CN111544333B

CN111544333B - 多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品

Info

Publication number: CN111544333B
Application number: CN202010418673.4A
Authority: CN
Inventors: 唐锡隆; 黄红斌; 王寅力; 曾兰兰
Original assignee: Guangzhou Cadillan Cosmetics Technology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Cadillan Cosmetics Technology Co ltd
Priority date: 2020-05-18
Filing date: 2020-05-18
Publication date: 2021-09-14
Anticipated expiration: 2040-05-18
Also published as: CN111544333A

Abstract

本发明涉及化妆品技术领域，特别涉及多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品。该多肽组合物由燕麦多肽和大米多肽组成，燕麦多肽与大米多肽的质量比为(5～6)：(4～5)。本发明按特定配比将燕麦多肽和大米多肽复配后，在抗氧化功效方面产生了显著的协同效应；本发明将积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液、本发明多肽组合物复配后，具有提升角质层水分含量、提升皮肤弹性、淡化眼角细纹的效果。

Description

多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，特别涉及多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品。

背景技术

近年来，多肽在生物体内的生理功能受到越来越多的重视。大量研究结果表明，蛋白质由于其分子量大，结构复杂，摄入人体后不易被消化吸收，从而影响了其生理功能和营养价值的有效发挥。多肽是比蛋白质结构简单，分子量小，由2～16个氨基酸通过肽键连接的一类化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。科学发现，几乎所有细胞都受多肽调节，如细胞分化、神经激素递质调节、免疫调节等均与活性多肽密切相关，它具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效。由于多肽具有调节植物神经系统、活化细胞免疫机能、改善心血管功能和抗衰老等生理活性，这为开发肽药物、肽类保健品提供了理论依据。

抗氧化性多肽是生物活性肽的一种。抗氧化机理包括通过给抗氧化酶提供氢、缓冲生理pH、螯合金属离子和捕捉自由基等途径起到抗氧化作用。研究表明自由基可引起蛋白质损伤、脂质过氧化、核酸损伤等，进而诱发各种疾病。而抗氧化多肽具有清除自由基、防止脂质过氧化等作用，可用于化妆品中起到延缓衰老的作用。

公开号为CN104706543A的发明公开了一种源自天然的对人体安全性高且效果好的具有抗衰老功能的植物多肽组合物，包含玉米多肽、荞麦多肽、燕麦多肽、葡萄籽多肽、螺旋藻多肽。该植物多肽组合物有较好的清除超氧自由基和羟自由基能力，具有增强成纤细胞增生能力，有延缓皮肤衰老效果，同时具有补水、锁水、减缓油脂分泌作用，且对皮肤无刺激。基于此，寻求一种配方更为简单、抗衰老功能更强的植物多肽组合物成为了化妆品技术领域新的研究方向。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品。该多肽组合物由燕麦多肽和大米多肽组成，具有较强的抗氧化功效。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种多肽组合物，由燕麦多肽和大米多肽组成，燕麦多肽与大米多肽的质量比为(5～6)：(4～5)。

作为优选，燕麦多肽与大米多肽的质量比为1：1。

优选地，燕麦多肽与大米多肽的质量比为3：2。

作为优选，燕麦多肽中多肽含量为35～40mg/mL，大米多肽中多肽含量为 35～40mg/mL。

优选地，燕麦多肽中多肽含量为38～39mg/mL，大米多肽中多肽含量为 36～37mg/mL。

在本发明提供的具体实施例中，燕麦多肽中多肽含量为38.24mg/mL，大米多肽中多肽含量为36.78mg/mL。

本发明还提供了该多肽组合物的制备方法，包括如下步骤：

将燕麦麸皮与水按质量比1：(10～20)混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量1％～3％碱性蛋白酶，在温度45～55℃下搅拌提取1.5～2.5h，静置0.8～1.2h 后取上清液；加入上清液质量7％～8％的活性炭，83～87℃保温30～50min，升温至93～97℃，保温8～12min；83～87℃保温25～35min，静置0.8～1.2h；抽滤，浓缩，灭菌，得到燕麦多肽；

将大米糠与水按质量比1：(10～20)混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量1％～3％的碱性蛋白酶，在温度45～55℃下搅拌提取1.5～2.5h，静置0.8～1.2h 后取上清液；加入上清液质量7％～8％的活性炭，83～87℃保温30～50min，升温至93～97℃，保温8～12min；83～87℃保温25～35min，静置0.8～1.2h；抽滤，浓缩，灭菌，得到大米多肽；

将燕麦多肽与大米多肽按质量比(5～6)：(4～5)混合。

作为优选，燕麦多肽的制备方法为：将燕麦麸皮与水按质量比1：15混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量2％碱性蛋白酶，在温度50℃下搅拌提取2h，静置1h后取上清液；加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；抽滤，浓缩，灭菌。

作为优选，大米多肽的制备方法为：将大米糠与水按质量比1：15混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量2％碱性蛋白酶，在温度50℃下搅拌提取2h，静置1h后取上清液；加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；抽滤，浓缩，灭菌。

本发明还提供了一种保湿抗衰老组合物，由积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液、本发明多肽组合物组成，积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液与多肽组合物的体积比为(15～25)：(5～15)：(0.5～1.5)： (60～80)。

优选地，积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液与多肽组合物的体积比为20：10：1：69。

作为优选，积雪草提取液中积雪草苷A含量不小于0.5mg/mL，积雪草苷 B含量不小于1.5mg/mL，羟基积雪草苷含量不小于3mg/mL，总积雪草苷含量不小于5mg/mL，总黄酮含量不小于3mg/mL，总多酚含量不小于2mg/mL；

银杏叶提取液中槲皮素含量不小于0.1mg/mL，山奈素含量不小于 0.1mg/mL，异鼠李素含量不小于0.04mg/mL，总黄酮醇苷含量不小于 0.5mg/mL；总黄酮含量不小于2mg/mL，总多酚含量不小于2mg/mL；

