CN107961228A - 一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊制备方法及微胶囊 - Google Patents

一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊制备方法及微胶囊 Download PDF

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Abstract

一种海藻酸钠‑壳聚糖P‑VP8*IgY微胶囊的制备方法,包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠‑壳聚糖P‑VP8*IgY溶液微胶囊。其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P‑VP8*IgY溶液混合得到混合液A。混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。该海藻酸钠‑壳聚糖P‑VP8*IgY微胶囊的微胶囊囊材为海藻酸钠和壳聚糖，内核为P‑VP8*IgY。呈球形，平均粒径2～5mm。该微胶囊的制备方法的有益效果是制备工艺简单，得到的微胶囊能保护特异性P‑VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。

Description

一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊制备方法及微胶囊
技术领域
本发明涉及海藻酸钠-壳聚糖微胶囊制备领域，特别涉及一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊制备方法及微胶囊。
背景技术
诺如病毒(NoV)和轮状病毒(RV)是导致病毒性胃肠炎的两种最主要病原体，至今尚无特异性的抗NoV药物和疫苗，更没有任何一种特异性药物可以同时防治NoV和RV感染。鸡卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulin of Yolk，IgY)具有抗体产量大，成本低廉、分子稳定性好、所需抗原量小等优点，目前IgY口服制剂已成为具有广阔应用前景的抗生素替代品。NoV P颗粒嵌合RV表面抗原VP8*的P-VP8*蛋白，经免疫来航鸡制备纯化出特异性P-VP8*IgY，研究证实P-VP8*IgY能有效阻断NoV与HBGA受体结合，并对RV Wa株感染MA104细胞具有抑制作用。
尽管IgY抗体具有一定的耐酸性，但在成人高强度的胃酸环境中容易被胃蛋白酶降解，从而失去部分抗体活性。因此直接口服P-VP8*IgY难以产生有效的抗病毒效果。
因此针对现有技术不足，提供一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊及其制备方法以解决P-VP8*IgY在小肠中定点缓释甚为必要。
发明内容
本发明的目的之一在于避免现有技术的不足之处而提供一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊制备方法。该制备方法具有简单的优点。
本发明提供一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P-VP8*IgY溶液混合得到混合液A。
混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。
混合液A、混合液B的混合具体是：加入酸碱调节剂至混合液B，调节混合液B的pH值为4～7，再将混合液A滴入混合液B，以搅拌速度为150～250r/min进行匀速搅拌，然后过滤，再于15～30℃干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
进一步，混合液A、混合液B的混合具体是：加入酸碱调节剂至混合液B，并调混合液B节pH值至5.5，再将混合液A装入注射器中且注射器配9号针头再滴入混合液B，以搅拌速度为200r/min进行搅拌，然后过滤，并于室温干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
优选的，上述P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为1/4～1/1。
优选的，上述P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为2/3；
在混合液A中，海藻酸钠的质量分数为2.0～3.5％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为1.5～3.5％；
在所述混合液B中，所述壳聚糖的质量分数为0.2～0.5％；
在混合液A中，所述P-VP8*IgY的浓度为8～15mg/ml。
进一步，在所述混合液A中，海藻酸钠的质量分数为3.0％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为2.0％；
在所述混合液B中，壳聚糖的质量分数为0.4％；
在所述混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为10mg/ml。
优选的，上述酸碱调节剂为稀盐酸溶液。
本发明另一发明目的是提供一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊，该微胶囊囊材为海藻酸钠和壳聚糖，内核为P-VP8*IgY。该微胶囊呈球形，平均粒径2～5mm。该微胶囊具有不被胃酸环境破坏和较好的缓释作用的特点，而且该微胶囊能在小肠中定点缓释。
