CN107699527A - 一种益生菌微生态制剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种益生菌微生态制剂及其制备方法和应用。该益生菌微生态制剂，包含有乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母。其制备方法为：S1.制备各菌株的液体制剂；按重量比为1：4～11将各菌株的液体制剂与麸皮混合，40℃～60℃风干，粉碎，获得各菌株的固体制剂；S2.益生菌微生态制剂的制备：将各菌株的液体制剂混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂；将各菌株的固体制剂混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂。本发明的微生态制剂的协同增效作用显著，此制剂中的益生菌活性强、代谢产物丰富，可提高不同阶段畜禽的生产性能，可用作饲料添加剂，亦可作为抗生素的替代品。
Description
技术领域
本发明属于微生态制剂技术领域，更具体地，涉及一种益生菌微生态制剂及其制备方法和应用。
背景技术
微生态制剂是近年来国内外迅速崛起的一类新型微生物添加剂，具有调节肠道菌群平衡、拮抗病原菌、促进动物生长、提高饲料转化率和增强机体免疫功能等优点，已被广泛应用于畜禽养殖业和饲料业，亦成为了饲用抗生素的理想替代品。
目前，市场上已有许多微生态制剂同类产品，但是还存在以下几个方面的主要问题：(1)产品中菌株间的协同效应不好，菌株间出现相互干扰或相互拮抗的现象，这是影响微生态制剂质量的重要因素之一；(2)活菌含量低，而研究表明，如果一种菌剂在盲肠内容物中的浓度低于107个/g，则该菌剂产生的酶及代谢产物不足以影响宿主，难以满足治疗需要；(3)产品中微生物菌株种类众多但不乏滥竽充数，菌株功能不高效、代谢产物不够丰富、益生作用不强；(4)制备过程较复杂和繁琐，很难保证所有菌株生长繁殖良好，产品一致性差。由于微生态制剂存在的这些质量问题，从而影响了其在动物上的应用效果，限制了微生态制剂的广泛应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服上述现有微生态制剂的不足，提供一种益生菌微生态制剂及其制备方法和应用。该微生态制剂包含的乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母配伍合理，在最大程度发挥乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌、胶红酵母功效的同时，可表现出三者显著的协同增效作用，可提高不同阶段畜禽的生长性能，增加肉、蛋、奶产量，可用作饲料添加剂，亦可作为抗生素的替代品。
本发明的目的是提供一种益生菌微生态制剂。
本发明的另一个目的是提供上述益生菌微生态制剂的制备方法。
本发明的第三个目的是提供上述益生菌微生态制剂的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种益生菌微生态制剂，包含有乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母。
优选地，所述的乳酸乳球菌为乳酸乳球菌(Lactobaccoccus lactis)菌株CAMT22361，已于2015年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2015295，保藏地址为：中国武汉，武汉大学。
优选地，所述的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)菌株ZJHD3-06，已于2016年12月15日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2016756，保藏地址为：中国武汉，武汉大学。
优选地，所述的胶红酵母为胶红酵母(Rhodotorula muciladinosa)菌株ZTHY2，已于2015年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2015296，保藏地址为：中国武汉，武汉大学。
