CN107823096A - 一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜 - Google Patents

Abstract

本发明涉及皮肤保养品技术领域，具体涉及一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜，面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，以面膜液的质量份数为100，面膜液的原料包括以下重量份的组分：5‑20份燕麦肽、5‑20份野大豆肽、0.05‑0.5份人脂肪间充质干细胞提取物、10‑20份对羟基苯甲酸甲酯、10‑20份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10‑20份苯丙醇、10‑20份1，3‑丁二醇、10‑20份透明质酸钠，以及去离子水。本发明的面膜对皮肤温和无刺激，对营养及功能性因子的吸附力弱，易渗透进入到皮肤中，可及时补充肌肤营养，使用本发明的面膜后，肌肤变得触感细腻柔滑、肤色更为均匀、肤质显著改善。

Description

一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜

技术领域

本发明涉及皮肤保养品技术领域，具体涉及一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜。

背景技术

随着人们生活水平的提高，人们对美的追求越来越注重，其中一个体现就是对皮肤护理以及面部修饰的注重。面膜是现代女性护肤品中必不可少的保养用品，它覆盖于皮肤表面，起到隔离空气、浸润、软化角质层、扩张毛孔和汗腺口、促进皮肤血液循环及面膜中活性成分渗入皮肤等作用，受到越来越多消费者的喜爱。

目前市场上的面贴膜均以人造纤维无纺布或天然纤维无纺布经折叠、装袋、注入浸泡液、封口等工序制造而成的，这些面膜虽能达到一定的美容护肤效果，但是有些护肤效果并不佳，有些无纺布面膜与皮肤亲和力不佳，仅仅是精华液的载体，皮肤与之接触时有明显异样反应；有些无纺布面膜吸附量低，致使大量精华液残留于面膜袋或滴落，未能得到有效利用；还有一些面膜中添加了化学防腐剂如烟酰胺、水杨酸、维生素A醇等，存在安全隐患。

发明内容

有鉴于此，有必要针对上述的问题，提供一种护肤效果更好，更安全的含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜。

本发明提供一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜，所述面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，以所述面膜液的质量份数为100，所述面膜液的原料包括以下重量份的组分：5-20份燕麦肽、5-20份野大豆肽、0.05-0.5份人脂肪间充质干细胞提取物、10-20份对羟基苯甲酸甲酯、10-20份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10-20份苯丙醇、10-20份1，3-丁二醇、10-20份透明质酸钠，以及去离子水。

优选的，所述面膜纸为复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸。

优选的，所述复合蛋白为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白。

优选的，所述复合蛋白的制备方法包括以脱脂大米蛋白为原料，先制备小分子大米蛋白肽溶液、再制备小分子胶原蛋白肽溶液、然后制备复合蛋白液，得到复合蛋白。

优选的，所述复合蛋白通过缩水甘油醚的醚键结合在纤维素无纺布上。

优选的，所述燕麦肽的分子量为1000～3000Da。

优选的，所述燕麦肽通过从燕麦麸皮中采用酶法降解提取得到。

优选的，所述野大豆肽通过将纯天然野大豆经过发酵或酶工程处理得到。

优选的，所述人脂肪间充质干细胞提取物的质量份数为0.05-0.1份。

本发明提供的面膜中，面膜液原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，对皮肤温和无刺激，面膜纸对营养及功能性因子的吸附力弱，易渗透进入到皮肤中，可及时补充肌肤营养，使用本发明的面膜后，肌肤变得触感细腻柔滑、肤色更为均匀、肤质显著改善，能够让受损皮肤快速得到修复，且还能起到美白及抗皱的功效。

具体实施方式

为了便于本领域技术人员理解，下面将结合具体实施例对本发明进行进一步描述。

本发明提供一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜，所述面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，以所述面膜液的质量份数为100，所述面膜液的原料包括以下重量份的组分：5-20份燕麦肽、5-20份野大豆肽、0.05-0.5份人脂肪间充质干细胞提取物、10-20份对羟基苯甲酸甲酯、10-20份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10-20份苯丙醇、10-20份1，3-丁二醇、10-20份透明质酸钠，以及去离子水。通过这些重量份比例的各原料得到的面膜原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，对皮肤温和无刺激，对营养及功能性因子的吸附力弱，易渗透进入到皮肤中，可及时补充肌肤营养。

具体实施方式中，面膜纸为复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，复合蛋白为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白，复合蛋白的制备方法包括以脱脂大米蛋白为原料，脱脂大米蛋白购买市售产品即可，先制备小分子大米蛋白肽溶液、再制备小分子胶原蛋白肽溶液、然后制备复合蛋白液，得到复合蛋白。

