CN108014135B - 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用 - Google Patents

鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108014135B
CN108014135B CN201810055411.9A CN201810055411A CN108014135B CN 108014135 B CN108014135 B CN 108014135B CN 201810055411 A CN201810055411 A CN 201810055411A CN 108014135 B CN108014135 B CN 108014135B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ovomucoid
quail
quail egg
egg
antiallergic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201810055411.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108014135A (zh
Inventor
车会莲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Agricultural University
Original Assignee
China Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Agricultural University filed Critical China Agricultural University
Priority to CN201810055411.9A priority Critical patent/CN108014135B/zh
Publication of CN108014135A publication Critical patent/CN108014135A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108014135B publication Critical patent/CN108014135B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56Materials from animals other than mammals
    • A61K35/57Birds; Materials from birds, e.g. eggs, feathers, egg white, egg yolk or endothelium corneum gigeriae galli
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L15/00Egg products; Preparation or treatment thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17Amino acids, peptides or proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/981Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
    • A61K8/982Reproductive organs; Embryos, Eggs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/75Anti-irritant

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用。通过小鼠PCA模型的被动皮肤过敏反应研究发现,鹌鹑蛋及其活性成分卵类粘蛋白具有抗过敏效果。使用HMC‑1细胞系研究鹌鹑蛋中活性成分卵类粘蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响,表明鹌鹑蛋活性成分卵类粘蛋白与化学抗过敏药物联用具有协同抗过敏效果。将鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白用于具有抗过敏作用的食品、化妆品、日用品及药品中,更为安全、副作用更低、且不易复发。

Description

鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用
技术领域
本发明涉及一种抗过敏物质,特别是涉及一种鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用。
背景技术
食物过敏是人体对无毒害物质所产生的异常反应,是由免疫系统针对一些过敏源所引起的反应。目前食物过敏发病率在世界范围内逐渐上升,对世界卫生保健体系产生着深远的影响。食物过敏源包括分子量在5-100kDa的蛋白质或糖蛋白及有交联IgE能力的受体。尽管许多潜在的过敏源在胃的酸性环境中经酶消化会变性,但有一些过敏源不受这些条件的影响。动物及人经口服用某些食物后,可以在血清中检测到完整的食物过敏源。
