CN108112476B - 一种金心也门铁组织培养快速繁殖方法 - Google Patents

一种金心也门铁组织培养快速繁殖方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种金心也门铁组织培养快速繁殖方法，以金心也门铁的茎段、侧芽作为组织培养的外植体，经过外植体预处理与消毒、外植体出芽诱导、快速繁殖、丛生芽壮苗培养、生根培养和炼苗移栽获得了大量的保持母本优良性状的金心也门铁。本发明的有益果是通过在外植体消毒液中添加吐温提高了外植体出芽诱导成功率和移栽成活率，通过壮苗培养提高了生根培养的生根率，满足了市场对金心也门铁的大量需求。

Description

一种金心也门铁组织培养快速繁殖方法
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，具体地涉及金心也门铁组织培养快速繁殖方法。
背景技术
龙血树，又被称之为：流血之树、活血圣药、植物寿星。主要分布于东南亚的柬埔寨、老挝、越南等地；国内主要分布在云南南部和广西南部海拔250-1700m的热带，亚热带石灰岩山地。龙血树性喜高温多湿，喜光，不耐寒，温度过低，因根系吸水不足，叶尖及叶缘会出现黄褐色斑块。树株形优美规整，叶形叶色多姿多彩，具有很高的观赏价值，为现代室内装饰的优良观叶植物。
近年来，国内关于龙血树繁殖的研究主要集中在海南龙血树、剑叶龙血树等。中国热带农业科学院热带生物技术研究所，以海南龙血树的顶芽和侧芽作为外植体，将其进行腋芽萌发诱导、丛芽萌发诱导、继代增殖培养、壮苗生根培养获得了移栽成活率高达98％的海南龙血树植株。中国专利公布CN103548694A选取剑叶龙血树的种子作为外植体，经过种子萌发获得无菌试管苗、试管苗丛生芽快速繁殖培养、丛生芽壮苗培养、健壮植株生根培养、炼苗移栽，获得了95％的生根率和90％的移栽成活率。
也门铁Dracaena fragrans，是龙舌兰科Agavaceae龙血树Dracaena常绿乔木，原产于几内亚。市场上以普通也门铁、金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana、扭纹铁和金心扭纹铁四品种最为流行。其中，金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana宽带状叶聚生茎干上部，革质富光泽，叶片中央有一金黄色宽条纹，两边绿色，是一种优良的双叶植物，植株美观大方，叶色鲜亮，置于室内光线一般处可摆6个月到两年，能吸收甲醛、苯等有害气体，是室内摆设装饰的良好选择，目前市场需求量大。
华南林业大学研究了金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana和普通也门铁的组织培养方法：选取各品种的嫩茎作为外植体进行了茎段不定芽诱导培养、不定芽增殖培养、不定芽壮苗培养和生根培养获得幼苗，并对幼苗进行了炼苗与移栽。但是，各品种的不定芽诱导发芽率均较低，其中，金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana不定芽诱导的发芽率最高为50.1％,普通也门铁的不定芽诱导发芽率仅为49.3％。湖南农业大学也选取了金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana的嫩茎进行了包含启动培养、分化培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养和炼苗与移栽的离体组织培养，培养过程中发现金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana嫩茎的培养启动和不定芽分化受激素浓度影响特别大，只有严格控制启动培养过程中的激素浓度才能获得较高的嫩茎组培的启动率和不定芽分化率，而且移栽时对基质种类要求较高。
发明内容
本发明提供了一种能够在短时间内大量繁殖金心也门铁Dracaena fragranscv.massangeana的方法。该方法不仅诱导发芽率高一次性繁殖数量多，而且变异性小、受环境影响小、移栽成活率高，能够低成本的满足市场对金心也门铁Dracaena fragranscv.massangeana的需求。
解释说明：
1、本发明中出现在培养基之后的“+”(例如“MS培养基+6-BA+SU+CAR”)表示该培养基包含、包括或含有“+”之后所列举的一种或多种物质(例如上述6-BA、SU和CAR)；例如“MS培养基+6-BA+SU+CAR”指该MS培养基包含、包括或含有6-BA、SU和CAR。
2、本发明中，6-BA是细胞分裂素6-卞氨基腺嘌呤的缩写。
3、本发明中，SU是蔗糖的缩写。
4、本发明中，CAR是卡拉胶的缩写。
5、本发明中，IBA是人工合成生长素乙哚丁酸的缩写。
6、本发明中，NAA是生长素类似物萘乙酸的缩写。
7、本发明中，IAA是植物体内普遍存在的内源生长素吲哚乙酸的缩写。
8、本发明中，CA是活性炭的缩写。
9、本发明中MS’培养基是指将MS培养基中硝酸钾和硝酸铵的量减半。
10、本发明中用到的MS培养基的配方为：
本发明提供的技术方案是一种金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)外植体预处理与消毒：选取金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana的茎段或侧芽作为外植体，用加有吐温的消毒液进行消毒；
(2)外植体出芽诱导：将经过步骤(1)消毒处理的茎段或侧芽外植体切成带芽生长点的小段接种到诱导培养基上进行侧芽诱导培养，得到新生侧芽，将得到的新生侧芽切下，转接种到新鲜的诱导培养基进行丛芽诱导培养，得到丛生芽团块苗；
(3)快速繁殖：将步骤(2)得到的丛生芽团块苗切成小团块接种于增殖培养基1上进行增殖扩繁培养，当扩繁至5-6代后，将增殖培养基1换为增殖培养基2继续进行增值扩繁培养，得到扩繁团块苗；
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)得到的扩繁团块苗切成小团块接种至壮苗培养基上进行壮苗培养得到壮苗；
(5)生根培养：将步骤(4)得到壮苗切开接种到生根培养基上进行生根诱导培养，得到生根幼苗；
(6)炼苗移栽：将生根幼苗进行炼苗，之后取出幼苗清洗幼苗根部的培养基，用质量浓度10-25％的百菌清洗液清洗1-5min，置于移栽基质中进行移栽培养。
优选的，所述步骤(1)中选用的茎段外植体是除去侧芽和凸起的茎段，接种之前将其切成1.0-2.0cm的小段；选用的侧芽外植体直径在0.8-2.5cm之间。
优选的，所述步骤(1)中先用剪刀剪去茎段上的叶片主体，再在叶片与茎干的交界线上方1-3cm处环割叶片，将叶片彻底除去，之后用质量体积百分比为0.1％的HgCl2溶液(含有体积百分比为0.1-0.6％的吐温)进行消毒。
优选的，所述步骤(1)中直径大于1.5cm的上部茎段外植体消毒时间为8～16min；直径大于1.5cm的下部茎段外植体消毒消毒时间为13～21min；直径在1cm左右的小嫩芽茎段消毒时间为8～16min。
优选的，所述步骤(2)使用的诱导培养基为组成为MS培养基+1.0-5.0mg/L的6-BA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且诱导培养基的pH为5.5-6.8。
优选的，所述步骤(3)使用的增殖培养基1为MS培养基+1.0-5.0mg/L的6-BA+0.01-0.05mg/L的NAA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且增殖培养基1的pH为5.5-6.8。
优选的，在所述步骤(3)中使用的增殖培养基2为MS培养基+0.1-2.0mg/L的6-BA+0.01-0.05mg/L的NAA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且增殖培养基2的pH为5.5-6.8。
优选的，所述步骤(4)中选用的壮苗培养基可以为以下两种中的任意一种：MS培养基+0-1.0mg/L的6-BA+0.1-1.0mg/L的IAA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8；或MS培养基+0.5-2.5g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8。
优选的，所述步骤(5)选用的生根培养基可以为以下两种中的任意一种：MS’培养基+0.1-2.0mg/L的IBA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8；或MS’培养基+0.5-2.0g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8。
优选的，所述步骤(2)-(5)的培养温度为24-28℃，光照强度1500-3000lx，光照时间为12h/d。
优选的，所述步骤(6)中的移栽基质为泥炭、泥炭+珍珠岩、椰糠+珍珠岩、泥炭藓或椰糠+珍珠岩+泥炭藓中的一种。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)在植物品种选择上，虽然现有技术中有关于龙血树繁殖的记载，但是关于金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana人工繁殖的记录较少。本发明记载的方法，实现了金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana的快速大量繁殖，能够低成本的满足市场对金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana的观赏需求。
(2)在组织培养步骤上，本发明在外植体生根诱导之前进行了壮苗培养，极大的提高了植株的生根率，本发明生根培养的生根率为100％。
(3)在外植体选择上，本发明采用金心也门铁Dracaena fragranscv.massangeana的茎段或侧芽直接诱导生芽，无愈伤组织诱导及愈伤组织分化诱导，可以保持母本的优良性状，有利于将观赏价值高的母本快速扩繁。
(4)在外植体处理上，消毒用的质量体积百分比为0.1％的HgCl2中加入了体积百分比为0.1-0.6％的吐温有助于提高外植体诱导发芽的成功率和移栽成活率。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图说明：
图1为完全切去叶片的外植体；
图2为经过壮苗培养的壮苗；
图3为可出货的生根幼苗。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供的繁殖方法中，移栽可以采用本领域常规使用的任何移栽基质，例如泥炭、泥炭+珍珠岩、椰糠+珍珠岩、泥炭藓或椰糠+珍珠岩+泥炭藓中的一种；以下实施例为了和现有技术对比，均采用泥炭藓作为移栽基质。
本发明提供的繁殖方法步骤(6)中炼苗可以为在自然光照射下炼苗7d或在温度为24-28℃，光照强度为1500-3000lx，光照时间为12h/d的育苗条件下炼苗3d。
本发明的培养温度为24-28℃，光照强度为1500-3000lx，光照时间为12h/d。
基础实施例一种金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)外植体预处理与消毒：选取金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana除去侧芽和凸起的茎段或直径在0.8-2.5cm之间的侧芽作为外植体，先用剪刀剪去茎段上的叶片主体，再在叶片与茎干的交界线上方1-3cm处环割叶片，将叶片彻底除去，完全除去叶片的外植体如图1所示，之后用质量体积百分比为0.1％的HgCl2溶液(含有体积百分比为0.3％的吐温)进行消毒，消毒时间为15min；
(2)外植体出芽诱导：将经过步骤(1)消毒处理的茎段或侧芽外植体切成带芽生长点的小段，之后将其接种到诱导培养基上进行侧芽诱导得到新生侧芽，将得到的新生侧芽切下，转接种到新鲜的诱导培养进行丛芽诱导，得到丛生芽团块苗；所用诱导培养基为：MS培养基+1.0-5.0mg/L的6-BA+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR，且其诱导培养基pH为6.2；
(3)快速繁殖：将步骤(2)得到的丛生芽团块苗切成小团块接种于增殖培养基1上进行增殖扩繁，当扩繁进行到第5-6代后，改用增殖培养基2，扩繁培养得到的是扩繁团块苗；所用增殖培养基1为MS培养基+1.0-5.0mg/L的6-BA+0.01-0.05mg/L的NAA+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR，且增殖培养基1的pH为6.2；增殖培养基2为MS培养基+0.1-2.0mg/L的6-BA+0.01-0.05mg/L的NAA+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR，且增殖培养基2的pH为6.2；
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)得到的扩繁团块苗切成小团块接种至壮苗培养基上进行壮苗培养得到壮苗，经过壮苗培养的壮苗如图2所示。选用的壮苗培养基为以下两种的任意一种：MS培养基+0-1.0mg/L的6-BA+0.1-1.0mg/L的IAA+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR或MS培养基+0.5-2.5g/L的AC+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR，且两种壮苗培养基的pH均为6.2；
(5)生根培养：将步骤(4)得到的壮苗切开接种到生根培养基上进行生根诱导，得到生根幼苗，为可出货的生根幼苗，如图3所示。选用的生根培养基为以下培养基中的任意一种：MS’培养基+0.1-2.0mg/L的IBA+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR或MS’培养基+0.5-2.0g/L的AC+20-40g/L的SU+4.5-7.5g/L的CAR，这两种培养基的pH均为6.2；
(6)炼苗移栽：将生根幼苗连同培养容器移至室温自然光下炼苗7d，之后取出幼苗清洗幼苗根部的培养基，用质量浓度20％的百菌清洗液清洗3min，置于泥炭藓移栽基质中进行移栽培养。
通过进一步确定基础实施例中的关键参数，得到了表1-7中的实施例1-25和表2中的对比例1。
以下表格中的“Y”指使用此成分，“N”指未使用此成分。
根据选用外植体种类的不同，设置了表1中的实施例1-3。表1中的数据显示，在其他实验条件相同的情况下，侧芽外植体的发芽率＞上部茎段外植体的发芽率＞侧芽外植体的发芽率。所以侧芽外植体更适合进行金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana组织培养，侧芽外植体的发芽率高达100％。
表1
根据消毒过程中质量体积百分比为0.1％的HgCl2溶液中添加吐温的种类不同，设置了表2中的实施例4-7和对比例1。在消毒过程中，往质量分数为0.1％的HgCl2溶液添加吐温的实施例4-7的发芽率明显高于消毒过程中不添加吐温的对比例1的发芽率，这说明在消毒过程中添加吐温有利于提高金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana组织培养的发芽率。进一步对比实施例4-7的发芽率，可以发现，吐温80对发芽率的提升作用最明显，其次是吐温20。消毒过程中，吐温的加入也有利于提高外植体移栽的成活率，吐温的加入将外植体的移栽成活率由80％提高到99％。
表2
根据诱导培养基中添加6-BA的量的不同，设置了表3中的实施例8-11。表3中的数据显示，随着6-BA添加浓度的升高，诱导培养的发芽率逐渐升高，当6-BA的浓度增加到3.0mg/L时，诱导发芽率达到100％,继续增加6-BA的浓度时，芽体出现轻微变形，所以金心也门铁Dracaena fragrans cv.massangeana诱导培养中6-BA的适宜浓度是3.0mg/L。
表3
根据增殖培养基中激素浓度的不同，设置了表4中的实施例12-15，6-BA和NAA浓度过低，扩繁增殖慢，植株高大，成苗少；6-BA和NAA浓度过高，扩繁速度快，苗丛生能力强，但是植株矮，成苗数量少。进一步对比实施例13和实施例14可以发现，当繁殖至5-6时，如果不降低增殖培养基中6-BA的浓度，保持增殖培养基2中6-BA的浓度和增殖培养基1中6-BA的浓度相同，会出现苗丛生能力特别强，植株不够高，成苗较少，部分芽上长出无效愈伤组织的现象，而且叶片全黄，已经不是最初绿边黄心的金心也门铁Dracaena fragranscv.massangeana了。所以增殖培养步骤适合综合使用增殖培养基1和增殖培养基2，其中，增殖培养基1是MS培养基+2.0mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR；增殖培养基2是MS培养基+0.5mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR。
表4
根据壮苗培养的不同，设置了表5和表6中的实施例16-21。表5和表6中的数据显示，MS培养基+0-1.0mg/L的6-BA+0.1-1.0mg/L的IAA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR和MS培养基+0.5-2.5g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR这两种培养基对壮苗培养结果没有明显影响，且上述培养基中，6-BA、IAA和AC含量在限定的范围内波动，对壮苗培养的结果也没有明显影响。
表5
表6
根据生根培养基的不同，设置了表7中的实施例22-25。表7中的数据显示，MS’培养基+0.1-2.0mg/L的IBA+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR和MS’培养基+0.5-2.0g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR这两种培养基对幼苗生根状态没有明显影响。
表7
对比例2
为了验证壮苗培养过程对组培生根率的影响，设置了实施例22的对照实验。
(1)外植体预处理与消毒：选取生长健壮、无病虫害、遗传性状纯正的母株，放置于干燥通风处晾干茎叶部分，不浇水，防淋雨，使茎叶部分干爽，之后选取有生机的直径1.5cm长度为1.0cm的侧芽作为外植体，切割除去叶片，叶片切割完成后，小侧芽外植体的形态如图1左侧所示，对切割完成的外植体用质量体积百分比为0.1％的HgCl2溶液(含有体积百分比为0.3％的吐温80)消毒15min；
(2)外植体出芽诱导：将消毒后的侧芽外植体插入到诱导培养基中，插入深度为3mm，每瓶接种一个外植体。侧芽外植体萌发新侧芽，此过程中新侧芽的萌发率为100％。将新侧芽切下，转接到新鲜的培养基中，如此转接2-3代之后，得到具有丛生芽的团块苗；此步骤中所用的培养基为MS培养基+3.0mg/L的6-BA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且诱导培养基的pH值为6.2；培养条件为温度25℃，光照强度1500-3000lx，光照时间12h/d，若此过程中出现全黄或全绿变异苗，需扔弃掉；
(3)快速繁殖:将步骤(2)获得的具有丛生芽的团块苗切成小团块，进行增殖扩繁得到扩繁团块苗，初步扩繁使用增殖培养基1，扩繁至5-6代时，使用增殖培养基2；其中，增殖培养基1为MS培养基+2.0mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增值培养基1的pH值为6.2，增殖培养基2为MS培养基+0.5mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增值培养基1的pH值为6.2；培养条件为温度25℃，光照强度1500-3000lx，光照时间12h/d，若此过程中出现全黄或全绿变异苗，仍需扔弃掉；
(4)生根培养：将步骤(3)得到的扩繁团块苗切成小团块进行生根诱导得到生根幼苗；选用的生根培养基为MS’+0.5mg/L的IBA+30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且生根培养基的pH为6.2；培养条件为温度25℃，光照强度1500-3000lx，光照时间12h/d；经过30d的生根培养，生根率为85％。远低于实施例22中100％的生根率。
(5)炼苗移栽：将生根幼苗连同培养容器移至室温自然光下炼苗7d，之后取出幼苗清洗幼苗根部的培养基，用质量浓度10-25％的百菌清洗液清洗1-5min，置于泥炭藓移栽基质中进行移栽培养。

Claims (5)

1.一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体预处理与消毒：选取金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana的茎段或侧芽作为外植体，用含有HgCl2和吐温的消毒液进行消毒，消毒液中HgCl2的质量体积百分比为0.1%，吐温的体积百分比为0.1-0.6%；
（2）外植体出芽诱导：将经过步骤（1）消毒处理的茎段或侧芽外植体切成带芽生长点的小段接种到诱导培养基上进行侧芽诱导培养，得到新生侧芽，将得到的新生侧芽切下，转接种到新鲜的诱导培养基进行丛芽诱导培养，得到丛生芽团块苗；
（3）快速繁殖：将步骤（2）得到的丛生芽团块苗切成小团块接种于增殖培养基1上进行增殖扩繁培养，当扩繁至5-6代后，将增殖培养基1换为增殖培养基2继续进行增殖扩繁培养，得到扩繁团块苗；
（4）丛生芽壮苗培养：将步骤（3）得到的扩繁团块苗切成小团块接种至壮苗培养基上进行壮苗培养得到壮苗；
（5）生根培养：将步骤（4）得到壮苗切开接种到生根培养基上进行生根诱导培养，得到生根幼苗；
（6）炼苗移栽：将生根幼苗进行炼苗，之后取出幼苗清洗幼苗根部的培养基，用质量浓度10-25%的百菌清洗液清洗1-5min，置于移栽基质中进行移栽培养；
所述步骤（2）使用的诱导培养基为组成为MS培养基+3.0mg/L的6-BA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且诱导培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；
所述步骤（3）使用的增殖培养基1为MS培养基+2.0mg/L的6-BA+0.01mg/L的NAA +30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增殖培养基1的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；
在所述步骤（3）中使用的增殖培养基2为MS培养基+0.5mg/L的6-BA +0.01mg/L的NAA +30g/L的SU+5.5g/L的CAR，且增殖培养基2的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；
所述步骤（4）中选用的壮苗培养基可以为以下两种中的任意一种：MS培养基+0-1.0mg/L的6-BA+0.1-1.0mg/L的IAA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8；或MS培养基+0.5-2.5g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且壮苗培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写；
所述步骤（5）选用的生根培养基可以为以下两种中的任意一种： MS’培养基+0.1-2.0mg/L的IBA +20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8；或MS’培养基+0.5-2.0g/L的AC+20-40g/L的SU+4-8g/L的CAR，且生根培养基的pH为5.5-6.8，其中SU是蔗糖的缩写，CAR是卡拉胶的缩写,MS’培养基是指将MS培养基中硝酸钾和硝酸铵的量减半。
2.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中选用的茎段外植体是除去侧芽和凸起的茎段，接种之前将其切成1.0-2.0cm的小段；选用的侧芽外植体直径在0.8-2.5cm之间。
3.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中先用剪刀剪去茎段上的叶片主体，再在叶片与茎干的交界线上方1-3cm处环割叶片，将叶片彻底除去，之后用含有HgCl2和吐温的消毒液进行消毒，消毒液中HgCl2的质量体积百分比为0.1%，吐温的体积百分比为0.1-0.6%。
4.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中直径大于1.5cm的上部茎段外植体消毒时间为8～16min；直径大于1.5cm的下部茎段外植体消毒时间为13～21min；直径在1cm左右的小嫩芽茎段消毒时间为8～16min。
5.根据权利要求1所述的一种金心也门铁Dracaena fragrans cv. massangeana组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（2）-（5）的培养温度为24-28℃，光照强度 1500-3000lx，光照时间为12h/d。
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