CN108135176A - 用于治疗植物疾病的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了用于控制植物疾病的方法,其中向所述植物施用组合物,所述组合物包含具有由式(I)至(V)之一所表示的结构的化合物。本发明还公开了所述化合物或其盐用于在植物中刺激天然防御和诱导对于疾病的抗性的用途。此外,本发明考虑了这些具有由式I至V之一所表示的结构的化合物用于预防性和治愈性治疗所述疾病的用途。本发明还涉及用于农业的组合物,其包含具有由式I至V之一所表示的结构的化合物。

Description

用于治疗植物疾病的方法
发明领域
本发明涉及农业生物技术领域,特别地涉及化学化合物用于在植物中刺激天然防御和诱导对于疾病的抗性的用途。当施用在本发明中所公开的化合物时,获得了高水平的针对植物所患疾病的保护作用。
现有技术
近几十年来,已经从形态学、生理学、生物化学和分子的角度对“植物-病原体”相互作用进行了许多研究。然而,迄今所取得的结果既不能满足用于不断增长的人口的食品的需求,也不能满足世界上主要研究小组的认识。此外,这阻碍了能够通过对于收获物的有效且稳定的保护来拥有高产量。尽管为了作物的全面保护在世界范围内采取了无数的措施,但是每年仍记录到由疾病所产生的收获物的大量损失,特别是在出现流行病的情况下,在这些情况下所述损失可以达到产量的直至80%(Gao等人,(2000)NatureBiotechnol.18:1307-1310)。
植物和病原体已经协同进化了数百万年。在该相互作用期间,出现了这样的策略,其允许植物可能识别正在侵袭它们的病原体并激发成功的防御。同样地,病原体已发展出了使其能够逃避和/或取消植物的防御应答的机制。该选择压力对于植物的影响导致了其防御机制的改善。作为这个的结果,病原体引起疾病的成功不但不是常规,反而是例外(Staskawicz(2001)Plant Physiology 125:73-76)。
植物对于特异和普通引发物的感知不仅使得能够识别病原体,而且使得用于激活应答机制的信号转导成为可能。在各种不同的所激活的信号传导途径之中,包括由中间物例如活性氧、水杨酸、乙烯和茉莉酮酸所介导的那些。这些植物激素的信号传导途径之间的交叉给予了一种调节可能性,其使得能够取决于攻击植物的特定病原体来激活最佳的应答组合。还激活了致病性相关(PR)基因的表达和抗微生物化合物(其通常是为了直接攻击病原体而产生的植物抗毒素、防御素、酚类和黄酮类化合物)的合成(Baker等人,(1997)Science 276:726-733)。
还存在有在植物中起作用的其他应答机制类型,其效应在感染后在植物中持续相对长的时间段。这些被称为:获得性局部应答和获得性全身应答。在由超敏反应所引起的损伤周围的厚度为5-10mm的细胞环中观察到获得性局部应答。该区带的特征为:基本上碱性的致病相关蛋白质的大量积聚(Fritig等人,(1998)Current Opinion of Immunology 10:16-22),和苯基丙酸类途径(其参与抗生素例如莨菪亭的产生)的酶例如甲基转移酶的刺激(Legrand等人,(1978)Planta144:101-108),这不为病原体提供合适的环境,从而阻止其传播遍整个植物。
另一方面,获得性全身应答给予植物更高水平的针对相同病原体的后继感染的抗性。它不仅在被感染的组织中,而且在整个生物中发展出来。其特征为:与水杨酸信号传导机制有关的PR蛋白质(尤其是酸性的)的积聚(Cordelier等人,(2003)Plant MolecularBiology 51:109-118)。
在农业中持续存在的一个重要问题是对于植物疾病的控制不足,所述植物疾病限制了在世界范围内每年的农业生产。因此,尽管已经取得了进展,但是仍需要鉴定出对于诱导对于植物疾病的抗性来说有用的新型化合物,以实现对于植物疾病的更有效的控制。
发明描述
本发明通过公开对于在植物中刺激天然防御和诱导对于疾病的抗性来说有效的化合物而有助于解决上面提及的问题。以这种方式,本发明提供了用于治疗或预防植物疾病的方法,其特征在于,向所述植物施用有效量的组合物,所述组合物包含至少一种具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐,
其中,
