CN107950998A - 改善血液循环的纳豆激酶组合物及其加工方法 - Google Patents

改善血液循环的纳豆激酶组合物及其加工方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种改善血液循环的纳豆激酶组合物及其加工方法，所述改善血液循环的纳豆激酶组合物包括纳豆激酶、糊精、香料、甜菊提取物、木糖醇。本发明所述改善血液循环的纳豆激酶组合物，保护心脑血管健康，可溶栓、抗凝、调压降脂肪、改善血液循环，同时组合物中的纳豆激酶可将体内尿激酶原激活为尿激酶，与纤溶酶原激活剂一同激活纤溶酶原溶解血栓，达到温和、持续溶栓目的的同时，抑制血小板凝聚。

Description

改善血液循环的纳豆激酶组合物及其加工方法
技术领域
本发明属于功能食品技术领域，具体涉及一种改善血液循环的纳豆激酶组合物及其加工方法。
背景技术
纳豆是日本人自古以来爱吃的食品，是分类为一种枯草芽孢杆菌的纳豆枯草芽孢杆菌的发酵食品。作为日本传统的保健食品，也以“蔬菜干酪”等被介绍到欧美。近年，报道了在纳豆中含有被称为纳豆激酶的酶。该纳豆激酶是从纳豆中通过萃取、盐析、色谱、凝胶过滤等的操作组合而很容易的精制出。含有纳豆的纳豆激酶，不仅呈现出纳豆的独特的风味，且该酶是与作为血栓溶解的尿激酶、组织纤维蛋白溶酶原活化因子等相同的丝氨酸蛋白酶系的酶。纳豆激酶在具有其自身强力的血栓溶解能力的同时，也认为增加血液中的组织纤维蛋白溶酶原活化因子的间接效果。
申请号为201610481596.0的发明专利公开了抗血栓的纳豆激酶组合物及其制备方法，该组合物包括纳豆激酶、黄芪和川芎组成。其制备方法包括：1)利用产纳豆激酶的枯草杆菌制备纳豆激酶发酵液，离心，取上清液浓缩，得到纳豆激酶浓缩液；2)将川芎加水提取，将提取液浓缩成川芎浸膏；3)将黄芪加水提取，将提取液浓缩成黄芪浸膏；4)将川芎浸膏、黄芪浸膏与纳豆激酶浓缩液混合，即得。本发明以纳豆激酶、黄芪和川芎为原料，这三种组分发挥协同增效的作用，具有较好的预防血栓形成以及溶栓效果。
发明内容
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
针对现有技术中存在的上述不足，本发明所要解决的技术问题之一是提供一种改善血液循环的纳豆激酶组合物。
本发明提供一种改善血液循环的纳豆激酶组合物，包括纳豆激酶、糊精、香料、甜菊提取物、木糖醇。
具体地，所述改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10-12wt％、香料2-3wt％、甜菊提取物0.2-0.6wt％、木糖醇3-4wt％、余量为糊精。
作为本发明的一些技术方案，所述糊精的制备过程为：将淀粉和无水正丁醇以料液比1：(5-10)(g/mL)混合均匀，加热至40-45℃，加入质量分数为36-38％的盐酸，盐酸重量为淀粉重量的0.04-0.05倍，以300-400转/分钟的转速搅拌反应3-7天；随后于0-5℃加入盐酸体积12-16倍的摩尔浓度为1-1.1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以300-400转/分钟的转速搅拌20-40分钟；将中和后的反应液以4000-5000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为50-70％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：(80-100)(g/mL)，于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到所述糊精。
作为本发明的一些技术方案，所述糊精的制备过程为：将淀粉和无水正丁醇以料液比1：(5-10)(g/mL)混合均匀，加热至40-45℃，加入质量分数为36-38％的盐酸，盐酸重量为淀粉重量的0.04-0.05倍，以300-400转/分钟的转速搅拌反应3-7天；随后于0-5℃加入盐酸体积12-16倍的摩尔浓度为1-1.1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以300-400转/分钟的转速搅拌20-40分钟；将中和后的反应液以4000-5000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为50-70％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：(80-100)(g/mL)，于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为2-5％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.4-0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和乙醇的体积比为(3-4)：1；无水乙醇添加完毕后，以300-400转/分钟的转速搅拌50-60分钟，于2-4℃放置24-36小时；随后于2-4℃以8000-10000转/分钟的转速离心20-30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到所述糊精。
通过添加用无水乙醇沉淀的步骤，将淀粉分解产物中可能存在的糖类物质进行沉淀，这有利于淀粉的降解，得到水溶性高、分子量少且分子量分布窄的糊精，从而增强糊精对纳豆激酶的包覆性能，增强纳豆激酶在人体消化系统内的功效。