本发明的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法,包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P-VP8*IgY溶液混合得到混合液A。混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。该海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的微胶囊囊材为海藻酸钠和壳聚糖，内核为P-VP8*IgY。呈球形，平均粒径2～5mm。该微胶囊的制备方法的有益效果是制备工艺简单，得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。该微胶囊的包封率可达85％。制备的微胶囊在胃液2h后的释放率为7％，肠液6h后的释放率高达86％，且生物活性良好。
附图说明
利用附图对本发明作进一步的说明，但附图中的内容不构成对本发明的任何限制。
图1为本发明的实施例2制得的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊显微镜图片。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P-VP8*IgY溶液混合得到混合液A。
混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。
混合液A、混合液B的混合具体是：加入酸碱调节剂至混合液B，调节混合液B的pH值为4～7，再将混合液A滴入混合液B，以搅拌速度为150～250r/min进行匀速搅拌，然后过滤，再于15～30℃干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
混合液A、混合液B的混合具体优选是：加入酸碱调节剂至混合液B，并调混合液B节pH值至5.5，再将混合液A装入注射器中且注射器配9号针头再滴入混合液B，以搅拌速度为200r/min进行搅拌，然后过滤，并于室温干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为1/4～1/1。
本发明的优选的P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为2/3。
在混合液A中，海藻酸钠的质量分数为2.0～3.5％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为1.5～3.5％；
在所述混合液B中，所述壳聚糖的质量分数为0.2～0.5％；
在混合液A中，所述P-VP8*IgY的浓度为8～15mg/ml。
本发明优选的,在所述混合液A中，海藻酸钠的质量分数为3.0％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为2.0％；
在所述混合液B中，壳聚糖的质量分数为0.4％；
在所述混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为10mg/ml。
酸碱调节剂为稀盐酸溶液。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法,包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P-VP8*IgY溶液混合得到混合液A。混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。该微胶囊的制备方法的有益效果是制备工艺简单，所制备的微胶囊包封率好，制得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
实施例2。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将原始浓度25mg/ml的P-VP8*IgY溶液、海藻酸钠溶液按体积比为2/3混合得到混合液A，在混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为10mg/ml、海藻酸钠溶液的质量分数为3.0％。
混合液B的制备是将氯化钙加入壳聚糖溶液中混合得到混合液B,壳聚糖在混合液B中的质量分数为0.4％，氯化钙在混合液B中的质量分数为2.0％。
加入稀盐酸溶液至混合液B，调节混合液B的pH值至5.5，再将步骤一的混合液A装入注射器，注射器配9号针头再滴入混合液B中，在搅拌速度为200r/min下进行搅拌10分钟，然后过滤，再于室温干燥，得到一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
在工艺条件下制备的微胶囊大部分呈较规则球形，表面较为光滑圆整，平均粒径3mm，如图1所示，该方案的包封率最终达到85％。
本发明的壳聚糖和KH2PO4的生产商为美国sigma公司；海藻酸钠和氯化钙的生产商为津市大茂化学试剂厂；胃蛋白酶和胰蛋白酶的生产商为biosharp公司；高速冷冻离心机的生产商为长沙湘智离心机仪器有限公司；磁力搅拌器的生产商为上海浦江分析仪器厂；精密电子天平的生产商为丹佛仪器北京有限公司；P-VP8*IgY溶液为市售试剂。
需说明的是，本发明的海藻酸钠溶液的原始浓度和用量、氯化钙的用量和壳聚糖溶液的原始浓度和用量都可以通过计算推出，计算的方法本领域的普通技术人员应当理解，在此不作累述。
本实例方法所制备的海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊性能相较于其它参数性能更佳，尤其在小肠内的释放性能良好。微胶囊的包封率可达85％。制备的微胶囊在胃液2h后的释放率为7％，肠液6h后的释放率高达86％，且生物活性良好。
本发明的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法制备工艺简单，制得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
实施例3。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将原始浓度25mg/ml的P-VP8*IgY溶液、海藻酸钠溶液按体积比为1/4混合得到混合液A，在混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为8mg/ml、海藻酸钠溶液的质量分数为2.0％。
混合液B的制备是将氯化钙加入壳聚糖溶液中混合得到混合液B,壳聚糖在混合液B中的质量分数为0.2％，氯化钙在混合液B中的质量分数为1.5％。