R表示由下列各项组成的组的成员:氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基C1-3烷基、杂(芳基C1-3烷基)、芳基C1-7环烷基、杂(芳基C1-7环烷基)、C1-3烷基C3-7环烷基、杂(C1-3烷基C3-7环烷基)。
定义
在本发明的背景下,术语“烷基”是指衍生自具有直链(非支化链)或支化链的脂族烃的基团,其中所述烷基基团由指定的碳数目构成(例如,“C1-C10烷基”表示可以由一至十个碳原子形成的烷基)。烷基基团可以是饱和的、单不饱和的或多不饱和的,并且可以包含二价和多价基团。饱和烃基团的实例包括但不限于诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、2,3-二甲基丁基等的基团。不饱和烷基基团的实例包括但不限于:乙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、1,4-己二烯基、1,3-戊二烯基、乙炔基、3-丙炔基、3-丁炔基、2,4-庚二炔基等。注意,术语“烷基”包括衍生自具有直链或支化链的脂族烃的二价基团。二价烷基的实例包括但不限于:-CH2CH2CH(CH2CH2CH3)CH2-、-CH2CH=CHCH2-、-CH2C≡CCH2-、-CH2CH2CH2CH2-等。
术语“杂烷基”,单独地或与其他术语相组合地,是指衍生自具有直链(非支化链)或支化链的脂族烃的基团,所述脂族烃由至少一个碳原子和至少一个下列中的杂原子构成:氧、氮、磷、硅和硫。在杂烷基基团中存在的杂原子可以是相同的或不同的。杂原子可以位于杂烷基基团的任何内部位置处或者位于在其处杂烷基基团与该分子的其余部分相连接的位置处。杂烷基基团可以是饱和的、单不饱和的或多不饱和的,并且可以包含二价和多价基团。杂烷基基团的实例包括但不限于:-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-CH2-CH=N-OCH3、-CH=CH-N(CH3)-CH3、-O-CH2-CH3等。在杂烷基基团中,可以发生连续地布置直至两个或三个杂原子,例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。注意,术语“杂烷基”包括衍生自具有直链或支化链的脂族烃的二价基团,所述脂族烃由至少一个碳原子和至少一个杂原子构成。二价杂烷基的实例包括但不限于:-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。
术语“环烷基”和“杂环烷基”,单独地或与其他术语相组合地,是指衍生自脂环烃的基团,所述脂环烃由一个或多个稠合的或共价连接的环构成,所述环可以是饱和的、单不饱和的或多不饱和的,其中在环烷基的情况下,所述环仅由碳原子和氢原子构成,而在杂环烷基的情况下,所述环包括至少一个下列中的杂原子:氧、氮和硫。单环环烷基的实例包括但不限于:环戊基、环己基、1-环己烯基、2-环丁炔基、1,3-环己二烯基等。由数个相连接的环所形成的环烷基的实例包括但不限于:环丁基环戊基等。由数个稠合的环所形成的环烷基的实例包括:具有两个或更多个由两个或更多个环所共有的碳原子的多环化合物,例如二环[4,2,0]辛基、二环[3,1,1]庚基、二环[4,4,0]癸基等;和只具有一个由两个环所共有的碳原子的二环化合物,其被称为螺烷,其中包括例如螺[3,4]辛基。杂环烷基的实例包括但不限于:四氢呋喃基、四氢吡喃基、二噁烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基、硫杂环戊烷基等。注意,术语“环烷基”和“杂环烷基”包括衍生自脂环烃的二价基团,所述脂环烃由一个或多个稠合的或共价连接的环构成,所述环可以是饱和的、单不饱和的或多不饱和的,其中在环烷基的情况下,所述环仅由碳原子和氢原子构成,而在杂环烷基的情况下,所述环包括至少一个杂原子。
术语“芳基”是指多不饱和的芳香烃基团,其由一个环(例如,苯基)或者数个稠合的(例如,萘基、蒽基等)或共价连接的(例如,联苯基)环(优选地,一个至三个环)构成。
术语“杂芳基”是指包含至少一个下面的原子列表中的杂原子的芳香烃基团(优选地,具有一个至三个环):氮、氧和硫(在涉及数个环的情况下,在每个单一环中)。芳基和杂芳基基团的实例包括但不限于:1-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、吡嗪基、2-噁唑基、2-噻唑基、3-呋喃基、2-噻吩基、4-吡啶基、2-苯并噻唑基、嘌呤基、5-吲哚基、6-异喹啉基等。术语“芳基”和“杂芳基”包括:衍生自仅由碳原子和氢原子构成的芳香烃的二价基团(在第一种情况下),和衍生自由一个或多个环(其由碳原子和氢原子以及至少一个杂原子构成)构成的多不饱和芳香烃的二价基团。