具体的，制备小分子大米蛋白肽溶液的步骤包括：以市售脱脂大米蛋白为原料，按照脱脂大米蛋白质量(kg)∶纯净水体积(L)之比为1∶8～12的比例，先向反应罐中泵入纯净水，再在转速为2000～3000r/min的条件下投入脱脂大米蛋白，边搅拌边加入稀NaOH溶液调节pH为8～10，然后向反应釜夹层通入蒸汽，升温至50～60℃，加入0.5～4％碱性蛋白酶，进行酶解1～2h，再加入0.5～3％风味蛋白酶继续酶解2～4h。酶解完成后将溶液泵入卧式螺旋离心机中，在转速为2500～3500r/min的条件下进行离心分离，分别收集离心上清液和离心沉淀，对收集的离心上清液，即为分子量为500～1000Da的小分子大米蛋白肽溶液，用于制备复合蛋白液；对收集的离心沉淀，含有大量蛋白质等营养物质，用于制造发酵饲料。制备小分子胶原蛋白肽溶液的步骤包括：以市售脱脂胶原蛋白为原料，按照脱脂胶原蛋白质量(kg)∶纯净水体积(L)之比为1∶10～15的比例，向反应罐中泵入纯净水，再在转速为2000～3000r/min的条件下投入脱脂胶原蛋白，边搅拌边加入稀NaOH溶液调节pH为8～10，然后向反应釜夹层通入蒸汽，升温至50～60℃，加入0.5～4％的碱性蛋白酶酶解1～2h，接着加入0.5～3％木瓜蛋白酶继续酶解2～4h，酶解完成后将此溶液泵入卧式螺旋离心机中，在转速为2500～3500r/min的条件下进行离心分离，分别收集上清液和沉淀，对于收集的上清液，即为分子量是800～2000Da的小分子胶原蛋白肽溶液，用于下一步制备复合蛋白液；对于收集的沉淀，含有大量蛋白质等营养物质，用于制造发酵饲料。制备复合蛋白液的步骤包括：将制备的小分子大米蛋白肽溶液与制备的小分子胶原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反应釜中，在搅拌下向反应釜夹层通入蒸汽，升温至35～45℃，然后加入0.5～5％的转谷氨酰胺酶，在搅拌下进行交联反应3～4h，就制备出复合蛋白液，收集复合蛋白液。将复合蛋白液置于不锈钢盘，再将市售纤维无纺布面膜纸浸没于其中，纤维无纺布面膜纸数量与复合蛋白液体积(mL)之比为1∶20～35。将盛有复合蛋白液和纤维无纺布面膜纸的不锈钢盘固定于恒温震荡水浴上，控制震荡频率为30～90次/min，水浴温度为50～70℃，加入缩水甘油醚，进行醚化反应1～2h。反应完成后，分别收集盘中的溶液和醚化后的纤维无纺布面膜纸。对收集的盘中溶液，补充复合蛋白液和缩水甘油醚，可用于下一批次复合蛋白面纸的制备；对收集的醚化后的纤维无纺布面膜纸，置于纯净水中反复洗涤，直至洗涤液中无蛋白质时止，就制备得到本发明所采用的复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸。

具体的，所用缩水甘油醚选自1，2-环己二醇二缩水甘油醚，或1，4丁二醇二缩水甘油醚，或乙二醇二缩水甘油醚，或丙三醇缩水甘油醚，或烯丙基缩水甘油醚中的至少一种。

通过采用复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸与本发明特殊配方的面膜液结合使用，由于面膜纸对营养及功能性因子的吸附力弱，使得面膜液能够更加容易渗透进入到皮肤中，达到及时补充肌肤营养，舒缓皮肤，减少细小皱纹的功效，而且面膜整体无过敏性，对皮肤温和无刺激。

具体实施方式中，本发明面膜液中所采用的人脂肪间充质干细胞提取物通过以下方法制备得到：

步骤S1、将人脂肪间充质干细胞经原代分离培养后，进行传代培养，取传代培养的P3～P30代人脂肪间充质干细胞，利用细胞生长液培养至细胞80％融合时，弃掉培养液，先用磷酸盐缓冲液洗涤细胞三次，磷酸盐缓冲液为pH值为7.0～7.2的PBS溶液，然后加入无血清培养液继续培养72小时后，无血清培养液采购市售产品即可，收集无血清培养液，未被收集的细胞则进行后续处理；其中，将人脂肪间充质干细胞经原代分离培养中，原代分离方法和培养方法采用本领域技术人员的常规操作即可；具体所用细胞生长液为含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液，并且该培养液中还含有抗细菌抗生素；具体实施方式中，含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液为向市售的基础DMEM/F12培养液中加入终浓度为10％的胎牛血清，并加入终浓度为200U/ml的青霉素和终浓度为250U/ml的链霉素得到本发明所采用的细胞生长液；具体的，抗细菌抗生素为青霉素和链霉素两种，其中，青霉素在细胞生长液中的终浓度为200U/ml，链霉素在细胞生长液中的终浓度为250U/ml。

