CN107802527A - 利用食用菌来源复合敷料制备的粉饼及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了利用食用菌来源复合敷料制备的粉饼及其制备方法，属于医学美容护肤产品技术领域。由以下重量份的原料成分组成：食用菌来源复合敷料10‑30份、茯苓粉5份、维生素E 2份、甘油2份、卵磷脂2份、滑石粉3份、丁二醇0.5份、尿囊素0.5份。本发明采用废弃食用菌菌根作为原料生产的食用菌来源复合敷料能够有效促进小鼠和大鼠受损表皮的修复与再生，在此基础上添加茯苓粉等成分，开发出了能够促进人源角质细胞生长的粉饼，可以变废为宝，应用于医学美容的后续护理，在填补市场空白的同时进一步提高食用菌工厂化生产的附加值，增加企业利润，具有很好的经济价值和社会效应。

Description

利用食用菌来源复合敷料制备的粉饼及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种食用菌来源复合敷料以及以此为原料制备的医学美容产品,属于医学美容护肤产品技术领域。
背景技术
我国是食用菌生产大国，食用菌工厂化生产过程中产生的废弃菌根大多就地堆置，或直接施入田中，这造成了农业有机资源的巨大浪费。菌根来源于食用菌的子实体，和药材相比安全性更高，并且其中含有大量多糖、有机酸、果胶、酶等生物活性物质，具有高值化利用的潜力。
随着我国居民的可支配收入水平不断升高，民众对自身形象的关注程度日益增强，不断增大的市场需求促进了医学美容行业的发展。医学美容是指通过医学手段以达到改变人体外部形态、色泽，增强人体外在美感为目的，而进行的一系列治疗。常见的治疗手段包括激光、注射、手术等，具有针对性强、起效迅速的优点。医学美容区别于传统生活美容的根本点，在于会给皮肤表面带来一定程度的创伤，因此会给消费者带来一定程度的心里负担。
目前我国市面上的美容护肤产品玲琅满目，但是主要集中在生活美容领域，涉及医学美容后续护理的美容护肤品较少。少数几种具有创伤修复功能的护肤产品由于原料来源成本较高，例如采用丹参、蚕丝等，大大增加了护理成本；此外，市场上还有采用对伤口愈合有促进功能的蟹壳几丁聚糖制备的护理产品。但是节肢动物的外壳中除了含有几丁聚糖以外，还含有相当多的无机盐、钙和蛋白质，必须经过酸液及碱液的处理才能得到几丁聚糖，而后再经脱乙酰化的处理才能得到具有生理活性的几丁聚糖(壳聚糖)。因此，整个生产工艺比较繁琐，开发潜力有限。
本发明首次以天然来源的食用菌废弃菌根为原料，通过简单的工艺制备出能够有效抑菌、加速皮肤创伤愈合的敷料，并在此基础上添加具有美白保湿功效的茯苓粉，开发出具有促进角质细胞生长功能的粉饼应用于医学美容的后续护理，从而变废为宝，进一步提高食用菌工厂化生产的附加值，增加企业利润。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术中食用菌废弃菌根浪费以及市面上可用于医学美容后续护理的经济有效的美容护肤品缺乏的问题，开发出具有促进角质细胞生长功能的粉饼，从而填补市场空白，提高食用菌工厂化生产的附加值，变废为宝，增加企业利润。
本发明的技术方案
利用上述食用菌来源复合敷料制备的粉饼，由以下重量份的原料成分组成：
食用菌来源复合敷料10-30份、
茯苓粉5份、
维生素E 2份、
甘油2份、
卵磷脂2份、
滑石粉3份、
丁二醇0.5份、
尿囊素0.5份。
所述的食用菌来源复合敷料的制备方法，按照下述步骤制备而成：
(1)将食用菌菌根干燥后磨粉，过筛，得到菌根粉末，密封保存备用；
(2)将菌根粉末进行脱色。
(3)将冷冻干燥至恒重的脱色菌根粉末分别于有机溶剂和碱液中浸泡后，进行微波处理。
(4)待冷却后进行离心，沉淀用水反复冲洗至无醇味，分散在去离子水中形成悬浮液。
(5)收集粒径在一定范围内的粉末，与纳米银颗粒以及金花葵精油均匀混合后，制成多孔膜。