术语“芳基烷基”是指由一个或多个与一个或多个烷基基团相连接的芳基基团所形成的基团(例如,苄基、苯基、苯乙烯等)。术语“杂(芳基烷基)”是指由一个或多个与一个或多个芳基基团相连接的杂烷基基团所形成的基团,和/或由一个或多个与一个或多个烷基基团相连接的杂芳基基团所形成的基团(例如,2,5-二甲基呋喃),和/或由一个或多个与一个或多个杂烷基基团相连接的杂芳基基团所形成的基团。
术语“芳基环烷基”是指由一个或多个与一个或多个环烷基基团相连接的芳基基团所形成的基团(例如,苄基、苯基、枯烯、苯乙烯、乙烯基苯等)。术语“杂(芳基环烷基)”是指由一个或多个与一个或多个环烷基基团相连接的杂芳基基团所形成的基团,和/或由一个或多个与一个或多个芳基基团相连接的杂环烷基基团所形成的基团,和/或由一个或多个与一个或多个杂芳基基团相连接的杂环烷基基团所形成的基团。
术语“烷基环烷基”是指由一个或多个被一个或多个烷基基团取代的环烷基环所形成的基团。术语“杂(烷基环烷基)”是指由一个或多个与一个或多个环烷基环相连接的杂烷基基团所形成的基团,和/由一个或多个被一个或多个烷基基团取代的杂环烷基基团所形成的基团,和/或由一个或多个被一个或多个杂烷基取代的杂环烷基基团所形成的基团。
术语“卤素”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。术语“杂原子”是指除了碳或氢之外的任何其他原子。通常为氧、氮、硫、磷、硼、氯、溴或碘。
在下面所给出的表格中,作为实例,显示了其结构由式I至V之一所表示的化合物。然而,在本发明中所鉴定的化合物并不限于在表1至5中所汇集的化合物。
表1显示了由本发明的式I所表示的化合物的实例。
表1.由式I所表示的化学化合物
表2显示了由本发明的式II所表示的化合物的实例。
表2.由式II所表示的化学化合物
表3显示了由本发明的式III所表示的化合物的实例。
表3.由式III所表示的化学化合物
表4显示了由本发明的式IV所表示的化合物的实例。
表4.由式IV所表示的化学化合物
表5显示了由本发明的式V所表示的化合物的实例。
表5.由式V所表示的化学化合物
在本发明的一个实施方案中,本发明的方法用于治疗由从由下列各项组成的组中选择的植物病原体引起的疾病:细菌、卵菌、真菌和线虫。在一个特别的实施方案中,所述方法用于治疗由待定的植物致病性细菌“亚洲韧皮部杆菌(Liberibacter asiaticus)”所引起的黄龙病(HLB)。
作为本发明的一个具体实施方案,在所公开的方法中,所述组合物包含0.01μΜ至5μΜ的具有由式I至V之一所表示的结构的化合物。在另一个具体实施方案中,每月一次至两次向所述植物施用所述化合物。
本发明的目标还为用于农业的组合物,其包含至少一种具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐以及合适的赋形剂或载体。
在本发明中,可以将所述化合物配制成悬浮液、溶液、乳液、粉剂、颗粒剂、乳油、气雾剂、浸渍颗粒剂、辅药、糊剂或通过包囊进行配制。所述制剂通过已知的方法来产生,例如通于将活性组分与增补剂、表面活性剂、乳化剂和/或分散剂、溶剂和合适的载体相混合。
在本发明的一个实施方案中,活性化合物(其为至少一种具有选自I至V的式的化合物)在所述组合物中处于0.01μΜ至5μΜ的范围内。在一个优选的实施方案中,向所述植物施用所述组合物以用于治疗由待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”(其是HLB的根由)所引起的疾病。
本发明的另一个目标为具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐用于在植物中刺激天然防御和诱导对于疾病的抗性的用途。
在植物中诱导抗性是目前具有巨大重要性和益处的方法,其使得能够利用在植物中已经存在的生物化学和分子机制,以使之用于疾病的控制。植物针对疾病的防御包括一系列与识别、信号传导和应答相关的事件,其被定义为植物的先天免疫。该先天免疫可以通过一系列因素而被激活,所述因素确实无疑地有助于疾病的控制。在由植物所激活的可能的防御机制之中尤其包括抗微生物化合物例如植物抗毒素、防御素和致病相关蛋白质的合成。这些应答通过与水杨酸、茉莉酮酸/乙烯和超敏反应相关的基因的激活来介导。
