CN108096443B - 一种清除畜禽体内毒素、提升机体免疫力的药物、其制备方法及应用 - Google Patents
一种清除畜禽体内毒素、提升机体免疫力的药物、其制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种清除畜禽体内毒素、提升机体免疫力的药物及其制备方法,属于畜禽药物技术领域。本发明的中药组合物是由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲,内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10‑20∶2‑5∶4‑10∶3‑8∶2‑8∶1‑4∶2‑6∶1‑4∶2‑5制备而成。本发明的中药组合物能够全面调节免疫系统功能,解除免疫抑制,提高畜禽抗病能力,且无毒副作用,适合畜禽长期使用。
Description
技术领域
本发明属于畜禽药物技术领域,具体涉及一种清除畜禽体内毒素、提升机体免疫力的药物及其制备方法。
背景技术
随着环境的恶化及很多有害物质的滥用,流行性疾病越来越多,对畜禽的危害也越来越大,所以导致其成活率下降或者品质下降。家畜禽对抗生素的长期大量使用,其负作用也越来越多的显现出来,抗生素在杀死有害菌的同时也杀死了有益菌。而且家畜禽长期使用抗生素不仅产生了细菌对药物的抗药性,使畜禽发病后药物治疗无效,同时药物残留及对畜产品品质的影响更是一个严重的问题。传统中医中药由于其毒性低、无后续危害、来源广的优点越来越受到畜禽饲养领域的欢迎,但现有的很多中药产品,要么是中药种类多,造成原料成本高,要么是工艺复杂,不适合大规生产。因此,亟需一种无毒副作用,价格低廉,工艺简单,适合大规模生产和长期使用的畜禽药物。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种清除畜禽体内毒素,解除机体亚健康,提高动物免疫力的药物。
为了达到以上目的,本发明的技术方案如下:
一种中药组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10-20∶2-5∶4-10∶3-8∶2-8∶1-4∶2-6∶1-4∶2-5制备而成。
在上述方案的基础上,所述中药组合物由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比15∶3∶6∶5∶6∶3∶4∶3∶4制备而成。
在上述方案的基础上,所述中药组合物的剂型为粉剂或汤剂。
在上述方案的基础上,所述中药组合物的制备方法,步骤如下:
(1)称取黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻粗粉碎至100目;
(3)对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶粗粉碎至100目;
(4)将(2)和(3)制得的粗粉混合均匀,超微粉碎;
(5)超微粉碎后的物料于200~400Mpa静水压下高压处理20~30min灭菌,并瞬间释放压力;
(6)灭菌后的物料干燥制备成超微粉,向超微粉中加入0.1~1%的L-抗坏血酸,混匀,装袋,封口,即得。
在上述方案的基础上,所述的超微粉碎为胶体磨湿法破壁,步骤为:将各中药组分粗粉和水以重量比1∶1混合搅拌,放入胶体磨破壁;调整胶体磨定子与转子的间隙为2~10微米,绞磨时间30~90min。
在上述方案的基础上,所述的超微粉碎为反复冷冻低温干法破壁,步骤为:
(1)将各中药组分粗粉-10℃低温冷冻15min后,加入低温中药材粉碎机粉碎30~60min;
(2)将上述粉碎后的物料再次-30℃冷冻15min后,放入震动破壁机破壁处理30~60min;
(3)重复步骤(2)中的冷冻、破壁粉碎操作3次;
(4)向(3)中得到的细粉中加入水,水料比1~1.2∶1。
在上述方案的基础上,所述的中药组分超微粉碎后超声处理,步骤为:将超微粉碎后的物料进行超声处理,超声频率为l0~60kHz,处理15~30min。
上述方法制备的中药组合物在清除畜禽体内毒素、提高生产性能、增强机体免疫力的方面的应用。
