CN107917896A - 基于近红外光谱和聚类分析技术的甘草快速鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药材鉴定技术领域，具体涉及基于近红外光谱和聚类分析技术的甘草快速鉴别方法。本发明提供了一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，所述基原为中国药典2015年版一部规定的甘草基原中的任意一种，所述生长条件包括野生及栽培，具体操作步骤包括：SA1、甘草模型药材粉制备；SA2、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图；SA3、利用聚类分析方法建立特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型定性鉴别分析标准模型；SA4、供试品分析。该方法适用于不同基原的野生及栽培甘草定性鉴别，成本几近于零，操作简便快捷，一般在10分钟内即可完成，准确率100%，符合药品监督管理对快检的要求。
Description
技术领域
本发明属于中药材鉴定技术领域，涉及中药材的光谱鉴别方法，特别是涉及基于近红外光谱和聚类分析技术的甘草快速鉴别方法。
背景技术
甘草为豆科植物甘草（又称乌拉尔甘草）Glycyrrhiza uralensis Fisch .、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat .或光果甘草Glycyrrhiza glabra L .的干燥根和根茎，甘，平，归心、肺、脾、胃经，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功效。素有“十方九草”之称。此外，甘草还被作为食品等使用。在我国，甘草分布范围最广，主要分布在西北、东北和华北地区，以内蒙古、宁夏、甘肃、新疆等西部地区所产的西甘草品质最佳。近年来，甘草作为药材、食品及烟草添加剂，其市场需求量急剧增加，野生资源遭到过度采挖，蕴藏量已不足50 万吨，被列入《国家重点保护野生药材物种名录》二级保护野生药材。2000年国务院发布的《关于禁止采集和销售发菜制止滥挖甘草和麻黄草有关问题的通知》，明令禁止对甘草的掠夺性采挖。目前，市售甘草以人工栽培为主。但是由于栽培与野生药材之间存在质量差异，对二者进行准确鉴别，有利于指导临床及生产合理区分使用，提高临床疗效。
中药鉴定旨在研究中药的品种、质量，保证临床疗效。目前，对于中药鉴定研究除传统的基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别外，以指纹图谱研究较多。其次，分子鉴定也已逐步开展。指纹图谱虽然可以反映药材的内在质量，但是需要考虑产地、采收期等因素对化学成分的影响，且需要对药材进行前处理；分子鉴定专属性强，但是其操作复杂，成本高。近红外光谱作为一种快速、价廉、无损分析方法，广泛应用于农业、食品、化学和石油化工等领域的定性和定量分析，已被欧美药典纳入附录内容。近红外光谱分析技术在中药材真伪、掺伪、产地、同属中药品种和中成药的鉴定及含量测定等方面已有相关研究报道。
目前，野生甘草的自然分布区已大面积开展人工栽培，药材市场同时存在野生和栽培甘草。野生和栽培甘草成分空间分布格局、形态组织学、质量特征及市场销售价格均存在差异。目前对于甘草的鉴定主要集中在不同产地、不同品种来源的鉴定。如：中国专利号CN 105543373 A公开了一种快速鉴定不同品种来源甘草的方法；CN 103293213 A公开了一种乌拉尔甘草和胀果甘草种子的鉴定方法。但是，有关野生和栽培甘草的鉴别方法，特别是快速、准确鉴别野生和栽培甘草方法的研究报道，目前相对较少。
狄天云，高晓娟，张霞等人采用HPLC 和紫外光谱法测定9 批野生甘草和14 批栽培甘草中甘草苷、甘草酸和总黄酮的含量并采集其近红外光谱信息。结果显示，基于指标成分定量的色谱鉴别无法有效鉴别宁夏野生和栽培甘草，近红外光谱结合聚类分析和主成分分析能够直观、快速、有效鉴别宁夏野生和栽培甘草样品，为甘草生长方式的鉴别及应用研究提供有效方法。同时，为甘草的品种、产地及规格等方面的鉴别提供了研究思路（狄天云,高晓娟,张霞,等.基于指标成分与近红外光谱对宁夏野生和栽培甘草的比较鉴别研究[J].中国中药杂志,2017,42(3):536.）。但是，该方法仅适用于宁夏野生和栽培乌拉尔甘草的鉴别，且未公开详细操作过程及技术参数。到目前为止，尚缺乏快速准确鉴别不同基原的野生及栽培甘草的系统、完整方法。
发明内容
为克服现有技术的不足，针对目前无法快速、准确鉴别不同基原的野生及栽培甘草的问题，本发明的目的是提供基于近红外光谱和聚类分析技术的快速、准确鉴别不同基原的野生及栽培甘草的方法，用于指导临床或生产合理区分使用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，所述基原为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch .、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat .、光果甘草Glycyrrhiza glabra L .中任意一种的干燥根和根茎，所述生长条件包括野生及栽培，其特征在于，包括如下步骤：
SA1、甘草模型药材粉制备：取已知基原及生长条件符合《中国药典》2015年版一部“甘草”项下规定的甘草模型药材，同一基原野生和栽培甘草模型药材至少各取五批，分别除去杂质，粉碎，过180目筛，得到特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉。
SA2、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图：分别称取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱。
SA3、利用聚类分析方法建立特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型定性鉴别分析标准模型：将测得的各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱数据导入OPUS5.5软件，采用一阶导数和矢量归一化预处理方式，对各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱进行预处理后，设置平滑点为13，采用OPUS5.5软件进行聚类分析，特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型分别聚类，建立近红外定性鉴别分析标准模型，保存，备用。
SA4、供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱，将测得的近红外光谱数据按步骤SA3方法处理，进行聚类分析，参照已保存的定性鉴别分析标准模型判定供试品的基原及生长条件。
进一步，在步骤SA1中，所述同一基原野生和栽培甘草模型药材可使用对照药材。
