CN108157362A - 一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺 - Google Patents

一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及其生产工艺，该农用微生物菌剂领域包括如下组分‑‑载体：蛭石粉，微生物菌体：地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌；保护剂：丙三醇、脱脂奶粉、脱乙酰几丁质、抗坏血酸、柠檬酸、复合氨基酸和糊精；吸附剂：风化煤粉，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计。其生产工艺包括如下工艺步骤：菌种活化、摇瓶培养、发酵培养、菌泥制备、加入配料及无菌封装。本发明配方针对草莓易受白粉病侵袭问题，结合草莓根系浅而叶片大的生长特点而为草莓专门设计，活菌共生性好，稳定性好，所栽培植株叶片浓绿，抗白粉病、抗逆性明显增强，其生产工艺简单，成本低廉，便于推广和使用。

Description

一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺
技术领域
本发明涉及农用微生物菌剂领域，具体地说是一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺。
背景技术
草莓为宿根性多年生常绿草本植物，其浆果鲜红艳丽、芳香多汁、酸甜可口，被誉为“水果皇后”。草莓营养成分丰富，易被人体消化吸收，其所含的维生素非常丰富，尤其是维生素C含量，每100克草莓中就含有维生素C 60毫克，所含的胡萝卜素是合成维生素A的重要物质，具有明目养肝的作用，所含的果胶和膳食纤维，可以帮助消化，通畅大便，是老少皆宜的健康食品，特别适合养生食用，深受广大消费者的喜爱。现代医学研究表明，草莓味酸、性凉、无毒，具有清热去火、润肝明目，滋阴生津的功效，对皮肤、头发均具有保健作用，对胃肠疾病、动脉硬化及冠心病也有较好的防治作用。
草莓属浅根系植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，株高一般20-30厘米，短缩的茎上密集着生叶片，并抽生花序和匍匐茎。一方面，草莓植株根系浅而叶片大，叶片蒸腾作用强，导致叶片气孔关闭，对植物的光合作用产生影响，所栽培植株表现为叶面枯萎，植株生长慢，抗逆性差，所结果实营养不足，口感不好，易受各种病害侵袭。另一方面，由于设施栽培技术的引进，通常采用连作和封闭的温、湿环境，这样就使病原物极易繁殖和积累，进一步增加了植株遭受病害侵袭的几率。白粉病是草莓产业化生产中的主要病害，白粉病发生严重时，病叶率在45%以上，病果率50%以上，严重影响草莓的产量、品质和经济效益。
在草莓栽培领域，人们主要采用化学农药防治此病，然而研究发现白粉病菌对化学农药容易产生抗药性，不仅对天敌生物群落产生严重破坏，破坏农业生态环境，而且很难达到预期的效果。随着社科技的进步和公众环保意识的增强，减少使用化学农药，保护人类生存环境的呼声日益高涨，因此利用生物活体或其代谢产物对病害进行防治，或利用仿生合成具有特异作用的农药制剂发展成为国内外植物保护科学工作者的重要研究课题之一，势必会对提高草莓果品品质、促进农业生态系统的和谐发展产生重要影响。
发明内容
本发明的技术任务是针对现有技术的不足，提供一种能防治白粉病、促进植株生根、提高植株抗逆性的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺，以适应现代农业发展的需求。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
1、本发明提供一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数≥2.0亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：
载体：40-60目蛭石粉24-32份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌0.8-1.5份、胶冻样芽孢杆菌0.6-1.2份、蜡样芽胞杆菌0-1份和细黄链霉菌1.5-3份；保护剂：丙三醇1-3份、脱脂奶粉0.5-1份、脱乙酰几丁质4-6份、抗坏血酸2-3份、柠檬酸1-2份、复合氨基酸3-8份和糊精0.5-2份；吸附剂：40-60目风化煤粉40-55份，上述农用微生物菌剂总组成为100质量份。
优选的，其配方中原料组成及各组分质量份如下：
载体：40-60目蛭石粉24-30份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌0.8-1.2份、胶冻样芽孢杆菌0.6-1份、蜡样芽胞杆菌0.5-1份和细黄链霉菌1.5-2份；保护剂：丙三醇2-3份、脱脂奶粉0.75-1份、脱乙酰几丁质4.5-6份、抗坏血酸2-2.5份、柠檬酸1.75-2份、复合氨基酸5-7份和糊精1.6-2份；吸附剂：风化煤粉43-52份，上述农用微生物菌剂总组成为100质量份。
所述脱乙酰几丁质脱乙酰度大于75%。
所述复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
2、本发明还一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
1）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到已灭菌的斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：28-30℃，2-3天；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到已灭菌的摇瓶培养基中，在28-30℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养2-3天，作为液体种子液；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：32-37℃，180转/分钟，3-5天，pH值7.0-7.2，通风比1:1，含氧量100%；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、5000-9000转/分钟条件下，离心10-15分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤1-5次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积10-20%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附15-20分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放3-5天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