一种清除母猪体内毒素、提高生产性能的饲料,在饲料中添加权利要求上述方法制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%。
一种增强猪免疫力的饲料,在饲料中添加上述方法制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%。
本发明中药君臣佐使关系如下:
本方以补气升阳、利水消肿、清热解毒为治则,其中黄芪补气升阳、利水消肿、生津养血、行滞通痹、脱毒排脓、敛疮生肌,野菊花清热解毒、消肿散结、利尿通淋,泽泻、茯苓利水渗湿,为君药;蒲公英散风清热,杜仲叶补肝肾,为臣药;石菖蒲化湿开胃,鸡内金健胃消食,百合清心安神为使药,九药共奏补气升阳、利水消肿、清热解毒之治则。
本发明的有益效果:
本发明的中药组合物能够全面调节免疫系统功能,解除免疫抑制,提高畜禽抗病能力;无毒副作用,且价格低廉,工艺简单,适合大规模生产和长期使用。
本发明的中药组合物能够刺激机体识别异源蛋白,经过醒脾、行水、下法、和法等,特异性的清除异源蛋白,使其始终控制在机体发病阈值以下,保证机体的健康。
本发明的中药组合物能够清理肠道毒素,净化血液内毒素,抑制母猪因毒素造成的便秘、泪斑、老皮及繁殖障碍,改善机体亚健康,提高母猪发情配种率,增加健仔数。
提高抗生素疗效,缩短病程,促进机体快速康复,并具有免疫调节作用。
保肝利胆,补气养血,缩短产程,提高奶水质量,降低哺乳仔猪腹泻。
抗应激,抗氧化,消除自由基对机体的损伤,增强肝脏的解毒功能。
本发明的中药进行粗粉后,优选的采用湿法破壁技术进行破壁或反复冷冻低温干法破壁,破壁后的微粉经超高压处理,并瞬间释放压力,不仅可以灭菌,亦可以通过瞬间释放压力提高破壁率,使破壁更充分完全。依照本发明的中药微粉不仅破壁粒高,粒度还特别小。本发明采用破壁技术打破中药原料细胞壁,使细胞内的有效成分充分释放出来,释放出来的有效成分与功能性小肽、益生菌完美结合,达到特异性识别、收集、清除体内病原微生物,而且对组织器官及血液中的内毒素起到过滤、代谢和排除的功能,从而达到内外毒素同时清除的目的,使机体各项生理功能达到最佳状态。
具体实施方式
在本发明中所使用的术语,除非有另外说明,一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
下面结合具体实施例,并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明,而非以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
一种清除家禽体内毒素的药物组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比20∶2∶4∶8∶2∶4∶2∶1∶5组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)的粗粉混合后,使用胶体磨湿法破壁:将各混合的中药组分粗粉和水以重量比1:1混合搅拌,放入胶体磨破壁;调整胶体磨定子与转子的间隙为2~10微米,绞磨时间30~90min。
(5)将(4)中制得的物液混合物使用超声破壁机超声处理,使用超声波细胞粉碎机SL-1200D,由南京顺流仪器有限公司提供,用l0~60kHz的超声波超声处理15~30min。
(6)超微粉碎后的物料于350Mpa静水压下高压处理30min灭菌,并瞬间释放压力;
上述湿法破壁后,超声处理可以有效的提高药物组分的破壁率并使得粒度最小化,
经上述处理后,制备的中药料液的破壁率为99%,其粒度直径在2微米左右,均质达到99%。
(7)灭菌后的物料冷冻干燥制备成超微粉,向超微粉中加入0.1%的L-抗坏血酸,混匀,装袋,封口,即得。
对比例1
一种清除家禽体内毒素的药物组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比20∶2∶4∶8∶2∶4∶2∶1∶5组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)的粗粉混合均匀,测得破壁率在23%左右,其粒度直径在150微米左右,均质达到23%。