作为本发明的一些技术方案，所述糊精的制备过程为：将淀粉和无水正丁醇以料液比1：(5-10)(g/mL)混合均匀，加热至40-45℃，加入质量分数为36-38％的盐酸，盐酸重量为淀粉重量的0.04-0.05倍，以300-400转/分钟的转速搅拌反应3-7天；随后于0-5℃加入盐酸体积12-16倍的摩尔浓度为1-1.1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以300-400转/分钟的转速搅拌20-40分钟；将中和后的反应液以4000-5000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为50-70％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：(80-100)(g/mL)，于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为2-5％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.4-0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和乙醇的体积比为(3-4)：1；无水乙醇添加完毕后，以300-400转/分钟的转速搅拌50-60分钟，于2-4℃放置24-36小时；随后于2-4℃以8000-10000转/分钟的转速离心20-30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：(8-12)(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.06-0.1倍的天然分子，在20-25℃、以300-400转/分钟的转速避光搅拌4-5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.40-0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于40-45℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥20-24小时，得到所述糊精。
在糊精的制备过程中，所述天然分子为芒果苷元和/或叶酸。优选地，所述天然分子由叶酸和芒果苷元按照质量比为3：1组成。采用无生物毒性、来源广泛的天然分子对糊精进行修饰，增强糊精水溶性的同时，提高纳豆激酶组合物的生物利用度。
在糊精的制备过程中，所述淀粉为大米淀粉、绿豆淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉中的一种。
在本发明的一些实施例中，所述甜菊提取物的制备过程为：将甜菊叶于50-60℃干燥3-4小时后，粉碎，过20-40目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：(5-10)(g/mL)混合，于25-30℃、超声功率300-400W的条件下超声提取10-20分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以2000-3000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时。
现有技术中的甜菊提取物通常后苦味严重，这影响了其食用性，本发明中对甜菊提取物中的活性成分进行改性，通过酶促反应改变活性成分的结构和组成，改善甜菊提取物后苦味明显的状况。
在本发明的一些实施例中，所述甜菊提取物的制备过程为：
S1：将甜菊叶于50-60℃干燥3-4小时后，粉碎，过20-40目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：(5-10)(g/mL)混合，于25-30℃、超声功率300-400W的条件下超声提取10-20分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以2000-3000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集上清液，将上清液真空冷冻干燥，得到粗品；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时；
S2：将步骤S1得到的粗品用pH7.2、摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液配置成粗品浓度为20-30g/L的溶液，随后加入粗品重量10-12倍的可溶性淀粉和粗品重量0.02-0.03倍的高峰淀粉酶，于PH6.4、60-70℃的条件下反应30-50分钟，得到反应液；反应结束后，将反应液升温至90-100℃，灭酶15-20分钟；冷却至23-25℃，采用400-500目滤布过滤，收集滤液，作为上柱液Ⅰ；
S3：将上柱液Ⅰ以1-2BV/h的流速通入DM301树脂柱，随后用上柱液Ⅰ体积0.6-0.7倍的去离子水以1-2BV/h的流速通入DM301树脂柱，除去残留的淀粉糖，接着用上柱液Ⅰ体积1.5-2倍的的体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
S4：将洗脱液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时。在离子交换中，BV/h表示空间流速，即指柱内单位时间(h)流经单位体积树脂平均液量。
所述改善血液循环的纳豆激酶组合物的剂型可以为胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂、糊剂、糖浆剂、喷雾剂或者滴剂。
本发明所要解决的技术问题之二是提供一种改善血液循环的纳豆激酶组合物的加工方法。
所述纳豆激酶组合物的加工方法为：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
本发明所述改善血液循环的纳豆激酶组合物，保护心脑血管健康，可溶栓、抗凝、调压降脂肪、改善血液循环，同时组合物中的纳豆激酶可将体内尿激酶原激活为尿激酶，与纤溶酶原激活剂一同激活纤溶酶原溶解血栓，达到温和、持续溶栓目的的同时，抑制血小板凝聚。
具体实施方式
下面用实施例对本发明作进一步的说明。应该理解的是，本发明的实施例仅仅书用于说明本发明，而非对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明进行的改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的百分数都是重量百分数。