进一步，在步骤SA2中，所述用傅利叶变换近红外光谱仪扫描近红外光谱的测试条件为：分辨率8cm-1；样品累积扫描次数32Scans；背景累积扫描次数32Scans；光谱范围12000～4000cm-1；每个样品平行测定6次，取平均值作为该样品的原始光谱。
进一步，在步骤SA3中，所述保存，包括保存所有过程数据及图谱。
进一步，在步骤SA3中，建立定性鉴别分析标准模型后，可以通过分析已知基原及生长条件，且未参与建立近红外定性鉴别分析标准模型的甘草药材，评价标准模型的准确率。
进一步，所述步骤SA4的另一种操作方法为：供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱，将测得的供试品近红外光谱数据按步骤SA3方法进行预处理后，和保存的定性鉴别分析标准模型数据进行聚类分析，根据供试品的聚类情况判定供试品的基原及生长条件。
在此基础上，进一步的技术方案是，一种快速鉴别甘草基原及生长条件的简化方法，所述基原为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch .、胀果甘草Glycyrrhizainflata Bat .、光果甘草Glycyrrhiza glabra L .中任意一种的干燥根和根茎，所述生长条件包括野生及栽培，其特征在于，包括如下步骤：
SB1、甘草模型药材粉制备：取已知基原及生长条件符合《中国药典》2015年版一部“甘草”项下规定的甘草模型药材，同一基原野生和栽培甘草模型药材至少各取五批，分别除去杂质，粉碎，过180目筛，得到特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉。
SB2、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图：分别称取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱。
SB3、供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描供试品获得近红外光谱，将测得的供试品近红外光谱数据与各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱数据一同导入OPUS5.5软件，采用一阶导数和矢量归一化预处理方式，对各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱进行预处理后，设置平滑点为13，采用OPUS5.5软件进行聚类分析，根据供试品的聚类情况判定供试品的基原及生长条件。
本发明的有益效果。
1、本发明基于近红外光谱技术，无损、价廉、快速、准确鉴别不同基原的野生及栽培甘草。
2、在通过步骤SA3建立定性鉴别分析标准模型后，对已知基原及生长条件，且未参与建立近红外定性鉴别分析标准模型的甘草药材样本的检测结果显示，该方法对不同基原的野生及栽培甘草定性鉴别的准确率为100%。
3、该方法用于不同基原的野生及栽培甘草定性鉴别非常简便、快捷，一般在10分钟内即可完成，准确度高，符合药品食品监督管理对快检的要求；由于检测过程中不使用任何试剂或标准品，成本低廉。
附图说明
图1是本发明实施例提供的105个不同产地的野生及栽培甘草Glycyrrhizauralensis Fisch.的干燥根和根茎的近红外聚类分析结果。
图2为基于定性鉴别分析标准模型对甘肃产野生甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.的干燥根和根茎验证样本G30W的定性鉴别图谱。
图3为基于定性鉴别分析标准模型对内蒙产栽培甘草Glycyrrhiza uralensisFisc .的干燥根和根茎验证样本M47C的定性鉴别图谱。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的技术方案进行详细说明，但本发明的内容并不局限于此。
实施例：
一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，所述基原为豆科植物甘草Glycyrrhizauralensis Fisch .的干燥根和根茎，生长条件包括野生及栽培。包括如下步骤：
S101、甘草模型药材粉制备：取已知基原及生长条件符合《中国药典》2015年版一部“甘草”项下规定的甘草模型药材，共从甘肃、宁夏、内蒙、新疆甘草产区收集样本130批，具体样本信息见表1，从中随机选取105批样本作为甘草模型药材，生长条件包括野生及栽培，且均超过5批；分别除去杂质，粉碎，过180目筛，得到105批特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉。
表1 从甘肃、宁夏、内蒙、新疆甘草产区收集甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根和根茎样本
| 序号 | 代码 | 生长条件 | 产地 |
| 1 | D1C | 栽培 | 吉林省齐齐哈尔市 |
| 2 | D2C | 栽培 | 黑龙江省黑河市嫩江县 |
| 3 | G1C | 栽培 | 甘肃白银市景泰县 |
| 4 | G2C | 栽培 | 甘肃酒泉市金塔县 |
| 5 | G3C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 6 | G4C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 7 | G5C | 栽培 | 甘肃张掖市高台县 |
| 8 | G6W | 野生 | 甘肃庆阳市环县 |
| 9 | G7W | 野生 | 甘肃庆阳市环县 |
| 10 | G8W | 野生 | 甘肃酒泉市金塔县 |
| 11 | G9C | 栽培 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 12 | G10C | 栽培 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 13 | G11C | 栽培 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 14 | G12W | 野生 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 15 | G13W | 野生 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 16 | G14C | 栽培 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 17 | G15W | 野生 | 甘肃天水市甘谷县 |
| 18 | G16W | 野生 | 甘肃平凉市庄浪县 |
| 19 | G17W | 野生 | 甘肃定西市临洮县 |
| 20 | G18W | 野生 | 甘肃酒泉金塔县 |
| 21 | G19W | 野生 | 甘肃庆阳市合水县 |
| 22 | M1W | 野生 | 内蒙阿拉善盟阿拉善右旗 |
| 23 | M2W | 野生 | 内蒙阿拉善盟阿拉善左旗 |