所述斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖16-20%、豆粉饼10-12%、牛肉膏3-5%、蛋白胨0.2-3%、硫酸镁0.5-2%、酵母粉0.1-2%、磷酸二氢钾0.6-1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
所述摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18-20%、豆粉饼13-15%、牛肉膏3-5%、蛋白胨0.2-3%、硫酸镁0.5-2%、酵母粉0.1-2%、磷酸二氢钾0.6-1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
所述发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜1-5%，玉米粉10-15%、豆粉饼15-20%、麸皮9-13%、磷酸二氢钾0.5-1%、硫酸镁0.5-2%、蛋白胨0.2-3%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
本发明采用的菌种如下：地衣芽孢杆菌的保藏编号为ACCC 02569，胶冻样芽孢杆菌的保藏编号为CICC 23575，蜡样芽胞杆菌的保藏编号为CMCC 63301，细黄链霉菌的保藏编号为CICC 11006。
本发明的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺与现有技术相比，所产生的有益效果是，
1、针对性强，该配方针对草莓易受白粉病侵袭问题，结合草莓根系浅而叶片大的生长特点而为草莓专门配制的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，重在专用，产品所含活菌共生性好，稳定性好，所栽培植株叶片浓绿，抗白粉病、抗逆性明显增强；
2、本发明配方中添加有地衣芽孢杆菌，可产生抗菌活性物质、杀灭致病菌，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖，同时还能调整菌落失调，增强植株抗逆性；添加有胶冻样芽孢杆菌，能活化硅酸盐矿物中钾素，而且还能利用磷灰石中磷素和固定大气氮素，减少化肥用量，为作物生长提供必要的营养成分；添加有蜡样芽胞杆菌，能产生生抗菌物质，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的营养成分，改善生态环境；添加有细黄链霉菌，其代谢产物中含有生长素、抗菌素、苯乙酸、琥珀酸及细胞分裂素等作物生长所必须的生长调节剂成分，具有转化土壤中氮、磷、钾，提高土壤肥力，减少化肥用量，抑制病菌繁殖，防病保苗，刺激细胞分裂，促进作物生根、发芽、成熟，提高作物产量，促进有效物质合成的功效，能显著提高果品的品质；该配方设计一方面可以为草莓生长提供必要的营养成分及生长调节剂，促进植株生根，保水保苗，增产增收，另一方面利用代谢产生的抗菌物质，达到杀灭致病菌的目的，有效免去或减少草莓生长阶段的防病及化控用药，为草莓叶面病害（白粉病）的无公害生物防治提供可靠保证，优化了环境，提高了草莓的品质；
3、本发明使用方法简单，省工省时省力，可按质量比1:80-100配合有机肥和复混肥使用，可做底肥或追肥，配方中保护剂的加入，可维持菌体内环境，保护目标菌种，配方中添加有脱乙酰几丁质，喷施于叶面后，能抑制微生物对草莓的侵染，可在草莓的表面形成半透膜，阻止二氧化碳散失，提高草莓表面的二氧化碳浓度，抑制草莓的呼吸作用，使果实充分长大，风味物质充分积累。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂及生产工艺作以下详细地说明。
实施例一
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为2.0亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉24份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌1份、胶冻样芽孢杆菌1份和细黄链霉菌2份；保护剂：丙三醇1份、脱脂奶粉1份、脱乙酰几丁质4份、抗坏血酸2份、柠檬酸2份、复合氨基酸6份和糊精1份；吸附剂：40-60目风化煤粉55份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度为80%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
1）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：28℃，2天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖16%、豆粉饼10%、牛肉膏3%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.5%、酵母粉0.1%、磷酸二氢钾0.6%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，40分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在28℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养2天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18%、豆粉饼13%、牛肉膏3%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.5%、酵母粉0.1%、磷酸二氢钾0.6%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，40分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：32℃，180转/分钟，3天，pH值7.0，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜1%，玉米粉10%、豆粉饼15%、麸皮9%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.5%、蛋白胨0.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，40分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、5000转/分钟条件下，离心10分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤1次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积10%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附15分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放3天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
实施例二