实施例中各原料介绍：
纳豆激酶，购自西安天瑞生物技术有限公司，活力为5000FU/g。
香料，由深圳市国鑫香精香料有限公司提供，主要成分为小茴香醛。
甜菊，拉丁学名：Stevia rebaudiana。具体采用亳州市利强中药材销售有限公司提供的甜菊叶。
木糖醇，CAS号：87-99-0，食品级，由深圳市森迪生物科技有限公司提供。
大米淀粉，购自广州市恩健贸易有限公司。
无水正丁醇，食品级，购自扬州天泰化工有限公司。
无水乙醇，食品级，购自扬州天泰化工有限公司。
芒果苷元，CAS号：3542-72-1，食品级，购自上海佰世凯化学科技有限公司。
摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，由34.2mL摩尔浓度为1mol/L的磷酸氢二钠水溶液与15.8mL摩尔浓度为1mol/L的磷酸二氢钠水溶液混合，然后用蒸馏水稀释至1000mL，即得。
可溶性淀粉，CAS号：9005-84-9，购自济宁佰一化工有限公司。
高峰淀粉酶，CAS号：9000-85-5，由上海如吉生物科技发展有限提供，酶活力为40000U/g。
DM301树脂，购自杭州市拱墅区凯英仪器经营部，树脂结构为交联聚苯乙烯。DM301树脂在树脂柱中的充填体积为50％。
叶酸，CAS号：59-30-3，食品级，购自南京汇格金医药科技有限公司。
实施例1
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到所述糊精。
对实施例1的糊精的溶解性进行测定：称取0.5g糊精，加入10mL蒸馏水，以300转/分钟的转速搅拌的同时加热至90℃，在90℃继续以300转/分钟搅拌保温30分钟，随后冷却至25℃，置于25℃保温4小时，以5000转/分钟的转速离心20分钟，取上清液；将上清液于130干燥2小时，称重。溶解性为上清液中的糊精占测试用糊精的质量。经测试，实施例1的糊精的溶解性为69.5％。
所述甜菊提取物的制备过程为：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
实施例2
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为3％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和无水乙醇的体积比为4：1；无水乙醇添加完毕后，以400转/分钟的转速搅拌50分钟，于2℃放置30小时；随后于2℃以8000转/分钟的转速离心30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到所述糊精。
对实施例2的糊精的溶解性进行测定：称取0.5g糊精，加入10mL蒸馏水，以300转/分钟的转速搅拌的同时加热至90℃，在90℃继续以300转/分钟搅拌保温30分钟，随后冷却至25℃，置于25℃保温4小时，以5000转/分钟的转速离心20分钟，取上清液；将上清液于130干燥2小时，称重。溶解性为上清液中的糊精占测试用糊精的质量。经测试，实施例2的糊精的溶解性为80.8％。
所述甜菊提取物的制备过程为：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
实施例3
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为3％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和无水乙醇的体积比为4：1；无水乙醇添加完毕后，以400转/分钟的转速搅拌50分钟，于2℃放置30小时；随后于2℃以8000转/分钟的转速离心30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：8(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.09倍的芒果苷元，在25℃、以400转/分钟的转速避光搅拌5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于45℃、真空度0.07MPa的条件下干燥24小时，得到所述糊精。
对实施例3的糊精的溶解性进行测定：称取0.5g糊精，加入10mL蒸馏水，以300转/分钟的转速搅拌的同时加热至90℃，在90℃继续以300转/分钟搅拌保温30分钟，随后冷却至25℃，置于25℃保温4小时，以5000转/分钟的转速离心20分钟，取上清液；将上清液于130干燥2小时，称重。溶解性为上清液中的糊精占测试用糊精的质量。经测试，实施例3的糊精的溶解性为88.3％。
所述甜菊提取物的制备过程为：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。参考GB 8270-1999对实施例3的甜菊提取物的相对甜度进行测定，实施例3的相对甜度为169。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
实施例4
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为3％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和无水乙醇的体积比为4：1；无水乙醇添加完毕后，以400转/分钟的转速搅拌50分钟，于2℃放置30小时；随后于2℃以8000转/分钟的转速离心30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：8(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.09倍的芒果苷元，在25℃、以400转/分钟的转速避光搅拌5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于45℃、真空度0.07MPa的条件下干燥24小时，得到所述糊精。