具体操作时，将传代培养的不同代细胞分别进行处理，如：将P3代的人脂肪间充质干细胞利用细胞生长液培养至细胞80％融合时，弃掉培养液，先用磷酸盐缓冲液洗涤细胞三次，然后将细胞加入到无血清培养液中继续培养72小时后，收集得到P3的无血清培养液；将P4代的人脂肪间充质干细胞利用细胞生长液培养至细胞80％融合时，弃掉培养液，先用磷酸盐缓冲液洗涤细胞三次，然后将细胞加入到无血清培养液中继续培养72小时后，收集得到P4代的无血清培养液等等；然后将P3～P30代人脂肪间充质干细胞分别得到的无血清培养液收集合并后，则得到实施例1收集的无血清培养液；同时，将P3～P30代人脂肪间充质干细胞分别得到的未被收集的细胞收集合并后，一起进行后续处理。

步骤S2、将步骤S1中未被收集的细胞利用消化液消化后，超声破碎仪破碎细胞，离心后收集上清，离心的条件优选为17000g、30min。具体的，所采用的消化液为0.25％胰蛋白酶-0.02％EDTA混合消化液，该混合消化液先经0.22μm的滤膜过滤除菌后得到；0.25％胰蛋白酶-0.02％EDTA混合消化液为本领域技术人员进行细胞实验时常用的一种消化液，其配制方法按照教科书上给出的配制方法，均可实现本发明；如可采用如下方法配制：取0.25g胰蛋白酶粉、20mgEDTA粉末和100ml 0.01mol/L的PBS，先用少量PBS溶解胰蛋白酶粉，然后将EDTA粉末和其余的PBS加入混合后，置于37℃水浴中，待彻底溶解液体呈透明为止，用G5抽滤，分装置于4℃冰箱中保存即可。具体的，超声破碎仪破碎细胞的破碎条件为4℃、400W、超声3s、间隔6s，99个循环。

步骤S3、将步骤1收集的无血清培养液和步骤S2收集的上清混合后，具体混合比例优选为体积比1：1，采用孔径为0.45μm的滤膜过滤，收集过滤液对其浓缩，具体采用截留分子量为3KD的过滤膜进行浓缩脱盐，浓缩至原体积的1/10，即将过滤液浓缩后得到浓缩液，使得浓缩液的体积是过滤液的1/10，所得浓缩液再进行除菌处理后，具体为将浓缩液采用无菌的0.22μm滤膜过滤除菌则制备得到所需人脂肪间充质干细胞提取物。

本发明的面膜液中所采用的人脂肪间充质干细胞提取物具有很多种生物学活性，与其他组分结合，能够使得面膜能够更好的具有深层修复、美白及抗皱等功效。

燕麦，禾本科燕族燕麦属，一年生或多年生草本植物，燕麦营养价值丰富而全面，其蛋白质、脂肪、维生素E、膳食纤维以及钙、镁、铁、磷等矿物元素含量均高于其它谷类作物，具有降血脂、降低胆固醇、降血压、降血糖和抗氧化性等多种生功能。

具体实施方式中，面膜液中所采用的燕麦肽的分子量为1000～3000Da，燕麦肽具体是从燕麦麸皮中采用酶法降解提取得到，酶法降解提取的具体步骤包括：1)预处理：将燕麦麸皮加水，调节pH到8-10，在45-55℃加热处理；2)酶处理：在经过预处理后的液体中加入碱性蛋白酶，在45-55℃下搅拌处理1-5小时；然后，加入木瓜蛋白酶，在45-55℃下搅拌处理1-5小时；3)过滤与膜处理：将经过酶处理的液体过滤，然后，以截留分子量为30000-50000Da的超滤膜超滤，然后以截留分子量为600-800Da的纳滤膜纳滤去除所含盐并浓缩，得到燕麦肽。

具体实施方式中，面膜液中的野大豆肽通过将纯天然野大豆经过发酵或酶工程处理得到，纯天然的野大豆肽则具有激活表皮基底细胞分裂功效。

本发明提供的面膜中，面膜液原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，对皮肤温和无刺激，面膜纸对营养及功能性因子的吸附力弱，易渗透进入到皮肤中，可及时补充肌肤营养，使用本发明的面膜后，肌肤变得触感细腻柔滑、肤色更为均匀、肤质显著改善，能够让受损皮肤快速得到修复，且还能起到美白及抗皱的功效。