(5)向(4)中加入0.1%的L-抗坏血酸(维生素C),混匀,装袋,封口,即得。
实施例2
一种清除家禽体内毒素的中药组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10∶5∶10∶3∶8∶1∶6∶4∶2组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)的粗粉混合后,使用胶体磨湿法破壁:将各混合的中药组分粗粉和水以重量比1:1混合搅拌,放入胶体磨破壁;调整胶体磨定子与转子的间隙为2~10微米,绞磨时间30~90min。胶体磨机型号:JMS180,由廊坊利杰机械厂提供;
(5)超微粉碎后的物料于200Mpa静水压下高压处理20min灭菌,并瞬间释放压力;
经上述处理后,制备的中药料液的破壁率为92%,其粒度直径在1~3微米左右,均质达到92%。
(6)灭菌后的物料在60℃以下低温负压干燥制备成超微粉,向超微粉中加入0.6%的L-抗坏血酸,混匀,装袋,封口,即得。
对比例2
一种清除家禽体内毒素的中药组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲,内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10∶5∶10∶3∶8∶1∶6∶4∶2组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)的粗粉混合均匀,将粗粉和水以重量比1:1混合搅拌,加入超声破壁机超声处理,使用超声波细胞粉碎机SL-1200D,由南京顺流仪器有限公司提供,用l0~60kHz的超声波超声处理15~30min。将所得物料在200Mpa(静水压)下高压处理20分钟灭菌,并瞬间释放压力;
经上述处理后,制备中药料液的破壁率在83%,其粒度直径在3~8微米左右,均质达到83%;
(5)灭菌后的物料在60℃以下低温负压干燥制备成超微粉,向超微粉中加入0.6%的L-抗坏血酸,混匀,装袋,封口,即得。
实施例3
一种清除家禽体内毒素的中药组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比15∶3∶6∶5∶6∶3∶4∶3∶4组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)制得的粗粉使用反复冷冻低温干法破壁;
①将各中药组分粗粉-10℃低温冷冻15min,加入低温中药材粉碎机粉碎30min;
②将上述粉碎后的物料再次-30℃冷冻15min后,放入震动破壁机(使用设备型号:SQW-25型三清微粉震动破碎机)破壁处理30min;
③重复步骤②中的冷冻、破壁粉碎操作3次;
(5)向(4)中得到的细粉中加入水,水料比1~1.2:1,超声(型号:超声波细胞粉碎机SL-1200D,由南京顺流仪器有限公司提供)处理,超声频率为40kHz,处理30min。
(6)将超声处理后得到的细粉混悬液放入超高压设备在400Mpa(静水压)下高压处理20分钟灭菌,并瞬间释放压力。
经上述处理后,制备的中药料液的破壁率为99%,其粒度直径在2微米左右,均质达到99%。
(7)将灭菌后的细粉混悬液放入冻干设备冷冻干燥制备成超微粉,向超微粉中加入1.0%的L-抗坏血酸(维生素C),混匀,装袋,封口,即得。
对比例3
一种清除家禽体内毒素的中药组合物,由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比15∶3∶6∶5∶6∶3∶4∶3∶4组成。
具体制备方法为:
(1)称取重量比的黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)利用万能粉碎机对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻进行粗粉碎,使之达到100目;