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为2.7亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉30份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌1.2份、胶冻样芽孢杆菌1.2份、蜡样芽胞杆菌1份和细黄链霉菌2.1份；保护剂：丙三醇3份、脱脂奶粉0.5份、脱乙酰几丁质6份、抗坏血酸3份、柠檬酸1.5份、复合氨基酸3份和糊精0.5份；吸附剂：40-60目风化煤粉47份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度85%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
2）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：29℃，2.5天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18%、豆粉饼11%、牛肉膏4%、蛋白胨2%、硫酸镁1%、酵母粉1%、磷酸二氢钾1%，余量为土壤浸出液，pH值7.1；灭菌条件：122℃，42分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在29℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养2.5天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖19%、豆粉饼14%、牛肉膏4%、蛋白胨2%、硫酸镁1%、酵母粉0.8%、磷酸二氢钾0.9%，余量为土壤浸出液，pH值7.1；灭菌条件：122℃，43分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：36℃，180转/分钟，4天，pH值7.1，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜4%，玉米粉13%、豆粉饼16%、麸皮10%、磷酸二氢钾0.7%、硫酸镁0.6%、蛋白胨2%，余量为土壤浸出液，pH值7.1；灭菌条件：122℃，42分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、8000转/分钟条件下，离心12分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤2次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积15%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附16分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放4天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
实施例三
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为3.0亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉25份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌0.8份、胶冻样芽孢杆菌0.6份、蜡样芽胞杆菌0.5份和细黄链霉菌1.5份；保护剂：丙三醇2份、脱脂奶粉0.75份、脱乙酰几丁质4.5份、抗坏血酸2份、柠檬酸1.75份、复合氨基酸7份和糊精1.6份；吸附剂：40-60目风化煤粉52份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度90%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
3）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：30℃，3天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖20%、豆粉饼12%、牛肉膏5%、蛋白胨3%、硫酸镁2%、酵母粉2%、磷酸二氢钾1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：123℃，45分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在30℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养3天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖20%、豆粉饼15%、牛肉膏5%、蛋白胨3%、硫酸镁2%、酵母粉2%、磷酸二氢钾1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：123℃，45分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：37℃，180转/分钟，5天，pH值7.2，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜5%，玉米粉15%、豆粉饼20%、麸皮13%、磷酸二氢钾1%、硫酸镁2%、蛋白胨3%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：123℃，45分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、9000转/分钟条件下，离心15分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤5次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积20%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附20分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放5天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
实施例四
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为3.2亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉32份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌1.5份、胶冻样芽孢杆菌1份、蜡样芽胞杆菌0.6份和细黄链霉菌3份；保护剂：丙三醇2.5份、脱脂奶粉1份、脱乙酰几丁质5份、抗坏血酸2.4份、柠檬酸1份、复合氨基酸8份和糊精2份；吸附剂：40-60目风化煤粉40份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度85%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