上述乳酸乳球菌CAMT22361、解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06、胶红酵母ZTHY2，均为分离鉴定的自有菌株，其中胶红酵母ZTHY2为经亚硝基胍和紫外线复合诱变的突变菌株；经小鼠致病性和毒性试验证明，三株菌无毒副作用。
优选地，所述的益生菌微生态制剂，按重量份计，包括乳酸乳球菌40～50份、解淀粉芽孢杆菌30～40份、胶红酵母20～30份。
更优选地，所述的益生菌微生态制剂，按重量份计，包括乳酸乳球菌制剂40～50份、解淀粉芽孢杆菌制剂30～40份、胶红酵母制剂20～30份。
所述乳酸乳球菌制剂、解淀粉芽孢杆菌制剂、胶红酵母制剂可以是液体制剂、固体制剂或半固体制剂；液体制剂是菌的发酵液，固体制剂为发酵液与麸皮混合后烘干粉碎所得，半固体制剂系指菌的发酵液与适宜基质(麸皮)均匀混合后，可按常规技术制成的具有适当稠度的半固体制剂。
具体优选地，所述乳酸乳球菌制剂的制备方法如下：
(1)取乳酸乳球菌CAMT22361，经37℃活化培养48h，然后经37℃静止扩大培养60h，期间每隔12h搅拌培养基10min，即得乳酸乳球菌液体制剂，活菌数为6.2×1011CFU/mL；
(2)将上述乳酸乳球菌液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得乳酸乳球菌固体制剂，活菌数为3.8×109CFU/g。
具体优选地，所述解淀粉芽孢杆菌制剂的制备方法如下：
(1)取解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06，经38℃活化培养36h，然后经38℃、150r/min扩大培养60h，即得解淀粉芽孢杆菌液体制剂，活菌数为5.5×109CFU/mL；
(2)将上述解淀粉芽孢杆菌液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：5，50℃～60℃风干，粉碎，即得解淀粉芽孢杆菌固体制剂，活菌数为4.6×108CFU/g。
具体优选地，所述胶红酵母制剂的制备方法如下：
(1)取胶红酵母ZTHY2，经30℃活化培养60h，然后经31℃、150r/min扩大培养72h，即得胶红酵母液体制剂，活菌数为3.6×1010CFU/mL；
(2)将上述胶红酵母液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得胶红酵母固体制剂，活菌数为6.7×108CFU/g。优选地，所述益生菌微生态制剂的剂型为液体制剂、固体制剂或半固体制剂。
本发明所述的半固体制剂是将所述菌的发酵液与适量麸皮均匀混合后，按常规技术制成的具有适当稠度的半固体制剂，所述半固体制剂中总活菌数为1.0×109～9.9×1011CFU/g。
优选地，所述液体制剂中总活菌数为1.0×1010CFU/mL以上。
更优选地，所述液体制剂中总活菌数为1.0×1010～9.9×1011CFU/mL。
优选地，所述固体制剂中总活菌数为1.0×109CFU/g以上。
更优选地，所述固体制剂中总活菌数为1.0×109～9.9×1010CFU/g。
进一步优选地，所述液体制剂中乳酸乳球菌活菌数为1.0×1011CFU/mL以上，解淀粉芽孢杆菌活菌数为1.0×109CFU/mL以上，胶红酵母活菌数为1.0×1010CFU/mL以上。
更进一步优选地，所述液体制剂中乳酸乳球菌活菌数为1.0×1011～9.9×1012CFU/mL，解淀粉芽孢杆菌活菌数为1.0×109～9.9×1010CFU/mL，胶红酵母活菌数为1.0×1010～9.9×1011CFU/mL。
进一步优选地，所述固体制剂中乳酸乳球菌活菌数为1.0×109CFU/g以上，解淀粉芽孢杆菌活菌数为1.0×108CFU/g以上，胶红酵母活菌数为1.0×108CFU/g以上。
更进一步优选地，所述固体制剂中乳酸乳球菌活菌数为1.0×109～9.9×1010CFU/g，解淀粉芽孢杆菌活菌数为1.0×108～9.9×109CFU/g，胶红酵母活菌数为1.0×108～9.9×109CFU/g。