在本发明中证明了,在用具有从在本文中所提及的I至V中选择的式的化合物进行处理后,GST1、PR1和PDF 1.2基因被激活,这些基因是超敏反应、水杨酸和茉莉酮酸/乙烯的标志物。
因此,本发明还考虑了具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐在制备用于预防性或治愈性治疗植物疾病的组合物中的用途。所述疾病的预防或治疗通过与水杨酸、茉莉酮酸/乙烯途径和超敏反应相关的基因的激活来实现。在一个实施方案中,本发明提供了由细菌、卵菌、真菌或线虫所引起的植物疾病的预防性和治愈性治疗。
在一个特别的实施方案中,以0.01-5μΜ的浓度范围施用具有由式I至V之一所表示的结构的化合物使得能够急剧地减少所述疾病的致病因子。这通过下述方式来实现:从用在本发明中所公开的化合物治疗患病植物开始来减少植物致病性细菌、卵菌、真菌或线虫的拷贝数。在一个优选的实施方案中,所述植物病原体为待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”。在一个更优选的实施方案中,所述具有由式I至V之一所表示的结构的化合物通过化学合成来获得。
附图简述
图1.在以1μΜ的浓度用所述化合物进行处理的拟南芥(Arabidopsis thaliana)植物中与植物对于疾病的防御应答相关的基因的相对表达。棒条表示对于所评价的每种化合物,10株植物的平均值的标准偏差。所评价的基因与植物的抗性相关,A:通过水杨酸(PR1:致病相关蛋白质),B:茉莉酮酸/乙烯(PDF 1.2:防御素),和C:超敏反应(GST1:谷胱甘肽S-转移酶)。
图2.在以1μΜ的浓度用所述化合物进行处理的柑橘属植物中与植物对于疾病的防御应答相关的基因的相对表达。棒条表示对于所评价的每种化合物,10株植物的平均值的标准偏差。所评价的基因与植物的抗性相关,A:AOS:环丙烯合酶;B:PAL:苯丙氨酸氨裂合酶。
图3.在处于生长发育中的柑橘属植物中,浓度为1μΜ的所述化合物对于降低产生HLB的致病性细菌的滴度的效应。作为对照,使用用水进行处理的植物。每个处理使用10株植物。在一年期间每3个月测定细菌的滴度。
图4.所述化合物的施用频次对于降低HLB的致病因子(细菌)的滴度的效应的评价。以1μΜ的浓度施用化合物。在6个月期间对细菌的滴度进行评价。
实施方案详述/实施例
实施例1.在用式I至V的化合物处理拟南芥植物后,与植物对于疾病的天然抗性相关的基因的激活
从通过用事先稀释直至达到1μΜ的浓度的所示的具有式I至V的化合物进行喷洒来进行处理的10株Col-0拟南芥植物中提取总核糖核酸(RNA)。在通过喷洒来施用所述化合物后24小时,收获植物。为了提取RNA,按照制造商的说明书,使用Rneasy试剂盒(Qiagen,Valencia,CA),其包括处理DNA酶的柱子(Qiagen)。按照制造商的说明书,通过使用oligo-dT引物和SuperScript III反转录试剂盒(Invitrogen,Carlsbad,CA)来合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)。通过使用Gene 3000PCR设备(Corbett,Australia)和QuantiTect SYBR GreenPCR试剂盒(Qiagen)来进行实时定量聚合酶链式反应(PCR)。用于检测在拟南芥植物中与对于疾病的防御相关的基因的寡核苷酸的序列显示在表6中。在该表格中,还出现了用于检测UBQ10基因(其用于测定作为内源基因的标记基因的相对表达,以便使标记基因的表达标准化)的寡核苷酸的序列。实时PCR反应的条件如下:在95℃下变性15分钟的初始步骤,接着是在95℃下变性15秒,在60℃下退火对齐30秒的步骤,和在72℃下延伸30秒的步骤,进行40个循环。借助于Rotor-Gene 3000程序(Corbett,Australia)来进行分析,并且对于每个样品使用五个复制物。实验重复进行两次。
表6.用于检测在拟南芥植物中与对于疾病的防御相关的基因的寡核苷酸