(3)利用万能粉碎机对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶进进行粗粉碎,使之达到100目;
(4)将(2)和(3)制得的粗粉使用反复冷冻低温干法破壁;
①将各中药组分粗粉-10℃低温冷冻15min,加入低温中药材粉碎机粉碎30min;
②将上述粉碎后的物料再次-30℃冷冻15min后,放入震动破壁机(使用设备型号:SQW-25型三清微粉震动破碎机)破壁处理30min;
③重复步骤②中的冷冻、破壁粉碎操作3次;
(5)向(4)中得到的细粉中加入水,水料比1.0~1.2:1,放入超高压设备在400Mpa(静水压)下高压处理20分钟灭菌,并瞬间释放压力。
经上述处理后,制备的中药料液的破壁率为95%,其粒度直径在1~3微米左右,均质达到95%。
(6)将灭菌后的细粉混悬液放入冻干设备冷冻干燥制备成超微粉,向超微粉中加入1.0%的L-抗坏血酸(维生素C),混匀,装袋,封口,即得。
使用方法:本发明的药物组合物添加到猪饲料中,按照1000kg饲料1kg药物的量添加。从断奶至出栏任何阶段均可添加,全程使用效果最佳。
一、药效试验
1.1试验分组
1.1.1实施例1的药物;
1.1.2实施例2的药物;
1.1.3实施例3的药物;
1.1.4实施例3不含有黄芪、野菊花、泽泻、茯苓制备的药物;
1.1.5实施例3不含有蒲公英、杜仲叶制备的药物;
1.1.6实施例3不含有石菖蒲、鸡内金、百合制备的药物;
1.1.7对比例1制备的药物;
1.1.8市售黄芪多糖
1.1.9空白对照组
1.2本发明药物对保育猪圆环病毒-2型的防治疗效评价
山东潍坊某中型猪场实验,该猪场未给大小猪免疫圆环病毒疫苗,在断奶前注射猪瘟细胞苗1头份,但是圆环病毒是典型的免疫抑制性病毒,会抑制保育猪对其他疫苗的抗体效价,发病的保育猪主要表现为生长迟缓,精神欠佳,全身被毛粗乱,消瘦,皮肤苍白,气喘,呼吸困难,部分猪出现腹泻,部分猪腹部皮下有陈旧性出血点。解剖后胸腔、腹腔有大量积液,腹股沟淋巴结显著肿大,切面多汁,呈土黄色,无出血点。肺显著肿大,呈斑驳样,存在不同的实变区,肺间质增宽,间叶、膈叶下缘有红色肉变区,肺门淋巴结肿大,肾脏肿大,质地变脆,无出血点,肝脏肿大。脾脏肿大,边缘不齐。无菌采取病死猪肺脏、淋巴结等组织样品,研磨后进行间接酶联免疫吸附检测确诊为猪圆环病毒-2型感染。
随机选取体重相近发病的断奶仔猪90头,随机分为9组,每组10头,其中第1~3组分别在基础日粮中添加实施例1~3制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%,分别记为实施例1~3组;第4~6组分别在基础日粮中添加1.1.4~1.1.6制备的药物,添加量为重量份数0.1%,分别记为对照组1~3;第7组在基础日粮中添加对比例1制备的药物,添加量为重量份数0.1%,记为对比例1组;第8组在基础日粮中添加市售黄芪多糖,添加量为重量份数0.1%,记为黄芪多糖组;第9组不添加任何药物,记为空白对照组,其他实验条件一致,连续一周,逐日记录腹泻和死亡情况。给药结束后,称定平均体重,并采取颈静脉血,分离血清测定干扰素-γ(IFN-γ)和猪瘟抗体的效价。
表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
1)预混料为每千克饲粮提供:Fe 100mg,Zn 100mg,Cu 10mg,Mn 10mg,Se 0.3mg,I0.5mg,VA2000IU,VD3200IU,VE 20IU,VK30.5mg,生物素biotin 0.05mg,叶酸folic acid0.3mg,尼克酸niacin 30mg,泛酸pantothenicacid20mg,VB23mg,VB12mg,VB63mg,VB1215μg,氯化胆碱choline chloride 0.5g。
2)粗蛋白质、钙、总磷为实测值,其余均为计算值。
表2实验前后各组猪平均体重及猪群中猪瘟抗体效价
由表2数据可知,圆环病毒具有直接的免疫抑制作用,会导致病猪的IFN-γ和猪瘟抗体产生受阻,从而引起病猪感染其他病原微生物而使健康状况恶化,最终导致死亡。