研究已报道了多种类型的食物过敏源。粮农组织(FAO)已提到八大类易过敏食物:牛奶、鸡蛋、鱼、甲壳贝类、坚果、花生、小麦和大豆。由这些易致敏食物导致的过敏反应约占世界上所有食物过敏的90%。花生是最常见的食物过敏源之一,且能诱导严重的速发型超敏反应,是很多致命性过敏反应发生的原因。通常,人们认为食物过敏是一种食物不良反应。大多数研究报道的食物过敏基本都是IgE介导的超敏反应,属于I型超敏反应。但是最近有研究报道,在遗传性过敏人群体内,食物过敏也能引起迟发型超敏反应,属于IV型超敏反应。相反,属于II或III型超敏反应的食物过敏鲜有报道。
利用不同的合成剂或药物可以治疗一些患者的过敏反应。据研究报道,全球约有22%的人患有过敏性疾病,中国则约有2亿多人患有过敏性疾病,并且发病率呈逐年上升趋势。到目前为止,没有任何治疗方法可以完全治愈过敏性疾病,即使药物治疗也很难保证不再复发。并且化学药物一般都有强烈的副作用,会对人体产生不利影响。因此,为了抑制过敏性疾病发病率的增加,开发新的有助于预防过敏性疾病的功能成分来替代药物已经引起了许多科学家的关注。许多研究发现一些具有抗氧化、抗炎等生物活性的成分对过敏疾病的治疗也发挥着作用,如黄酮类、多酚类物质。过敏反应与炎症反应有着紧密的关系,食物抗原引发的过敏反应会释放炎性介质(如组胺、类胰蛋白酶等)和促炎细胞因子,导致机体发生炎症反应。一些发挥抗炎功能的成分通过抑制肥大细胞颗粒从而抑制炎性介质的分泌。
到目前为止,对于抗过敏成分的研究越来越多,研究发现许多天然化合物都具有抗过敏作用,除多酚类、黄酮类、多糖类之外,在实验中发现益生菌也可以发挥抗过敏的作用。另外,研究发现,一些食物也中具有抗过敏活性成分,如n-6和n-3系多价不饱和脂肪酸、多酚类化合物(例如茶多酚、类黄酮)等。多价不饱和脂肪酸通过抑制4-系列淋巴毒素(4-LT)的合成抑制I型过敏反应的发生。多酚类化合物的抗过敏作用也是同样的机理,抑制炎症细胞分泌化学介质,如组胺等。而且,目前研究已显示天然活性成分也具有抗过敏作用,可以抑制免疫球蛋白IgE的产生,保护和稳定炎症细胞及靶细胞膜等。
鹌鹑蛋含有许多营养成分,被称为“卵中佳品”,富含多种维生素和矿物质,磷脂含量高,大部分鹌鹑蛋是蛋白质,脂肪,维生素E和矿物质(氮,铁和锌)的良好来源。鹌鹑蛋中的蛋白质主要有卵类粘蛋白、溶菌酶、卵抑制剂等。卵类粘蛋白是蛋清中的一种糖蛋白,热稳定性好,包含20%~25%的糖基部分,主要是由葡糖胺、甘露糖、半乳糖组成;溶菌酶在蛋清中含量丰富,具有较强的抗热性和抗菌能力,能水解致病菌中黏多糖;卵抑制剂的碳水化合物含量约为10%,远低于卵类粘蛋白,卵抑制剂中存在三个糖基化位点,是丝氨酸蛋白酶如胰蛋白酶的特异性抑制剂。鹌鹑蛋是良好的营养物质来源。之前一直有研究提及,在一些药学理论不完善的国家,将来自日本鹌鹑的鹌鹑蛋作为一种营养疗法已有数百年的历史。
发明内容
针对目前化学抗过敏药物存在副作用,且在停止给药后容易出现病情复发的情况,本发明发现鹌鹑蛋及鹌鹑蛋中的卵类粘蛋白具有抗过敏作用,进而获得一种来源于食品的、副作用更低、更为安全且不易复发的抗过敏成分。
本发明的第一个目的是提供鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏食品中的应用。
其中,所述食品包括油制品、奶制品、肉制品、海产品或坚果制品。
优选的,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在食品中的质量含量为10~50%。
本发明的第二个目的是提供鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏化妆品中的应用。
其中,所述化妆品包括化妆水、化妆乳液、面霜、口红、BB霜或面膜。
优选的,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在化妆品中的质量含量为5~15%。
本发明的第三个目的是提供鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏日用品中的应用。
其中,所述日用品包括洗发水、沐浴露或香皂。
优选的,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在日用品中的质量含量为1~10%。
本发明的第四个目的是提供鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在制备具有预防和/或治疗过敏药品中的应用。
其中,所述药品的成分优选包括氯雷他定、西利替嗪或阿司咪唑。
优选的,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在药品中的有效含量为5~20%。
本发明通过小鼠PCA模型的被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋及其活性成分卵类粘蛋白的抗过敏作用。结果显示,相对于阳性对照组,鹌鹑蛋处理组耳部颜色变浅,其中活性成分卵类粘蛋白组颜色明显变浅,证明鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应,其中的卵类粘蛋白应该是抑制过敏的主要成分。鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白能够用于抗过敏食品、化妆品、日用品及药品中。
