CN107778476B - 一种超分子水凝胶材料的构建方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种新型超分子水凝胶材料的构建方法及水凝胶材料在组织工程、生物医用材料及药物负载方面的应用，该水凝胶材料由精氨酸端基化改性的聚乙二醇与鱼精DNA以2:(1‑5)的电荷摩尔比通过静电结合制备而成。该方法操作简便、易于纯化、高效、成本低并能在偶联过程中保持氨基酸原有手性中心活性等特点。采用该方法制备的超分子网络结构的水凝胶材料可以最大程度地保持所负载分子的生物活性，并实现对特定靶位的局部持续释放，同时具有生物降解性、可逆性、更多的环境响应性和结构动态可控性。

Description

一种超分子水凝胶材料的构建方法及应用
技术领域
本发明涉及新材料技术领域，具体涉及一种基于Arg2-PEG-Arg2与DNA静电作用构建的超分子水凝胶材料及构建方法与应用。
背景技术
水凝胶材料是以水为分散介质的凝胶材料，是具有网状交联结构的水溶性高分子中引入一部分疏水基团和亲水残基，亲水残基与水分子结合，将水分子连接在网状内部，而疏水残基遇水膨胀的交联聚合物。利用高分子为基本原料构建的水凝胶材料，根据其凝胶形成机理大致可以分为两大类，一类是聚合物通过共价连接的方法所形成的化学交联水凝胶，另一类是利用聚合物之间主客体识别、静电作用等非共价作用力形成的物理交联水凝胶。由高分子链段之间物理交联形成的超分子凝胶网络，由于能够充分利用大量天然存在的各类生物分子及其聚集体为基本构造单元，具有原料来源的广泛性、构建过程的可逆性和组装结构的有序性等特点，受到研究人员的广泛关注。同时，物理交联机理又能极大地简化功能材料的构筑过程，拓展功能材料的应用领域。
由两种或两种以上不同类型高分子复合而成的杂化材料，由于可以同时兼具不同种类单体或聚合物的性质，使该类材料拥有独特的结构和功能。专利CN103910893A公开了一种聚多肽-DNA水凝胶及其制备方法，包括共价结合有单链DNA分子的多肽和具有两个粘性末端的双链DNA分子，通过单链DNA分子与双链DNA分子的互补形成交联结构，该水凝胶机械强度可调节、生物相容性良好。但是通过共价结合的方式，操作条件复杂、不可逆，同时也未公开通过静电作用构筑杂化超分子水凝胶材料的方法。
在各类超分子非共价作用力当中，静电相互作用由于其良好的响应性与可逆性，使基于静电作用形成的水凝胶体系往往具有很好的动态可控性，因此，分子间的静电作用是构筑超分子水凝胶材料的重要非共价驱动力。Aida等人在Nature，2010(463)：339-343中将由聚乙二醇连接多个胍基形成的树状分子与黏土纳米薄片进行混合后，基于树状高分子两端胍基与黏土片层表面电荷之间的静电作用，形成了具有自愈性且模量可调控的环境友好型水凝胶材料。在Journal of the American Chemical Society，2009(131)：1626-1627中，他们将多个胍基通过柔性链段与聚乙二醇连接起来，提高和稳定这种非共价作用力的方法，已经成功应用于稳定微蛋白的“分子胶水”的研究中。
很多生物大分子往往也是带有电荷的聚电解质，如DNA、RNA、海藻酸、聚谷氨酸等是阴离子型聚电解质，壳聚糖、聚赖氨酸、溶菌酶等是阳离子型聚电解质。这些聚电解质类生物大分子之间的静电相互作用，在基因调控、胞间通讯和适配体识别等过程中发挥了重要的作用，并且带相反电荷的聚电解质还可利用多价离子之间的相互作用实现共组装，因此静电作用是负载和转运生物大分子的重要方法。
因此，本发明提供了一种利用柔性PEG链段作为连接部分、经修饰后的PEG两端的精氨酸中的胍基与DNA骨架中的磷酸基团形成稳定铆合位点，形成质量浓度低且稳定性高的新型超分子水凝胶材料。
发明内容
本发明提供了一种利用柔性PEG链段作为连接部分、经修饰后的PEG两端的精氨酸中的胍基与DNA骨架中的磷酸基团形成稳定铆合位点，形成质量浓度低且稳定性高的新型超分子水凝胶材料；利用聚乙二醇(HO-PEG-OH)末端的羟基与丁二酸酐进行偶联反应，使PEG末端羟基转化成羧基，随后加入脱水试剂及催化剂将PEG端位羧基与N-羟基丁二酰亚胺反应制备成活化酯结构后，再与氨基酸中氨基进行偶联的方法进行PEG端基修饰，该方法具有操作简便、易于纯化、高效、成本低并能在偶联过程中保持氨基酸原有手性中心活性等特点。采用该方法制备的超分子网络结构的水凝胶材料可以最大程度地保持所负载分子的生物活性，并实现对特定靶位的局部持续释放，同时具有生物降解性、可逆性、更多的环境响应性和结构动态可控性；同时通过静电作用方式结合的杂化超分子而具有瞬态网络结构的特征，同时解决了传统使用光引发剂和化学交联剂带来的毒性。