在图1中可以看出,在用由式I至V所表示的化学化合物处理拟南芥植物后,所分析的基因被激活。PR1、GST1和PDF1.2基因在植物的先天免疫(其针对由真菌、卵菌和细菌所产生的各种不同类型的疾病是有效的)中具有重要作用。从该结果开始,可以预测,通过激活植物的天然防御,所述基因的激活与针对病原体的生物学活性相关。
实施例2.在用式I至V的化合物处理柑橘属植物后,与植物对于疾病的天然抗性相关的基因的激活
从用事先稀释直至达到1μΜ的浓度的所示的具有式I至V的化合物进行处理的10株柑橘属植物(甜橙(Citrus sinensis))中提取总RNA。在通过喷洒来施用所述化合物后24小时,收集经处理的植物的样品。为了提取RNA,按照制造商的说明书,使用Rneasy试剂盒(Qiagen,Valencia,CA),其包括处理DNA酶的柱子(Qiagen)。按照制造商的说明书,通过使用oligo-dT引物和SuperScript III反转录试剂盒(Invitrogen,Carlsbad,CA)来合成cDNA。通过使用Gene3000PCR设备(Corbett,Australia)和QuantiTect SYBR Green PCR试剂盒(Qiagen)来进行实时定量PCR。在该实验中所使用的用于检测在柑橘属植物中与对于疾病的防御相关的基因的所有寡核苷酸的序列显示在表7中。在该表格中,还出现了用于检测肌动蛋白基因(其用于测定作为内源基因的标记基因的相对表达,以便使标记基因的表达标准化)的寡核苷酸的序列。实时PCR反应的条件如下:在95℃下变性15分钟的初始步骤,接着是在95℃下变性15秒,在60℃下退火对齐30秒的步骤,和在72℃下延伸30秒的步骤,进行40个循环。借助于Rotor-Gene 3000程序(Corbett,Australia)来进行分析,并且对于每个样品使用五个复制物。实验重复进行两次。
表7.用于检测在柑橘属植物中与对于疾病的防御相关的基因的寡核苷酸
在图2中可以看出,作为所分析的基因(PAL和AOS),它们在用所示的化合物处理柑橘属植物后被激活。重要的是指出,在本发明中所鉴定的化合物如何不仅能够在拟南芥属(Arabidopsis)中,而且还能够在柑橘属植物中激活防御。
实施例3.具有式I至V的化合物对于控制柑橘属植物的HLB的效应的评价
该实验在温室条件下开展。将具有HLB症状的植物放置在黑色塑料袋中,其中具有适当的灌溉制度。经由根据标准曲线和通过扩增细菌的16S核糖体DNA来进行的对于在叶子中的细菌的绝对定量,通过实时PCR来测定在具有HLB症状的植物中的待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”的水平。在实验之前,选择10株植物/处理。在一年期间,每3个月进行细菌的定量。最终评价通过摘取植物的所有叶子并且在分离DNA之前进行混合来开展。具有式I至V的化合物的浓度为1μΜ,并且通过每15天进行喷洒来施用。按照Promega的分离DNA的实验方案,从叶子中提取DNA。通过使用Gene 3000PCR设备(Corbett,Australia)和QuantiTectSYBR Green PCR试剂盒(Qiagen)来进行实时定量PCR。在细菌的定量中所使用的寡核苷酸为下列:CTAATCCCCAAAAGCCATCTC和CTTCAGGCAAAACCAACTCC。实时PCR反应的条件如下:在95℃下变性15分钟的初始步骤,接着是在95℃下变性15秒,在57℃下退火对齐30秒的步骤,和在72℃下延伸30秒的步骤,进行40个循环。借助于Rotor-Gene 3000程序(Corbett,Australia)来进行分析,并且对于每个样品使用五个复制物。实验重复进行两次。如能够观察到的,在用具有式I至V的化合物进行处理的植物中,产生了细菌水平的显著降低,其中从第4个月开始,达到了不可检测的水平,其保持这样直至在该实验结束时进行的最终评价(图3)。作为对照,使用向其施用水而不是化合物溶液的患病的柑橘属植物。在所述植物中,在整个评价时间期间,细菌水平保持与该实验开始时的水平类似。
实施例4.不同浓度的具有式I至V的化合物在控制柑橘属植物的HLB中的效应的评价
该实验的目的是评价对于控制柑橘属植物的HLB来说所需的具有式I至V的化合物的最低剂量。对于每个剂量,使用10株处于生长发育中的具有HLB的柑橘属植物(甜橙)。所测试的化合物浓度为0.001、0.01、0.1、1.5和10μΜ,并且通过在12个月期间每15天进行喷洒来施用它们。在处理了12个月之时进行评价。待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”的水平如在实施例3中那样来进行测定。在采用每一种所评价的浓度的实验开始时,在植物中的细菌滴度的平均值为大约6000个拷贝的细菌/反应。如在表8中所观察到的,在受试化合物的0.01至5μΜ的浓度之间,细菌水平急剧地降低。
表8.不同浓度的化合物对于引起HLB的细菌的效应
*细菌滴度(在以所示浓度用所述化合物进行处理后12个月)
实施例5.化合物的施用频次对于控制柑橘属植物的HLB的效应的评价
该实验的目的是确定在患病的柑橘属植物中控制HLB方面喷洒施用化合物IB的频次。使用10株植物/处理,并且施用频次为在6个月期间每月一次和两次。所使用的浓度为1μΜ,并且每个月进行细菌水平的测定。待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”的水平如在实施例3中那样来进行测定。如在图4中所看出的,所研究的两种变化形式均减少了细菌。相比于两次施用而言,每月单次施用显著地降低了细菌水平。
实施例6.具有式I至V的化合物对于控制其他植物疾病的效应的评价
为了比较具有式I至V的化合物对于控制各种不同植物的疾病的效应,使用经寄生疫霉(Phytophthora parasitica)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、茄链格孢(Alternaria solani)、诺卡氏菌属物种(Nocardia sp)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)接种的烟草、番茄和拟南芥植物。在一周期间,每24小时以1μM的浓度通过喷洒来施用所述化合物。在由寄生疫霉、立枯丝核菌和诺卡氏菌属物种所产生的疾病的情况下,测定植物的死亡率百分比;而对于茄链格孢,测定具有症状的叶子的百分比。对于由于灰葡萄孢而患病的植物的情况,测定损伤的大小。表9显示,所述化合物在降低由数种植物疾病所引起的死亡率方面具有明显的效应,以及具有植物疾病的症状学的减轻。对于每一种所述处理,使用50株植物。作为对照,使用用水进行处理的植物。按照不同的接种实验方案(Frontiers inPlant Science 3:268,1-6,2012),将每种处理的植物事先用所述病原体进行接种,并且然后将它们用所述化合物进行处理。
表9.受试化合物在控制由真菌、卵菌和细菌所产生的各种不同疾病中的效应
Pp-Nt:寄生疫霉-烟草;Rs-Nt:立枯丝核菌-烟草;N-Nt:诺卡氏菌属物种-烟草;Rs-Sl:立枯丝核菌-番茄;As-Sl:茄链格孢-番茄;Bc-At:灰葡萄孢-拟南芥属;Bc-Nt:灰葡萄孢-烟草;Bc-Sl:灰葡萄孢-番茄。*所述值表示由于所述疾病而引起的死亡率的百分比(%)。**所述值表示具有该疾病的症状的叶子的百分比(%)。***所述值表示由该疾病所产生的损伤大小的直径(mm)的平均值。
实施例7.具有式I至V的化合物对于柑橘属植物的HLB的保护效应的评价
开展该实验,以便测定在具有患有HLB的柑橘属植物和高水平的媒介昆虫种群的区域中,以1μΜ的浓度每月一次施用所述化合物对于没有HLB症状的柑橘属植物的保护效应。使用10株没有HLB的柑橘属植物,向其通过喷洒来施用待评价的化合物的溶液;和10株没有HLB的柑橘属植物,向其不施用化合物。待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”的水平如在实施例3中那样来进行测定。在没有HLB的柑橘属植物中施用具有式I至V的化合物使得能够保护所述植物免于通过媒介的细菌感染。在所述经处理的植物中,细菌滴度保持非常低,在0和4之间;而在不向其施用任何化合物的植物中,随着月份的推移,细菌水平逐渐升高。在该实验开始时,在未用具有式I至V的化合物进行处理的植物中的细菌滴度为5621,而在一年后,细菌平均滴度升高直至6584。在未用所述化合物进行处理的所述对照植物中,在两年后,细菌滴度已持续增加至8456。在未处理的对照植物中,HLB的症状也增强。在施用具有式I至V的化合物后所取得的结果是出人意料的,并且使得能够使用包含所述化合物的组合物来保护柑橘属植物对抗该重要的疾病。
实施例8.具有式I至V的化合物对于线虫感染的保护效应的评价
在乙醇中制备所述化合物的溶液,并且在水中稀释至1μΜ的浓度,以用于最终将其施用在叶子上。每5天进行施用,其中用每一种所述化合物仅喷洒叶子。使用10株植物/处理,并且最终评价在35天时进行,通过定量结节数目/植物。如在表10中所看出的,所述化合物诱导了对于线虫的全身效应,其中在所分析的作物中出现了“结节数目/植物”的显著下降。如此,证明了所述化合物在番茄、大蕉、香蕉中控制南方根结线虫(Meloidogyneincognita)、相似穿孔线虫(Radopholus similis)和咖啡短体线虫(Pratylenchuscoffeae)这些植物线虫的高种群方面的有效性。
表10.具有式I至V的化合物在控制线虫中的效应
Rs:相似穿孔线虫;Mi:南方根结线虫;Pc:咖啡短体线虫。*所述值表示结节数目/植物。

Claims (14)

1.用于治疗或预防植物疾病的方法,其特征在于,向所述植物施用有效量的组合物,所述组合物包含至少一种具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐,
其中,
R表示由下列各项组成的组的成员:氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基C1-3烷基、杂(芳基C1-3烷基)、芳基C1-7环烷基、杂(芳基C1-7环烷基)、C1-3烷基C3-7环烷基、杂(C1-3烷基C3-7环烷基)。
2.权利要求1的方法,其中所述疾病由从由下列各项组成的组中选择的植物病原体引起:细菌、卵菌、真菌和线虫。
3.权利要求2的方法,其中所述植物病原体为待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌(Liberibacter asiaticus)”。
4.权利要求1的方法,其中所述组合物包含0.01μΜ至5μΜ的所述化合物。
5.权利要求1的方法,其中每月一次或两次向所述植物施用所述化合物。
6.用于农业的组合物,其包含至少一种具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐,
其中,
R表示由下列各项组成的组的成员:氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基C1-3烷基、杂(芳基C1-3烷基)、芳基C1-7环烷基、杂(芳基C1-7环烷基)、C1-3烷基C3-7环烷基、杂(C1-3烷基C3-7环烷基),
以及合适的赋形剂或载体。
7.权利要求6的组合物,其中式I至V的化合物处于0.01μΜ至5μΜ的范围内。
8.权利要求7的组合物,其特征在于,向所述植物施用所述组合物以用于治疗由待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”所引起的疾病。
9.具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐用于在植物中刺激天然防御和诱导对于疾病的抗性的用途,
其中,
R表示由下列各项组成的组的成员:氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基C1-3烷基、杂(芳基C1-3烷基)、芳基C1-7环烷基、杂(芳基C1-7环烷基)、C1-3烷基C3-7环烷基、杂(C1-3烷基C3-7环烷基)。
10.权利要求9的用途,其中所述疾病由从由下列各项组成的组中选择的植物病原体引起:细菌、卵菌、真菌和线虫。
11.权利要求10的用途,其中所述植物病原体为待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”。
12.具有由式I至V之一所表示的结构的化合物或其盐在制备用于预防性或治愈性治疗植物疾病的组合物中的用途,
其中,
R表示由下列各项组成的组的成员:氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、芳基、杂芳基、芳基C1-3烷基、杂(芳基C1-3烷基)、芳基C1-7环烷基、杂(芳基C1-7环烷基)、C1-3烷基C3-7环烷基、杂(C1-3烷基C3-7环烷基)。
13.权利要求12的用途,其中所述疾病由从由下列各项组成的组中选择的植物病原体引起:细菌、卵菌、真菌和线虫。
14.权利要求13的用途,其中所述植物病原体为待定的细菌“亚洲韧皮部杆菌”。
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