以下结合具体实施例予以进一步说明。

实施例1

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为纤维素无纺布，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：10份燕麦肽、10份野大豆肽、0.2份人脂肪间充质干细胞提取物、15份对羟基苯甲酸甲酯、15份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、15份苯丙醇、15份1，3-丁二醇、15份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例2

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：10份燕麦肽、10份野大豆肽、0.2份人脂肪间充质干细胞提取物、15份对羟基苯甲酸甲酯、15份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、15份苯丙醇、15份1，3-丁二醇、15份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例3

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：20份燕麦肽、5份野大豆肽、0.05份人脂肪间充质干细胞提取物、10份对羟基苯甲酸甲酯、20份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10份苯丙醇、20份1，3-丁二醇、10份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例4

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：5份燕麦肽、20份野大豆肽、0.1份人脂肪间充质干细胞提取物、20份对羟基苯甲酸甲酯、10份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、20份苯丙醇、10份1，3-丁二醇、10份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例5

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：10份燕麦肽、10份野大豆肽、0.5份人脂肪间充质干细胞提取物、12份对羟基苯甲酸甲酯、18份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、12份苯丙醇、12份1，3-丁二醇、20份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例6

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：12份燕麦肽、8份野大豆肽、0.3份人脂肪间充质干细胞提取物、18份对羟基苯甲酸甲酯、12份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10份苯丙醇、10份1，3-丁二醇、20份透明质酸钠，以及去离子水。

实施例7

本实施例的面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，面膜纸为纤维素无纺布，面膜液的原料由以下重量份的组分组成：15份燕麦肽、15份野大豆肽、0.08份人脂肪间充质干细胞提取物、10份对羟基苯甲酸甲酯、10份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10份苯丙醇、10份1，3-丁二醇、20份透明质酸钠，以及去离子水。

试用结果分析

表1使用面膜90天前后面部皮肤各指标变化情况

使用德国Courage+Khazaka(CK)公司生产的皮肤黑色素和血红素测量仪MX18测定皮肤中黑色素值，靶部位皮肤黑色素测量5次，取其平均值，通过测量产品使用前后皮肤黑色素数值的变化来评估该产品的皮肤美白功效，并对进行美白有效性评估：评估指标包括皮肤滋润、皮肤色斑、皮肤光泽和皮肤灰暗色。

140位平均年龄为55周岁的测试人员，分别使用本发明实施例1-7的面膜后，面部皮肤各项指标变化情况的平均水平如表3中所示。从表中可以看出，连续使用该面膜90天后，测试人员面部皮肤纹理明显变浅，缺水及眼周皮肤黯沉问题有所改善，眼周轮廓变得紧致，黑色素明显减少，美白有效性比例较高。

综上可知，本发明提供的面膜中，面膜液原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，对皮肤温和无刺激，面膜纸对营养及功能性因子的吸附力弱，易渗透进入到皮肤中，可及时补充肌肤营养，使用本发明的面膜后，肌肤变得触感细腻柔滑、肤色更为均匀、肤质显著改善，能够让受损皮肤快速得到修复，且还能起到美白及抗皱的功效。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (9)

1.一种含人脂肪间充质干细胞提取物的面膜，其特征在于，所述面膜包括面膜纸和浸润在面膜纸上的面膜液，以所述面膜液的质量份数为100，所述面膜液的原料包括以下重量份的组分：5-20份燕麦肽、5-20份野大豆肽、0.05-0.5份人脂肪间充质干细胞提取物、10-20份对羟基苯甲酸甲酯、10-20份聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、10-20份苯丙醇、10-20份1，3-丁二醇、10-20份透明质酸钠，以及去离子水。

2.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述面膜纸为复合蛋白结合的纤维素无纺布面膜纸。

3.根据权利要求2所述的面膜，其特征在于，所述复合蛋白为大米蛋白-胶原蛋白复合蛋白。

4.根据权利要求3所述的面膜，其特征在于，所述复合蛋白的制备方法包括以脱脂大米蛋白为原料，先制备小分子大米蛋白肽溶液、再制备小分子胶原蛋白肽溶液、然后制备复合蛋白液，得到复合蛋白。

5.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述复合蛋白通过缩水甘油醚的醚键结合在纤维素无纺布上。

6.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述燕麦肽的分子量为1000～3000Da。

7.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述燕麦肽通过从燕麦麸皮中采用酶法降解提取得到。

8.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述野大豆肽通过将纯天然野大豆经过发酵或酶工程处理得到。

9.根据权利要求1所述的面膜，其特征在于，所述人脂肪间充质干细胞提取物的质量份数为0.05-0.1份。