加入稀盐酸溶液至混合液B，调节混合液B的pH值至4.0，再将步骤一的混合液A装入注射器，注射器配9号针头再滴入混合液B中，在搅拌速度为150r/min下进行搅拌20分钟，然后过滤，再于15℃干燥，得到一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
本发明的壳聚糖和KH2PO4的生产商为美国sigma公司；海藻酸钠和氯化钙的生产商为津市大茂化学试剂厂；胃蛋白酶和胰蛋白酶的生产商为biosharp公司；高速冷冻离心机的生产商为长沙湘智离心机仪器有限公司；磁力搅拌器的生产商为上海浦江分析仪器厂；精密电子天平的生产商为丹佛仪器北京有限公司；P-VP8*IgY溶液为实验室制备得到。
需说明的是，本发明的海藻酸钠溶液的原始浓度和用量、氯化钙的用量和壳聚糖溶液的原始浓度和用量都可以通过计算推出，计算的方法本领域的普通技术人员应当理解，在此不作累述。
本实施例的方法所制备的微胶囊在小肠内释放性能较好，且本实施例的P-VP8*IgY的浓度最低仅为8mg/ml，能减少制备的成本。同时制得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
实施例4。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将原始浓度25mg/ml的P-VP8*IgY溶液、海藻酸钠溶液按体积比为1/1混合得到混合液A，在混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为15mg/ml、海藻酸钠溶液的质量分数为3.5％。
混合液B的制备是将氯化钙加入壳聚糖溶液中混合得到混合液B,壳聚糖在混合液B中的质量分数为0.5％，氯化钙在混合液B中的质量分数为3.0％。
加入稀盐酸溶液至混合液B，调节混合液B的pH值至5.0，再将步骤一的混合液A装入注射器，注射器配9号针头再滴入混合液B中，在搅拌速度为250r/min下进行搅拌30分钟，然后过滤，再于30℃干燥，得到一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
本发明的壳聚糖和KH2PO4的生产商为美国sigma公司；海藻酸钠和氯化钙的生产商为津市大茂化学试剂厂；胃蛋白酶和胰蛋白酶的生产商为biosharp公司；高速冷冻离心机的生产商为长沙湘智离心机仪器有限公司；磁力搅拌器的生产商为上海浦江分析仪器厂；精密电子天平的生产商为丹佛仪器北京有限公司；P-VP8*IgY溶液为市售试剂。
需说明的是，本发明的海藻酸钠溶液的原始浓度和用量、氯化钙的用量和壳聚糖溶液的原始浓度和用量都可以通过计算推出，计算的方法本领域的普通技术人员应当理解，在此不作累述。
本实施例的方法所制备的微胶囊在小肠内释放性能较好，制得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
实施例5。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，包括混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将原始浓度25mg/ml的P-VP8*IgY溶液、海藻酸钠溶液按体积比为1/3混合得到混合液A，在混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为15mg/ml、海藻酸钠溶液的质量分数为3.5％。
混合液B的制备是将氯化钙加入壳聚糖溶液中混合得到混合液B,壳聚糖在混合液B中的质量分数为0.3％，氯化钙在混合液B中的质量分数为3.5％。
加入稀盐酸溶液至混合液B，调节混合液B的pH值至6.0，再将步骤一的混合液A装入注射器，注射器配9号针头再滴入混合液B中，在搅拌速度为250r/min下进行搅拌60分钟，然后过滤，再于30℃干燥，得到一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
本发明的壳聚糖和KH2PO4的生产商为美国sigma公司；海藻酸钠和氯化钙的生产商为津市大茂化学试剂厂；胃蛋白酶和胰蛋白酶的生产商为biosharp公司；高速冷冻离心机的生产商为长沙湘智离心机仪器有限公司；磁力搅拌器的生产商为上海浦江分析仪器厂；精密电子天平的生产商为丹佛仪器北京有限公司；P-VP8*IgY溶液为市售试剂。
需说明的是，本发明的海藻酸钠溶液的原始浓度和用量、氯化钙的用量和壳聚糖溶液的原始浓度和用量都可以通过计算推出，计算的方法本领域的普通技术人员应当理解，在此不作累述。
本实施例的方法所制备的微胶囊在胃液2h后的释放率5％，该微胶囊的抗胃蛋白酶的性能最佳，制得的微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
实施例6。
一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，
包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊。
其中，混合液A的制备是将原始浓度25mg/ml的P-VP8*IgY溶液、海藻酸钠溶液按体积比为2/3混合得到混合液A，在混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为10mg/ml、海藻酸钠溶液的质量分数为3.0％。
混合液B的制备是将氯化钙加入壳聚糖溶液中混合得到混合液B,壳聚糖在混合液B中的质量分数为0.4％，氯化钙在混合液B中的质量分数为3.0％。
加入稀盐酸溶液至混合液B，调节混合液B的pH值至7.0，再将步骤一的混合液A装入注射器，注射器配9号针头再滴入混合液B中，在搅拌速度为200r/min下进行搅拌120分钟，然后过滤，再于室温干燥，得到一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
本发明的壳聚糖和KH2PO4的生产商为美国sigma公司；海藻酸钠和氯化钙的生产商为津市大茂化学试剂厂；胃蛋白酶和胰蛋白酶的生产商为biosharp公司；高速冷冻离心机的生产商为长沙湘智离心机仪器有限公司；磁力搅拌器的生产商为上海浦江分析仪器厂；精密电子天平的生产商为丹佛仪器北京有限公司；P-VP8*IgY溶液为市售试剂。