本发明实施例1~2组药物、对照1~3组及对比例1组药物可以增加猪的抵抗力,提高生产性能,但是效果不显著;而相同用量下,本发明实施例3的药物组合物则可以显著增加猪的抵抗力,提高生长性能,效果显著,能使免疫指标和体重接近正常水平,明显优于实施例1组、实施例2组药物组合物。本发明药物组方使用,通过药性和药效的互补,具有非常良好的免疫增强作用。
1.3本发明药物对断奶仔猪猪瘟疫抗体及蓝耳病抗体的影响
从规模猪场选择同品种断奶仔猪90只,随机分成9组,每组10只,其中第1~3组分别在基础日粮中添加实施例1~3制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%,分别记为实施例1~3组;第4~6组分别在基础日粮中添加1.1.4~1.1.6制备的药物,添加量为重量份数0.1%,分别记为对照组1~3;第7组在基础日粮中添加对比例1制备的药物,添加量为重量份数0.1%,记为对比例1组;第8组在基础日粮中添加市售黄芪多糖,添加量为重量份数0.1%,记为黄芪多糖组;第9组不添加任何药物,记为空白对照组,其他实验条件一致,各组疫苗免疫相同。基础日粮同表1。
血液采集和检测:分别在试验前和给药后7d、14d、35d和42d分别于前腔静脉逐头采血3~4mL,分离血清,冷冻待检。
抗体评价标准:血清ELISA抗体检测:按照抗体检测试剂盒说明书进行。猪瘟抗体:大于0.4为阳性,小于等于0.3为阴性,0.3至0.4之间为可疑。蓝耳病抗体:大于或等于0.4为阳性,小于0.4为阴性。
组别 | 0d | 7d | 14d | 35d | 42d |
实施例1组 | 0.183±0.024 | 0.454±0.063 | 0.754±0.067 | 1.174±0.060 | 1.204±0.080 |
实施例2组 | 0.187±0.040 | 0.432±0.054 | 0.746±0.065 | 1.074±0.106 | 1.065±0.056 |
实施例3组 | 0.185±0.042 | 0.451±0.051 | 0.775±0.060 | 1.274±0.060 | 1.277±0.078 |
对照组1 | 0.186±0.037 | 0.357±0.056 | 0.584±0.059 | 0.778±0.072 | 0.765±0.059 |
对照组2 | 0.184±0.051 | 0.384±0.061 | 0.592±0.063 | 0.815±0.097 | 0.834±0.075 |
对照组3 | 0.185±0.048 | 0.398±0.057 | 0.627±0.066 | 0.904±0.083 | 0.914±0.068 |
对比例1组 | 0.187±0.033 | 0.390±0.062 | 0.634±0.062 | 0.911±0.079 | 0.909±0.093 |
黄芪多糖组 | 0.186±0.041 | 0.380±0.059 | 0.590±0.055 | 0.808±0.095 | 0.826±0.086 |
空白对照组 | 0.188±0.038 | 0.342±0.067 | 0.563±0.052 | 0.704±0.076 | 0.774±0.082 |
试验结果显示,试验刚开始时各组猪瘟疫抗体水平相当,相差不大;试验第7天,使用本发明中药组合物的组猪瘟疫抗体大于0.4,显示为阳性,其他各组均未到达阳性水平;试验第14天,各组猪瘟疫抗体水平均达到阳性水平;试验35~42天,猪瘟疫抗体水平相对稳定,实施例1~3组的猪瘟疫抗体水平显著高于其他各组。
组别 | 0d | 7d | 14d | 35d | 42d |
实施例1组 | 0.25±0.14 | 0.45±0.23 | 0.76±0.27 | 1.13±0.24 | 1.27±0.32 |
实施例2组 | 0.23±0.16 | 0.44±0.24 | 0.74±0.25 | 1.07±0.26 | 1.06±0.36 |
实施例3组 | 0.24±0.18 | 0.46±0.21 | 0.77±0.20 | 1.27±0.23 | 1.31±0.28 |