本发明人还惊奇的发现质量浓度为30mg/mL的精氨酸功能化的聚乙二醇Arg2-PEG-Arg2水溶液的Zeta电位测量值为+3mV左右，而相同浓度的原料(HO-PEG-OH)与合成中间体(Glu-PEG-Glu)的Zeta电位的测量值都为负电位(-2.8mV与-12.3mV)，证明聚乙二醇经精氨酸功能化修饰后，两侧端基成功连接了带有正电荷胍基，为后续研究利用静电作用构筑超分子三维网络水凝胶材料提供了结构基础。
本发明的第一方面，涉及一种新型超分子水凝胶材料的构建方法，由精氨酸端基化改性的聚乙二醇与鱼精DNA以2:(1-5)的电荷摩尔比通过静电结合制备而成。
优选的，所述电荷摩尔比为2:(2-4)；进一步优选的，所述电荷摩尔比2:3。
优选的，所述精氨酸端基化改性的聚乙二醇为Arg2-PEG-Arg2。
本发明所述的静电结合作用是构筑超分子水凝胶材料的重要非共价驱动力。本发明通过利用精氨酸端基化改性的聚乙二醇侧链中的胍基作为正离子的来源与鱼精DNA的磷酸二酯键骨架氧负离子之间的盐桥作用形成以静电相互作用为主的非供价作用力进行交联，获得新型的超分子水凝胶材料。
优选的，所述一种新型超分子水凝胶材料的构建方法，包括如下步骤：
1、将Arg2-PEG-Arg2与鱼精DNA分别溶解于水，获得Arg2-PEG-Arg2母液和鱼精DNA母液；
2、按照DNA磷酸二酯键中带负电荷的磷酸基团与聚合物中精氨酸侧链质子化的胍基正电荷，两者之间的电荷摩尔比例为(1-5):2进行混合后，常温下静置过夜。其中，利用翻转样品管的方法，确定样品能够形成杂化水凝胶结构的最低成胶质量浓度。
优选的，所述步骤1中所述的Arg2-PEG-Arg2母液带正电荷的胍基正离子与所述鱼精DNA母液中带负电荷的磷酸基团的电荷浓度分别控制在10mM左右。
优选的，所述电荷摩尔比为(2-4):2；进一步优选的，所述电荷摩尔比3:2。
本发明所述的Arg2-PEG-Arg2合成步骤如下：
(1)合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇；
(2)以步骤(1)中获得的谷氨酸端基化改性的聚乙二醇为原料合成Arg2-PEG-Arg2。
优选的，所述步骤(1)中合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇的具体步骤如下：
1)将聚乙二醇与丁二酸酐溶解在溶剂中，反应完全后，除去过量酸酐，干燥，得到羧基化改性的聚乙二醇；
优选的，步骤1)中所述溶剂为无水二氯甲烷(DCM)。
优选的，步骤1)中所述聚乙二醇加入量为3-10g。进一步优选的，所述聚乙二醇加入量为4-6g。最优选的，所述聚乙二醇加入量为5g(0.5mmol)。
优选的，步骤1)中所述丁二酸酐为过量加入。
优选的，步骤1)中所述聚乙二醇与丁二酸酐反应时间为1-3天。优选为2天。反应温度为40-50℃。优选为45℃。
优选的，步骤1)中所述除去过量酸酐的方法为通过加水水解后分液洗涤除去。
优选的，步骤1)中所述干燥为将有机层旋干溶剂并真空干燥后。
2)在步骤1)中获得的羧基化改性的聚乙二醇中顺序加入N,N'-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺、4-二甲氨基吡啶与无水四氢呋喃(THF)，反应结束后过滤、浓缩、干燥得到两端连接有活性酯结构的聚乙二醇；
优选的，步骤2)中所述羧基化改性的聚乙二醇加入量为2.0-4.0g，分别加入N,N'-二环己基碳二亚胺0.0824g-0.177g，N-羟基丁二酰亚胺0.0472g-0.0944g，4-二甲氨基吡啶0.48mg-0.96mg，无水THF约80mL。进一步优选的，所述羧基化改性的聚乙二醇加入量为3.0g，分别加入N,N'-二环己基碳二亚胺0.133g，N-羟基丁二酰亚胺0.071g，4-二甲氨基吡啶0.72mg，无水THF约80mL。
优选的，步骤2)中所述反应在冰水浴中进行，时间为5min左右；随后过夜反应。
优选的，步骤2)中所述过滤目的为去除反应产生的不溶物N,N'-二环乙基脲(DCU)；所述过滤和浓缩步骤反复进行，具体包括反应过夜后置于4℃冰箱放置约1小时后，过滤除去大部分的DCU。将滤液使用旋转蒸发仪浓缩至原体积的三分之二后，再一次于4℃放置约4小时，过滤除去析出的DCU。继续浓缩至原体积的三分之一，4℃放置过夜后，进一步过滤除去残留的DCU。
优选的，步骤2)中所述干燥为将最后一次滤液旋干后真空干燥。
3)在步骤2)中获得的两端连接有活性酯结构的聚乙二醇中依次加入谷氨酸、NaHCO3和水，溶解得谷氨酸水溶液，将谷氨酸水溶液滴加至THF中，反应完全后去除THF、透析、干燥得到谷氨酸端基化改性的聚乙二醇。