由于实施例4中糊精的制备方法同实施例3相同，所以实施例4中糊精的溶解性测试不再赘述，同实施例3。
所述甜菊提取物的制备过程为：
S1：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到粗品；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时；
S2：将步骤S1得到的粗品用pH7.2、摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液配置成粗品浓度为20g/L的溶液，随后加入粗品重量10倍的可溶性淀粉和粗品重量0.03倍的高峰淀粉酶，于PH6.4、70℃的条件下反应40分钟，得到反应液；反应结束后，将反应液升温至100℃，灭酶15分钟；冷却至23℃，采用500目滤布过滤，收集滤液，作为上柱液Ⅰ；
S3：将上柱液Ⅰ以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，随后用上柱液Ⅰ体积0.7倍的去离子水以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，除去残留的淀粉糖，接着用上柱液Ⅰ体积1.5倍的的体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
S4：将洗脱液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。
参考GB 8270-1999对实施例4的甜菊提取物的相对甜度进行测定，实施例4的相对甜度为205。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
实施例5
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为3％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和无水乙醇的体积比为4：1；无水乙醇添加完毕后，以400转/分钟的转速搅拌50分钟，于2℃放置30小时；随后于2℃以8000转/分钟的转速离心30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：8(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.09倍的叶酸，在25℃、以400转/分钟的转速避光搅拌5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于45℃、真空度0.07MPa的条件下干燥24小时，得到所述糊精。
对实施例5的糊精的溶解性进行测定：称取0.5g糊精，加入10mL蒸馏水，以300转/分钟的转速搅拌的同时加热至90℃，在90℃继续以300转/分钟搅拌保温30分钟，随后冷却至25℃，置于25℃保温4小时，以5000转/分钟的转速离心20分钟，取上清液；将上清液于130干燥2小时，称重。溶解性为上清液中的糊精占测试用糊精的质量。经测试，实施例5的糊精的溶解性为91.7％。
所述甜菊提取物的制备过程为：
S1：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到粗品；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时；
S2：将步骤S1得到的粗品用pH7.2、摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液配置成粗品浓度为20g/L的溶液，随后加入粗品重量10倍的可溶性淀粉和粗品重量0.03倍的高峰淀粉酶，于PH6.4、70℃的条件下反应40分钟，得到反应液；反应结束后，将反应液升温至100℃，灭酶15分钟；冷却至23℃，采用500目滤布过滤，收集滤液，作为上柱液Ⅰ；
S3：将上柱液Ⅰ以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，随后用上柱液Ⅰ体积0.7倍的去离子水以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，除去残留的淀粉糖，接着用上柱液Ⅰ体积1.5倍的的体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
S4：将洗脱液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
实施例6
改善血液循环的纳豆激酶组合物，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10.5wt％、糊精83wt％、香料3wt％、甜菊提取物0.5wt％、木糖醇3wt％。
所述糊精的制备过程为：将大米淀粉和无水正丁醇以料液比1：8(g/mL)混合均匀，加热至40℃，加入质量分数为37％的盐酸，盐酸重量为大米淀粉重量的0.047倍，以400转/分钟的转速搅拌反应5天；随后于0℃加入盐酸体积14倍的摩尔浓度为1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以400转/分钟的转速搅拌20分钟；将中和后的反应液以5000转/分钟的转速离心20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为60％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：80(g/mL)，于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为3％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和无水乙醇的体积比为4：1；无水乙醇添加完毕后，以400转/分钟的转速搅拌50分钟，于2℃放置30小时；随后于2℃以8000转/分钟的转速离心30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40℃、真空度0.07MPa的条件下干燥16小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：8(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.09倍的天然分子，所述天然分子由叶酸和芒果苷元按照质量比为3：1组成，在25℃、以400转/分钟的转速避光搅拌5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于45℃、真空度0.07MPa的条件下干燥24小时，得到所述糊精。
