CN107898828A - 胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法和用途 - Google Patents

胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明属于医药制备技术领域，涉及药用植物化学成分提取分离方法，具体涉及一种回药核心药对胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法和用途。本发明按重量比胡椒︰荜茇为1:10‑10:1称取胡椒、荜茇，粉碎，混匀，用CO2超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏，干燥，得到二氯甲烷萃取部位；该二氯甲烷萃取部位中含有胡椒环丁酰胺G等10种化合物；药效学研究结果表明，胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位对大鼠脑缺血恢复早期具有脑保护作用；胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法对药物研发具有很高的学术及应用价值。

Description

胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于医药制备技术领域，涉及药用植物化学成分提取分离方法，具体涉及一种回药核心药对胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法和用途。
背景技术
脑卒中（stroke），是以出现意识障碍和局灶性神经功能缺失为共同特征的急性脑血管病。脑卒中发病率高、复发率高、致残率高，已成为国民死亡的首要因素。2016年《中国脑卒中防治报告》显示，我国每年新发脑卒中患者200余万人；每年死于脑卒中的患者多达180余万，存活患者大多也引起残疾，给家庭和社会带来了很大的负担。中国政府每年因脑卒中直接经济支出374亿元。随着我国人口老龄化，脑卒中的问题日益严重，社会和经济将不堪重负（郭晋敏.ALDH2对缺血性脑卒中的作用研究.第二军医大学博士学位论文.2012）。
迄今为止，对于脑卒中尚无特效治疗药物，尤其是对错过最佳治疗时间窗（6h以内，溶栓治疗）缺血性脑卒中治疗，全世界尚没有完全统一的标准。目前临床使用的治疗药物主要分为以下几类：溶栓药物、抗血小板聚集药物、降纤药物、抗凝药物和神经保护药物等。这些药物虽然有一定的疗效，但药物不良反应较多，有的会发生胃肠道不良反应（如阿司匹林），或者可能会增加颅外出血的危险性（如肝素），即使是近几年备受关注的神经细胞保护药物亦缺乏安全性及有效性等临床评价（任雪梅，杨光福．脑梗死治疗研究现状与进展[J].河北医学.2010，16(2):237-238.），（段云霞，陈小玉，张梓倩等.缺血性脑卒中治疗药物研究进展[J].中央民族大学学报(自然科学版).2012,21(2):65-68.）。因此，寻找疗效确切、安全有效的脑卒中治疗药物异常迫切。
回医药是回族丰富的文化遗产之一，是祖国传统医学的重要组成部分，2008年被列为世界非物质文化保护遗产（《第二批国家级非物质文化遗产名录》977 Ⅸ-17 回族医药，2008年）。回医药治疗脑卒中历史悠久，《回回药方》、《海药本草》、《瑞竹堂经验方》等经典著作中收录治疗脑卒中的方剂百余首，以扎里奴思方、哈黑里里方为代表的一系列方剂经临床验证疗效显著。脑卒中新药的研发亦是宁夏回族自治区十三五期间发展民族特色医药及大健康的主要方向。
胡椒，为胡椒科植物胡椒Piper nigrum L.的干燥近成熟或成熟的果实。气芳香，味辛辣。温中散寒，下气，消痰。所述胡椒包括白胡椒和黑胡椒。
荜茇，为胡椒科植物荜茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果穗。有特异香气、味辛辣。温中散寒，下气止痛。用于脘腹冷痛，呕吐，泄泻，寒凝气滞，胸痹心痛，头痛，牙痛。
现代研究成果表明，胡椒、荜茇具有较高的药用价值，在心血管系统、中枢神经系统、抗炎、抗菌、抗病毒、保肝、抗癌等方面均具有药理活性。