(6)将多孔膜冷冻干燥至恒重，即得食用菌来源复合敷料，保存于-20℃。
步骤(1)中，所述食用菌选自平菇、香菇、草菇、杏鲍菇、金针菇、白玉菇、蟹味菇或双胞蘑菇中的一种或两种以上任意比例的混合物。
步骤(1)中，所述干燥温度为70℃，时间为15h。
步骤(1)中，所述过筛为过60目筛。
步骤(2)中，所述脱色试剂为0.1％次氯酸钠。
步骤(3)中，所述有机溶剂为80％乙醇溶液，浸泡时间为2.5h。
步骤(3)中，所述碱液为50％NaOH溶液，浸泡时间为10min。
步骤(3)中，所述微波处理的功率为462W，处理时间20min。
步骤(4)中，所述粉末的粒径小于100微米。
步骤(4)中，所述粉末与纳米银颗粒以及金花葵精油的比例为100：5：1。
步骤(5)中，所述多孔膜的厚度为0.1mm-0.2mm。
上述粉饼的制备方法：(1)依据配方将食用菌来源复合敷料，茯苓粉和滑石粉混合均匀，获得原料A；(2)依据配方将维生素E、甘油、卵磷脂和尿囊素隔水加热至完全溶解后混入原料A中，获得湿粉；(3)将湿粉舀入模槽内，合模压制，再行脱模和吸湿阴干处理。本发明的有益效果
本发明采用废弃食用菌菌根作为原料生产的功能性食用来源敷料能够有效促进小鼠和大鼠受损表皮的修复与再生，并且效果好于云南白药对照组。在此基础上添加具有美白保湿功效的茯苓粉，开发出能够促进角质细胞增殖的粉饼，可以变废为宝，应用于医学美容的后续护理，在填补市场空白的同时进一步提高食用菌工厂化生产的附加值，增加企业利润，具有很好的经济价值和社会效应。
附图说明
图1为实施例1的食用菌来源复合敷料对小鼠体表伤口愈合效果的时间关系图；
图2为实施例1的食用菌来源复合敷料对大鼠体表伤口愈合效果的时间关系图；
图3为实施例1的食用菌来源复合敷料与云南白药对大鼠体表伤口愈合效果的对比图；
图4为实施例3的食用菌来源复合敷料制备的粉饼对人源角质细胞生长影响的时间和剂量关系图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
将金针菇菌根70℃干燥15h后磨粉，过60目筛，得到菌根粉末，密封保存备用；用0.1％次氯酸钠使菌根粉末褪色，并用去离子水反复洗涤去除任何残留的次氯酸盐；称取2g冷冻干燥至恒重的脱色菌根粉末于50ml烧杯中，加入20ml 80％乙醇在90℃条件下浸泡2.5小时；离心除去乙醇，加入30ml 50％NaOH溶液，搅拌均匀后，浸泡10min。(注：所有溶液体积根据粉末重量等体积放大)；将烧杯放入微波炉内，杯口罩保鲜膜以尽可能减少反应过程中反应液水分的蒸发，在微波功率462W下处理20min；微波反应结束后，取出烧杯，待冷却后进行离心，沉淀用水反复冲洗至中性，分散在去离子水中形成悬浮液；使用滤纸过滤悬浮液，收集粒径小于100微米的粉末，与纳米银颗粒以及金花葵精油以100：5：1的比例均匀混合后，制成厚度为0.2mm的多孔膜；将多孔膜冷冻干燥至恒重，即得功能性食用菌来源敷料，产物记为TG05，保存于-20℃。
实施例2
将金针菇菌根70℃干燥15h后磨粉，过60目筛，得到菌根粉末，密封保存备用；用0.1％次氯酸钠使菌根粉末褪色，并用去离子水反复洗涤去除任何残留的次氯酸盐；称取2g冷冻干燥至恒重的脱色菌根粉末于50ml烧杯中，加入20ml 80％乙醇在90℃条件下浸泡2.5小时；离心除去乙醇，加入30ml 50％NaOH溶液，搅拌均匀后，浸泡10min。(注：所有溶液体积根据粉末重量等体积放大)；将烧杯放入微波炉内，杯口罩保鲜膜以尽可能减少反应过程中反应液水分的蒸发，在微波功率462W下处理20min；微波反应结束后，取出烧杯，待冷却后进行离心，沉淀用水反复冲洗至中性，分散在去离子水中形成悬浮液；使用滤纸过滤悬浮液，收集粒径小于100微米的粉末，与纳米银颗粒以及金花葵精油以100：5：1的比例均匀混合后，制成厚度为0.2mm的多孔膜；将多孔膜冷冻干燥至恒重，即得功能性食用菌来源敷料，产物记为TG06，保存于-20℃。