对实施例6的糊精的溶解性进行测定：称取0.5g糊精，加入10mL蒸馏水，以300转/分钟的转速搅拌的同时加热至90℃，在90℃继续以300转/分钟搅拌保温30分钟，随后冷却至25℃，置于25℃保温4小时，以5000转/分钟的转速离心20分钟，取上清液；将上清液于130干燥2小时，称重。溶解性为上清液中的糊精占测试用糊精的质量。经测试，实施例6的糊精的溶解性为95.2％。
所述甜菊提取物的制备过程为：
S1：将甜菊叶于50℃干燥4小时后，粉碎，过30目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：10(g/mL)混合，于25℃、超声功率360W的条件下超声提取14分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以3000转/分钟的转速离心20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到粗品；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时；
S2：将步骤S1得到的粗品用pH7.2、摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液配置成粗品浓度为20g/L的溶液，随后加入粗品重量10倍的可溶性淀粉和粗品重量0.03倍的高峰淀粉酶，于PH6.4、70℃的条件下反应40分钟，得到反应液；反应结束后，将反应液升温至100℃，灭酶15分钟；冷却至23℃，采用500目滤布过滤，收集滤液，作为上柱液Ⅰ；
S3：将上柱液Ⅰ以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，随后用上柱液Ⅰ体积0.7倍的去离子水以1BV/h的流速通入DM301树脂柱，除去残留的淀粉糖，接着用上柱液Ⅰ体积1.5倍的的体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
S4：将洗脱液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30℃，预冻时间2小时，升华温度15℃，解析温度35℃，真空度0.095MPa，真空冷冻干燥时间20小时。
加工改善血液循环的纳豆激酶组合物：按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
测试例1
选择200名具有服用功能食品习惯的人群作为样本，对实施例6的改善血液循环的纳豆激酶组合物进行问卷调查，结果发现：74％的人对实施例6的纳豆激酶组合物满意，食用时无反感；23％的人对实施例6的纳豆激酶组合物感觉不明确；3％的人对实施例6的纳豆激酶组合物无期待，食用时有反感。
测试例2
对实施例1-6的改善血液循环的纳豆激酶组合物的功效进行评价。
受试者：选择年龄40岁以上的男性受试者作为研究对象，随机分为6组，每组8名。在试验前，对受试者说明试验的意义以及受试者的安全性。
受试者从试验前一周控制纳豆、青椒、落花生、洋葱、酶等对血流有影响的食物材料的摄取。连续摄取7天本发明所述改善血液循环的纳豆激酶组合物，每天服用6g，热水送服。
试验期间，受试者的饮食按照正常进行，并使其生活方式尽可能普通。
试验前和试验后对受试者进行血液检查，指标为中性脂肪含量和游离脂肪酸含量。血液检测当天，受试者早饭除了水以外，不得服用其他的食物。
具体测试结果见表1。
表1：功效测试结果表
从表2可以看出，经过一周的连续摄取，受试者血液中中性脂肪含量降低，游离脂肪酸含量增加，这说明本发明所述纳豆激酶组合物具有改善脂质代谢异常的功效。

Claims (9)

1.改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，包括纳豆激酶、糊精、香料、甜菊提取物、木糖醇。
2.根据权利要求1所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，由下述重量份的原料构成：纳豆激酶10-12wt％、香料2-3wt％、甜菊提取物0.2-0.6wt％、木糖醇3-4wt％、余量为糊精。
3.根据权利要求2所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述糊精的制备过程为：将淀粉和无水正丁醇以料液比1：(5-10)(g/mL)混合均匀，加热至40-45℃，加入质量分数为36-38％的盐酸，盐酸重量为淀粉重量的0.04-0.05倍，以300-400转/分钟的转速搅拌反应3-7天；随后于0-5℃加入盐酸体积12-16倍的摩尔浓度为1-1.1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以300-400转/分钟的转速搅拌20-40分钟；将中和后的反应液以4000-5000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为50-70％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：(80-100)(g/mL)，于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为2-5％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.4-0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和乙醇的体积比为(3-4)：1；无水乙醇添加完毕后，以300-400转/分钟的转速搅拌50-60分钟，于2-4℃放置24-36小时；随后于2-4℃以8000-10000转/分钟的转速离心20-30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到所述糊精。