牡丹花提取液中总黄酮含量不小于3mg/mL，总多酚含量不小于 10mg/mL；

多肽组合物中多肽含量不小于30mg/mL。

在本发明提供的实施例中，积雪草提取液中积雪草苷A含量为 0.5～0.8mg/mL，积雪草苷B含量为1.5～1.7mg/mL，羟基积雪草苷含量为 3～4mg/mL，总积雪草苷含量为5.0～6.5mg/mL，总黄酮含量为3.0～4.0mg/mL，总多酚含量为2.0～3.0mg/mL；

银杏叶提取液中槲皮素含量为0.1～0.2mg/mL，山奈素含量为 0.1～0.2mg/mL，异鼠李素含量为0.04～0.08mg/mL，总黄酮醇苷含量为 0.5～1.0mg/mL；总黄酮含量为2.0～2.5mg/mL，总多酚含量为2.0～3.0mg/mL；

牡丹花提取液中总黄酮含量为3～4mg/mL，总多酚含量为10～12mg/mL；

多肽组合物中多肽含量为30～40mg/mL。

本发明还提供了一种保湿抗衰老化妆品，包括上述保湿抗衰老组合物和化妆品学上可接受的辅料。

作为优选，保湿抗衰老化妆品的剂型为水剂、乳剂、膏剂、粉剂、油剂或面膜剂。

本发明提供了多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品。该多肽组合物由燕麦多肽和大米多肽组成，燕麦多肽与大米多肽的质量比为(5～6)：(4～5)。

本发明具有如下技术效果：

本发明按特定配比将燕麦多肽和大米多肽复配后，在抗氧化功效方面产生了显著的协同效应；

本发明将积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液、本发明多肽组合物复配后，体外细胞试验证明，该保湿抗衰老组合物可显著清除HaCaT细胞中由H₂O₂刺激产生的ROS，具有显著抗氧化能力；对HDF细胞MMP-1基因表达具有显著抑制性，表明可显著减少胶原蛋白降解，具有潜在的抗衰老功效；

人体皮肤试验证明该保湿抗衰老组合物连续使用28天后，受试者脸颊角质层水分含量、皮肤弹性R2值及Q1值均得到显著提升，眼角皮肤纹理度Ra 值、Rz值及Rt值均得到显著改善，且实验组改善效果显著好于对照组，说明实验组测试产品具有提升角质层水分含量、提升皮肤弹性、淡化眼角细纹的效果。

附图说明

图1示4种积雪草原料照片；

图2示3种银杏叶原料照片；

图3示牡丹花原料照片；

图4示积雪草提取液中积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷的HPLC色谱图，其中，1.积雪草苷B；2.羟基积雪草苷；3.积雪草苷A；

图5示银杏叶提取液中槲皮素、山奈素和异鼠李素的HPLC色谱图，其中，1.槲皮素；2.山奈素；3.异鼠李素；

图6示燕麦麸皮原料照片；

图7示大米糠原料照片；

图8示燕麦和大米多肽复配液DPPH的IC₅₀比较；

图9示复配提取物照片；

图10示样品对HaCaT细胞的24h细胞毒性；

图11示样品处理24h后对HaCaT细胞相对ROS水平的影响，注：与空白对照组相比，*p<0.05，***p<0.001；

图12示样品对HDF细胞的24h细胞毒性；

图13示样品对HDF细胞MMP-1基因表达的影响，注：与空白对照组相比，*p<0.05；

图14示检测部位；

图15示角质层水分含量变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表p <0.05/p<0.01/p<0.001)；

图16示皮肤弹性R2值变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表p <0.05/p<0.01/p<0.001)；

图17示皮肤弹性Q1值变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表p <0.05/p<0.01/p<0.001)；

图18示皮肤纹理度Ra值变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表 p<0.05/p<0.01/p<0.001)；

图19示皮肤纹理度Rz值变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表 p<0.05/p<0.01/p<0.001)；

图20示皮肤纹理度Rt值变化趋势及变化率对比图(*/**/***分别代表 p<0.05/p<0.01/p<0.001)；

图21示淡化皱纹有效例(受试者编号：030，VISIA-CR Standard 2光源模式照片)；

图22示淡化皱纹有效例(受试者编号：030，Derma TOP彩色图、棕色图、倒模图模式照片)。

具体实施方式

本发明公开了多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的多肽组合物、保湿抗衰老组合物及化妆品中所用原料或辅料均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

一、积雪草和银杏叶的原料筛选

1.1、积雪草原料筛选

1.1.1依据

研究表明，积雪草的主要成分有积雪草苷和羟基积雪草苷，用于化妆品中具有修复、抗敏、抗炎、美白、抗氧化等的功效。中国药典2015年版第一部p283-284要求，含总苷以羟基积雪草苷和积雪草苷的总量计，不得少于 0.80％(8mg/g)。本配方中积雪草原料的筛选以积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷的含量为依据。由于不同产地及品牌的积雪草原料间的活性成分含量差异较大，因此，从原料品控入手，筛选出优质原料。

1.1.2分析方法

4种不同品牌的积雪草原料(图1)中积雪草苷A、积雪草苷B和羟基积雪草苷的含量测定的方法：依据药典处理方法(中国药典2015年版一部 p283-284)进行提取测定。

提取：将积雪草样品烘干粉碎，过50目筛，称取0.5g样品加入80％甲醇20mL，超声30min后过滤膜，用Agilent 1220HPLC测定。

测定：色谱条件：Agilent HPLC 1220；流动相A：水-2mmolβ环糊精；B：乙腈；梯度洗脱：0～35min，A保持76％，B保持24％；流速：0.8mL/min；进样量：20μL；温度：30℃；检测波长：205nm。用积雪草苷A、积雪草苷 B、羟基积雪草苷标准品进行外标法定量。