本发明通过对古今文献中治疗脑卒中的回药方剂进行挖掘、整理，并结合临床药效研究等方法，确定“胡椒+荜茇”的组合物在治疗脑卒中的方剂中应用最多，是出现频次最高的两味药材，“胡椒+荜茇”的组合出现频次为 37 次（李婷婷,王星,马学琴等.回药治疗脑卒中方剂配伍规律研究[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(20):307-311.）。但在文献中并未明确指出发挥治疗作用的有效部位及其药物化学成分。
综上所述，现有技术存在的主要问题有：（1）现有治疗脑卒中药物虽然有一定的疗效，但药物不良反应较多，寻找疗效确切、安全有效的脑卒中治疗药物异常迫切；（2）现有技术指出“胡椒+荜茇”的组合物在治疗脑卒中的方剂中应用最多，但未明确指出发挥治疗作用的有效部位及其药物化学成分。
因此，对该组合物中治疗脑卒中发挥作用的二氯甲烷萃取部位进行深入研究，探索药理活性的物质基础，对药物研发及质量控制具有重要意义。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的首要目的是提供一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位及其制备方法。所述制备方法是先将胡椒荜茇组合物经二氧化碳超临界流体法提取除油，然后用乙醇提取药渣，将所得乙醇浸膏用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷萃取部位。
本发明的第二个目的是提供胡椒荜茇组合物中二氯甲烷萃取部位的用途，即用于改善和治疗脑卒中。
本发明的第三个目的是提供含有胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的药物制剂，用于改善和治疗脑卒中。
为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现。
一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位，其特征在于：所述的二氯甲烷萃取部位，其化学成分包括：胡椒环丁酰胺G、胡椒环丁酰胺H、胡椒环丁酰胺C、(2S,3S)-2-(5-甲氧基-3,4-亚甲基二氧苄基)-3-(3,4-亚甲基二氧苄基)丁内酯、4-己基-4,6-二甲基-4,5-二氢吡咯[1,2-A]喹喔啉、N-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙酰胺、E-4(15)-桉叶烯-1β,6α二醇、3-(3',4'-亚甲基二氧苯基)-丙烯醛、7-去甲氧基-齐墩果醇-9(z),12(z)亚油酸、邻苯二甲酸二丁酯。本发明采用正相硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、LH-20凝胶柱色谱和制备薄层色谱法相结合的方法对二氯甲烷萃取部位的化学成分进行了系统分离、测定，得到了上述10种化合物。药效学实验结果表明，上述10种化合物对治疗脑卒中具有确切的疗效，对药物研发及质量控制具有重要意义。
进一步，所述的二氯甲烷萃取部位的制备方法为：按重量比胡椒︰荜茇为1:10-10:1称取胡椒、荜茇，粉碎，混匀，用CO2超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏，干燥，即得。
进一步，所述的二氯甲烷萃取部位可用于治疗脑卒中。
一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：按重量比胡椒︰荜茇为1:10-10:1称取胡椒、荜茇，粉碎，混匀，用CO2超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏，干燥，即得。其中，所述的二氯甲烷可用等极性有机混合溶媒替代。
进一步，所述的制备方法包括以下步骤：
S1：CO2超临界萃取除油：按重量比胡椒︰荜茇为1:1称取胡椒、荜茇，置粉碎机中粉碎，混合均匀，用CO2超临界萃取至不出油；
S2：乙醇提取：取除油后的药渣，用70%乙醇提取，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得乙醇粗提物溶液；
S3：二氯甲烷萃取：取乙醇粗提物溶液，加入等体积二氯甲烷，萃取，静置分层，收集二氯甲烷萃取液，减压回收二氯甲烷，干燥，即得二氯甲烷萃取部位，密封储存。