优选的，步骤3)中所述活性酯结构的聚乙二醇含量为1g-3g，所述谷氨酸加入量为0.051g-0.153g，所述NaHCO3加入量为0.0645g-0.1935g，所述水加入15mL，调节pH值使H-Glu-OH完全溶解。进一步优选的，所述活性酯结构的聚乙二醇含量为2g，所述谷氨酸加入量为0.102g，所述NaHCO3加入量为0.129g，所述水加入15mL，调节pH值使H-Glu-OH完全溶解。
优选的，步骤3)中，在冰水浴中，将溶解后的谷氨酸水溶液缓慢滴加至上述THF溶液中，所述THF溶液为15mL。
优选的，步骤3)中所述反应时间约5h。
优选的，步骤3)中所述去除THF采用旋转蒸发仪。
优选的，步骤3)中所述透析时间约48h，目的为除去过量未反应的谷氨酸。优选的，所述干燥采用冷冻干燥。
在本发明的一个具体实施例中，所述步骤1)中羧基化改性的聚乙二醇结构式如式I所示；所述步骤2)中两端连接有活性酯结构的聚乙二醇结构式如式II所示；所述步骤3)中谷氨酸端基化改性的聚乙二醇结构式如式III所示。
Figure BDA0001482661120000051
Figure BDA0001482661120000061
式中n为200-300。
优选的，所述式中n为227。
优选的，所述步骤(2)中合成Arg2-PEG-Arg2的具体步骤如下：
a)将谷氨酸端基化改性的聚乙二醇溶解于THF中，随后顺序加入N,N'-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺、4-二甲氨基吡啶，反应结束后过滤、浓缩得到两端谷氨酸的羧基转变为活性酯的结构的聚乙二醇；
优选的，所述谷氨酸端基化改性的聚乙二醇为上述构建方法中步骤3)中获得的谷氨酸端基化改性的聚乙二醇。
优选的，取0.5g-1.5g的谷氨酸端基化改性的聚乙二醇溶解于10mL THF中。进一步优选的，取1.0g的谷氨酸端基化改性的聚乙二醇溶解于10mL THF中。
优选的，所述加入N,N'-二环己基碳二亚胺0.045g-0.136g，N-羟基丁二酰亚胺0.0242g-0.072g，4-二甲氨基吡啶0.24mg-0.74mg。进一步优选的，分别加入N,N'-二环己基碳二亚胺0.0908g，N-羟基丁二酰亚胺0.0483g，4-二甲氨基吡啶0.49mg。
优选的，所述步骤a)中反应为在冰水浴中反应30min，再于常温下反应3h。
优选的，所述过滤的目的在于去除反应产生的DCU。
优选的，所述过滤与浓缩交替反复进行，步骤为通过过滤的方法除去产生的DCU，后经多次浓缩，并再次置于4℃冷却过滤，进一步除去残留的DCU副产物。
b)将步骤a)中获得的两端为活性酯结构的聚乙二醇溶解于THF中，将L-精氨酸溶解于NaHCO3水溶液中，将溶解在NaHCO3水溶液中的L-精氨酸滴加到两端为活性酯结构的聚乙二醇的THF溶液中；
优选的，所述步骤b)中THF为10mL。所述反应中的L-精氨酸为过量加入。
c)待步骤b)中反应完全后，进行旋蒸、透析、干燥得Arg2-PEG-Arg2。
优选的，所述步骤b)中反应为冰水浴30min，再于室温下反应过夜。
优选的，所述旋蒸的目的为去除大部分的THF。
优选的，所述透析为在纯水中透析，其目的为除去过量未反应的精氨酸。
在本发明一个具体实施例中，所述步骤a)得到的两端谷氨酸的羧基转变为活性酯的结构的聚乙二醇的结构式如式IV所示；所述步骤c)中得到的Arg2-PEG-Arg2的结构式如式V所示。
Figure BDA0001482661120000071
式中n为200-300。
优选的，所述式中n为227。
本发明的第二方面，涉及根据上述的构建方法获得的新型超分子水凝胶材料。
本发明的第三方面，涉及本发明所述的新型超分子水凝胶材料在组织工程、生物医用材料及药物负载方面的应用。
本发明的第四方面，涉及一种精氨酸端基化改性的聚乙二醇，所述的聚乙二醇结构如式V所示：
Figure BDA0001482661120000081
式中n为200-300的整数。
本发明所述的DCM、THF和正己烷经高纯氮鼓泡除氧再利用活性氧化铝柱干燥后使用。
本发明利用柔性PEG链段作为连接部分、经修饰后的PEG两端的精氨酸中的胍基与DNA骨架中的磷酸基团形成稳定铆合位点，形成质量浓度低且稳定性高的新型超分子水凝胶材料；利用聚乙二醇(HO-PEG-OH)末端的羟基与丁二酸酐进行偶联反应，使PEG末端羟基转化成羧基，随后加入脱水试剂及催化剂将PEG端位羧基与N-羟基丁二酰亚胺反应制备成活化酯结构后，再与氨基酸中氨基进行偶联的方法进行PEG端基修饰，该方法具有操作简便、易于纯化、高效、成本低并能在偶联过程中保持氨基酸原有手性中心活性等特点。采用该方法制备的超分子网络结构的水凝胶材料可以最大程度地保持所负载分子的生物活性，并实现对特定靶位的局部持续释放，同时具有生物降解性、可逆性、更多的环境响应性和结构动态可控性。
本发明所述的缩写与对应的全称如下：
PEG：聚乙二醇
DCU：N,N'-二环乙基脲
DCM：二氯甲烷
DCC：N,N'-二环己基碳二亚胺