1.1.3检测结果

4种积雪草原料中积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷的含量见表1。

表1 4种积雪草原料中积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷的含量(mg/g)

根据中国药典2015年版第一部p283-284的要求，含总苷以羟基积雪草苷和积雪草苷的总量计，不得少于0.80％(8mg/g)。结果表明，1号和4号样品的结果与符合药典要求，其中4号样品中总积雪草苷的含量最高，因此，本配方中选用4号积雪草原料样品。

1.2银杏叶原料筛选

1.2.1依据

研究表明，银杏叶中的黄酮在化妆品中起到抗氧化活性。由于不同产地及品牌的银杏叶原料间活性成分含量差异较大，因此，从原料品控入手，筛选出优质原料。根据药典要求(中国药典2015年版第一部p316-317)银杏叶中总黄酮醇苷含量不低于0.40％(4mg/g)，配方中银杏叶原料的筛选以总黄酮醇苷的含量为依据。

1.2.2分析方法

3种不同品牌的银杏叶原料(图2)中总黄酮醇苷的分析方法依据根据药典(中国药典2015年版一部p316-317)方法。

提取总黄酮醇苷方法：取本品中粉末lg，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷回流提取2小时，弃去三氯甲烷溶液，药渣挥干，加甲醇回流提取4小时，提取液蒸干，残渣加甲醇-25％盐酸溶液(4:1)混合溶液25mL，加热回流30分钟，放冷，转移至50mL容量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即得。分别计算3种黄酮苷元的含量，以下式换算成总黄酮醇苷的含量。

总黄酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)×2.51

色谱条件：Agilent HPLC 1220；流动相：A：水-0.04％磷酸；B：甲醇；梯度洗脱：0～30min，A保持50％，B保持50％；流速：1mL/min；进样量： 20μL；温度：35℃；检测波长：360nm；用槲皮素、异鼠李素及山奈素标准品进行外标法定量。

1.2.3结果

3种银杏叶原料中总黄酮醇苷的含量见表2。结果说明，所购3种银杏叶中总黄酮醇苷含量均大于药典所要求的0.4％(4mg/g)，符合药典要求，其中3号样品中总黄酮醇苷的含量最高，因此，本配方中选用3号银杏叶原料样品。

表2. 3种银杏叶原料中总黄酮醇苷的含量(mg/g)

二、积雪草、银杏叶、牡丹花提取物的制备及主要活性成分的分析

2.1提取物的制备

2.1.1积雪草提取物的制备

利用超声醇提法进行制备。将积雪草粉碎、过20目筛，称取一定量的积雪草粉末，70％乙醇，料液比1:12，低频超声提取40min，粗滤，用滤液质量1％的活性炭脱色，精滤，浓缩，添加多元醇并定容，灭菌防腐。最终得到提取液为：透明液体，浅黄色，植物特征气味，pH＝5～7。

2.1.2银杏叶提取物的制备

利用超声醇提法进行制备。将银杏叶粉碎、过20目筛，称取一定量的银杏叶粉末，70％乙醇，料液比1:12，低频超声提取40min，粗滤，用滤液质量1％的活性炭脱色，精滤浓缩，添加多元醇并定容，灭菌防腐。最终得到提取液为：透明液体，黄棕色，植物特征气味，pH＝5～7。

2.1.3牡丹花提取物的制备

利用超声醇提法进行制备。将牡丹花瓣粉碎、过20目筛，称取一定量的牡丹花瓣(图3)粉末，70％乙醇，料液比1:12，低频超声提取40min，粗滤，用滤液质量1％的活性炭脱色，精滤浓缩，添加多元醇并定容，灭菌防腐。最终得到提取液为：透明液体，淡红棕色，植物特征气味，pH＝5～7。

2.2主要活性成分的分析方法

2.2.1积雪草提取液中积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷分析方法

同1.1.2

2.2.2银杏叶中总黄酮醇苷含量的分析方法

同1.2.

2.2.3提取液中总黄酮的分析方法

提取液0.2mL加至10mL离心管中，加入5％NaNO₂溶液0.3mL，摇匀，静置6min；加入10％Al(NO₃)₃溶液0.3mL，摇匀，静置6min；加入4％NaOH 溶液2mL，最后再加入水补足至10mL并摇匀后，静置10min。用紫外分光光度计在510nm处测定吸光度。用0mL芦丁样本作为空白。以芦丁标准品进行标准曲线法定量。

2.2.4提取液中总多酚的分析方法(福林酚比色法)

试剂配制(现配现用)：10％福林酚；12％Na₂CO₃；0.1mg/mL没食子酸标准溶液。样品的测定：将样品稀释10倍，加0.25mL到试管中，加入5mL 去离子水和2.5mL 10％福林酚试剂，漩涡震荡混匀，静置3min后加入12％ Na₂CO₃溶液1mL，用去离子水补足至15mL，室温下反应1h后，用分光光度计在765nm波长下测定吸光度值。以没食子酸标准品进行标准曲线法定量。

2.3主要活性成分含量分析结果

积雪草提取液中积雪草苷(A和B)和羟基积雪草苷的HPLC色谱图见图4，银杏叶提取液中槲皮素、山奈素和异鼠李素的HPLC色谱图见图5，其含量见表3，此外对积雪草、银杏叶、和牡丹花提取液中的总黄酮和总多酚分别进行了测定，结果见表3。

表3.积雪草、银杏叶和牡丹提取液中主要活性成分含量(mg/mL)