| 24 | M3W | 野生 | 内蒙阿拉善盟阿拉善左旗 |
| 25 | M4W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 26 | M5W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 27 | M6W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 28 | M7W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 29 | M8W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 30 | M9W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 31 | M10W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 32 | M11W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 33 | M12W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 34 | M13W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 35 | M14W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 36 | M15W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 37 | M16W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 38 | M17W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 39 | M18W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 40 | M19C | 栽培 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 41 | M20C | 栽培 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 42 | M21W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 43 | M22W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 44 | M23W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 45 | M24W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 46 | M25W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 47 | M26W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 48 | M27W | 野生 | 内蒙赤峰市奈曼旗 |
| 49 | M28W | 野生 | 内蒙赤峰市奈曼旗 |
| 50 | M29W | 野生 | 内蒙赤峰市奈曼旗 |
| 51 | M30W | 野生 | 内蒙赤峰市奈曼旗 |
| 52 | M31W | 野生 | 内蒙赤峰市熬汉旗 |
| 53 | M32W | 野生 | 内蒙赤峰市熬汉旗 |
| 54 | M33W | 野生 | 内蒙赤峰市熬汉旗 |
| 55 | M34W | 野生 | 内蒙赤峰市熬汉旗 |
| 56 | M35W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 57 | M36W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 58 | M37W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 59 | M38W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 60 | M39W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 61 | M40W | 野生 | 内蒙赤峰市荣生堂饮片厂 |
| 62 | M41C | 栽培 | 内蒙通辽市扎鲁特旗 |
| 63 | M42W | 野生 | 内蒙通辽市扎鲁特旗 |
| 64 | N1C | 栽培 | 宁夏吴忠市同心县 |
| 65 | N2C | 栽培 | 宁夏吴忠市同心县 |
| 66 | N3W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 67 | N4W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 68 | N5W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 69 | N6W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 70 | N7W | 野生 | 宁夏吴忠市同心县 |
| 71 | N8W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 72 | N9C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 73 | N10C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 74 | N11C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 75 | N12C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 76 | N13C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 77 | N14C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 78 | N15C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 79 | N16C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 80 | N17C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 81 | N18C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 82 | N19C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 83 | N20C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 84 | N21C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 85 | N22W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 86 | N23W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 87 | N24W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 88 | N25W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 89 | N26W | 野生 | 宁夏固原市隆德县 |
| 90 | X1W | 野生 | 新疆阿克苏区 |
| 91 | X2W | 野生 | 新疆阿勒泰市福海县 |
| 92 | X3W | 野生 | 新疆塔城市额敏县 |
| 93 | X4W | 野生 | 新疆塔城市额敏县 |
| 94 | X5W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 95 | X6W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 96 | X7W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 97 | X8W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 98 | X9W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 99 | X10W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 100 | X11W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒焉耆县 |
| 101 | X12W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒焉耆县 |
| 102 | X13C | 栽培 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和硕县 |
| 103 | X14W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和硕县 |
| 104 | X15W | 野生 | 新疆伊犁哈萨克自治州新源县 |
| 105 | X16W | 野生 | 新疆伊犁哈萨克自治州新源县 |
| 106 | G20C | 栽培 | 甘肃白银市景泰县 |
| 107 | G21C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 108 | G22C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 109 | G23C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 110 | G24C | 栽培 | 甘肃酒泉市瓜州县 |
| 111 | G25W | 野生 | 甘肃张掖市高台县 |
| 112 | G26W | 野生 | 甘肃酒泉市玉门市 |
| 113 | G27W | 野生 | 甘肃天水市甘谷县 |
| 114 | G28C | 栽培 | 甘肃张掖市甘州区 |
| 115 | G29C | 栽培 | 甘肃兰州市永登县 |
| 116 | G30W | 野生 | 甘肃酒泉金塔县 |
| 117 | M43W | 野生 | 内蒙阿拉善盟阿拉善左旗 |
| 118 | M44W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 119 | M45W | 野生 | 内蒙鄂尔多斯市杭锦旗 |
| 120 | M47C | 栽培 | 内蒙通辽市扎鲁特旗 |
| 121 | M48W | 野生 | 内蒙通辽市扎鲁特旗 |
| 122 | M49C | 栽培 | 内蒙通辽市扎鲁特旗 |
| 123 | N27C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 124 | N28C | 栽培 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 125 | N29W | 野生 | 宁夏吴忠市盐池县 |
| 126 | N30W | 野生 | 宁夏固原市隆德县 |
| 127 | X17W | 野生 | 新疆阿勒泰市福海县 |
| 128 | X18W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县 |
| 129 | X19W | 野生 | 新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒焉耆县 |
| 130 | X20W | 野生 | 新疆伊犁哈萨克自治州新源县 |
其中，序号1-105为建模集样本批次，序号106-130为验证集样本批次。
S102、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图：分别称取105批特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉各1g，利用Bruker Matrix-F型傅里叶近红外光谱仪扫描各样本近红外光谱。分辨率8cm-1；样品累积扫描次数32Scans；背景累积扫描次数32Scans；光谱范围12000～4000cm-1；每个样品平行测定6次，取平均值作为该样品的原始光谱。
S103、利用聚类分析方法建立特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型定性鉴别分析标准模型：将测得的各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱数据导入OPUS5.5软件，采用一阶导数和矢量归一化预处理方式，对各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱进行预处理后，设置平滑点为13，采用OPUS5.5软件进行聚类分析，特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型分别聚类，建立近红外定性鉴别分析标准模型，保存，备用。
如图1所示，不同基原野生和栽培甘草模型药材的近红外光谱可以明显的聚为两类，说明可以用近红外光谱建立定性鉴别分析模型来区分不同基原的野生及栽培甘草。