DMAP：4-二甲氨基吡啶
THF：活性酯的结构的聚乙二醇
NHS：N-羟基丁二酰亚胺
附图说明
以下，结合附图来详细说明本发明的实施例，其中：
图1：谷氨酸端基化改性的聚乙二醇(Glu-PEG-Glu)的合成过程，其中，PEG分子量为10000g/mol；
图2：Arg2-PEG-Arg2的合成过程，其中，PEG分子量为10000g/mol；
图3：核磁氢谱图，其中，A为Glu-PEG227-Glu的核磁氢谱图；B为Arg2-PEG-Arg2的核磁氢谱图；
图4：Arg2-PEG-Arg2与鱼精DNA形成超分子水凝胶结构示意图，其中，A为Arg2-PEG-Arg2的两端胍正离子与鱼精DNA中带负电荷的氧负离子静电相互作用形成偶联结合位点；B为具有空间网络结构的杂化超分子水凝胶材料；C为稳定的水凝胶结构。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本申请实施例所用的材料、仪器：
L-谷氨酸：H-Glu-OH，上海吉尔生化，99％；
L-精氨酸：H-Arg-OEt.2HCl，上海吉尔生化，96％；
N,N'-二环己基碳二亚胺：DCC，上海吉尔生化，99％；
丁二酸酐：阿拉丁，99％；
N-羟基丁二酰亚胺：NHS，阿拉丁，99％；
4-二甲氨基吡啶：DMAP，阿拉丁，99％；
鱼精DNA(2000bp)、聚乙二醇(HO-PEG227-OH，Mn＝10000g/mol)：Sigma-Aldrich；
去离子水(电阻率＞18MΩ·cm-1)：Millipore Milli-Q纯化；
1H-NMR使用Bruker AV400FT-NMR核磁共振仪测定；
Zeta电位使用英国Malvern公司Nano ZS ZEN3600型Zeta电位粒度仪侧量。
实施例1
1、制备方法
1.1合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇
1)将5g(0.5mmol)的聚乙二醇(HO-PEG227-OH)与过量的丁二酸酐于250mL无水二氯甲烷中，45℃反应2天后，过量的酸酐通过加水水解后分液洗涤除去，将有机层旋干溶剂并真空干燥后，得到端基进行羧基化改性的聚乙二醇(HOOC-PEG227-COOH)；
2)取3.0g的HOOC-PEG227-COOH，加入1.1倍当量的N,N'-二环己基碳二亚胺(0.133g)，1.05倍当量的N-羟基丁二酰亚胺(0.071g)，0.01倍当量的DMAP(0.72mg)，无水四氢呋喃约80mL，冰水浴中反应5min后，有一定量不溶物N,N'-二环乙基脲(DCU)产生。反应过夜后，置于4℃冰箱放置约1小时后，过滤除去大部分的DCU。将滤液使用旋转蒸发仪浓缩至原体积的三分之二后，再一次于4℃放置约4小时，过滤除去析出的DCU。继续浓缩至原体积的三分之一，4℃放置过夜后，进一步过滤除去残留的DCU。最后将滤液旋干后真空干燥，得到两端连接有活性酯结构的产物(NHS-PEG-NHS)；
3)取2g NHS-PEG-NHS，溶解于15mL THF中，然后依次取1.8倍当量的H-Glu-OH(0.102g)、4倍当量的NaHCO3(0.129g)、15mL水，调节溶液pH值使H-Glu-OH完全溶解。然后在冰水浴中，将溶解后的谷氨酸水溶液缓慢滴加至上述THF溶液中，反应约5小时后，用旋转蒸发仪除去反应体系中大部分的THF，将剩余的水溶液转移至透析袋中，并于纯水中透析48小时，除去过量未反应的谷氨酸，最后将透析后的溶液冷冻干燥后，得到两端分别接有谷氨酸的聚乙二醇(Glu-PEG-Glu)。
1.2合成Arg2-PEG-Arg2
a)取1.0g的Glu-PEG-Glu溶解于10mL四氢呋喃中，依次加入DCC(0.0908g)、NHS(0.0483g)和DMAP(0.49mg)，并在冰水浴中反应30min后，再于常温下反应3h，通过过滤的方法除去产生的DCU，后经多次浓缩，并再次置于4℃冷却过滤，进一步除去残留的DCU副产物，进而使两端谷氨酸中的羧基都转变成活性酯的结构(NHS-Glu-PEG-Glu-NHS)；
b)将NHS-Glu-PEG-Glu-NHS溶解于10mL THF，将过量的H-Arg-OEt溶解于NaHCO3水溶液中，然后在冰水浴中缓慢滴加到NHS-Glu-PEG-Glu-NHS的THF溶液中，反应半小时后，再于室温下反应过夜，经过旋蒸的方法除去大部分的THF，然后于纯水中进行透析的方法除去过量未反应的精氨酸，最后将溶液冷冻干燥后，最终得到聚乙二醇两端分别修饰有两个精氨酸的产物(Arg2-PEG-Arg2)。
1.3合成超分子水凝胶材料
将鱼精DNA与Arg2-PEG-Arg2分别溶解于水中，并且分别保持其电荷浓度控制在10mM左右，按照DNA磷酸二酯键中带负电荷的磷酸基团与聚合物中精氨酸侧链质子化的胍基正电荷，两者之间的电荷摩尔比例为3:2进行混合后，常温下静置过夜，利用翻转样品管的方法，确定样品能够形成杂化水凝胶结构的最低成胶质量浓度。