在步骤S1中，所述CO2超临界萃取的工艺条件为：萃取釜压力300Bar，温度55℃；分离釜I压力80Bar，分离釜I温度50℃；分离釜II压力60Bar，分离釜II温度40℃。
在步骤S2中，所述70%乙醇提取的工艺条件为：提取次数为3次，每次3h，药渣︰70%乙醇的体积比为1:9-1:11。
在步骤S3中，所述加入二氯甲烷萃取的方法为：振摇萃取或连续逆流萃取，其中振摇萃取的工艺条件为工艺条件为：每批萃取次数不少于4次，合并二氯甲烷萃取液；所述密封储存的温度为-10℃～0℃，优选为-4℃。
进一步，所述的制备方法可用于治疗脑卒中的药物的制备。
含有如权利要求1所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的药物制剂，其特征在于：由所述的二氯甲烷萃取部位和符合药用要求的辅料加工制成，其中二氯甲烷萃取部位和辅料的重量比为1:0.2-1:5。
进一步，所述的药物制剂为分散片、软胶囊、滴丸、普通片、硬胶囊、颗粒剂、口含片、注射剂等。当药物制剂为分散片、颗粒剂、硬胶囊、丸剂、普通片\口含片等固体制剂时，所述辅料包括抗粘剂、稀释剂（填充剂）、矫味剂、崩解剂、助流剂、润滑剂，其中抗粘剂为D-甘露糖醇、滑石粉、矿物油、辛,癸酸甘油酯及辛烯基琥珀酸淀粉钠中的任意一种或几种的组合；其中稀释剂为木糖醇、D-甘露糖醇、山梨糖醇、微晶纤维素中的任意一种或几种的组合；其中矫味剂为三氯蔗糖、罗汉果苷、阿斯巴甜、甘草甜素、甜菊苷、甜蜜素、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、菠萝香精、草莓香精、桔子香精、薄荷香精中的任意一种或几种的组合；其中崩解剂为交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素中的一种或几种的组合；其中助流剂为胶态二氧化硅；其中润滑剂为硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠中的一种或几种的组合；需要时，可加入水作为粘合剂。当药物制剂为软胶囊时，所述辅料包括基质、分散剂、助悬剂、防腐剂，其中基质包括甘油、明胶等，分散剂包括色拉油、玉米油、聚乙二醇400、聚乙二醇600或PVPK30等，助悬剂包括石蜡、蜂蜡、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000等，防腐剂为对羟基苯甲酸甲脂（1.6%）及对羟基苯甲酸并酯（0.04%）的混合物；当药物制剂为滴丸时，所述辅料包括基质、冷凝液，其中基质硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、虫蜡、氢化植物油、硬脂醇、鲸蜡醇、半合成脂肪酸酯中任意一种或多种的组合，冷凝液为液体石蜡、乙醇溶液或稀酸溶液中的任意一种。
本发明的有益效果：
本发明将胡椒荜茇组合物用二氧化碳超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，干燥，得到二氯甲烷萃取部位；本发明还采用正相硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、LH-20凝胶柱色谱和制备薄层色谱法将二氯甲烷萃取部位的化学成分进行系统分离、测定，得到10种化合物；二氯甲烷萃取部位对大鼠脑缺血恢复早期的保护作用实验结果表明，胡椒、荜茇二氯甲烷萃取部位对大鼠脑缺血恢复早期具有脑保护作用，表现为神经功能行为学评分降低，横木行走能力恢复，以及前肢抓握力量提高；药效学实验结果表明，从胡椒、荜茇二氯甲烷萃取部位中分离、纯化得到的10种化合物对治疗脑卒中具有确切的疗效，对药物研发及质量控制具有重要意义。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案进行详细说明，但本发明的实施并不局限于此。
实施例1：
一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位，其制备方法包括以下步骤：
S1：CO2超临界萃取除油：称取胡椒、荜茇各20kg，置粉碎机中粉碎，混合均匀，投入CO2超临界萃取釜中萃取至不出油，萃取条件：压力300Bar；温度55℃，分离釜I压力80Bar，分离I温度50℃，分离釜II压力60Bar，分离II温度40℃。