三、燕麦多肽和大米多肽的制备、复配及抗氧化活性的研究

3.1燕麦多肽和大米多肽的制备

3.1.1燕麦多肽的制备

以干燥的燕麦麸皮(图6)为原料，拣选以去除霉变、虫蛀、病疤部分及夹杂物。将过20目筛后的燕麦麸皮与纯水按比例为1：15配料，添加至提取罐中，调pH值9.5-10.5，加入纯水质量2％的碱性蛋白酶，温度50℃，搅拌提取2h；静置1h；取上清液，加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至 95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；粗滤板抽滤，精滤板抽滤；浓缩；定容；灭菌防腐。最终得到提取液为：液体，黄色，蛋白酶固有气味， pH＝6.5～7.5。

3.1.2大米多肽的制备

以干燥的大米糠(图7)为原料，拣选以去除霉变、虫蛀、病疤部分及夹杂物。将过20目筛后的大米糠与纯水按比例为1：15配料，添加至提取罐中，调pH值9.5-10.5，加入纯水质量2％的碱性蛋白酶，温度50℃，搅拌提取2h；静置1h；取上清液，加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；粗滤板抽滤，精滤板抽滤；浓缩；定容；灭菌防腐。最终得到提取液为：液体，黄色，蛋白酶固有气味，pH＝6.5～7.5。

3.2、多肽含量的测定

3.2.1多肽含量测定原理

本产品采用Folin-酚法测定多肽含量，Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。甲试剂由碳酸钠，氢氧化钠，硫酸铜及酒石酸钾钠(KNaC₄H₄O₆·4H₂O)组成。多肽中的肽键在碱性条件下，与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用，生成紫红色络合物。乙试剂是Folin-酚试剂(由磷钼酸、磷钨酸、硫酸和溴等组成)。此试剂在碱性条件下，易被多肽中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应，其色泽深浅与多肽含量成正比。

3.2.2试剂配制

试剂甲：Na₂CO₃10g，NaOH 2g，酒石酸钾钠(KNaC₄H₄O₆·4H₂O)0.25g。溶于500mL去离子水，配制为试剂A；硫酸铜(CuSO₄·5H₂0)0.5g溶解于100mL 去离子水中，配制为试剂B；每次使用前，将50份试剂A与1份试剂B混合，即为试剂甲。

试剂乙：Folin-酚试剂，使用时稀释到0.5N左右。

标准蛋白质溶液：精确称取结晶牛血清蛋白，溶于去离子水中，浓度500 μg/mL左右。

3.2.3检测方法

标准曲线的制作：取16个试管，1个作空白，3个留作未知样品，其余试管分成两组，分别加入0mL，0.1mL，0.2mL，0.4mL，0.6mL，0.8mL，1.0mL，标准蛋白质溶液(浓度为500μg/mL左右)。用水补足到1mL，然后每个试管加入5mL试剂甲在漩涡混合器上迅速混合，于室温放置10min。在逐管加入0.5mL 试剂乙立即混合，室温下放置30min。以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于700nm处利用紫外-可见光分光光度计测定各试管中溶液的吸光度值。每组做3个平行重复，根据蛋白质标准液的浓度和吸光度值作标准曲线。

样品的测定：燕麦多肽以及大米多肽各取0.1mL样品溶液(稀释10倍之后)，利用标准曲线的回归方程计算样品多肽含量。按上述方法进行操作，取1mL 水代替样品作为空白对照。

3.3多肽的抗氧化活性研究(DPPH自由基清除实验)

3.3.1 DPPH自由基清除实验原理

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)是一种比较稳定的脂性自由基，其N 上有一个游离电子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm处有最大的吸收峰。加入抗氧化剂以后，DPPH捕捉一个电子与游离电子配对，紫色褪去，变为无色物质，在517nm处的吸收消失，其褪色程度与其接受的电子数成定量关系。依此原理用分光光度计检测DPPH自由基与试样液反应后吸光值的变化，可检定试样提供氢原子、清除自由基抗氧化的能力。

3.3.2 DPPH自由基清除实验方法

溶液配制：0.25mmol/L DPPH-乙醇溶液：称取9.9mg的DPPH加入到10ml 的乙醇中，溶解摇匀后取1mL加入到9mL的乙醇中即为0.25mmol/L DPPH- 乙醇溶液。

在96孔板中，用移液枪分别加入不同浓度的提取液样品溶液100μL，与 0.25mmol/L DPPH-乙醇溶液100μL，混匀，静置30min后，将样品于517nm 测吸光值。每个试样作3次平行测定，取其均值为A₁。按下式计算DPPH清除率:

其中:A₀为反应体系中不含样品100μL DPPH-乙醇溶液及100μL的乙醇，即空白吸光度值；A₁为反应体系中含有样品的吸光度值(100μL DPPH-乙醇溶液及100μL的样品)；A₂为反应体系中含有100μL样品，100μL水代替DPPH 的吸光度值。

3.3.3大米多肽和燕麦多肽的复配及抗氧化活性研究

将大米多肽与燕麦多肽体积比为1：9；2：8……9:1等进行复配，复配之后将复配溶液分别稀释2、5、10、20、50、100倍进行DPPH自由基清除实验，计算DPPH清除率。利用GraphPadPrism 8软件将不同配比的复配液样品的各浓度与DPPH清除率进行S型标准曲线拟合，计算出不同配比的复配液的IC₅₀。

3.4实验结果

3.4.1多肽含量

根据3.2.3得到牛血清蛋白标准曲线Y＝0.0008x+0.0324(相关系数 R²＝0.9944)。利用该标准曲线计算得出大米多肽和燕麦多肽的含量分别为 36.78mg/mL和38.24mg/mL。将大米多肽和燕麦多肽进行1：1复配后，复配液中总多肽含量为37.01mg/mL。该复合多肽提取液为透明液体，黄色，蛋白酶固有气味，pH 6.5-7.5。