本发明同时提供了所述益生菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1.制备各菌株的液体制剂；按重量比为1：4～11将各菌株的液体制剂与麸皮混合，40℃～60℃风干，粉碎，获得各菌株的固体制剂；
S2.益生菌微生态制剂的制备：将各菌株的液体制剂混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂；将各菌株的固体制剂混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂。
优选地，所述液体制剂的制备方法如下：将所述菌株经28℃～37℃活化培养24～48h后，经27℃～38℃扩大培养48～72h，获得所述菌株的液体制剂。
更优选地，乳酸乳球菌液体制剂的制备方法如下：将所述乳酸乳球菌经36℃～37℃活化培养36～48h后，经33℃～37℃静止扩大培养48～60h，期间每隔11～13h搅拌培养基5～15min，获得乳酸乳球菌液体制剂，活菌数为1×1011CFU/mL以上；乳酸乳球菌固体制剂的制备方法如下：按重量比1：9～11将上述乳酸乳球菌液体制剂与麸皮混合，40℃～50℃风干，粉碎，获得乳酸乳球菌固体制剂，活菌数为1×109CFU/g以上。
进一步优选地，所述乳酸乳球菌液体制剂的制备方法中活化培养基的成分及其质量比如下：0.5％～1.5％蛋白胨，0.5％～1.5％牛肉膏，0.4％～0.6％酵母膏，1％～3％葡萄糖，0.1％～0.3％磷酸氢二钾，0.4％～0.6％乙酸钠，0.1％～0.3％柠檬酸三铵，0.02％～0.08％七水硫酸镁，0.01％～0.04％一水硫酸锰，0.05％～0.15％吐温80，pH值为6.2～6.4；
其扩大培养的接种量为5％～8％，扩大培养基的成分及其质量比如下：1％～3％大豆蛋白胨，0.5％～1.5％牛肉膏，0.2％～0.8％酵母膏，1％～3％葡萄糖，0.2％～0.8％氯化钠，0.05％～0.15％磷酸氢二钾，0.01％～0.05％硫酸镁，0.01％硫酸锰。
更优选地，解淀粉芽孢杆菌液体制剂的制备方法如下：将所述解淀粉芽孢杆菌经36℃～37℃活化培养24～36h后，经34～38℃、130～150r/min扩大培养48～60h，获得解淀粉芽孢杆菌液体制剂，活菌数为1×109CFU/mL以上；解淀粉芽孢杆菌固体制剂的制备方法如下：按重量比1：4～6将上述液体解淀粉芽孢杆菌制剂与麸皮混合，50℃～60℃风干，粉碎，获得解淀粉芽孢杆菌固体制剂，活菌数为1×108CFU/g以上。
进一步优选地，所述解淀粉芽孢杆菌液体制剂的制备方法中活化培养基的成分及其质量比如下：0.5％～1.5％蛋白胨，0.2％～0.8％牛肉膏，0.2％～0.8％酵母膏，0.2％～0.8％氯化钠，0.05％～0.15％磷酸氢二钾，pH值为7.2～7.6；
其扩大培养的接种量为8％～10％，扩大培养基的成分及其质量比如下：0.5％～1.5％大豆蛋白胨，0.2％～0.8％牛肉膏，0.2％～0.8％酵母膏，1％～3％葡萄糖，0.2％～0.8％氯化钠，0.05％～0.15％磷酸氢二钾。
更优选地，胶红酵母液体制剂的制备方法如下：将所述胶红酵母经28℃～30℃活化培养48～60h后，经27℃～31℃、130～150r/min扩大培养60～72h，获得胶红酵母液体制剂，活菌数在1×1010CFU/mL以上；胶红酵母固体制剂的制备方法如下：按重量比为1：9～11将上述液体胶红酵母制剂与麸皮混合，40℃～50℃风干，粉碎，获得胶红酵母固体制剂，活菌数在1×108CFU/g以上。
进一步优选地，所述胶红酵母液体制剂的制备方法中活化培养基的成分及其质量比如下：1％～3％蛋白胨，1％～3％酵母膏，0.5％～1.5％牛肉膏，1％～3％葡萄糖，1％～3％氯化钠，pH值自然；
其扩大培养的接种量为6％～8％，扩大培养基的成分及其质量比如下：1％～3％大豆蛋白胨，1％～3％酵母膏，0.5％～1.5％牛肉膏，1％～3％葡萄糖，1％～3％氯化钠，0.05％～0.1％硫酸锰，pH值自然。
上述任一所述的培养基中的大豆蛋白胨为市售医药级，酵母膏和葡萄糖为市售食用级。