S2：乙醇提取：将由步骤S1得到的药渣分多次加入多功能提取罐中，用70%乙醇提取3次，每次3h，药渣∶70%乙醇的体积比为1:10。合并提取液，置旋转蒸发仪中，旋至无醇味，得乙醇粗提物溶液。
S3：二氯甲烷萃取：将由步骤S2得到的乙醇粗提物溶液和二氯甲烷以体积比1:1的比例混合，加入分液漏斗，摇匀，静置分层，收集二氯甲烷萃取液；每批萃取次数不少于4次，合并二氯甲烷萃取液，用旋转蒸发仪回收二氯甲烷萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏。取出流浸膏，自然干燥，即得二氯甲烷萃取部位；密封储存，储存温度为-4℃。
实施例2：
在实施例1的基础上，对从实施例1得到的二氯甲烷萃取部位进行对大鼠脑缺血恢复早期的保护作用实验。
1 实验材料
1.1 主要试剂与耗材
A4-2026线栓；水合氯醛；95%酒精；蒸馏水；羧甲基纤维素钠（CMC-Na）；丙二醛 MDA 检测试剂盒 。
1.2 主要仪器
YLS-12A大小鼠抓力测试仪；电子分析天平。
2. 实验动物和方法
雄性健康SD大鼠，体重280~320g，由宁夏医科大学实验动物中心提供。
用线栓法阻塞大鼠中动脉，建立大鼠永久性脑缺血损伤模型。将手术模型成功的大鼠随机分组（每组10-15只大鼠）：模型组、假手术组、二氯甲烷萃取部位高（200mg/kg）、低剂量组（100mg/kg）。于脑缺血6 h后灌胃给药，1次/d，给药14天。通过监测3d、6d、9d、12d和14d大鼠体重、姿势反射、身体摆动、横木行走、前肢抓力值变化评价二氯甲烷萃取部位对局灶性脑缺血损伤大鼠的神经行为的影响。
2.1 体重检测
分别于pMCAO造模后3 d、6 d、9 d、12 d和14 d 测定大鼠体重。
2.2 神经功能评分。
2.2.1 姿势反射实验
分别于pMCAO造模后3 d、6 d、9 d、12 d和14 d，按照Longa 5级评分法对动物进行评分：0分：提鼠尾离开地面约1 m，观察前肢屈曲情况，正常大鼠双前肢对称伸向地面；1分：手术对侧前肢出现腕屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕、肘的屈曲又有肩内旋者；2分：将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，正常或轻度功能失调的老鼠在两个方向上都不平等地滑动，严重功能障碍的大鼠阻力持续减少；3 分：大鼠不停地向左侧转圈者。
2.2.2 身体摆动实验
提升鼠尾距地面1m处，分别在第3 d、6 d、9 d、12 d和14 d对其进行评分。评分标准：0分：躯干左右摇摆；1分：不对称摇摆小于30度；2分：不对称摇摆大于30度。
2.2.3横木行走试验
横木长120 cm，宽2.0 cm，距地面80 cm水平悬空放置。横木一端连接一个20×20×20cm暗盒，以适当刺激大鼠使其通过横木。术前训练7d，分别于pMCAO造模后3 d、6 d、9 d、12d和14 d为观察时间点进行检测。
评分标准：6分：顺利通过；5分：通过，但损伤侧后肢滑落1次；4分：滑落超过1次但不到总步数50%；3分：滑落次数超过总步数50%；2分：试图通过横木，但从横木上摔下；1分：能静卧在横木上但无法移动；0分：不能静卧在横木上，直接从横木上摔下。
2.2.4 前肢抓握力测试
抓握力量测试评价大鼠脑缺血后前肢抓握力量的大小。测试者提鼠尾，将大鼠置于拉力仪测试区域。当测试者拉住鼠尾向后拉拽大鼠时，大鼠试图以前肢抓握横杆不放以免从横杆滑脱。继续拖拽大鼠，直至大鼠滑脱，读取使大鼠滑脱的最大拉力值。分别于pMCAO造模后3 d、6 d、9 d、12 d和14 d为观察时间点进行检测。
3. 实验结果
3. 1胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠体重的影响
如表1结果所示，与模型组比较，假手术组pMCAO大鼠体重在3~14天均明显升高（P<0.01）；二氯甲烷萃取部位低剂量组（100 mg/kg）pMCAO大鼠体重在3~14天位均未见明显改变；二氯甲烷萃取部位高剂量组（200 mg/kg）pMCAO大鼠体重在6~14天均明显升高（P<0.01）。
注：与模型组比较，# P<0.05；## P<0.01；* P <0.05；** P <0.01（n 模型组=11；n 假手术组=13；n DCM 100 mg/kg=9；n DCM 200 mg/kg=9）。
