CN108148775B - 一株高产胞外多糖的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株高产胞外多糖的嗜热链球菌,其保藏号为CGMCC No.14809;本申请还公开了利用该高产胞外多糖的嗜热链球菌的制备发酵乳的方法,包括如下步骤:(1)将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;(2)将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养;(3)将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比5%~10%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。本发明的产胞外多糖的嗜热链球菌在发酵过程中可以减少或者完全替代食品添加剂的使用,从而不需要添加稳定剂,同时该高产胞外多糖的嗜热链球菌还具有改善产品质构的作用,提高产品的保水性和爽滑性。
Description
技术领域
本发明属于微生物及微生物发酵技术领域,具体为一株高产胞外多糖的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法。
背景技术
乳酸菌胞外多糖(EPS)是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的一类糖类化合物,有的依附于微生物细胞壁形成荚膜,称为荚膜多糖;有的则进入培养基形成粘液,称为粘液多糖,是微生物适应环境的产物。乳酸菌EPS具有显著的生理功能:(1)抗癌、抗肿瘤作用;(2)促进益生菌在肠道粘膜上的吸附。(3)对免疫系统的调节有促进作用。(4)对细胞的保护作用。另外,乳酸菌EPS能够显著改善乳制品的结构与质地。在酸乳生产过程中,常出现粘度低、粗糙有凝块和大量乳清析出等问题,这些问题可以通过使用产EPS的乳酸菌解决。利用高产EPS的乳酸菌可以提高酸乳粘度,减少乳清析出和颗粒感,在大规模生产搅拌型酸乳时,有利于保持产品的均匀性。含有EPS的酸乳在经泵抽、搅拌和灌装时,可降低机械破坏程度,对热和物理应激的抵抗能力增强,使酸乳生产不添加或少添加稳定剂,满足消费者对纯天然食品的需求。此外,乳酸菌胞外多糖还可作为增稠剂、稳定剂、乳化剂、胶凝剂、填充剂和持水剂,广泛用于食品、制药、石油化工以及生化产品等领域。
但是现有的乳酸菌产生的胞外多糖含量较少,针对酸奶发酵过程中需要添加稳定剂,例如淀粉,果胶,琼脂等来降低产品货架期内的乳清析出,但是随着消费者对食品安全性的关注无添加产品更受消费者的青睐,该现状亟待解决。
发明内容
为解决现有技术在酸奶发酵过程中需要添加稳定剂,例如淀粉,果胶,琼脂等来降低产品货架期内的乳清析出的缺陷,本发明提供了一株高产胞外多糖的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法,实现的目的为该菌种能在牛奶中快速生长并且产生较高产量的胞外多糖,具有极大的应用价值。
为了实现上述目的,本发明提供以下技术方案:本发明提供的一株高产胞外多糖的嗜热链球菌,该嗜热链球菌保藏号为CGMCC No.14809。该菌种已于申请日前保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101,保藏日期是2017年10月16日。该菌的全基因序列在NCBI上的注册号为:Accession number CP025400。
本发明提供的高产胞外多糖的嗜热链球菌的培养方法,其包括如下步骤:
(1)从酸马奶中分离出高产胞外多糖的嗜热链球菌;
(2)将步骤(1)得到的高产胞外多糖的嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上进行培养保存。
优选地,所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基。
优选地,所述步骤(2)中斜面培养的PH为6.5-7.5,温度为37-45℃。
本发明还要求保护经过上述培养方法得到的高产胞外多糖的嗜热链球菌,保藏号是CGMCC No.14810。
本发明还公开了制备含上述高产胞外多糖的嗜热链球菌的发酵乳的方法,包括如下步骤:(1)斜面活化培养:将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;
(2)液体种子培养:将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养制得种子培养液;
(3)接种发酵:将步骤(2)得到的种子培养液与待发酵乳品按照体积比5%~10%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。
优选地,所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为6.5-7.5,活化温度为37-45℃,活化时间为24-72h。
优选地,所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶,液体培养基中培养的温度为37-42℃,培养时间为16-24h。
优选地,步骤(3)中的待发酵乳品添加有以产酸为主的菌种,其添加量1×103~1×106cfu/mL。
优选地,所述以产酸为主的菌种为嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌等中的一种或多种。
优选地,以上所述的发酵温度为37-42℃,发酵时间为24-72h,发酵终点的酸度为70-75°T。。
本发明还公开了富含胞外多糖的发酵乳,该发酵乳由本发明公开的任一所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法制得。
本发明采用上述技术方案,包括以下有益效果:通过本发明的菌种可以量产胞外多糖。在发酵过程中产胞外多糖的嗜热链球菌可以减少或者完全替代食品添加剂的使用,从而不需要添加稳定剂,例如淀粉,果胶,琼脂等来降低产品货架期内的乳清析出,同时该高产胞外多糖的嗜热链球菌还具有改善产品质构的作用,用该菌株生产的酸奶细腻光滑,该菌株和其他以产酸性能为主的菌株复配还可以解决产品粗糙的问题,提高产品的保水性和爽滑性。
值得说明的是,斜面活化培养所使用的培养基为其他适合于嗜热链球菌生长的培养基均可,如改良MRS培养基等。
附图说明
图1为嗜热链球菌多糖对保水性和粘度的影响对比图;
图2为嗜热链球菌对酸奶质构的影响对比图。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明做进一步的详细描述。
实施例一:本发明提供的一种产胞外多糖的嗜热链球菌的培养保存方法,包括如下步骤:
(1)从酸马奶中分离出高产胞外多糖的嗜热链球菌;
(2)将步骤(1)得到的高产胞外多糖的嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上进行培养保存。
所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基,所述步骤(2)中斜面培养的PH为7.0,温度为37℃。
