅拌直至混合均匀。待温度下降到30～40℃，加入适量的NaCl调节黏度，再加入柠檬酸调节溶pH值至6～7，最后加入适量的香精，出料。对照组缺少鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白成分之外其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天用样品洗头，15天后，两组对象分别接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中有10人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状，6人具有轻微皮疹等过敏反应，24人未发生过敏反应。而对照组中21人发生较重过敏症状，7人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于洗发水中具有一定的抗过敏作用。

实施例8

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白应用于香皂中抗过敏作用研究

1、实验材料

鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白、氢氧化钠、甘油，香精、色素；猪油，冰糖均为市售。

2、实验对象

选择我校有过敏史的80名学生，其中40名为男生，年龄在18～28岁，分为实验组和对照组，各有20名男生，20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。

3、制备方法

将80g氢氧化钠溶解于净化水中，配成30％的溶液。将200g猪油在反应锅中预热熔化，将配制好的氢氧化钠溶液加入反应锅中，保持温度在60℃左右，反应完全后静止0.5h。边搅拌边加入150g甘油和50g鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白，并加入20g冰糖，溶解完全后，加入8g香精、4g色素，搅拌均匀便得到香皂皂基。将皂基注入模具，冷却成型后，卸出，切成厚度一定的块状，在25℃、湿度为50％、通风的干燥室进行干燥。对照组缺少鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白成分之外其他工序一致。

4、实验效果

实验组和对照组每天用样品洗头，15天后，两组对象分别接触过敏原，观察过敏症状。结果表明实验组40人，其中有7人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状，9人具有轻微皮疹等过敏反应，24人未发生过敏反应。而对照组中22人发生较重过敏症状，13人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋ovoinhibitor糖蛋白用于香皂中具有一定的抗过敏作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (1)

1.鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在制备具有预防和/或治疗过敏药品中的应用；

所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白制备方法为：将鹌鹑蛋蛋清在水中透析、离心并弃去沉淀，加入饱和硫酸铵使上清液达到0.40饱和，离心取沉淀物溶于水中；溶液通过Bio-GelP-150柱进行分子筛，以254μm处监测的流出物显示分离为三个峰，经超滤将第二个峰浓缩，用硫酸铵使其达到0.30饱和并收集，得到ovoinhibitor糖蛋白；

所述药品的成分包括氯雷他定、西替利嗪或阿司咪唑；

所述鹌鹑蛋活性成分ovoihibitor糖蛋白在药品中的有效含量为5～20％；

所述鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白与药品成分的质量比为10：1。

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