需说明的是，本发明的海藻酸钠溶液的原始浓度和用量、氯化钙的用量和壳聚糖溶液的原始浓度和用量都可以通过计算推出，计算的方法本领域的普通技术人员应当理解，在此不作累述。
本实施例的方法所制备的微胶囊在肠液6h后的释放率高达86％，小肠内释放性能最好。制得微胶囊能保护特异性P-VP8*IgY选择性地在小肠内释放，从而有效到达小肠部位增强其抗病毒效果。
对本发明制得的海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的性能进行测定。实验条件如下：
包封率的测定，取海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊10mg，加入3％柠檬酸钠溶液10ml，37℃，100转/min搅拌24h使之完全溶解，1500转/min离心10min，取上清液，采用SDS-PAGE蛋白电泳法检测P-VP8*IgY，采用ELISA标准曲线法检测P-VP8*IgY蛋白质含量，计算包封率。包封率计算公式：包封率(％)＝(IgY初始质量-滤液中IgY质量)/IgY初始质量×100％。
肠液6h后的释放率的测定，称取微胶囊10mg，作用在10ml模拟肠液SGF中，37℃振荡孵育6h，100转/min离心取上清，采用ELISA标准曲线法检测P-VP8*IgY蛋白质含量。
胃液2h后的释放率的测定，称取微胶囊10mg，作用在10ml模拟胃液SGF中，37℃振荡孵育2h，100转/min离心取上清，采用ELISA标准曲线法检测P-VP8*IgY蛋白质含量。
释放率的计算方法：对应的VA387-P颗粒和VP8*检测释放液中抗体水平(OD值)，P-VP8*IgY原液作为实验对照计算其释放率。释放率＝各次取样时模拟胃液(肠液)中蛋白总量/微胶囊中包封的蛋白总量×100％。
表1为微胶囊的性能测定数据
模拟胃液(SGF)的配置：取浓度为25％的稀盐酸16.4ml，加入800mlH2O与胃蛋白酶10g，摇匀后，加H2O稀释至1000ml。
模拟肠液(SIF)的配置：称取KH2PO46.8g，加入500ml H2O使之溶解，用0.1mol/LNaOH调节pH至6.8，另取10g胰蛋白酶，加H2O适量溶解，将两种溶液混和，加水稀释至1000ml。
从上表可知，实施例2得到的海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊性能测定数据最佳，具体为包封率可达到85％，在胃液2h后的释放率为7％，肠液6h后的释放率高达86％。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于，包括，混合液A、混合液B的制备，以及将混合液A滴入混合液B中，搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY溶液微胶囊；
其中，混合液A的制备是将海藻酸钠溶液与P-VP8*IgY溶液混合得到混合液A；
混合液B的制备是将壳聚糖溶液与氯化钙混合得到混合液B。
2.根据权利要求1所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于，
混合液A、混合液B的混合具体是：加入酸碱调节剂至混合液B，调节混合液B的pH值为4～7，再将混合液A滴入混合液B，以搅拌速度为150～250r/min进行匀速搅拌，然后过滤，再于15～30℃干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
3.根据权利要求2所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于，
混合液A、混合液B的混合具体是：加入酸碱调节剂至混合液B，并调混合液B节pH值至5.5，再将混合液A装入注射器中且注射器配9号针头再滴入混合液B，以搅拌速度为200r/min进行搅拌，然后过滤，并于室温干燥，得到海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊。
4.根据权利要求3所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于：所述P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为1/4～1/1。
5.根据权利要求4所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于：所述P-VP8*IgY溶液与海藻酸钠溶液体积比为2/3。
6.根据权利要求5所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于：在混合液A中，海藻酸钠的质量分数为2.0～3.5％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为1.5～3.5％；
在所述混合液B中，所述壳聚糖的质量分数为0.2～0.5％；
在混合液A中，所述P-VP8*IgY的浓度为8～15mg/ml。
7.根据权利要求6所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于：在所述混合液A中，海藻酸钠的质量分数为3.0％；
在所述混合液B中，氯化钙的质量分数为2.0％；
在所述混合液B中，壳聚糖的质量分数为0.4％；
在所述混合液A中，P-VP8*IgY的浓度为10mg/ml。
8.根据权利要求7所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊的制备方法，其特征在于：所述酸碱调节剂为稀盐酸溶液。
9.一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊,其特征在于：微胶囊囊材为海藻酸钠和壳聚糖，内核为P-VP8*IgY。
10.根据权利要求9所述的一种海藻酸钠-壳聚糖P-VP8*IgY微胶囊,其特征在于：呈球形，平均粒径2～5mm。
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