3.2 胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠神经功能的影响
3.2.1 胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠姿势反射的影响
如表2结果所示，与模型组比较，假手术组pMCAO大鼠姿势反射在3~14天均未见升高（P<0.01）；二氯甲烷萃取部位低剂量组（100 mg/kg）pMCAO大鼠姿势反射在6、9、12天均明显降低（P <0.05；P <0.01）；二氯甲烷萃取部位高剂量组（200 mg/kg）pMCAO大鼠姿势反射在9、12、14天均明显降低（P <0.01）。
注：与模型组比较，# P<0.05；## P<0.01；* P <0.05；** P <0.01（n 模型组=11；n 假手术组=13；n DCM 100 mg/kg=9；n DCM 200 mg/kg=9）。
3.2.2 胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠身体摆动的影响
如表3结果所示，与模型组比较，假手术组pMCAO大鼠身体摆动在3~14天均未见升高（P<0.01）；二氯甲烷萃取部位低剂量组（100 mg/kg）pMCAO大鼠身体摆动在3、6、9、14天均明显降低（P<0.05；P<0.01）；二氯甲烷萃取部位高剂量组（200 mg/kg）pMCAO大鼠身体摆动在3、9、12、14天均明显降低（P<0.01）。
注：与模型组比较，# P<0.05；## P<0.01；* P <0.05；** P <0.01（n 模型组=11；n 假手术组=13；n DCM 100 mg/kg=9；n DCM 200 mg/kg=9）。
3.2.3 胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠横木行走的影响
如表4结果所示，与模型组比较，假手术组pMCAO大鼠横木行走在3~14天均未见降低（P<0.01）；二氯甲烷萃取部位低剂量组（100 mg/kg）pMCAO大鼠横木行走在6、12天均明显升高（P<0.05）；二氯甲烷萃取部位高剂量组（200 mg/kg）pMCAO大鼠横木行走在3~14天明显升高（P<0.01）。
注：与模型组比较，# P<0.05；## P<0.01；* P <0.05；** P <0.01（n 模型组=11；n 假手术组=13；n DCM 100 mg/kg=9；n DCM 200 mg/kg=9）。
3.2.4 胡椒荜茇二氯甲烷萃取部位对pMCAO大鼠抓力的影响
如表5结果所示，与模型组比较，假手术组pMCAO大鼠抓力值在3~14天均有显著性意义（P<0.01）; 二氯甲烷萃取部位低剂量组（100 mg/kg）pMCAO大鼠抓力值在6天明显升高（P<0.01）;二氯甲烷萃取部位高剂量组（200 mg/kg）pMCAO大鼠抓力值在3~14天均明显升高（P<0.05；P<0.01）。
注：与模型组比较，# P<0.05；## P<0.01；* P <0.05；** P <0.01（n 模型组=11；n 假手术组=13；n DCM 100 mg/kg=9；n DCM 200 mg/kg=9）。
4. 结论
大鼠pMCAO造模后，假手术组14天后成活率100%；二氯甲烷萃取部位高（200mg/kg）、低剂量组（100mg/kg）14天后成活率（81.82%和75.00%）均比模型组高（73.33%）。胡椒、荜茇二氯甲烷萃取部位在大鼠脑缺血恢复早期具有脑保护作用，表现为神经功能行为学评分降低、横木行走能力恢复、以及前肢抓握力量提高。
实施例3
普通片剂的制备：
在实施例1的基础上，将实施例1得到的二氯甲烷萃取部位与辅料按重量比为1:5混合，制粒，压片，即得。
实施例4
分散片的制备：
在实施例1的基础上，将实施例1得到的二氯甲烷萃取部位与辅料按重量比为1:1混合，粉碎，过180目筛，制粒，压片，即得。
实施例5
胶囊剂、颗粒剂的制备：