本发明在获得了鹌鹑蛋及其活性成分卵类粘蛋白具有抑制过敏的基础上,将HMC-1细胞系用于研究鹌鹑蛋中活性成分卵类粘蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响。通过体外肥大细胞脱颗粒水平来研究,鹌鹑蛋卵类粘蛋白单独或和联合其他抗过敏药物使用的抗过敏效果。结果表明,鹌鹑蛋卵类粘蛋白的抗过敏效果要弱于化学抗过敏药物,鹌鹑蛋卵类粘蛋白与化学抗过敏药物联用具有协同抗过敏效果,不同的化学抗过敏药物协同作用强弱不同。
附图说明
图1被动皮肤过敏反应中鹌鹑蛋、卵类粘蛋白处理后小鼠耳部颜色情况;
图2被动皮肤过敏反应中鹌鹑蛋、卵类粘蛋白处理后小鼠耳部皮肤浸出液吸光值。
具体实施方式
本发明中所述鹌鹑蛋为本领域中所熟知的鹌鹑蛋,或称为鹑鸟蛋、鹌鹑卵,为鹌鹑(学名:Coturnix)所产。鹌鹑蛋呈白色或橄榄褐色,散布有褐色或锈色斑点,大小为25.6~33×19~25毫米,重5.6~7克。本发明对鹌鹑蛋的来源没有特殊限定,采用市售鹌鹑蛋即可。
本发明中所述卵类粘蛋白特指鹌鹑蛋中的卵类粘蛋白。本发明对卵类粘蛋白的来源没有特殊限定,采用市售卵类粘蛋白或本领域中的常规制备方法制备得到。在本发明具体实施例中采用自行制备得到卵类粘蛋白,优选用三氯乙酸-丙酮除去蛋清中的杂蛋白,再用凝胶色谱分离得到具有抗胰蛋白酶活性的成分,对回收的组分酸水解,通过凝胶过滤回收,得到卵类粘蛋白。本领域技术人员可以根据本领域的常规技术对卵类粘蛋白进行制备及分离纯化。
本发明通过以下研究证明鹌鹑蛋及其活性成分卵类粘蛋白的抗过敏作用。
1.被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋的抗过敏作用
研究被动皮肤过敏反应(PCA)是一种皮肤对抗原抗体IgE结合后产生应答的快速过敏反应,其特征在于皮肤内血管渗透性的增加。为了观察及量化分析PCA是否增强皮肤内血管的渗透性,利用能与血浆白蛋白结合的伊文思蓝染液进行实验。抗原抗体结合后刺激组胺释放,增强皮肤内血管渗透性,允许白蛋白结合渗漏的染料,并在皮内注射部位产生斑点。本发明使用小鼠PCA模型研究鹌鹑蛋及其活性成分卵类粘蛋白的抗过敏作用。结果显示,鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应,其中的卵类粘蛋白可能是抑制过敏的主要成分。
2.鹌鹑蛋中卵类粘蛋白和其他抗过敏药物联合抗过敏作用研究
肥大细胞在过敏性疾病如特应性鼻炎、哮喘和特应性皮炎中起关键作用。当肥大细胞被激活时,大量储存于颗粒中的炎症介质如组胺、蛋白酶和细胞因子被释放出来。在临床情况下,由于肥大细胞脱颗粒引起的超敏反应表现为荨麻疹、皮疹等,在极端情况下可能会成为危及生命的过敏性休克。HMC-1人白血病肥大细胞是过敏疾病研究中最常用的细胞模型,在过敏性疾病发病机理及药物抗过敏成分的研究中有着广泛的应用。
在过敏反应中,有多种化学介质参与其中,最主要的有组胺和白三烯等,导致肥大细胞脱颗粒的化学物质中最主要的是组胺。目前较为常用的抗组胺药即H1受体拮抗剂,H1受体拮抗剂的发展经历了第一代、第二代,第一代例如氯苯那敏、苯海拉明等,它们容易透过血脑屏障与相关受体发生亲和反应,致中枢镇静作用的发生率较高;第二代与第一代抗组胺药相比,第二代具有镇静作用小,几乎无抗胆碱作用的优点,而且作用时间长,减少了服药次数,用药剂量相对要少,提高了患者的顺应性,得到了广大医生和患者的欢迎,故在临床上得到了广泛使用,常用的包括氯雷他定、西利替嗪或阿司咪唑等。
在获得了鹌鹑蛋活性成分卵类粘蛋白具有抑制过敏的基础上,将HMC-1细胞系用于研究鹌鹑蛋中活性成分卵类粘蛋白以及联合化学抗过敏药物对肥大细胞脱颗粒的影响。通过体外肥大细胞脱颗粒水平来研究,以IgE或非IgE介导的途径刺激HMC-1细胞,以β-氨基己糖苷酶作为脱颗粒检测指标。C48/80用作阳性对照,观察鹌鹑蛋卵类粘蛋白和其他抗过敏药物单独或联合使用的抗过敏效果。结果表明鹌鹑蛋卵类粘蛋白与化学抗过敏药物具有协同抑制HMC-1细胞脱颗粒的作用。
由于鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白具有抗过敏作用,将鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于抗过敏食品、化妆品、日用品及药品中,使其具有一定程度的抗过敏效果。本发明中所述食品包括但不限于油制品、奶制品、肉制品、海产品及坚果制品中。本发明中,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在食品中的质量含量优选为10~50%,更优选为30~45%。本发明所述化妆品包括但不限于化妆水、化妆乳液、面霜、口红、BB霜及面膜。所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在化妆品中的质量含量优选为5~15%,更优选为10~13%。本发明所述日用品包括但不限于洗发水、沐浴露、香皂。所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在日用品中的质量含量优选为1~10%,更优选为5~8%。本发明所述药品包括但不限于氯雷他定、西利替嗪及阿司咪唑等过敏药品。本发明中,所述鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白在药品中的有效含量优选为5~20%,更优选为10~15%。鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白添加入食品、化妆品、日用品及药品中,使食品、化妆品、日用品及药品具有一定的抗过敏效果。