2、结果
图1为谷氨酸端基化改性的聚乙二醇(Glu-PEG227-Glu)的合成过程。
首先将聚乙二醇末端的羟基与丁二酸酐进行偶联反应，通过羟基使五元环酸酐开环，从而将聚乙二醇末端的羟基羧基化，得到末端羧基化的聚乙二醇，其中产量为4.85g，产率为95％；随后将末端羧基制备成活化酯结构得到NHS-PEG-NHS，其中，产量为2.75g，产率为90％；再与谷氨酸H-Glu-OH进行偶联得到Glu-PEG227-Glu，其中，产量为1.66g，产率为82％。产物Glu-PEG227-Glu的1H-NMR(图3-A)表征结果表明，在化学位移3.5～3.9的范围内为聚乙二醇亚甲基的特征峰，同时谷氨酸侧基中亚甲基的吸收峰出现在化学位移1.8～2.3的区域内，证明通过氨基与活化酯的反应，可以高效地制备得到以谷氨酸为端基的聚乙二醇。
图2为Arg2-PEG-Arg2的合成过程。
首先将Glu-PEG227-Glu端位的羧基转化为活化酯结构，然后与过量的精氨酸H-Arg-OEt在THF/NaHCO3的混合溶剂中反应后，进一步透析、干燥得到目标产物Arg2-PEG-Arg2，其中产量为0.83g，产率为78％。该产物Arg2-PEG-Arg2的1H-NMR表征结果如图3-B所示，在核磁氢谱的相应化学位移处具有聚乙二醇的亚甲基和端基精氨酸相应基团的吸收峰，并且它们的积分面积也与其结构中氢的数目相对应，表明合成出多个精氨酸端基化修饰的聚乙二醇Arg2-PEG-Arg2。
图4为Arg2-PEG227-Arg2与鱼精DNA形成超分子水凝胶结构示意图，其中，Arg2-PEG227-Arg2的两端胍正离子与鱼精DNA中带负电荷的氧负离子利用静电相互作用形成偶联结合位点(图4A)；同时连接两端精氨酸的中间作为桥链结构的聚乙二醇链，具有柔性且链段长度较长的特点，能够将精氨酸与DNA形成的偶联位点连接起来，最终形成具有空间网络结构的杂化超分子水凝胶材料(图4B)；同时两种组分总的质量浓度为4％左右的情况下，可以形成稳定的水凝胶结构(图4C)。
实施例2
1、制备方法
1.1合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇
1)将3g(0.3mmol)的聚乙二醇(HO-PEG227-OH)与过量的丁二酸酐于250mL无水二氯甲烷中，40℃反应3天后，过量的酸酐通过加水水解后分液洗涤除去，将有机层旋干溶剂并真空干燥后，得到端基进行羧基化改性的聚乙二醇(HOOC-PEG227-COOH)；
2)取2.0g的HOOC-PEG227-COOH，加入N,N'-二环己基碳二亚胺(0.0824g)，N-羟基丁二酰亚胺(0.0472g)，DMAP(0.48mg)，无水四氢呋喃约80mL，冰水浴中反应5min后，有一定量不溶物N,N'-二环乙基脲(DCU)产生。反应过夜后，置于4℃冰箱放置约1小时后，过滤除去大部分的DCU。将滤液使用旋转蒸发仪浓缩至原体积的三分之二后，再一次于4℃放置约4小时，过滤除去析出的DCU。继续浓缩至原体积的三分之一，4℃放置过夜后，进一步过滤除去残留的DCU。最后将滤液旋干后真空干燥，得到两端连接有活性酯结构的产物(NHS-PEG-NHS)；
3)取1g NHS-PEG-NHS，溶解于15mL THF中，然后依次取H-Glu-OH(0.051g)、NaHCO3(0.0645g)、15mL水，调节溶液pH值使H-Glu-OH完全溶解。然后在冰水浴中，将溶解后的谷氨酸水溶液缓慢滴加至上述THF溶液中，反应约5小时后，用旋转蒸发仪除去反应体系中大部分的THF，将剩余的水溶液转移至透析袋中，并于纯水中透析48小时，除去过量未反应的谷氨酸，最后将透析后的溶液冷冻干燥后，得到两端分别接有谷氨酸的聚乙二醇(Glu-PEG-Glu)。
1.2合成Arg2-PEG-Arg2
a)取0.5g的Glu-PEG-Glu溶解于10mL四氢呋喃中，依次加入DCC(0.0454g)、NHS(0.0242g)和DMAP(0.24mg)，并在冰水浴中反应30min后，再于常温下反应3h，通过过滤的方法除去产生的DCU，后经多次浓缩，并再次置于4℃冷却过滤，进一步除去残留的DCU副产物，进而使两端谷氨酸中的羧基都转变成活性酯的结构(NHS-Glu-PEG-Glu-NHS)；
b)将NHS-Glu-PEG-Glu-NHS溶解于10mL THF，将过量的H-Arg-OEt溶解于NaHCO3水溶液中，然后在冰水浴中缓慢滴加到NHS-Glu-PEG-Glu-NHS的THF溶液中，反应半小时后，再于室温下反应过夜，经过旋蒸的方法除去大部分的THF，然后于纯水中进行透析的方法除去过量未反应的精氨酸，最后将溶液冷冻干燥后，最终得到聚乙二醇两端分别修饰有两个精氨酸的产物(Arg2-PEG-Arg2)。