4.根据权利要求2所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述糊精的制备过程为：将淀粉和无水正丁醇以料液比1：(5-10)(g/mL)混合均匀，加热至40-45℃，加入质量分数为36-38％的盐酸，盐酸重量为淀粉重量的0.04-0.05倍，以300-400转/分钟的转速搅拌反应3-7天；随后于0-5℃加入盐酸体积12-16倍的摩尔浓度为1-1.1mol/L的碳酸氢钠水溶液进行中和，以300-400转/分钟的转速搅拌20-40分钟；将中和后的反应液以4000-5000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集沉淀；将沉淀用体积分数为50-70％的乙醇水溶液洗涤，沉淀与洗涤用乙醇水溶液的固液比为1：(80-100)(g/mL)，于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体A；将固体A配制质量分数为2-5％的固体A水溶液；向固体A水溶液以0.4-0.5mL/min的速度添加无水乙醇，直至固体A水溶液和乙醇的体积比为(3-4)：1；无水乙醇添加完毕后，以300-400转/分钟的转速搅拌50-60分钟，于2-4℃放置24-36小时；随后于2-4℃以8000-10000转/分钟的转速离心20-30分钟，除去上清液，收集固体；将固体于40-50℃、真空度0.06-0.08MPa的条件下干燥10-20小时，得到固体B；将固体B和去离子水以固液比1：(8-12)(g/mL)混合，然后加入糊精重量0.06-0.1倍的天然分子，在20-25℃、以300-400转/分钟的转速避光搅拌4-5天；反应结束后，将反应液在常压用孔径0.40-0.45μm的滤膜过滤，收集滤液；将滤液于40-45℃、真空度0.06-0.08MPa的条件在干燥20-24小时，得到所述糊精。
5.根据权利要求4所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述天然分子为芒果苷元和/或叶酸。
6.根据权利要求1-2中任一项所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述甜菊提取物的制备过程为：将甜菊叶于50-60℃干燥3-4小时后，粉碎，过20-40目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：(5-10)(g/mL)混合，于25-30℃、超声功率300-400W的条件下超声提取10-20分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以2000-3000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集上清液；将上清液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时。
7.根据权利要求1-2中任一项所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述甜菊提取物的制备过程为：
S1：将甜菊叶于50-60℃干燥3-4小时后，粉碎，过20-40目筛，得到甜菊叶粉末；将甜菊叶粉末和去离子水以料液比1：(5-10)(g/mL)混合，于25-30℃、超声功率300-400W的条件下超声提取10-20分钟，得到甜菊提取物；将甜菊提取液以2000-3000转/分钟的转速离心10-20分钟，收集上清液，将上清液真空冷冻干燥，得到粗品；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时；
S2：将步骤S1得到的粗品用pH7.2、摩尔浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液配置成粗品浓度为20-30g/L的溶液，随后加入粗品重量10-12倍的可溶性淀粉和粗品重量0.02-0.03倍的高峰淀粉酶，于PH6.4、60-70℃的条件下反应30-50分钟，得到反应液；反应结束后，将反应液升温至90-100℃，灭酶15-20分钟；冷却至23-25℃，采用400-500目滤布过滤，收集滤液，作为上柱液Ⅰ；
S3：将上柱液Ⅰ以1-2BV/h的流速通入DM301树脂柱，随后用上柱液Ⅰ体积0.6-0.7倍的去离子水以1-2BV/h的流速通入DM301树脂柱，除去残留的淀粉糖，接着用上柱液Ⅰ体积1.5-2倍的的体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
S4：将洗脱液真空冷冻干燥，得到所述甜菊提取物；其中真空冷冻干燥的工艺条件为：预冻温度-30～-25℃，预冻时间1-2小时，升华温度15-20℃，解析温度30-35℃，真空度0.09-0.095MPa，真空冷冻干燥时间16-24小时。
8.根据权利要求2所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物，其特征在于，所述改善血液循环的纳豆激酶组合物的剂型可以为胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂、糊剂、糖浆剂、喷雾剂或者滴剂。
9.权利要求1-8中任一种所述的改善血液循环的纳豆激酶组合物的加工方法，其特征在于，按配方称量其原料，将其混合均匀，即得。
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