在实施例1的基础上，将实施例1得到的二氯甲烷萃取部位与辅料按重量比为1:1混合，制成胶囊或颗粒剂，即得。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非用以限制本发明的权利范围。任何以本申请专利范围所涵盖的权利范围实施的技术方案，或者任何熟悉本领域的技术人员，利用上述揭示的方法内容做出许多可能的变动和修饰的方案，均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位，其特征在于：所述的二氯甲烷萃取部位，其化学成分包括：胡椒环丁酰胺G、胡椒环丁酰胺H、胡椒环丁酰胺C、(2S,3S)-2-(5-甲氧基-3,4-亚甲基二氧苄基)-3-(3,4-亚甲基二氧苄基)丁内酯、4-己基-4,6-二甲基-4,5-二氢吡咯[1,2-A]喹喔啉、N-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙酰胺、E-4(15)-桉叶烯-1β,6α二醇、3-(3',4'-亚甲基二氧苯基)-丙烯醛、7-去甲氧基-齐墩果醇-9(z),12(z)亚油酸、邻苯二甲酸二丁酯。
2.如权利要求1所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位，其特征在于：所述的二氯甲烷萃取部位的制备方法为：按重量比胡椒︰荜茇为1:10-10:1称取胡椒、荜茇，粉碎，混匀，用CO2超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏，干燥，即得。
3.如权利要求1所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位，其特征在于：所述的二氯甲烷萃取部位可用于治疗脑卒中。
4.一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：按重量比胡椒︰荜茇为1:10-10:1称取胡椒、荜茇，粉碎，混匀，用CO2超临界萃取除油，药渣用70%乙醇提取，提取液减压浓缩至无醇味，用二氯甲烷萃取，回收萃取液中的二氯甲烷，得流浸膏，干燥，即得。
5.如权利要求4所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：所述的制备方法包括以下步骤：
S1：CO2超临界萃取除油：按重量比胡椒︰荜茇为1:1称取胡椒、荜茇，置粉碎机中粉碎，混合均匀，用CO2超临界萃取至不出油；
S2：乙醇提取：取除油后的药渣，用70%乙醇提取，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得乙醇粗提物溶液；
S3：二氯甲烷萃取：取乙醇粗提物溶液，加入等体积二氯甲烷，萃取，静置分层，收集二氯甲烷萃取液，减压回收二氯甲烷，干燥，即得二氯甲烷萃取部位，密封储存。
6.如权利要求4所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：
在步骤S1中，所述CO2超临界萃取的工艺条件为：萃取釜压力300Bar，温度55℃；分离釜I压力80Bar，分离釜I温度50℃；分离釜II压力60Bar，分离釜II温度40℃；
在步骤S2中，所述70%乙醇提取的工艺条件为：提取次数为3次，每次3h，药渣︰70%乙醇的体积比为1:9-1:11；
在步骤S3中，所述加入二氯甲烷萃取的方法为：振摇萃取或连续逆流萃取，其中振摇萃取的工艺条件为工艺条件为：每批萃取次数不少于4次，合并二氯甲烷萃取液；所述密封储存的温度为-10℃～0℃。
7.如权利要求4所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：所述的二氯甲烷可用等极性有机混合溶媒替代。
8.如权利要求4所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的制备方法，其特征在于：所述的制备方法可用于治疗脑卒中的药物的制备。
9.含有如权利要求1所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的药物制剂，其特征在于：由所述的二氯甲烷萃取部位和符合药用要求的辅料加工制成，其中二氯甲烷萃取部位和辅料的重量比为1:0.2-1:5。
10.如权利要求9所述的含有如权利要求1所述的一种胡椒荜茇组合物二氯甲烷萃取部位的药物制剂，其特征在于：所述的药物制剂为分散片、软胶囊、滴丸、普通片、硬胶囊、颗粒剂、口含片、注射剂。
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