3.4.2 DPPH清除率

实验结果表明(表4)，不同配比的复合肽复配液的DPPH清除率均随浓度的增大而增大。不同配比的大米多肽和燕麦多肽复配液的DPPH自由基清除的IC₅₀(抗氧化能力)比较结果见图8。纯大米多肽和纯燕麦多肽的DPPH 的IC₅₀分别为55.57％和31.6％，说明燕麦多肽的抗氧化活性优于大米多肽。而当大米多肽和燕麦多肽进行1:1复配时，DPPH的IC₅₀最低，为10.7％，这提示我们，当大米多肽和燕麦多肽1:1复配时，DPPH自由基清除能力最强，也即产生了抗氧化活性的显著的协同效应。

表4燕麦多肽和大米多肽在不同配比及浓度下的DPPH自由基清除率(％)

四、提取液的复配及主要活性物质含量

4.1提取液的复配

复配以尽量不产生沉淀、颜色变化小为主要依据，同时兼顾抗氧化活性及保湿性。最终确定复配提取物(图9)中各成分的配比见(表5)。复配提取物的物理性质见(表6)。复配液中主要活性成分(表7)。

复配液中总黄酮测定方法：同2.2.3；

复配液中总多酚测定方法：同2.2.4；

复配液中总多肽测定方法：同3.2。

表5.复配提取物成分体积配比

表6.复配溶液物理性质

表7.复配溶液主要活性物质含量

五、复配提取物的功效评价——体外单细胞模型

5.1试剂耗材与仪器设备

试剂耗材：HDF细胞及其培养基(美国ScienCell公司)；HaCaT细胞(中科院昆明细胞库)；DMEM、胎牛血清、Trizol(美国ThermoFisher Scientific 公司)；青链霉素、噻唑蓝(美国Sigma公司)；CCK-8检测试剂盒(日本 Dojindo Laboratories公司)；维生素E(VE)(日本TCI公司)；H₂O₂(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)；ROS检测试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；反转录和荧光定量PCR试剂盒(日本Takara公司)；细胞培养板等塑料耗材(美国Corning公司)。

HaCaT细胞完全培养基成分：89％DMEM，10％胎牛血清，1％青链霉素。

测试时，待测样品用完全培养基稀释至各测试浓度，并迅速直接应用于实验。待测样品浓度均以v/v百分比表示。

仪器设备：CO₂细胞培养箱(德国Binder公司)；超净工作台(美国Airtech 公司)；倒置显微镜AE2000(麦克奥迪实业集团有限公司)；ME104E电子分析天平(瑞士梅特勒–托利多公司)；酶标仪M1000(瑞士Tecan公司)；实时荧光定量PCR仪ViiA 7(美国ThermoFisher Scientific公司)

5.2实验方法

5.2.1体外抗氧化功效测试(HaCaT细胞ROS清除实验)

1.HaCaT细胞(人角质形成细胞)毒性实验

本实验采用HaCaT细胞为功效评价模型，测试样品的细胞毒性，筛选抗氧化功效测试剂量。

HaCaT细胞在完全培养基中培养，细胞长到80％以上密度时，将细胞按 1×10⁵cells/mL密度接种于96孔板，于37℃，5％CO₂环境中培养过夜；去除培养液，将样品分别按浓度0.156％，0.313％，0.625％，1.25％，2.5％和 5％作用于HaCaT细胞，每个浓度做3个复孔，另设空白对照6孔，在5％CO₂、 37℃环境中孵育24h；每孔加入5mg/mL的噻唑兰溶液10μL，在5％CO₂、 37℃条件下孵育4h；去除培养液，每孔加入DMSO 150μL，避光孵育10 分钟，混匀后用酶标仪在570nm和680nm波长下测定吸光值；按以下公式计算细胞存活率：细胞存活率(％)＝各孔(OD₅₇₀-OD₆₈₀)值/空白组(OD₅₇₀ -OD₆₈₀)值均值×100。

2.HaCaT细胞ROS清除实验

本实验将H₂O₂作用于HaCaT细胞，使细胞产生氧化应激，然后测试样品对ROS的清除能力，评价样品的抗氧化活性。

HaCaT细胞在完全培养基中培养，细胞长到80％以上密度时，将细胞按 1.5×10⁵cells/mL密度接种于96孔板，于37℃，5％CO₂环境中培养过夜；去除培养液，将0.9mMH₂O₂作用于HaCaT细胞，于37℃，5％CO₂环境中培养24h；去除培养液，将样品分别按浓度0.156％，0.313％，0.625％，1.25％和2.5％作用于HaCaT细胞，每个浓度做3个复孔，另设空白对照3孔及阳性对照(2mg/mL VE)3孔，于37℃，5％CO₂环境中培养24h；去除培养液，按ROS检测试剂盒说明书指示，每孔加入10μM DCFH-DA 100μL，于37℃， 5％CO₂环境中培养20min；去除培养液，用DMEM洗涤细胞3次，用酶标仪在488nm激发波长和525nm发射波长下测定荧光值；按以下公式计算相对ROS水平：相对ROS水平(％)＝各孔荧光值/空白组荧光值均值×100。

5.2.2体外抗衰老功效测试

1.HDF细胞(人皮肤成纤维细胞)毒性实验

本实验采用HDF细胞为功效评价模型，测试样品的细胞毒性，筛选抗衰老功效测试剂量。

HDF细胞在完全培养基中培养，细胞长到80％以上密度时，将细胞按 1×10⁵cells/mL密度接种于96孔板，于37℃，5％CO₂环境中培养过夜；去除培养液，将样品分别按浓度0.01％，0.05％，0.1％，0.5％，1％和5％作用于 HDF细胞，每个浓度做3个复孔，另设空白对照6孔，在5％CO₂、37℃环境中孵育24h；按CCK-8检测试剂盒说明书指示，每孔加入CCK-8溶液10μL，在5％CO₂、37℃条件下孵育2h，用酶标仪在450nm波长下测定吸光值；按以下公式计算细胞存活率：细胞存活率(％)＝各孔OD₄₅₀值/空白组OD₄₅₀值均值×100。