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白,下面结合实施例对本发明进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
被动皮肤过敏反应研究鹌鹑蛋的抗过敏作用
1、实验动物
实验所用的SPF级Balb/c小鼠购买自北京维通利华实验动物技术有限公司,饲养于中国农业大学食品科学与营养工程学院SPF级动物实验室。饲养环境温度维持在22±1℃,湿度稳定在55±5%,每12小时昼夜气流交替一次,空气交换为15次/h。试验期间,动物可自行饮水摄食。小鼠日常饲料为商业化的SPF级大小鼠维持饲料,购自北京科澳协力饲料有限公司(Beijing,China),饲料主要营养成分(水分、灰分、粗蛋白、脂肪、粗纤维、钙磷)满足Chinese Standard GB14924.3-2010要求,并且未检测出黄曲霉毒素(≤20μg/kg)。本研究中的动物实验已通过中国农业大学动物伦理委员会审查。
2、试验材料:鹌鹑蛋和卵类粘蛋白
使用搅拌机分别将鹌鹑蛋或卵类粘蛋白混合均匀,置于平板中。使用冻干机,-400C,两天之内冻干,-20℃冰箱保存。
卵类粘蛋白为实验室自行提取,具体方法如下:
通过缓慢加入一个体积的三氯乙酸/丙酮溶液(1体积的0.5M三氯乙酸+2体积丙酮),使鹌鹑蛋蛋清(250cm3)达到pH 3.5,同时在含有蛋清的结晶器中慢慢旋转玻璃棒。将得到的液体在4℃下置于沉降安瓿中48小时。上清液必须澄清,沉淀或过滤必须重复,直到达到结果。为此,可以将上清液或絮状物在80℃下加热5分钟,随后再过滤。当向滤液中加入2至3体积的丙酮时,具有抗胰蛋白酶活性的部分沉淀;这种沉淀多重复几次,过滤出沉淀物。将沉淀物溶解于蒸馏水中,在含有磷酸盐缓冲液的蒸馏水中透析除去过量的三氯乙酸,然后经过截留分子量约10000的膜过滤,利用得到的溶液在G-50葡聚糖凝胶上进行色谱分离并回收具有抗胰蛋白酶活性的成分,在胃蛋白酶的存在下使用稀盐酸在约37℃对回收的组分酸水解,通过凝胶过滤回收。
3、实验方法
将小鼠按体重随机分为3组,分别为生理盐水组(C)、鹌鹑蛋处理组(Q)(17mg/kg)、卵类粘蛋白处理组(P)(17mg/kg)。第0天到第10天分别给予上述三组,每天一次。第11天,对小鼠右耳部注射抗DNP-IgE致敏,24h后激发,激发前一小时进行灌胃处理,分别给予生理盐水,鹌鹑蛋粉和卵类粘蛋白处理组,然后尾静脉注射抗原DNP-HSA与伊文思蓝染液的混合物,激发被动过敏反应,观察小鼠耳部颜色变化。
4、试验结果
抗原刺激后,观察小鼠耳部颜色变化。采血后处死小鼠,将耳朵剪下,剪碎后溶于甲酰胺溶液中,70℃、4小时后,进行比色分析,得到620nm处的吸光值,吸光值代表了溶液中耳部皮肤浸出的染料多少,即吸光值越大,被动皮肤过敏反应越强烈,数据处理采用GraphPad Prism统计分析软件的单因素方差分析(One-wayANOVA)多重比较,P<0.05表示有显著性差异,P<0.01表示有非常显著性差异。
图1也可以看到在生理盐水处理组中,耳部的蓝色最深,而在鹌鹑蛋处理组和卵类粘蛋白处理组中,耳部颜色都有肉眼可区分的差异,卵类粘蛋白处理组比鹌鹑蛋处理组耳部颜色浅。图2结果表明,相比于生理盐水组,鹌鹑蛋处理组(Q)表现出较浅的颜色,吸光度较低,有显著性差异(P<0.05),卵类粘蛋白组(P)耳部颜色比对生理盐水组耳部颜色更浅,吸光度更低,有非常显著性差异(P<0.01)。
鹌鹑蛋通常是作为营养成分在人体内发挥作用,很少作为药物使用。因此,本发明提前对小鼠进行灌胃处理,模拟食物摄入,对小鼠给予特定量的鹌鹑蛋营养成分,特异性处理一段时间,使得机体免疫能力增强。在给予抗原和染料静脉注射之后,肉眼观察各组小鼠耳部颜色,可以明显看到相对于阳性对照组,鹌鹑蛋处理组耳部颜色变浅,其中活性成分卵类粘蛋白组颜色明显变浅,证明鹌鹑蛋处理可以抑制小鼠的PCA反应,其中的卵类粘蛋白应该是抑制过敏的主要成分。
实施例2
鹌鹑蛋中卵类粘蛋白和其他抗过敏药物联合抗过敏作用研究
1、实验材料
细胞株:HMC-1细胞在含10%胎牛血清和1%三抗的GI1640培养基中于37℃,5%CO2(体积分数)的培养箱中培养,悬浮的HMC-1细胞生长迅速,细胞大概占全部培养液50%时传代或见培养液颜色由红转黄时传代。传代时将细胞及培养液转移至离心管中1500g常温下离心5min,弃去培养液,再加入新鲜GI1640完全培养液,吸管小心吹打使细胞重悬分瓶传代。传代比例为1:4,传代时25cm2培养瓶5mL完全培养基,1天传一次。
2、供试品组:
分成三个组:鹌鹑蛋卵类粘蛋白组(P),化学抗过敏药物组(氯雷他定(L),西替利嗪(C),阿司咪唑(A)),鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+化学抗过敏药物组(P+L/P+C/P+A)。使用搅拌机将各组分混合均匀后,放在平板里。使用冻干机,温度-40℃,在两天之内冻干,-20℃冰箱保存。
3、实验方法:
5×105/mL细胞系以200μL/孔接种到96孔细胞培养板上。每孔加入表1中不同浓度的供试品组处理30min。30min后,每孔加上C48/80(100μg/mL)刺激细胞,在37℃反应2个小时,将96孔板放在冰上冷却15min以终止反应。转移30μL上清液至另一个96孔板,加入50μL溶解了1.3mg/mL4-硝基苯基N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷(PNAG)的柠檬酸溶液,37℃反应1h。加200μL碳酸钠缓冲液终止反应,测定405nm波长处吸光值。细胞脱颗粒以TritonX-100阳性组为百分比,对其他组进行换算,结果以β-氨基己糖苷酶释放率表示,β-氨基己糖苷酶释放率=[(样品组吸光度-阴性对照组吸光度)/(阳性对照组吸光度-阴性对照组吸光度)]×100%。
表1各组分含量表(单位μg/mL)
Figure BDA0001553613080000081
Figure BDA0001553613080000091
4、结果判定
肥大细胞脱颗粒是过敏反应发生的关键,颗粒中的一些炎性介质可以作用于体内的其他组织,导致过敏症状。β-氨基己糖苷酶的释放水平是肥大细胞脱颗粒程度的关键指标。因此,为了检查鹌鹑蛋的潜在抗过敏活性,本发明使用HMC-1细胞系建立肥大细胞脱颗粒体外模型,利用C48/80化学物诱导HMC-1细胞脱颗粒,作为非IgE介导的细胞脱颗粒,结果如表2所示。
表2各组分β-氨基己糖苷酶释放率
释放率(%) 浓度1 浓度2 浓度3 浓度4 浓度5
P 100 83.3 74.2 56.7 40.4
L 100 66.9 55.1 42.5 28.7
P+L 100 52.2 41.9 24.8 12.5
C 100 64.1 48.9 36.0 32.4
P+C 100 44.8 27.5 8.9 5.6
A 100 70.5 52.0 37.2 25.5
P+A 100 62.9 37.5 28.1 14.4
通过表2可以看出,各组中β-氨基己糖苷酶的释放水平随着浓度增加而减弱,由此可知:
1)鹌鹑蛋卵类粘蛋白组、化学抗过敏药物组以及鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+化学抗过敏药物组都具有抑制HMC-1细胞脱颗粒的作用,并具有浓度依赖性的关系;
2)化学抗过敏药物组对HMC-1细胞脱颗粒的抑制作用普遍强于鹌鹑蛋卵类粘蛋白组;
3)鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+化学抗过敏药物组对HMC-1细胞脱颗粒的抑制作用明显强于鹌鹑蛋卵类粘蛋白组、化学抗过敏药物组,二者组合具有协同抑制HMC-1细胞脱颗粒的作用;
4)鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+西利替嗪组对HMC-1细胞脱颗粒的抑制作用明显强于鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+氯雷他定、鹌鹑蛋卵类粘蛋白组+阿司咪唑组。
实施例3
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于肉制品中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白;肠衣;大豆分离蛋白、面粉、食用淀粉、阿拉伯胶、食用盐、香精等辅料均为市售食品级产品。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
5kg猪肉经水洗净后,用绞肉机将其绞碎,以肉浆状为标准。然后将2kg鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、200g大豆分离蛋白、500g食用淀粉、200g阿拉伯胶、30g食用盐、30g香精等辅料搅拌混合均匀,将制备好的馅利用灌肠机灌入肠衣中,扎口,在100℃常压蒸煮30min或120℃高压蒸煮20min,冷却至室温,获得灌肠。对照组灌肠制品中除了用2kg面粉代替鹌鹑蛋或卵类粘蛋白外,其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天食用灌肠,7天后,两组对象接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中5人发生皮疹、腹泻等过敏症状,9人具有轻微过敏反应,26人未发生过敏反应。而对照组中28人发生过敏症状,12人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于肉制品中具有一定的抗过敏作用。
实施例4
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于奶制品中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白;纯牛奶、白砂糖(无吸潮现象)均为市售。焦磷酸钠:粉末状或小结晶,食品级。黄原胶、柠檬酸、香精:食品级。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