4）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：30℃，2.5天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖17%、豆粉饼11%、牛肉膏4%、蛋白胨0.8%、硫酸镁0.75%、酵母粉1%、磷酸二氢钾1%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，45分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在30℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养3天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖19%、豆粉饼14%、牛肉膏4%、蛋白胨1%、硫酸镁1.5%、酵母粉1%、磷酸二氢钾0.8%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，45分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：36℃，180转/分钟，4天，pH值7.0，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜4%，玉米粉12%、豆粉饼15%、麸皮11%、磷酸二氢钾1%、硫酸镁1%、蛋白胨1%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，45分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、7500转/分钟条件下，离心15分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤5次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积15%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附15分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放5天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
实施例五
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为4.2亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉30份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌1.2份、胶冻样芽孢杆菌1份、蜡样芽胞杆菌1份和细黄链霉菌2.3份；保护剂：丙三醇3份、脱脂奶粉1份、脱乙酰几丁质6份、抗坏血酸2.5份、柠檬酸2份、复合氨基酸5份和糊精2份；吸附剂：40-60目风化煤粉43份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度为85%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
5）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：28℃，2天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18%、豆粉饼11%、牛肉膏5%、蛋白胨3%、硫酸镁0.5%、酵母粉1%、磷酸二氢钾1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：123℃，40分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在28℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养3天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18%、豆粉饼15%、牛肉膏3%、蛋白胨1.5%、硫酸镁2%、酵母粉1%、磷酸二氢钾1%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：121℃，45分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：34℃，180转/分钟，4天，pH值7.0，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜3%，玉米粉15%、豆粉饼17%、麸皮11%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.5%、蛋白胨2.1%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：121℃，40分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、6000转/分钟条件下，离心10分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤3次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积15%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附20分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放5天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
实施例六
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数为3.2亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：载体：40-60目蛭石粉24份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌1份、胶冻样芽孢杆菌0.7份、蜡样芽胞杆菌0.75份和细黄链霉菌2份；保护剂：丙三醇2.1份、脱脂奶粉0.8份、脱乙酰几丁质5份、抗坏血酸2.25份、柠檬酸1.9份、复合氨基酸5.7份和糊精1.8份；吸附剂：40-60目风化煤粉52份，其中脱乙酰几丁质脱乙酰度为90%，复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其工艺步骤包括如下：
6）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：30℃，3天；