2.HDF细胞抗衰老相关基因表达实验

HDF细胞在ScienCell完全培养基中培养，细胞长到80％以上密度时，将细胞按5×10⁵cells/mL密度接种于12孔板，于37℃，5％CO₂环境中培养过夜；将样品按浓度0.5％作用于HDF细胞，另设空白对照及阳性对照(0.1％浓度的透明质酸(HA))，每组做3个复孔，在5％CO₂、37℃环境中孵育24h；去除培养液，用PBS清洗一次后利用Trizol法提取mRNA；按照反转录试剂盒说明书的指示将mRNA反转录为cDNA，随后按照荧光定量PCR试剂盒说明书的指示检测基因表达情况，以2^-ΔΔCt法相对定量基因表达量，所得结果表述为以GAPDH基因表达量进行矫正后的数据。引物信息(表8)如下：

表8引物序列信息

5.2.3数据处理

使用的统计学分析软件为GraphPadPrism 8，图表中的数据的表述形式为 mean±SEM，数据处理采用one-wayANOVA进行分析。P＜0.05时即具有显著性差异。

5.3结果与讨论

1.样品对HaCaT细胞生存率的影响及对ROS的清除能力

本实验旨在利用MTT法测定样品对HaCaT细胞在24h的细胞毒性，选择对细胞无毒性的剂量(细胞生存率≥90％)作为抗氧化功效测试的剂量。实验结果显示(图10)，样品在24h时对HaCaT细胞存活率的影响呈明显剂量依赖效果。其中5％浓度的样品对细胞有明显毒性，2.5％及其以下浓度对细胞存活率没有影响。

根据上述细胞毒性检测结果，我们选取了5个无毒浓度，即0.156％， 0.313％，0.625％，1.25％和2.5％，分别测试其对经0.9mM H₂O₂刺激后HaCaT 细胞产生的ROS的清除能力。实验结果显示(图11)，经0.9mM H₂O₂刺激 24h后的HaCaT细胞，在样品处理24h后对相对ROS水平的影响呈明显剂量依赖效果。相对于未添加样品的空白组，2.5％浓度的样品使相对ROS水平显著降低至77.96％，而其它浓度的样品未能显著清除细胞中的ROS。阳性对照 2mg/mL的VE也可使相对ROS水平显著降低至57.48％。

2.样品对HDF细胞生存率的影响及对抗衰老相关基因的表达

本实验旨在利用CCK-8法测定样品对HDF细胞在24h的细胞毒性，选择对细胞无毒性的剂量(细胞生存率≥90％)作为抗衰老功效测试的剂量。实验结果显示(图12)，样品在24h时对HDF细胞存活率的影响呈明显剂量依赖效果。其中5％及1％浓度的样品对细胞有明显毒性，0.5％及其以下浓度对细胞存活率没有影响。

根据上述细胞毒性检测结果，我们选取了最大安全浓度0.5％，测试样品对HDF细胞抗衰老相关基因表达的影响。实验结果(图13)显示，在基质金属蛋白酶-1基因MMP-1的表达上，0.5％浓度的样品和阳性对照0.1％浓度的HA均具有显著抑制性且程度相近，表明样品具有显著减少胶原蛋白降解的能力，具有潜在的抗衰老功效。

5.4结论

通过复配样品对HaCaT细胞的细胞毒性和ROS清除能力的实验，以及对 HDF细胞的细胞毒性和保湿、衰老相关基因表达的测试，结果表明：

1.抗氧化功效测试：

(1)复配样品浓度在2.5％及以下时对HaCaT细胞无明显毒性；

(2)样品浓度在2.5％时可显著清除HaCaT细胞中由H₂O₂刺激产生的 ROS，具有显著抗氧化能力；

2.抗衰老功效测试：

(1)复配样品浓度在0.5％及以下时对HDF细胞无明显毒性；

(2)样品浓度在0.5％时对基质金属蛋白酶-1基因MMP-1的表达具有显著抑制性，表明样品可显著减少胶原蛋白降解，具有潜在的抗衰老功效。

六、复配提取物的功效评价——人体皮肤模型

6.1仪器设备

皮肤角质层水分含量测量仪Corneometer(德国Courage&Khazaka公司)；皮肤弹性测试仪Cutometer(德国Courage&Khazaka公司)；面部图像分析仪VISIA-CR(美国Canfield公司)；皮肤快速光学成像系统Derma TOP(德国Breuckmann公司)

6.2实验方法

6.2.1测试样品

将复配提取物添加至粉底液基础配方中(乳液状)，添加量为15％。制备出①30份空白样品(不添加复合提取物)，每份25g；②30份添加样品 (添加复合提取物)，每份25g。

6.2.2检测方法

选择皮肤干燥、肌肤松弛、有皱纹的中国健康受试者30名，年龄范围在 35～55周岁。随机选择受试者一侧脸颊使用测试产品“样板A”，记为实验组，另一侧脸颊使用测试产品“样板B”，记为对照组。在受试者使用产品前(第0 天)、第14天、第28天分别进行脸颊图像的拍摄，脸颊角质层水分含量、皮肤弹性R2、Q1值的测量，以及眼角皮肤纹理度(Ra值、Rz值、Rt值)的分析，产品使用前后的评价结果通过统计学检验方法进行比较从而判断是否有统计学差异。

6.2.3检测部位(见图14)

6.2.4检测指标(表9、表10)

表9：功效性检测

表10：功效性评估

6.2.5检测环境

本次测试的测试环境为温度21.0℃±1℃，湿度50.0％±10.0％，符合方案设计的要求。

6.2.6检测流程(表11)