对照组1 | 0.23±0.15 | 0.35±0.22 | 0.66±0.24 | 0.85±0.25 | 0.87±0.27 |
对照组2 | 0.25±0.17 | 0.37±0.23 | 0.68±0.26 | 0.89±0.23 | 0.90±0.26 |
对照组3 | 0.24±0.16 | 0.38±0.24 | 0.70±0.23 | 0.92±0.26 | 0.91±0.24 |
对比例1组 | 0.26±0.12 | 0.37±0.25 | 0.69±0.26 | 0.90±0.24 | 0.93±0.25 |
黄芪多糖组 | 0.25±0.15 | 0.36±0.24 | 0.67±0.25 | 0.89±0.25 | 0.89±0.25 |
空白对照组 | 0.23±0.20 | 0.33±0.17 | 0.64±0.22 | 0.70±0.26 | 0.77±0.32 |
试验结果显示,试验刚开始时各组蓝耳病抗体水平相当,相差不大;试验第7天,使用本发明中药组合物的组蓝耳病抗体大于0.4,显示为阳性,其他各组均未到达阳性水平;试验第14天,各组蓝耳病抗体水平均达到阳性水平;试验35~42天,猪瘟疫抗体水平相对稳定,实施例1~3组的猪瘟疫抗体水平显著高于其他各组。
1.4本发明药物对妊娠母猪及哺乳仔猪的影响
选取怀孕日龄相近的二胎母猪(怀孕60天左右的母猪),改变生长环境和营养平衡,制造模型,选出精神不振,采食量减少,有的出现便秘、体温升高或眼角出现泪斑的母猪20头,随机平均分为两组,第1组为使用本发明实施例3药物组,第2组为使用西药组,主要使用磺胺二甲嘧啶片,加用多维。用法用量:以磺胺二甲嘧啶计,内服:一次量,每1kg体重,家畜首次量140~200mg,维持70~100mg。一日1~2次,连用3~5天。
磺胺二甲嘧啶片,生产厂家:四川恒通动物制药有限公司。
本试验从怀孕后60天至断奶,共进行了75天。在造模3日后,第1组开始使用本发明药物组,使用一周停10天,再使用一周停10天,在预产前一周至后一周一直使用,停一周后,使用至断奶,使用方式是将药物拌料到基础日粮中,添加量为重量份数0.1%。第2组为对照组,一直添加多维,在发烧和便秘的母猪使用磺胺二甲嘧啶片。两个组别均按正常程序接种疫苗。测试各组母猪产前生理指标、产后采食量以及哺乳仔猪的生长性能,如表6~8所示。
表5基础日粮组成及营养水平
项目 | 妊娠期 | 项目 | 妊娠期 |
原料 | 含量% | 营养水平<sup>2)</sup> | 含量% |
玉米 | 58.80 | 消化能/(MJ/kg) | 12.50 |
豆粕 | 15 | 粗蛋白质 | 15.00 |
麦麸 | 20.00 | 钙 | 0.90 |
鱼粉 | 2.00 | 有效磷 | 0.43 |
食盐 | 0.40 | 总赖氨酸 | 0.74 |
氯化胆碱(50%) | 0.10 | 总含硫氨基酸 | 0.43 |
碳酸钙 | 1.20 | 总苏氨酸 | 0.48 |
碳酸氢钙 | 1.26 | 总色氨酸 | 0.15 |
L-赖氨酸(98%) | 0.03 | ||
L-苏氨酸(98%) | 0.01 | ||
预混料<sup>1)</sup> | 1.00 | ||
酵母细胞壁 | 0.20 | ||
合计 | 100.00 |
1)预混料为每千克饲粮提供:VA 12000IU,VD 3000IU,VE90IU,VK4.0mg,VB13mg,VB210mg,VB64mg,VB1240μg,烟酸50mg,泛酸30mg,叶酸4mg,生物素0.45mg,氯化胆碱750mg,Cu(as copper sulfate)30mg,Fe(as ferrous sulfate)100mg,I(as potassium iodate)0.25mg,Zn(as zinc oxide)100mg,Mn(as manganese sulfate)40mg,Se(as sodiumselenite)0.25mg。
2)营养水平为计算值。
表6本发明药物对产前母猪生理指标的影响