首先在溶解器中加入白砂糖6%、黄原胶0.5%和焦磷酸钠0.5%充分溶解20min,温度为80℃,然后冷却至室温(25℃)备用。将溶解的糖液10%和50%纯奶泵人配料罐(200L),加入鹌鹑蛋或卵类粘蛋白至容量的80%左右,搅拌均匀后加入8%的柠檬酸溶液,再加入香精并添加净化水到容量值。在60℃,20MPa压力下均质,并通过135℃灭菌机进行超高温瞬时杀菌,冷却到室温罐装贮存。对照组样品中鹌鹑蛋或卵类粘蛋白用净化水代替,其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天饮用牛奶,7天后,两组对象分别接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中有6人发生瘙痒、腹泻等过敏症状,8人具有轻微皮疹等过敏反应,26人未发生过敏反应。而对照组中25人发生过敏症状,10人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于乳制品中具有一定的抗过敏作用。
实施例5
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于化妆品中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、维生素E、硬脂酸、甘油三酯、黄原胶、海藻糖、丙二醇、白凡士林、甘油、乙二胺四乙酸二钠、苯甲酸钠。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
称取100g白凡士林、10g维生素E、30g硬脂酸、30g甘油三酯、80g甘油水浴加热溶化并恒温于80℃,构成油相;称取10g乙二胺四乙酸二钠、50g丙二醇、40g海藻糖加热溶解于1L净化水中保持80℃恒温,构成水相;在200rmp转速搅拌下将油相缓慢加入水相中,冷却至50℃时加入50g鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、20g黄原胶、20g苯甲酸钠,搅拌均匀,使其充分乳化。对照组缺少鹌鹑蛋或卵类粘蛋白成分之外其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天涂抹乳膏,7天后,两组对象分别接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中有9人发生瘙痒、皮疹等过敏症状,9人具有轻微皮疹等过敏反应,22人未发生过敏反应。而对照组中23人发生过敏症状,10人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于化妆品中具有一定的抗过敏作用。
实施例6
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于化妆品中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、硬脂酸、甘油三酯、十八醇、黄原胶、丙二醇、氢氧化钾、苯甲酸钠、香精。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
称取30g硬脂酸、5g甘油三酯、5g十六醇、10g丙二醇于100ml烧杯中水浴加热并恒温于80℃;称取1g氢氧化钾、5g黄原胶置于烧杯中,加水至100ml,水浴加热到80℃,充分溶化,在搅拌过程中将水相缓慢加入油相中,冷却至50℃加入25g鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、5g苯甲酸钠,5g香精,搅拌均匀,使其充分乳化,静置冷却至室温。对照组缺少鹌鹑蛋或卵类粘蛋白成分之外其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天涂抹样品,7天后,两组对象分别接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中有10人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状,9人具有轻微皮疹等过敏反应,21人未发生过敏反应。而对照组中25人发生过敏症状,9人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于化妆品中具有一定的抗过敏作用。
实施例7
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于洗发水中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、十二烷基硫酸钠、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠、十二烷基甜菜碱、皂角、柠檬酸、香精、黄原胶、NaCl、强力珠光剂。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