其中，斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖16%、豆粉饼12%、牛肉膏3%、蛋白胨3%、硫酸镁0.5%、酵母粉0.1%、磷酸二氢钾1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：123℃，45分钟；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到摇瓶培养基中，在28℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养3天，作为液体种子液；
其中摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18%、豆粉饼13%、牛肉膏5%、蛋白胨0.2%、硫酸镁2%、酵母粉2%、磷酸二氢钾0.6%，余量为土壤浸出液，pH值7.2；灭菌条件：121℃，45分钟；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：32℃，180转/分钟，3天，pH值7.0，通风比1:1，含氧量100%；
其中，发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜4%，玉米粉10%、豆粉饼15%、麸皮10%、磷酸二氢钾1%、硫酸镁2%、蛋白胨2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0；灭菌条件：121℃，40分钟；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、7500转/分钟条件下，离心10分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤3次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积10%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附15分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放4天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。

Claims (8)

1.一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，其特征在于，农用微生物菌剂包括载体、微生物菌体、保护剂和吸附剂，每克农用微生物菌剂所含有效活菌数≥2.0亿CPU，微生物菌体以发酵液离心沉淀后的菌泥计，其配方中原料组成及各组分质量份如下：
载体：40-60目蛭石粉24-32份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌0.8-1.5份、胶冻样芽孢杆菌0.6-1.2份、蜡样芽胞杆菌0-1份和细黄链霉菌1.5-3份；保护剂：丙三醇1-3份、脱脂奶粉0.5-1份、脱乙酰几丁质4-6份、抗坏血酸2-3份、柠檬酸1-2份、复合氨基酸3-8份和糊精0.5-2份；吸附剂：40-60目风化煤粉40-55份，上述农用微生物菌剂总组成为100质量份。
2.根据权利要求1所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，其特征在于，所述配方中原料组成及各组分质量份如下：
载体：40-60目蛭石粉24-30份，微生物菌体：地衣芽孢杆菌0.8-1.2份、胶冻样芽孢杆菌0.6-1份、蜡样芽胞杆菌0.5-1份和细黄链霉菌1.5-2份；保护剂：丙三醇2-3份、脱脂奶粉0.75-1份、脱乙酰几丁质4.5-6份、抗坏血酸2-2.5份、柠檬酸1.75-2份、复合氨基酸5-7份和糊精1.6-2份；吸附剂：风化煤粉43-52份；上述农用微生物菌剂总组成为100质量份。
3.根据权利要求1或2所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，其特征在于，所述脱乙酰几丁质脱乙酰度大于75%。
4.根据权利要求1或2所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂，其特征在于，所述复合氨基酸为大豆蛋白酶解提取制备的氨基酸。
5.一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其特征在于，工艺步骤包括如下：
1）菌种活化：将冻干保存状态的地衣芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和细黄链霉菌分别用接种环接种到已灭菌的斜面培养基上活化，使菌丝蔓延至整个斜面，控制活化条件：28-30℃，2-3天；
2）摇瓶培养：将活化好的微生物菌种按照混合接种的方法，按5%的体积百分比接种量接种到已灭菌的摇瓶培养基中，在28-30℃，振荡频率150转/分钟条件下，摇瓶培养2-3天，作为液体种子液；
3）发酵培养：将液体种子液无菌转入已灭菌的含有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，其中，液体种子液与发酵培养基按照体积比1:1000的量，控制发酵培养条件：32-37℃，180转/分钟，3-5天，pH值7.0-7.2，通风比1:1，含氧量100%；
4）菌泥制备：将发酵液在4℃、5000-9000转/分钟条件下，离心10-15分钟，弃去上清液，弃去杂菌，离心沉淀物用无菌水洗涤1-5次，再次离心分离，弃去上清液，收集菌泥；
5）加入配料、无菌封装：将所得菌泥用发酵液总体积10-20%的无菌水重新悬浮，与载体按比例混合，在磁力搅拌器上吸附15-20分钟，然后加入保护剂，最后加入固化剂充分混合均匀，堆放3-5天，采用无菌铝箔袋封装，即可制成复合国标的草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其特征在于，所述所述斜面培养基组成，以质量分数计：葡萄糖16-20%、豆粉饼10-12%、牛肉膏3-5%、蛋白胨0.2-3%、硫酸镁0.5-2%、酵母粉0.1-2%、磷酸二氢钾0.6-1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
7.根据权利要求5所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其特征在于，所述摇瓶培养基组成，以质量分数计：葡萄糖18-20%、豆粉饼13-15%、牛肉膏3-5%、蛋白胨0.2-3%、硫酸镁0.5-2%、酵母粉0.1-2%、磷酸二氢钾0.6-1.2%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
8.根据权利要求5所述的一种草莓专用防病促根粉状农用微生物菌剂的生产工艺，其特征在于，所述发酵培养基组成，以质量分数计：蜂蜜1-5%，玉米粉10-15%、豆粉饼15-20%、麸皮9-13%、磷酸二氢钾0.5-1%、硫酸镁0.5-2%、蛋白胨0.2-3%，余量为土壤浸出液，pH值7.0-7.2；灭菌条件：121-123℃，40-45分钟。
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