由表6可以看出:本发明的药物可以维持母猪产前体温稳定,增加产前采食量,减少泪斑出现率,减少母猪的便秘率。使用一周后,除1头猪外,其他出现便秘的猪排便恢复正常,未再出现便秘现象。
表7母猪产后日采食量(kg)
由表7的试验结果数据可以看出,在产后第3天本发明实施例3药物组高于西药治疗组的采食量,但两者相差不大;产后第四天本发明实施例3药物组采食量达到2.95±0.78kg,显著高于西药组;本发明实施例3药物组在第7d~9d采食量趋于稳定,恢复到正常水平;而西药组在第8d才接近实施例3组的采食量,并于第9d恢复到正常水平,可见,本发明药物能够显著增加母猪产后的采食量的恢复。
表8本发明药物对哺乳仔猪生长的影响
由表8的结果可以看出:本发明的中药组合物不仅能够清除母猪血清内毒素水平,使奶水中毒素含量减少,从而提高哺乳仔猪的成活率,减少仔猪的腹泻率;本发明的中药组合物还能增加仔猪的出生体重,保证出生后的仔猪健康快速的生长。
综上,由于在妊娠中后期开始使用本中药,对产仔数没影响,但对仔猪成活率,腹泻发生率有较好控制效果。本发明药物能较好地清理肠道毒素,净化血液内毒素,抑制母猪因毒素造成的便秘、泪斑、老皮及繁殖障碍,改善母猪机体亚健康问题,并迅速增强母猪免疫力,控制亚临床感染,母体健康水平的提高,有效净化母猪血液和奶水中的毒素,有效降低仔猪下痢,使得乳仔猪成活率大大提升,腹泻率大幅减少,仔猪健康快速生长得以保证
二、本发明药物的毒性试验
2.1急性毒性试验方法
取健康昆明种小白鼠80只,雌雄各半,随机分为4组,分别为空白对照组、实施例1药物组、实施例2药物组、实施例3药物给药组。选用拟临床试验的给药途径─灌胃,实验前禁食、不禁水12h,灌胃给药,按药液(以0.8%羧甲基纤维素钠混悬液配制)最大浓度0.2g/mL和最大体积0.5m L/20g,24h内连续灌胃3次,每次间隔4h。单次最大剂量5g生药/kg。给药后常规饲养14d,观察动物出现反应的一般情况、中毒表现和死亡过程。
2.2长期毒性试验方法
健康SPF级Wistar大鼠160只,雌雄各半,随机分为4组,分别为空白对照组、实施例1药物低剂量(2.08g生药/kg)组、实施例1药物中剂量(4.17g生药/kg)组和实施例1药物高剂量(8.33g生药/kg)组,对照组给予等体积0.8%羧甲基纤维素钠混悬液。按上述剂量每日喂饲前定时灌胃1次,给药体积20mL/kg;每周按所测体重调整给药量(周二不给药),连续给药180d。实验期间动物自由饮水、觅食
2.3长期毒性试验观察和测定指标
2.3.1观察指标
行为、外观、毛色、尿色、粪便、活动情况、饮水和每日摄食量、分泌物及监测每周体重及中毒情况和中毒反应等。
2.3.2计算脏器系数
取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、大脑、胃、大肠、小肠、气管、食管、生殖器官(雌性:子宫、卵巢,雄性:睾丸、附睾)肉眼观察、以滤纸吸去血液并称湿重,计算脏器系数(脏器系数=脏器重量/体重×100)
2.3.3测定指标
给药第90,180d及停药30d,每组各处死10只动物,腹主动脉采血测定。血液学指标包括:血红蛋白(Hgb)、红细胞(RBC)数、白细胞(WBC)数、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、淋巴细胞(LYM)数、单核细胞(MON)数、中性粒细胞(NEUT)数、嗜酸性粒细胞(EOS)数、嗜碱性粒细胞(BAS)数及血小板(PLT)数;血液生化指标包括:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(T-BIL)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、肌酐、白蛋白(ALB)、血糖、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇、钾、钠、氯、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK);凝血指标包括:凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)。