表11：检测流程安排

6.2.7产品使用方法

受试者每天洁面后半脸使用测试产品(一侧面部使用实验组测试产品、一侧面部使用对照组测试产品)，定量使用，早晚各使用一次。

6.2.8数据处理

统计分析软件为SPSS，对各个测量值进行描述性统计，包括数量，均值，标准差，最小值，最大值等。在不同时间点的测量值与基础值比较，采用 Shapiro-Wilk Test进行数据改善值正态分布的显著性检验，Sig.(双侧)>0.01，则呈正态分布，进行配对t检验，显著性差异水平α取0.05。若Sig.(双侧)< 0.01，则呈非正态分布，进行Wilcoxon检验，显著性差异水平α取0.05。

使用产品后的提升/改善(百分比)＝(使用后数据-使用前数据)/使用前数据

6.3检测结果

6.3.1样本完成情况

有效例数30人，平均年龄为48.60±1.14岁，具体纳入标准及排除标准见《附录3：样本完成情况》。

6.3.2产品使用及耐受性反馈情况

每名受试者在28天内按要求使用测试样品，根据不良反应记录及受试者日记跟踪结果均显示无任何不良反应出现，故认为实验组产品人体皮肤安全性好。

6.3.3仪器检测结果及统计分析结果

6.3.3.1角质层水分含量

表12：角质层水分含量统计结果

*显著性标注方法：“n.s.”表示无统计学差异，p>0.05；“*”表示有显著性差异，0.01≤p< 0.05，“**”，0.001≤p<0.01；“***”，p<0.001。

由表12和图15可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者脸颊角质层水分含量提升12.82％，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.001)；连续使用实验组产品28天后，受试者脸颊角质层水分含量提升15.57％，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.001)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著提升脸颊角质层水分含量，且提升效果显著好于对照组，实验组测试产品具有提升角质层水分含量的效果。

6.3.3.2皮肤弹性R2值

表13：皮肤弹性R2值统计结果

由表13和图16可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者脸颊皮肤弹性R2值提升5.48％，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组 (p<0.001)；连续使用实验组产品28天后，受试者脸颊皮肤弹性R2值提升12.39％，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.001)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著提升脸颊皮肤弹性R2值，且提升效果显著好于对照组，实验组测试产品具有提升皮肤弹性的效果。

6.3.3.3皮肤弹性Q1值

表14：皮肤弹性Q1值统计结果

由表14和图17可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者脸颊皮肤弹性Q1值提升4.41％，显著好于使用前(p<0.01)，且显著好于对照组(p <0.05)；连续使用实验组产品28天后，受试者脸颊皮肤弹性Q1值提升7.60％，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.001)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著提升脸颊皮肤弹性Q1值，且提升效果显著好于对照组，实验组测试产品具有提升皮肤弹性的效果。

6.3.3.4皮肤纹理度Ra值

表15：皮肤纹理度Ra值统计结果

由表15和图18可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者眼角皮肤纹理度Ra值改善3.15％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.001)，且好于对照组；连续使用实验组产品28天后，受试者眼角皮肤纹理度Ra值改善 4.72％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.01)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著改善眼角皮肤纹理度Ra值，且改善效果显著好于对照组，实验组测试产品具有淡化眼角细纹的效果。

6.3.3.5皮肤纹理度Rz值

表16：皮肤纹理度Rz值统计结果

由表16和图19可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者眼角皮肤纹理度Rz值改善5.36％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.01)，且显著好于对照组(p<0.05)；连续使用实验组产品28天后，受试者眼角皮肤纹理度Rz值改善9.08％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.05)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著改善眼角皮肤纹理度Rz值，且改善效果显著好于对照组，实验组测试产品具有淡化眼角细纹的效果。

6.3.3.6皮肤纹理度Rt值

表17：皮肤纹理度Rt值统计结果

由表17和图20可以看出，连续使用实验组产品14天后，受试者眼角皮肤纹理度Rt值改善8.80％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.001)；连续使用实验组产品28天后，受试者眼角皮肤纹理度Rt值改善7.56％(绝对值)，显著好于使用前(p<0.001)，且显著好于对照组(p<0.05)。

以上说明，连续使用实验组产品28天后，可以显著改善眼角皮肤纹理度Rt值，且改善效果显著好于对照组，实验组测试产品具有淡化眼角细纹的效果。

6.4有效例

产品淡化眼角细纹有效例

选取1例使用实验组测试产品28天后，淡化眼角细纹效果明显的受试者 030号，见图21、图22。

6.5检测结论

本次测试产品通过30例皮肤干燥、肌肤松弛、有皱纹的中国健康受试者的28天产品连用，人体皮肤安全性好，并由结果可得知实验组测试产品具有以下功效：

–仪器检测结果显示：连续使用实验组测试产品28天后，受试者脸颊角质层水分含量、皮肤弹性R2值及Q1值均得到显著提升，眼角皮肤纹理度Ra 值、Rz值及Rt值均得到显著改善，且实验组改善效果显著好于对照组，说明实验组测试产品具有提升角质层水分含量、提升皮肤弹性、淡化眼角细纹的效果。

综上所述，连续使用实验组测试产品28天后，具有提升角质层水分含量、提升皮肤弹性、淡化眼角细纹的效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

附录1：受试者信息表

附录2：安全性评价结果

安全性评价结果

通过人体试用试验来观察样品对人体皮肤安全性，受试者回访时，仔细询问、检查并记录受试者在使用样品期间所发生的任何不良事件，包括不良事件的表现、发生时间、处理措施及转归，并对不良事件与所使用样品的关系做出判断。

表人体试用试验皮肤不良反应

皮肤反应	分级	第14天	第28天
				无反应	0	30例	30例
微弱红斑	1	0例	0例
				红斑、浸润、丘疹	2	0例	0例
红斑、水肿、丘疹、水疱	3	0例	0例
				红斑、水肿、大疱	4	0例	0例