1.3合成超分子水凝胶材料
将鱼精DNA与Arg2-PEG-Arg2分别溶解于水中，并且分别保持其电荷浓度控制在10mM左右，按照DNA磷酸二酯键中带负电荷的磷酸基团与聚合物中精氨酸侧链质子化的胍基正电荷，两者之间的电荷摩尔比例为1:2进行混合后，常温下静置过夜，利用翻转样品管的方法，确定样品能够形成杂化水凝胶结构的最低成胶质量浓度。
2、结果
图1为谷氨酸端基化改性的聚乙二醇(Glu-PEG227-Glu)的合成过程。
首先得到末端羧基化的聚乙二醇，其中产量为2.79g；随后将末端羧基制备成活化酯结构得到NHS-PEG-NHS，其中，产量为1.78g；再与谷氨酸H-Glu-OH进行偶联得到Glu-PEG227-Glu，其中，产量为0.81g。产物Glu-PEG227-Glu的1H-NMR(图3-A)表征结果表明，在化学位移3.5～3.9的范围内为聚乙二醇亚甲基的特征峰，同时谷氨酸侧基中亚甲基的吸收峰出现在化学位移1.8～2.3的区域内，证明通过氨基与活化酯的反应，可以高效地制备得到以谷氨酸为端基的聚乙二醇。
图2为Arg2-PEG-Arg2的合成过程。
首先将Glu-PEG227-Glu端位的羧基转化为活化酯结构，然后与过量的精氨酸H-Arg-OEt在THF/NaHCO3的混合溶剂中反应后，进一步透析、干燥得到目标产物Arg2-PEG-Arg2，其中产量为0.385g。该产物Arg2-PEG-Arg2的1H-NMR表征结果如图3-B所示，在核磁氢谱的相应化学位移处具有聚乙二醇的亚甲基和端基精氨酸相应基团的吸收峰，并且它们的积分面积也与其结构中氢的数目相对应，表明合成出多个精氨酸端基化修饰的聚乙二醇Arg2-PEG-Arg2。
图4为Arg2-PEG227-Arg2与鱼精DNA形成超分子水凝胶结构示意图，其中，Arg2-PEG227-Arg2的两端胍正离子与鱼精DNA中带负电荷的氧负离子利用静电相互作用形成偶联结合位点(图4A)；同时连接两端精氨酸的中间作为桥链结构的聚乙二醇链，具有柔性且链段长度较长的特点，能够将精氨酸与DNA形成的偶联位点连接起来，最终形成具有空间网络结构的杂化超分子水凝胶材料(图4B)；同时两种组分总的质量浓度为6％左右的情况下，可以形成稳定的水凝胶结构(图4C)。
实施例3
1、制备方法
1.1合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇
1)将10g(1.0mmol)的聚乙二醇(HO-PEG227-OH)与过量的丁二酸酐于250mL无水二氯甲烷中，50℃反应1天后，过量的酸酐通过加水水解后分液洗涤除去，将有机层旋干溶剂并真空干燥后，得到端基进行羧基化改性的聚乙二醇(HOOC-PEG227-COOH)；
2)取4.0g的HOOC-PEG227-COOH，N,N'-二环己基碳二亚胺(0.177g)，N-羟基丁二酰亚胺(0.0944g)，DMAP(0.96mg)，无水四氢呋喃约80mL，冰水浴中反应5min后，有一定量不溶物N,N'-二环乙基脲(DCU)产生。反应过夜后，置于4℃冰箱放置约1小时后，过滤除去大部分的DCU。将滤液使用旋转蒸发仪浓缩至原体积的三分之二后，再一次于4℃放置约4小时，过滤除去析出的DCU。继续浓缩至原体积的三分之一，4℃放置过夜后，进一步过滤除去残留的DCU。最后将滤液旋干后真空干燥，得到两端连接有活性酯结构的产物(NHS-PEG-NHS)；
3)取3g NHS-PEG-NHS，溶解于15mL THF中，然后依次取H-Glu-OH(0.153g)、NaHCO3(0.1935g)、15mL水，调节溶液pH值使H-Glu-OH完全溶解。然后在冰水浴中，将溶解后的谷氨酸水溶液缓慢滴加至上述THF溶液中，反应约5小时后，用旋转蒸发仪除去反应体系中大部分的THF，将剩余的水溶液转移至透析袋中，并于纯水中透析48小时，除去过量未反应的谷氨酸，最后将透析后的溶液冷冻干燥后，得到两端分别接有谷氨酸的聚乙二醇(Glu-PEG-Glu)。
1.2合成Arg2-PEG-Arg2
a)取1.5g的Glu-PEG-Glu溶解于10mL四氢呋喃中，依次加入DCC(0.136g)、NHS(0.072g)和DMAP(0.74mg)，并在冰水浴中反应30min后，再于常温下反应3h，通过过滤的方法除去产生的DCU，后经多次浓缩，并再次置于4℃冷却过滤，进一步除去残留的DCU副产物，进而使两端谷氨酸中的羧基都转变成活性酯的结构(NHS-Glu-PEG-Glu-NHS)；