本发明还公开了利用产胞外多糖的嗜热链球菌发酵的方法,包括如下步骤:(1)斜面活化培养:将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;
(2)液体种子培养:将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养制得种子培养液;
(3)接种发酵:将步骤(2)得到的种子培养液与待发酵乳品按照体积比10%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为7.0,活化温度为37℃,活化时间为48h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶,液体培养基中培养的温度为37℃,培养时间为24h。所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为10:100,还可添加白砂糖等现有技术发酵乳中常见的原材料,发酵的温度为42℃,发酵时间为8h。获得含胞外多糖的富含胞外多糖的发酵乳。
实施例二:本发明还公开了利用产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,包括如下步骤:(1)斜面活化培养:将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;
(2)液体种子培养:将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养制得种子培养液;
(3)接种发酵:将步骤(2)得到的种子培养液与待发酵乳品按照体积比8%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为7.0,活化温度为37℃,活化时间为48h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶,液体培养基中培养的温度为37℃,培养时间为24h。所述步骤(3)中添加1×104cfu/mL的保加利亚乳杆菌,所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为8:100,还可添加白砂糖等现有技术发酵乳中常见的原材料,发酵的温度为37℃,发酵时间为12h。获得含胞外多糖的发酵乳。
实施例三:本发明还公开了利用产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,包括如下步骤:(1)斜面活化培养:将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;
(2)液体种子培养:将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养制得种子培养液;
(3)接种发酵:将步骤(2)得到的种子培养液与待发酵乳品按照体积比5%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为7.0,活化温度为37℃,活化时间为48h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶,液体培养基中培养的温度为37℃,培养时间为24h。所述步骤(3)中添加1×106cfu/mL的嗜酸乳杆菌。所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为5:100,还可添加白砂糖等现有技术发酵乳中常见的原材料,发酵的温度为42℃,发酵时间为10h。获得含胞外多糖的发酵乳。
对比例
在其他条件均相同时,分别使用不产多糖的嗜热链球菌、不产多糖的嗜热链球菌添加有0.5%琼脂、不产多糖的嗜热链球菌添加有1%琼脂、不产多糖的嗜热链球菌添加有0.5%果胶、不产多糖的嗜热链球菌添加有1%果胶和嗜热链球菌EPS生产酸奶,由图1可以明显看出嗜热链球菌EPS生产的酸奶的粘度显著大于用不产多糖的嗜热链球菌生产的酸奶以及不产多糖的嗜热链球菌添加琼脂和果胶后生产的酸奶;并且嗜热链球菌EPS生产的酸奶脱水收缩率低于用不产多糖的嗜热链球菌生产的酸奶以及不产多糖的嗜热链球菌添加琼脂和果胶后生产的酸奶,产品保水性好。图1柱状图中左柱为粘度,右柱为脱水率。
在其他条件均相同时,分别使用不产多糖的嗜热链球菌和嗜热链球菌EPS生产酸奶,由图2可以明显看出嗜热链球菌EPS生产的产品细腻光滑。图2中上一排为使用不产多糖的嗜热链球菌生产的产品,下一排为使用嗜热链球菌EPS生产的产品。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一株高产胞外多糖的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),其特征在于,该嗜热链球菌的保藏号为CGMCC No.14809。
2.利用权利要求1所述高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,该方法包括步骤如下:
(1)斜面活化培养:将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化;
(2)液体种子培养:将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养制得种子培养液;
(3)接种发酵:将步骤(2)得到的种子培养液与待发酵乳品按照体积比5%~10%进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。
3.根据权利要求2所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,步骤(1)中M17斜面培养基的pH为6.5-7.5,活化温度为37-45℃,活化时间为24-48h。
4.根据权利要求2所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶,液体培养基中培养的温度为37-42℃,培养时间为16-24h。
5.根据权利要求2所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,步骤(3)中的待发酵乳品添加有以产酸为主的菌种,其添加量1×103~1×106cfu/mL。
6.根据权利要求5所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,所述以产酸为主的菌种为嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌中的一种或多种。
7.根据权利要求2~6任一所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法,其特征在于,发酵的温度为37-42℃,发酵时间为8-12h,发酵终点的酸度为70-75°T。
8.一种富含胞外多糖的发酵乳,该发酵乳由权利要求2~7中任一所述的利用高产胞外多糖的嗜热链球菌制备发酵乳的方法制得。
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