30名受试者进行28天人体试用试验研究，未见任何皮肤不良反应，参考 2015年版《化妆品安全技术规范》中规定的人体试用试验皮肤不良反应分级标准，评定实验组和对照组测试样品具有良好的安全性。

附录3：样本完成情况

有效例数30人，平均年龄为48.60±1.14。所有完成的受试者均满足下列纳入标准、排除标准与退出(脱落)标准：

纳入标准：

1.身体健康的中国人群，男女均可，年龄35-55岁；

2.皮肤干燥、肌肤松弛、有皱纹者；

3.医疗和健康状况符合纳入标准；

4.无化妆品过敏史；

5.治疗前2周未服用皮质类固醇激素、抗生素、维A酸类药物或接受其他抗痤疮药物治疗

6.近2年内未做过激光美容或化学换肤；

7.无伦理学禁忌；

8.在研究前已阅读并在知情同意书上签字。

排除标准：

1.妊娠或哺乳期妇女；

2.自述有计划怀孕，具有生育能力的女性志愿者不愿或不能采用避孕措施者；

3.目前或本研究开始前已参加其它临床试验研究；

4.对化妆品有过敏或高度敏感风险者；

5.近一周使用抗组胺药或近一个月内使用免疫抑制剂者；

6.近两个月内受试部位使用任何抗炎药物者；

7.受试者患有炎症性皮肤病临床末愈者，或正在接受治疗的哮喘或其它慢性呼吸系统疾病患者；

8.在近6个月内接受抗癌化疗者；

9.免疫缺陷或自身免疫性疾病患者或胰岛素依赖性糖尿病患者，或体质高度敏感者；

10.测试区域接受过美容疗法；

11.非志愿参加或不能按试验要求完成规定内容者。

退出(脱落)标准：

1.受试者失访、主动要求退出；

2.依从性差，不能按时按量使用产品；不能按要求随诊；

3.整个研究期间出现直接影响临床状态评估的新疾病，包括皮肤疾病；

4.整个研究期间出现严重疾病者；

5.研究期间怀孕受试者；

6.不能耐受本研究者；

7.整个研究期间出现严重不良反应SAE者。

Claims

1.一种多肽组合物，其特征在于，由燕麦多肽和大米多肽组成，所述燕麦多肽与所述大米多肽的质量比为(5～6)：(4～5)；

所述多肽化合物的制备方法包括如下步骤：

将燕麦麸皮与水按质量比1：(10～20)混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量1％～3％碱性蛋白酶，在温度45～55℃下搅拌提取1.5～2.5h，静置0.8～1.2h后取上清液；加入上清液质量7％～8％的活性炭，83～87℃保温30～50min，升温至93～97℃，保温8～12min；83～87℃保温25～35min，静置0.8～1.2h；抽滤，浓缩，灭菌，得到燕麦多肽；

将大米糠与水按质量比1：(10～20)混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量1％～3％的碱性蛋白酶，在温度45～55℃下搅拌提取1.5～2.5h，静置0.8～1.2h后取上清液；加入上清液质量7％～8％的活性炭，83～87℃保温30～50min，升温至93～97℃，保温8～12min；83～87℃保温25～35min，静置0.8～1.2h；抽滤，浓缩，灭菌，得到大米多肽；

将燕麦多肽与大米多肽按质量比(5～6)：(4～5)混合。

2.根据权利要求1所述的多肽组合物，其特征在于，所述燕麦多肽与所述大米多肽的质量比为1：1。

3.根据权利要求1所述的多肽组合物，其特征在于，所述燕麦多肽中多肽含量为35～40mg/mL，所述大米多肽中多肽含量为35～40mg/mL。

4.权利要求1至3中任一项所述多肽组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将燕麦多肽与大米多肽按质量比(5～6)：(4～5)混合。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述燕麦多肽的制备方法为：将燕麦麸皮与水按质量比1：15混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量2％碱性蛋白酶，在温度50℃下搅拌提取2h，静置1h后取上清液；加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；抽滤，浓缩，灭菌。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述大米多肽的制备方法为：将大米糠与水按质量比1：15混合，调pH值至9.5～10.5，加入水质量2％碱性蛋白酶，在温度50℃下搅拌提取2h，静置1h后取上清液；加入上清液质量7.5％的活性炭，85℃保温40min，升温至95℃，保温10min；85℃保温30min，静置1h；抽滤，浓缩，灭菌。

7.一种保湿抗衰老组合物，其特征在于，由积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液、权利要求1至3中任一项所述多肽组合物组成，积雪草提取液、银杏叶提取液、牡丹花提取液与多肽组合物的体积比为(15～25)：(5～15)：(0.5～1.5)：(60～80)。

8.根据权利要求7所述的保湿抗衰老组合物，其特征在于，所述积雪草提取液中积雪草苷A含量不小于0.5mg/mL，积雪草苷B含量不小于1.5mg/mL，羟基积雪草苷含量不小于3mg/mL，总积雪草苷含量不小于5mg/mL，总黄酮含量不小于3mg/mL，总多酚含量不小于2mg/mL；

所述银杏叶提取液中槲皮素含量不小于0.1mg/mL，山奈素含量不小于0.1mg/mL，异鼠李素含量不小于0.04mg/mL，总黄酮醇苷含量不小于0.5mg/mL；总黄酮含量不小于2mg/mL，总多酚含量不小于2mg/mL；

所述牡丹花提取液中总黄酮含量不小于3mg/mL，总多酚含量不小于10mg/mL；

所述多肽组合物中多肽含量不小于30mg/mL。

9.一种保湿抗衰老化妆品，其特征在于，包括权利要求7或8所述的保湿抗衰老组合物和化妆品学上可接受的辅料。

10.根据权利要求9所述的保湿抗衰老化妆品，其特征在于，所述保湿抗衰老化妆品的剂型为水剂、乳剂、膏剂、粉剂、油剂或面膜剂。