b)将NHS-Glu-PEG-Glu-NHS溶解于10mL THF，将过量的H-Arg-OEt溶解于NaHCO3水溶液中，然后在冰水浴中缓慢滴加到NHS-Glu-PEG-Glu-NHS的THF溶液中，反应半小时后，再于室温下反应过夜，经过旋蒸的方法除去大部分的THF，然后于纯水中进行透析的方法除去过量未反应的精氨酸，最后将溶液冷冻干燥后，最终得到聚乙二醇两端分别修饰有两个精氨酸的产物(Arg2-PEG-Arg2)。
1.3合成超分子水凝胶材料
将鱼精DNA与Arg2-PEG-Arg2分别溶解于水中，并且分别保持其电荷浓度控制在10mM左右，按照DNA磷酸二酯键中带负电荷的磷酸基团与聚合物中精氨酸侧链质子化的胍基正电荷，两者之间的电荷摩尔比例为5:2进行混合后，常温下静置过夜，利用翻转样品管的方法，确定样品能够形成杂化水凝胶结构的最低成胶质量浓度。
2、结果
图1为谷氨酸端基化改性的聚乙二醇(Glu-PEG227-Glu)的合成过程。
首先得到末端羧基化的聚乙二醇，其中产量为9g；随后将末端羧基制备成活化酯结构得到NHS-PEG-NHS，其中，产量为3.36g；再与谷氨酸H-Glu-OH进行偶联得到Glu-PEG227-Glu，其中，产量为2.34g。产物Glu-PEG227-Glu的1H-NMR(图3-A)表征结果表明，在化学位移3.5～3.9的范围内为聚乙二醇亚甲基的特征峰，同时谷氨酸侧基中亚甲基的吸收峰出现在化学位移1.8～2.3的区域内，证明通过氨基与活化酯的反应，可以高效地制备得到以谷氨酸为端基的聚乙二醇。
图2为Arg2-PEG-Arg2的合成过程。
首先将Glu-PEG227-Glu端位的羧基转化为活化酯结构，然后与过量的精氨酸H-Arg-OEt在THF/NaHCO3的混合溶剂中反应后，进一步透析、干燥得到目标产物Arg2-PEG-Arg2，其中产量为1.13g。该产物Arg2-PEG-Arg2的1H-NMR表征结果如图3-B所示，在核磁氢谱的相应化学位移处具有聚乙二醇的亚甲基和端基精氨酸相应基团的吸收峰，并且它们的积分面积也与其结构中氢的数目相对应，表明合成出多个精氨酸端基化修饰的聚乙二醇Arg2-PEG-Arg2。
图4为Arg2-PEG227-Arg2与鱼精DNA形成超分子水凝胶结构示意图，其中，Arg2-PEG227-Arg2的两端胍正离子与鱼精DNA中带负电荷的氧负离子利用静电相互作用形成偶联结合位点(图4A)；同时连接两端精氨酸的中间作为桥链结构的聚乙二醇链，具有柔性且链段长度较长的特点，能够将精氨酸与DNA形成的偶联位点连接起来，最终形成具有空间网络结构的杂化超分子水凝胶材料(图4B)；同时两种组分总的质量浓度为5％左右的情况下，可以形成稳定的水凝胶结构(图4C)。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (7)

1.一种超分子水凝胶材料的制备方法，其特征在于，由精氨酸端基化改性的聚乙二醇与鱼精DNA以2:（1-5）的电荷摩尔比通过静电结合制备而成；所述精氨酸端基化改性的聚乙二醇为Arg2-PEG-Arg2；所述Arg2-PEG-Arg2合成步骤如下：
（1）合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇；
（2）以步骤（1）中获得的谷氨酸端基化改性的聚乙二醇为原料合成Arg2-PEG-Arg2；
所述步骤（1）中合成谷氨酸端基化改性的聚乙二醇的具体步骤如下：
1）将聚乙二醇与丁二酸酐溶解在溶剂中，反应完全后，除去过量酸酐，干燥，得到羧基化改性的聚乙二醇；
2）在步骤1）中获得的羧基化改性的聚乙二醇中顺序加入N,N'-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺、4-二甲氨基吡啶与无水四氢呋喃，反应结束后过滤、浓缩、干燥得到两端连接有活性酯结构的聚乙二醇；
3）在步骤2）中获得的两端连接有活性酯结构的聚乙二醇中依次加入谷氨酸、NaHCO3和水，溶解得谷氨酸水溶液，将谷氨酸水溶液滴加至四氢呋喃中，反应完全后去除四氢呋喃、透析、干燥得到谷氨酸端基化改性的聚乙二醇。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中羧基化改性的聚乙二醇结构式如式
Figure 330490DEST_PATH_IMAGE001
所示；所述步骤2）中两端连接有活性酯结构的聚乙二醇结构式如式
Figure 345851DEST_PATH_IMAGE002
所示；所述步骤3）中谷氨酸端基化改性的聚乙二醇结构式如式
Figure 394710DEST_PATH_IMAGE003
所示：
Figure 481090DEST_PATH_IMAGE004
式
Figure 121150DEST_PATH_IMAGE001
Figure 889386DEST_PATH_IMAGE005
式
Figure 538673DEST_PATH_IMAGE002