将500g皂角研磨成粉末,溶解在1L净化水,置于搅拌器中加热搅拌,充分溶解后过滤。称量50g月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠于烧杯中,加入适量的皂角水,加热搅拌,直至全部溶解。向烧杯中加入30g十二烷基硫酸钠和30g十二烷基甜菜碱,搅拌直至溶液混合均匀。向溶液中加入20g黄原胶,20g强力珠光剂后,升温至80℃,加入100g鹌鹑蛋或卵清黏蛋白搅拌直至混合均匀。待温度下降到30~40℃,加入适量的NaCl调节黏度,再加入柠檬酸调节溶pH值至6~7,最后加入适量的香精,出料。对照组缺少鹌鹑蛋或卵类粘蛋白成分之外其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天用样品洗头,15天后,两组对象分别接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中有8人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状,9人具有轻微皮疹等过敏反应,23人未发生过敏反应。而对照组中22人发生过敏症状,11人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于洗发水中具有一定的抗过敏作用。
实施例8
鹌鹑蛋或鹌鹑蛋卵类粘蛋白应用于香皂中抗过敏作用研究
1、实验材料
鹌鹑蛋或卵类粘蛋白、氢氧化钠、甘油,香精、色素;猪油,冰糖均为市售。
2、实验对象
选择我校有过敏史的80名学生,其中40名为男生,年龄在18~28岁,分为实验组和对照组,各有20名男生,20名女生。两组在年龄、性别、类型等方面无显著性差异。
3、制备方法
将80g氢氧化钠溶解于净化水中,配成30%的溶液。将200g猪油在反应锅中预热熔化,将配制好的氢氧化钠溶液加入反应锅中,保持温度在60℃左右,反应完全后静止0.5h。边搅拌边加入150g甘油和50g鹌鹑蛋或卵类粘蛋白,并加入20g冰糖,溶解完全后,加入8g香精、4g色素,搅拌均匀便得到香皂皂基。将皂基注入模具,冷却成型后,卸出,切成厚度一定的块状,在25℃、湿度为50%、通风的干燥室进行干燥。对照组缺少鹌鹑蛋或卵类粘蛋白成分之外其他工序一致。
4、实验效果
实验组和对照组每天用样品洗头,15天后,两组对象分别接触过敏原,观察过敏症状。结果表明实验组40人,其中有7人发生瘙痒、腹泻、皮疹等过敏症状,10人具有轻微皮疹等过敏反应,23人未发生过敏反应。而对照组中22人发生过敏症状,12人具有轻微过敏反应。以上结果显示鹌鹑蛋或者卵类粘蛋白用于香皂中具有一定的抗过敏作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (2)

1.鹌鹑蛋卵类粘蛋白在制备具有预防和/或治疗过敏药品中的应用,其特征在于,所述药品的成分包括氯雷他定、西利替嗪或阿司咪唑。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述鹌鹑蛋卵类粘蛋白在药品中的有效含量为5~20%。
CN201810055411.9A 2018-01-19 2018-01-19 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用 Active CN108014135B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810055411.9A CN108014135B (zh) 2018-01-19 2018-01-19 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810055411.9A CN108014135B (zh) 2018-01-19 2018-01-19 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108014135A CN108014135A (zh) 2018-05-11
CN108014135B true CN108014135B (zh) 2020-04-03

Family

ID=62074943

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810055411.9A Active CN108014135B (zh) 2018-01-19 2018-01-19 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108014135B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4340591A (en) * 1979-05-07 1982-07-20 Societe Coturnix Process for obtention of the ovomucoid fraction and an ovomucoid extract of quail egg, products so obtained and their use as a medicament