上述任一所述的培养基采用115℃、30min的条件进行灭菌处理。
更优选地，按重量份计，将上述乳酸乳球菌液体制剂40～50份、解淀粉芽孢杆菌液体制剂30～40份、胶红酵母液体制剂20～30份混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂；按重量份计，将上述乳酸乳球菌固体制剂40～50份、解淀粉芽孢杆菌固体制剂30～40份、胶红酵母固体制剂20～30份混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂。
本发明还提供了上述任一所述的益生菌微生态制剂在制备动物饲料添加剂中的应用。
优选地，所述动物指的是畜禽类动物。
进一步优选地，所述畜禽类动物指的是家畜和家禽。
更进一步优选地，所述家畜和家禽指的是猪或鸡。
同时，一种包含上述任一所述的益生菌微生态制剂的制品也在本发明的保护范围之内，所述制品为饲料、食品或药品。
优选地，所述制品中益生菌微生态制剂添加的质量比为0.1％～1.0％，可直接将该微生态制剂添加到畜禽饲料中，也可拌水直接供畜禽饮用。
更优选地，所述制品中益生菌微生态制剂添加的质量比为0.2％～0.5％。
本发明的乳酸乳球菌CAMT22361具有高产乳酸、抑菌活性物质和生长速度快的优良性能，其抵抗力也强于其他常用的乳酸杆菌和乳酸球菌，对机体起到拮抗病原菌和提高免疫功能的作用；解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06则易形成芽孢，抵抗力强，能产生杆菌肽、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等活性物质，对机体主要有营养作用和生物拮抗作用；而胶红酵母ZTHY2能产生类胡萝卜素、虾青素、维生素等代谢产物，对机体具有营养作用、抗氧化作用和着色功能，而且容易培养，菌体细胞数量多。
上述菌株分别属于乳酸菌、芽孢菌和酵母菌，均为高活性益生菌株，菌株性能优良、特性明显，混合使用可以起到互补和协调的作用，协同增效作用显著；而且本发明在制备工艺上先分别制备各菌株制剂，再按一定比例将各菌株制剂复配成复合微生态制剂，保证了三种益生菌单独发酵的最优状态，使得菌体细胞数量和代谢产物量达到最大化。由这三种菌株制成的益生菌微生态制剂含有乳酸、乳酸菌素、杆菌肽、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、类胡萝卜素、虾青素、维生素等多种代谢产物，益生菌活性强。
实验证明，本发明的微生态制剂应用于妊娠母猪时，可使其分娩的死产、畸形、木乃伊和体弱仔猪的总数量减少45.45％，且出生仔猪的平均重增加8.13％；应用于断奶仔猪时，可使其平均日增重提高8.57％，料重比降低5.75％，腹泻率降低87.63％；应用于三黄鸡时，可使每只鸡平均重提高了16.94％。该实验结果说明，本发明的微生态制剂具有防治动物腹泻、提高免疫力和抗病力、降低动物死产和畸形率的作用，并可提高饲料转化率及动物生产性能，对各生长阶段的畜禽均有较好的效果，可提高不同生长阶段畜禽的生产性能。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明实现了乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母的最佳组合，配伍得当，在最大程度发挥乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌、胶红酵母功效的同时，可表现出三者显著的协同增效作用。
2、本发明的益生菌微生态制剂可用于防治各种动物腹泻、提高免疫力和抗病力、降低动物死产和畸形率，并可提高饲料转化率及动物生产性能，增加肉、蛋、奶产量，对各生长阶段的不同种类畜禽均有较好的效果。