Figure 75964DEST_PATH_IMAGE006
式
Figure 886926DEST_PATH_IMAGE003
式中n为200-300的整数。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中合成Arg2-PEG-Arg2的具体步骤如下：
a）将谷氨酸端基化改性的聚乙二醇溶解于四氢呋喃中，随后顺序加入N,N'-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺、4-二甲氨基吡啶，反应结束后过滤、浓缩得到两端谷氨酸的羧基转变为活性酯的结构的聚乙二醇；
b）将步骤a）中获得的两端为活性酯结构的聚乙二醇溶解于四氢呋喃中，将L-精氨酸溶解于NaHCO3水溶液中，将溶解在NaHCO3水溶液中的L-精氨酸滴加到两端为活性酯结构的聚乙二醇的四氢呋喃溶液中；
c）待步骤b）中反应完全后，进行旋蒸、透析、干燥得Arg2-PEG-Arg2。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a）得到的两端谷氨酸的羧基转变为活性酯的结构的聚乙二醇的结构式如式
Figure 139528DEST_PATH_IMAGE007
所示；所述步骤c）中得到的Arg2-PEG-Arg2的结构式如式
Figure 326927DEST_PATH_IMAGE008
所示：
Figure 249883DEST_PATH_IMAGE009
式
Figure 497325DEST_PATH_IMAGE007
Figure 381099DEST_PATH_IMAGE010
式
Figure 637768DEST_PATH_IMAGE008
式中n为200-300的整数。
5.根据权利要求1-4任一所述的制备方法获得的超分子水凝胶材料。
6.根据权利要求5所述的超分子水凝胶材料在组织工程、生物医用材料及药物负载中的应用。
7.一种精氨酸端基化改性的聚乙二醇，其特征在于，所述的改性的聚乙二醇结构如权利要求4的式V所示，式中n为200-300的整数。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109810265B (zh) * 2018-12-28 2021-08-03 天津大学 一种溶剂驱动体积变化的dna-多糖杂化水凝胶及制备方法
CN110180026B (zh) * 2019-06-27 2021-02-09 清华-伯克利深圳学院筹备办公室 一种生物支架及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101176791A (zh) * 2006-11-07 2008-05-14 中国药科大学 连接有聚乙二醇的氨基酸及其制法和用途
CN106700528A (zh) * 2016-12-29 2017-05-24 淮阴师范学院 一种超分子组装体及其制备和形貌调控方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2247645B1 (en) * 2008-02-13 2017-12-06 Hyperbranch Medical Technology, Inc. Crosslinked polyalkyleneimine hydrogels with tunable degradation rates

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101176791A (zh) * 2006-11-07 2008-05-14 中国药科大学 连接有聚乙二醇的氨基酸及其制法和用途
CN106700528A (zh) * 2016-12-29 2017-05-24 淮阴师范学院 一种超分子组装体及其制备和形貌调控方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Polyethylene Glycol-Based Low Generation Dendrimers Functionalized with b-Cyclodextrin as Cryo- and Dehydro-Protectant of Catalase Formulations;Santagapita P R, et al;《Biotechnol Prog》;20130418;第29卷(第3期);第786-795页 *
基于席夫碱键的可注射糖肽水凝胶的制备及性能;赵麒等;《高等学校化学学报》;20160930;第37卷(第9期);第1750-1756页 *

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