实施例3
分别将10份食用菌来源复合敷料TG05，5份茯苓粉和3份滑石粉混合均匀，获得原料A；分别将2份维生素E、甘油、卵磷脂和0.5份丁二醇和尿囊素隔水加热至完全溶解后混入原料A中，获得湿粉；将湿粉舀入模槽内，合模压制，再行脱模和吸湿阴干处理，即得粉饼样品TG08。
实施例4
分别将30份食用菌来源复合敷料TG05，5份茯苓粉和3份滑石粉混合均匀，获得原料A；分别将2份维生素E、甘油、卵磷脂和0.5份丁二醇和尿囊素隔水加热至完全溶解后混入原料A中，获得湿粉；将湿粉舀入模槽内，合模压制，再行脱模和吸湿阴干处理，即得粉饼样品TG08-1。
实验测试：
将实施例1制得的功能性食用菌来源敷料分别进行小鼠和大鼠体表伤口愈合效果的研究，并且与市购云南白药创可贴进行效果对比；同时检测了功能性食用菌来源敷料制备的面膜对人源角质细胞生长的影响，方法和结果如下：
1.食用菌来源复合敷料对小鼠体表伤口愈合效果的影响测定
(1)建立小鼠体表创伤模型:将6只雄性小鼠适应性喂养3天后，分别进行编号并称量体重，腹腔注射20％乌拉坦试剂(5mL/100g)进行麻醉，待昏迷后用剃须刀去除小鼠的背部毛发并用碘伏消毒。在脊柱两侧，距离脊柱0.5cm、耳朵后方2.5cm的两个大小相同的面积为1cm2的镜像区域(1.0cm*1.0cm)进行标记，并切除全层皮肤，止血消毒后备用。
(2)给药:用已灭菌的敷料覆盖每只小鼠背部的右侧创面作为实验组，用无菌纱布覆盖每只小鼠背部的左侧创面作为对照组，处理完毕后用绷带加以包扎固定。分别在术后隔天用游标卡尺对伤口面积进行测量、记录、拍照以及换药，直至伤口完全愈合。实验期间小鼠每日自由进食、饮水。由图1可以看出与对照相比，敷料TG05能够有效促进小鼠体表伤口的愈合。
2.食用菌来源复合敷料对大鼠体表伤口愈合效果的影响测定
(1)建立大鼠体表创伤模型:将9只雄性大鼠适应性喂养3天后，分别进行编号并称量体重，腹腔注射20％乌拉坦试剂(5mL/100g)进行麻醉，待昏迷后用剃须刀去除大鼠的背部毛发并用碘伏消毒。在脊柱两侧，距离脊柱1cm、耳朵后方4.5cm的两个大小相同的面积为1cm2的镜像区域(1.0cm*1.0cm)进行标记，并切除全层皮肤，止血消毒后备用。
(2)给药:用已灭菌的敷料覆盖每只大鼠背部的右侧创面作为实验组，用无菌纱布覆盖每只大鼠背部的左侧创面作为对照组，处理完毕后用绷带加以包扎固定。分别在术后隔天用游标卡尺对伤口面积进行测量、记录、拍照以及换药，直至伤口完全愈合。实验期间大鼠每日自由进食、饮水。由图2可以看出与对照相比，敷料TG05能够有效促进大鼠体表伤口的愈合。
3.食用菌来源复合敷料与云南白药对大鼠体表伤口愈合效果的对比测定
用已灭菌的敷料TG05覆盖每只大鼠背部的右侧创面作为实验组，用市售云南白药创口贴覆盖每只大鼠背部的左侧创面作为对照组，其余实验步骤同上，结果见图3。由图3可以看出，敷料TG05对大鼠体表伤口愈合的促进效果优于云南白药对照组。
4.食用菌来源复合敷料制备的粉饼对人源角质细胞生长的影响
将食用菌来源敷料制备的粉饼样品TG08以终浓度50mg/ml溶解于二甲基亚砜配置成母液，保存于-20℃待用。人源角质细胞HOK培养于含10％胎牛血清，50U/m青霉素和50U/mL链霉素的DMEM高糖完全培养液中，置于37℃，5％CO2培养箱中培养。采用MTT细胞增殖检测试剂盒体外测定细胞生长，具体步骤如下：用血球计数板对细胞计数。调整细胞密度至1×106/mL，按每孔2500个细胞接种于96孔细胞培养板。设置空白对照以调零；在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养24h后，小心弃去孔内培养液。将TG08母液用完全培养液稀释成包括对照组在内的4个药物浓度梯度(0-200μg/ml)，每孔给药100μL，设置3个平行孔；继续培养24-72h，并在倒置显微镜下观察。小心弃去孔内培养液，每孔加入新鲜完全培养液100μL和20μLMTT，继续培养4h；终止培养，每孔加入二甲基亚砜150μL，室温放置1h，使结晶物充分溶解；用酶标仪测定490nm波长处各孔的吸光值(OD值)。取三个平行孔的平均OD值，按照以下公式计算细胞生长率(％)：