3、本发明的益生菌微生态制剂包含菌株种类少、活性高、代谢产物丰富，制备工艺简单、应用效果好，可用作饲料添加剂，亦可作为抗生素的替代品，消除药物残留，提高肉蛋奶等产品品质。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明。以下实施例为本发明较佳的实施方式，但并不对本发明的保护范围做任何形式的限定。本发明主要阐述所述菌株以及基于所述菌株的应用思想，实施方式中简单参数的替换不能一一在实施例中赘述，但并不因此限制本发明，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，应被视为等效的置换方式，都应包含在本发明范围内。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1菌株制剂的制备
1、乳酸乳球菌CAMT22361
(1)取乳酸乳球菌CAMT22361，经37℃活化培养48h，然后经37℃静止扩大培养60h，期间每隔12h搅拌培养基10min，即得乳酸乳球菌液体制剂，活菌数为6.2×1011CFU/mL；
其中，活化培养的培养基组分是：1％蛋白胨，1％牛肉膏，0.5％酵母膏，2％葡萄糖，0.2％磷酸氢二钾，0.5％乙酸钠，0.2％柠檬酸三铵，0.058％七水硫酸镁，0.025％一水硫酸锰，0.1％吐温80，pH值6.2～6.4；
扩大培养的培养基组分是：2％大豆蛋白胨，1％牛肉膏，0.5％酵母膏，2％葡萄糖，0.5％氯化钠，0.1％磷酸氢二钾，0.03％硫酸镁，0.01％硫酸锰，pH值自然；
(2)将上述乳酸乳球菌液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得乳酸乳球菌固体制剂，活菌数为3.8×109CFU/g。
2、解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06
(1)取解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06，经38℃活化培养36h，然后经38℃、150r/min扩大培养60h，即得解淀粉芽孢杆菌液体制剂，活菌数为5.5×109CFU/mL；
其中，活化培养的培养基组分是：蛋白胨1％，牛肉膏0.5％，酵母膏0.5％，氯化钠0.5％，磷酸氢二钾0.1％，pH值7.2～7.6；
扩大培养的培养基组分是：大豆蛋白胨1％，牛肉膏0.5％，酵母膏0.5％，葡萄糖2％，氯化钠0.5％，磷酸氢二钾0.1％，pH值自然；
(2)将上述解淀粉芽孢杆菌液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：5，50℃～60℃风干，粉碎，即得解淀粉芽孢杆菌固体制剂，活菌数为4.6×108CFU/g。
3、胶红酵母ZTHY2
(1)取胶红酵母ZTHY2，经30℃活化培养60h，然后经31℃、150r/min扩大培养72h，即得胶红酵母液体制剂，活菌数为3.6×1010CFU/mL；
其中，活化培养的培养基组分是：蛋白胨2％，酵母膏2％，牛肉膏1％，葡萄糖2％，氯化钠2％，pH值自然；
扩大培养的培养基组分是：大豆蛋白胨2％，酵母膏2％，牛肉膏1％，葡萄糖2％，氯化钠2％，硫酸锰0.075％，pH值自然；
(2)将上述胶红酵母液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得胶红酵母固体制剂，活菌数为6.7×108CFU/g。
实施例2益生菌微生态液体制剂A的制备
一种益生菌微生态液体制剂A，其制备方法如下：
(1)按照实施例1的方法分别制备乳酸乳球菌液体制剂、解淀粉芽孢杆菌液体制剂、胶红酵母液体制剂；
(2)按重量份，将上述乳酸乳球菌液体制剂40份、解淀粉芽孢杆菌液体制剂30份、胶红酵母液体制剂30份混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂A，活菌总数约为2.6×1011CFU/mL。
实施例3益生菌微生态液体制剂B的制备
一种益生菌微生态液体制剂B，其制备方法如下：
(1)取乳酸乳球菌CAMT22361，经36℃活化培养36h，然后经33℃静止扩大培养48h，期间每隔12h搅拌培养基10min，即得乳酸乳球菌液体制剂，活菌数为1.4×1011CFU/mL；