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4340591A (en) * 1979-05-07 1982-07-20 Societe Coturnix Process for obtention of the ovomucoid fraction and an ovomucoid extract of quail egg, products so obtained and their use as a medicament

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Immunochemical Characterization of Ovomucoid from Japanese Quail Egg White Using Monoclonal Antibodies;Kyoko TAKAHASHI et.al.,;《J Nutr Sci Vitaminol》;19991231;第45卷;摘要 *
Quail egg homogenate alleviates food allergy induced eosinophilic esophagitis like disease through modulating PAR-2 transduction pathway in peanut sensitized mice;Priscilia Lianto et.al.,;《SCIENTIFIC REPORTS》;20180118;第8卷;摘要,第8页第3段,第10页第1段 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108014135A (zh) 2018-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ghaeni et al. Review for application and medicine effects of Spirulina, microalgae
US20180153950A1 (en) Eurycoma longifolia extract and its use in enhancing and/or stimulating immune system
JP2013056931A (ja) 耐寒性キーウィの抽出物を含む食品添加物
CN103598426B (zh) 用于提高雏鸡生长性能的饲料添加剂及饲料
CN103442725A (zh) 治疗、减轻或预防动物的视觉系统衰退的方法和组合物
JP4917584B2 (ja) 可溶化蜂の子処理物、その製造方法、抗酸化剤、ace阻害剤、血圧降下剤、皮膚繊維芽細胞増殖促進剤、疲労回復剤、血流改善剤、並びに可溶化蜂の子処理物を含有する医薬品、化粧品又は飲食品
CN104411296A (zh) 含有鱼类眼球的粉碎物或提取物的化妆料、药学及食品组合物
CN108158841B (zh) 鹌鹑蛋活性成分ovoinhibitor糖蛋白在抗过敏中的应用
CN108014135B (zh) 鹌鹑蛋及鹌鹑蛋卵类粘蛋白在抗过敏中的应用
Kumari et al. Study on the immuno-modulatory effect of herbal extract of Asparagus racemosus Willd. in broiler chicks
KR101642176B1 (ko) 성장촉진 조성물
CN106236927A (zh) 一种具有增强免疫力和抗疲劳作用的中药组合物及其制备方法与用途
KR20110041141A (ko) 각종 영양성분을 첨가한 기능성 인조벌꿀의 제조가공 및 그 방법
KR101713115B1 (ko) 발효 오신채 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR20150078613A (ko) 침향 및 해양심층수를 유효성분으로 함유하는 항알러지용 조성물
KR101599907B1 (ko) 천연 원료 추출물을 포함하는 항산화제 및 이의 용도
KR100536857B1 (ko) 항알러지 및 항염증 활성을 갖는 다래 추출물을 함유하는화장료 조성물
US6183742B1 (en) Applications of lysozyme dimer
KR20010016591A (ko) 홍경천 추출물 제조방법과 그 용도
KR101418881B1 (ko) 면역증강, 염증치료 및 통증치료용 수지봉독과 이를 이용한 비경구 투여용 조성물 및 그 제조방법
KR20110041140A (ko) 기능성 벌꿀제조가공 및 그 방법
TW200930395A (en) Morinda citrifolia based formulations for regulating T cell immunomodulation in neonatal stock animals
KR100536495B1 (ko) 항알러지 및 항염증 활성을 갖는 다래 추출물을 함유하는식품 첨가제, 동물사료 첨가제 또는 화장료 조성물
KR100533702B1 (ko) 항알러지 및 항염증 활성을 갖는 다래 추출물을 함유하는동물사료 첨가제
CN116114871B (zh) 增强免疫力的中式养生组合物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant