CN108060198A - 利用鹿胎制备的活性多肽 - Google Patents

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    • C12P21/00Preparation of peptides or proteins
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Abstract

本发明公开了利用鹿胎制备的活性多肽,其制备过程包括脱脂鹿胎的制备,酶解液的制备以及活性多肽的制备。有益效果为:本发明所公布的活性多肽分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。

Description

利用鹿胎制备的活性多肽
技术领域
本发明属于生物工程领域,尤其是涉及利用鹿胎制备的活性多肽。
背景技术
鹿胎指母鹿腹中的带胎衣、胎水的胎儿,或体表无毛、空腹、体内各器官已经发育完整,但是由于机械等原因造成流产的胎儿或产后因缺乳、母鹿拒哺、恶癖等原因死亡的幼鹿。现代生物学及医学研究证明,胎盘中均含有多种免疫球蛋白、活性肽、激素等生物活性物质及氨基酸、矿物质等成分,是一种较为理想的免疫调节剂和营养美容保健品。虽然,我国在利用动物组织器官及代谢产物进行治病、防病方面有着悠久的历史。但是,国内外对于羊胎、牛胎、猪胎等的研究较为深入,而对于鹿胎的研究较少。
发明内容
本发明的目的是提供利用鹿胎制备的活性多肽,其制备方法简单,所得的多肽分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
为了达到上述目的本发明提供的技术方案为:利用鹿胎制备的活性多肽,其制备方法包括以下步骤:
脱脂鹿胎的制备:取鹿胎,粉碎,按料液比1g/5-7mL加入丙酮,搅拌3-4h,过滤,所得滤饼经干燥粉碎得脱脂鹿胎,该条件下,利用丙酮脱脂可除去鹿胎中的胆固醇,由此降低了所制备的活性多肽对人体的危害;
酶解液的制备:向2-5份脱脂鹿胎中加入35-45份水,调pH至7-9,加热至90-95℃保持30-40min,接着降温至55-60℃,加入占脱脂鹿胎质量3%-5%的巯基蛋白酶反应2-6h,然后再加入占脱脂鹿胎质量2%-5%的木瓜蛋白酶,在45-55℃,pH为8的条件下水解7-10h,反应结束后灭酶活,过滤取上清液,得酶解液,该条件下,采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解,所得到的活性多肽分子量小,与蛋白质相比,更易消化吸收,同时致敏性低,扩大了其在医药食品中的应用;提高了其在等电点时的溶解度,增加了其在高离子强度下的稳定性,可用于食品的蛋白质强化;酶解也降低了产品的粘度,改变了其流变性质,方便了对其进行加工制造;且过程中没有有害物质的混入,对人体的健康没有任何不良影响,属于健康绿色生产工艺;
活性多肽的制备:将酶解液以9-10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂,接着以9-10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂,向所得洗脱液中加入占上清液质量7%-12%的β-环状猢精,所得物即为活性多肽,该条件下,所制备的活性多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力,预防肿瘤、美容、养眼等多种功效,对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性,且分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:利用丙酮脱脂可除去鹿胎中的胆固醇,由此降低了所制备的活性多肽对人体的危害;采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解,所得到的活性多肽分子量小,与蛋白质相比,更易消化吸收,同时致敏性低,扩大了其在医药食品中的应用;提高了其在等电点时的溶解度,增加了其在高离子强度下的稳定性,可用于食品的蛋白质强化;酶解也降低了产品的粘度,改变了其流变性质,方便了对其进行加工制造;且过程中没有有害物质的混入,对人体的健康没有任何不良影响,属于健康绿色生产工艺;所制备的活性多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力,预防肿瘤、美容、养眼等多种功效,对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性,且分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
具体实施方式
以下通过实施例进一步详细描述:
实施例1:利用鹿胎制备的活性多肽,其制备方法包括以下步骤:
1)脱脂鹿胎的制备:取鹿胎,粉碎,按料液比1g/5mL加入丙酮,搅拌3h,过滤,所得滤饼经干燥粉碎得脱脂鹿胎,该条件下,利用丙酮脱脂可除去鹿胎中的胆固醇,由此降低了所制备的活性多肽对人体的危害;
2)酶解液的制备:向2份脱脂鹿胎中加入35份水,调pH至7,加热至90℃保持30min,接着降温至55℃,加入占脱脂鹿胎质量3%的巯基蛋白酶反应2h,然后再加入占脱脂鹿胎质量2%的木瓜蛋白酶,在45℃,pH为8的条件下水解7h,反应结束后灭酶活,过滤取上清液,得酶解液,该条件下,采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解,所得到的活性多肽分子量小,与蛋白质相比,更易消化吸收,同时致敏性低,扩大了其在医药食品中的应用;提高了其在等电点时的溶解度,增加了其在高离子强度下的稳定性,可用于食品的蛋白质强化;酶解也降低了产品的粘度,改变了其流变性质,方便了对其进行加工制造;且过程中没有有害物质的混入,对人体的健康没有任何不良影响,属于健康绿色生产工艺;
3)活性多肽的制备:将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂,接着以9倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂,向所得洗脱液中加入占上清液质量7%的β-环状猢精,所得物即为活性多肽,该条件下,所制备的活性多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力,预防肿瘤、美容、养眼等多种功效,对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性,且分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
实施例2:利用鹿胎制备的活性多肽,其制备方法包括以下步骤:
1)脱脂鹿胎的制备:取鹿胎,粉碎,按料液比1g/7mL加入丙酮,搅拌4h,过滤,所得滤饼经干燥粉碎得脱脂鹿胎,该条件下,利用丙酮脱脂可除去鹿胎中的胆固醇,由此降低了所制备的活性多肽对人体的危害;
2)酶解液的制备:向5份脱脂鹿胎中加入45份水,调pH至9,加热至95℃保持40min,接着降温至60℃,加入占脱脂鹿胎质量5%的巯基蛋白酶反应6h,然后再加入占脱脂鹿胎质量5%的木瓜蛋白酶,在55℃,pH为8的条件下水解10h,反应结束后灭酶活,过滤取上清液,得酶解液,该条件下,采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解,所得到的活性多肽分子量小,与蛋白质相比,更易消化吸收,同时致敏性低,扩大了其在医药食品中的应用;提高了其在等电点时的溶解度,增加了其在高离子强度下的稳定性,可用于食品的蛋白质强化;酶解也降低了产品的粘度,改变了其流变性质,方便了对其进行加工制造;且过程中没有有害物质的混入,对人体的健康没有任何不良影响,属于健康绿色生产工艺;
3)活性多肽的制备:将酶解液以10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂,接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂,向所得洗脱液中加入占上清液质量12%的β-环状猢精,所得物即为活性多肽,该条件下,所制备的活性多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力,预防肿瘤、美容、养眼等多种功效,对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性,且分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
实施例3:利用鹿胎制备的活性多肽,其制备方法包括以下步骤:
1)脱脂鹿胎的制备:取鹿胎,粉碎,按料液比1g/6mL加入丙酮,搅拌4h,过滤,所得滤饼经干燥粉碎得脱脂鹿胎,该条件下,利用丙酮脱脂可除去鹿胎中的胆固醇,由此降低了所制备的活性多肽对人体的危害;
2)酶解液的制备:向3份脱脂鹿胎中加入37份水,调pH至8,加热至93℃保持34min,接着降温至57℃,加入占脱脂鹿胎质量5%的巯基蛋白酶,再加入占脱脂鹿胎质量1‰普鲁兰多糖的以及脱脂鹿胎质量0.3‰的2,4-己二烯酸,反应3h,接着加入占脱脂鹿胎质量2%的木瓜蛋白酶,在48℃,pH为8的条件下水解8h,反应结束后灭酶活,过滤取上清液,得酶解液,所加入的2,4-己二烯酸、普鲁兰多糖具有协同作用,增强了巯基蛋白酶所含有的半胱氨酸的活性,提高了其催化水解肽键的能力,降低了酶解所得的活性多肽的分子量,提高了其经济效益;
3)活性多肽的制备:将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂,接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂,向所得洗脱液中加入占上清液质量12%的β-环状猢精,所得物即为活性多肽,该条件下,所制备的活性多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力,预防肿瘤、美容、养眼等多种功效,对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性,且分子量小,纯度高,利于人体吸收,可直接使用,具有显著的经济效益。
以上实施方式仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,本领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以做出各种变化和变型。因此,所有等同的技术方案也属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (6)

1.利用鹿胎制备的活性多肽,其制备过程包括脱脂鹿胎的制备,酶解液的制备以及活性多肽的制备,其特征在于:所述酶解液的制备过程为:向脱脂鹿胎中加入35-45份水,调pH至7-9,加热至90-95℃保持30-40min,接着降温至55-60℃,加入巯基蛋白酶反应,然后再加入木瓜蛋白酶,在45-55℃,pH为8的条件下反应,反应结束后灭酶活,过滤取上清液,得酶解液。
2.根据权利要求1所述的利用鹿胎制备的活性多肽,其特征在于:所述脱脂鹿胎的制备过程为:取鹿胎,粉碎,加入丙酮,搅拌3-4h,过滤,所得滤饼经干燥粉碎得脱脂鹿胎。
3.根据权利要求1所述的利用鹿胎制备的活性多肽,其特征在于:所述活性多肽的制备过程为:将酶解液以9-10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂,接着以9-10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂,向所得洗脱液中加入占上清液质量7%-12%的β-环状猢精,所得物即为活性多肽。
4.根据权利要求1所述的利用鹿胎制备的活性多肽,其特征在于:所述巯基蛋白酶的加入量占脱脂鹿胎质量的3%-5%,巯基蛋白酶反应时间为2-6h。
5.根据权利要求1所述的利用鹿胎制备的活性多肽,其特征在于:所述木瓜蛋白酶的加入量占脱脂鹿胎质量的2%-5%,木瓜蛋白酶反应时间为7-10h。
6.根据权利要求2所述的利用鹿胎制备的活性多肽,其特征在于:所述鹿胎与丙酮的料液比为1g/5-7mL。
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