细胞生长率(％)＝(OD实验组-OD对照组)/OD对照组×100％
TG08对人源角质细胞增殖影响的时间和剂量关系如图4所示。从中可以看出，食用菌来源复合敷料制备的粉饼能够有效促进人源角质细胞的生长，并且促生长效果呈现明显的时间和剂量依赖性。

Claims (10)

1.利用食用菌来源复合敷料制备的粉饼，其特征在于由以下重量份的原料成分组成：
食用菌来源敷料10-30份、
茯苓粉5份、
维生素E 2份、
甘油2份、
卵磷脂2份、
滑石粉3份、
丁二醇0.5份、
尿囊素0.5份。
2.根据权利要求1所述的利用食用菌来源复合敷料制备的粉饼，其特征在于所述的食用菌来源复合敷料按照下述步骤制备而成：
(1)将食用菌菌根干燥后磨粉，过筛，得到菌根粉末，密封保存备用；
(2)将菌根粉末进行脱色；
(3)将冷冻干燥至恒重的脱色菌根粉末分别于有机溶剂和碱液中浸泡后，进行微波处理；
(4)待冷却后进行离心，沉淀用水反复冲洗至无醇味，分散在去离子水中形成悬浮液；
(5)收集粒径在一定范围内的粉末，与纳米银颗粒以及金花葵精油均匀混合后，制成多孔膜；
(6)将多孔膜冷冻干燥至恒重，即得食用菌来源复合敷料，保存于-20℃。
3.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(1)中，所述食用菌选自平菇、香菇、草菇、杏鲍菇、金针菇、白玉菇、蟹味菇或双胞蘑菇中的一种或两种以上任意比例的混合物。
4.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(1)中，所述干燥温度为70℃，时间为15h。
5.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(1)中，所述过筛为过60目筛。
6.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(2)中，所述脱色试剂为0.1％次氯酸钠。
7.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(3)中，所述有机溶剂为80％乙醇溶液，浸泡时间为2.5h；
其特征在于步骤(3)中，所述碱液为50％NaOH溶液，浸泡时间为10min；
其特征在于步骤(3)中，所述微波处理的功率为462W，处理时间20min。
8.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(4)中，所述粉末的粒径小于100微米；
其特征在于步骤(4)中，所述粉末与纳米银颗粒以及金花葵精油的比例为100：5：1。
9.根据权利要求1所述食用菌来源复合敷料的制备方法，其特征在于步骤(5)中，所述多孔膜的厚度为0.1mm-0.2mm。
10.根据权利要求1所述的食用菌来源复合敷料制备的粉饼的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：(1)依据配方将食用菌来源敷料，茯苓粉和滑石粉混合均匀，获得原料A；(2)依据配方将维生素E、甘油、卵磷脂和尿囊素隔水加热至完全溶解后混入原料A中，获得湿粉；(3)将湿粉舀入模槽内，合模压制，再行脱模和吸湿阴干处理。
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