2.3.4病理组织检查
随机抽取正常对照组和高剂量组3~4只大鼠(雌雄各半)心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、大脑、胃、小肠、气管、食管、生殖器官(雌性:子宫、卵巢,雄性:睾丸、附睾)。所有脏器以10%甲醛固定、石蜡包埋、HE染色。光学显微镜检查病变。如高剂量组出现组织病理学变化,低剂量组也应进行组织病理学检查以确定剂量-毒性关系。若在尸检时发现器官和组织有肉眼可见的病理变化时,应对此脏器或组织进行详细的病理组织学检查。系统观察给药期间中毒反应及可能产生的延迟毒性反应。
2.3.5统计学分析
2.4试验结果
2.4.1急性毒性试验结果
经预实验,由于受药物浓度及给药体积的限制,无法测出半数致死量(LD50),只能测定其一日内最大给药量。
2.4.2长期毒性试验结果
各组大鼠的一般外观形态、行为、活动、饮水、摄食情况未见异常,口、眼、鼻、耳未见异常分泌物,各给药组动物也未见有系统毒性症状出现,给药期间未出现动物死亡。体重、血液学指标、脏器系数、血液生化指标与对照组比较差异无统计学意义。各脏器均未见其他明显的变性、坏死和肿瘤的发生等病理改变。
灌胃本发明药物对小鼠无明显急性毒性。大鼠连续灌胃给药180d,各剂量对大鼠血液指标有轻度影响,停药后消失;无其他明显的慢性毒性反应和延缓毒性反应,临床用药安全。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.一种中药组合物,其特征在于:由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10-20∶2-5∶4-10∶3-8∶2-8∶1-4∶2-6∶1-4∶2-5制备而成;
所述中药组合物的制备方法,步骤如下:
(1)称取黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻,清洗、切片,干燥;
(2)对干燥后的黄芪、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻粗粉碎至100目;
(3)对干燥后的蒲公英、野菊花、杜仲叶粗粉碎至100目;
(4)将(2)和(3)制得的粗粉混合均匀,超微粉碎;
(5)超微粉碎后的物料于200~400Mpa静水压下高压处理20~30min灭菌,并瞬间释放压力;
(6)灭菌后的物料干燥制备成超微粉,向超微粉中加入0.1~1%的L-抗坏血酸,混匀,装袋,封口,即得;
所述的中药组分超微粉碎后超声处理,步骤为:将超微粉碎后的物料进行超声处理,超声频率为l0~60kHz,处理15~30min。
2.根据权利要求1所述中药组合物,其特征在于:由黄芪、蒲公英、野菊花、杜仲叶、石菖蒲、内金、百合、茯苓、泽泻按重量比10∶5∶10∶3∶8∶1∶6∶4∶2制备而成。
3.根据权利要求1所述中药组合物的制备方法,其特征在于:所述的超微粉碎为胶体磨湿法破壁,步骤为:将各中药组分粗粉和水以重量比1∶1混合搅拌,放入胶体磨破壁;调整胶体磨定子与转子的间隙为2~10微米,绞磨时间30~90min。
4.根据权利要求1所述中药组合物的制备方法,其特征在于:所述的超微粉碎为反复冷冻低温干法破壁,步骤为:
(1)将各中药组分粗粉-10℃低温冷冻15min后,加入低温中药材粉碎机粉碎30~60min;
(2)将上述粉碎后的物料再次-30℃冷冻15min后,放入震动破壁机破壁处理30~60min;
(3)重复步骤(2)中的冷冻、破壁粉碎操作3次;
(4)向(3)中得到的细粉中加入水,水料比1~1.2∶1。
5.一种清除母猪体内毒素、提高生产性能的饲料,其特征在于:在饲料中添加权利要求1制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%。
6.一种增强猪免疫力的饲料,其特征在于:在饲料中添加权利要求1制备的中药组合物,添加量为重量份数0.1%。
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