S104、供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱，将测得的近红外光谱数据按步骤SA3方法处理，进行聚类分析，参照已保存的定性鉴别分析标准模型判定供试品的基原及生长条件。
S105、模型准确度评价：利用OPUS5.5软件，基于已建立的不同基原的野生及栽培甘草近红外定性鉴别分析标准模型，取130批样本中的剩余25批已知基原及生长条件，且未参与建立近红外定性鉴别分析标准模型的甘草药材作为验证样本，通过扫描近红外光谱，结合聚类结果及其真实来源进行分析，评价标准模型的准确率。结果显示，基于已建立的不同基原的野生及栽培甘草近红外定性鉴别分析标准模型，25批已知基原及生长条件，且未参与建立近红外定性鉴别分析标准模型的甘草药材通过近红外光谱聚类分析均能正确鉴别，准确度为100%。
如图2及图3所示，分别列示了基于定性鉴别分析标准模型对甘肃产野生甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根和根茎验证样本G30W及内蒙产栽培甘草Glycyrrhiza uralensis Fisc .的干燥根和根茎验证样本M47C的定性鉴别图谱。其中，图2左起第一个为验证样本G30W的图谱，图3左起第一个为验证样本M47C的图谱。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非用以限制本发明的权利范围。任何以本申请专利范围所涵盖的权利范围实施的技术方案，或者任何熟悉本领域的技术人员，利用上述揭示的方法内容做出许多可能的变动和修饰的方案，均属于本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，所述基原为豆科植物甘草Glycyrrhizauralensis Fisch .、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat .、光果甘草Glycyrrhizaglabra L .中任意一种的干燥根和根茎，所述生长条件包括野生及栽培，其特征在于，包括如下步骤：
SA1、甘草模型药材粉制备：取已知基原及生长条件符合《中国药典》2015年版一部“甘草”项下规定的甘草模型药材，同一基原野生和栽培甘草模型药材至少各取五批，分别除去杂质，粉碎，过180目筛，得到特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉；
SA2、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图：分别称取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱；
SA3、利用聚类分析方法建立特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型定性鉴别分析标准模型：将测得的各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱数据导入OPUS5.5软件，采用一阶导数和矢量归一化预处理方式，对各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱进行预处理后，设置平滑点为13，采用OPUS5.5软件进行聚类分析，特定基原野生甘草模型及栽培甘草模型分别聚类，建立近红外定性鉴别分析标准模型，保存，备用；
SA4、供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱，将测得的近红外光谱数据按步骤SA3方法处理，进行聚类分析，参照已保存的定性鉴别分析标准模型判定供试品的基原及生长条件；或，取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱，将测得的供试品近红外光谱数据按步骤SA3方法进行预处理后，和保存的定性鉴别分析标准模型数据进行聚类分析，根据供试品的聚类情况判定供试品的基原及生长条件。
2.如权利要求1所述的一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，其特征在于：在步骤SA1中，所述同一基原野生和栽培甘草模型药材可使用对照药材。
3.如权利要求1所述的一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，其特征在于：在步骤SA2中，所述用傅利叶变换近红外光谱仪扫描近红外光谱的测试条件为：分辨率8cm-1；样品累积扫描次数32Scans；背景累积扫描次数32Scans；光谱范围12000～4000cm-1；每个样品平行测定6次，取平均值作为该样品的原始光谱。
4.如权利要求1所述的一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，其特征在于：在步骤SA3中，所述保存，包括保存所有过程数据及图谱。
5.如权利要求1所述的一种快速鉴别甘草基原及生长条件的方法，其特征在于：在步骤SA3中，建立定性鉴别分析标准模型后，可以通过分析已知基原及生长条件，且未参与建立近红外定性鉴别分析标准模型的甘草药材，评价标准模型的准确率。
6.一种快速鉴别甘草基原及生长条件的简化方法，所述基原为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch .、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat .、光果甘草Glycyrrhiza glabra L .中任意一种的干燥根和根茎，所述生长条件包括野生及栽培，其特征在于，包括如下步骤：
SB1、甘草模型药材粉制备：取已知基原及生长条件符合《中国药典》2015年版一部“甘草”项下规定的甘草模型药材，同一基原野生和栽培甘草模型药材至少各取五批，分别除去杂质，粉碎，过180目筛，得到特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉；
SB2、扫描获取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉的近红外光谱图：分别称取特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描获得近红外光谱；
SB3、供试品分析：取供试品，粉碎，过180目筛，称取1g，用傅利叶变换近红外光谱仪扫描供试品获得近红外光谱，将测得的供试品近红外光谱数据与各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱数据一同导入OPUS5.5软件，采用一阶导数和矢量归一化预处理方式，对各批次特定基原野生甘草模型药材粉及栽培甘草模型药材粉近红外光谱进行预处理后，设置平滑点为13，采用OPUS5.5软件进行聚类分析，根据供试品的聚类情况判定供试品的基原及生长条件。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20180417 |