(2)取解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06，经36℃活化培养24h，然后经34℃、130r/min扩大培养48h，即得解淀粉芽孢杆菌液体制剂，活菌数为2.6×109CFU/mL；
(3)取胶红酵母ZTHY2，经28℃活化培养48h，然后经31℃、130r/min扩大培养60h，即得胶红酵母液体制剂，活菌数为2.2×1010CFU/mL；
(4)按重量份，将上述液体乳酸乳球菌制剂50份、液体解淀粉芽孢杆菌制剂30份、液体胶红酵母制剂20份混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂B，活菌总数约为7.52×1010CFU/mL。
实施例4益生菌微生态固体制剂C的制备
一种益生菌微生态固体制剂C，其制备方法如下：
(1)按照实施例1的方法分别制备乳酸乳球菌固体制剂、解淀粉芽孢杆菌固体制剂、胶红酵母固体制剂；
(2)按重量份，将上述乳酸乳球菌固体制剂40份、解淀粉芽孢杆菌固体制剂30份、胶红酵母固体制剂30份混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂C，活菌总数约为1.86×109CFU/g。
实施例5益生菌微生态固体制剂D的制备
一种益生菌微生态固体制剂D，其制备方法如下：
(1)取乳酸乳球菌CAMT22361，经36℃活化培养36h，然后经35℃静止扩大培养48h，期间每隔12h搅拌培养基10min，即得乳酸乳球菌液体制剂；将该液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得乳酸乳球菌固体制剂，活菌数为2.7×109CFU/g；
(2)取解淀粉芽孢杆菌ZJHD3-06，经36℃活化培养24h，然后经36℃、140r/min扩大培养48h，即得解淀粉芽孢杆菌液体制剂；将该液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：5，50℃～60℃风干，粉碎，即得解淀粉芽孢杆菌固体制剂，活菌数为1.3×108CFU/g；
(3)取胶红酵母ZTHY2，经28℃活化培养48h，然后经30℃、140r/min扩大培养60h，即得胶红酵母液体制剂；将该液体制剂与麸皮混合，二者重量比为1：10，40℃～50℃风干，粉碎，即得胶红酵母固体制剂，活菌数为4.4×108CFU/g；
(4)按重量份，将上述乳酸乳球菌固体制剂45份、解淀粉芽孢杆菌固体制剂30份、胶红酵母固体制剂25份混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂D，活菌总数约为1.35×109CFU/g。
实施例6不同益生菌微生态固体制剂对断奶仔猪生产性能的影响
1、选用210头28日龄的三元杂交断奶仔猪，随机分为7组，每组30头仔猪，公母各半，采用网上平养，试验期28d。这7个处理组，分别为：
(1)对照组仔猪饲喂基础日粮；
(2)试验1组仔猪饲喂添加有益生菌微生态固体制剂C(乳酸乳球菌+解淀粉芽孢杆菌+胶红酵母)的基础日粮，添加量为0.2％；
(3)试验2组仔猪饲喂添加有益生菌微生态固体制剂C(乳酸乳球菌+解淀粉芽孢杆菌+胶红酵母)的基础日粮，添加量为0.4％；
(4)试验3组仔猪饲喂添加由乳酸乳球菌和解淀粉芽孢杆菌按照实施例1制成的微生态固体制剂(乳酸乳球菌固体制剂和解淀粉芽孢杆菌固体制剂＝1:1)的基础日粮，添加量为0.4％；
(5)试验4组仔猪饲喂添加有乳酸乳球菌固体制剂(按实施例1制成)的基础日粮，添加量为0.4％；
(6)试验5组仔猪饲喂添加有解淀粉芽孢杆菌固体制剂(按实施例1制成)的基础日粮，添加量为0.4％；
(7)试验6组仔猪饲喂添加有胶红酵母固体制剂(按实施例1制成)的基础日粮，添加量为0.4％。
2、试验结果如下：
(1)如表1所示，试验1组、试验2组、试验3组、试验4组、试验5组和试验6组的断奶仔猪与对照组比较，平均日增重分别提高了6.67％、8.57％、5.16％、4.37％、4.45％和4.23％，其中试验1组和试验2组的增重作用最显著，说明与乳酸乳球菌+解淀粉芽孢杆菌制剂、单独乳酸乳球菌制剂、解淀粉芽孢杆菌制剂、胶红酵母制剂对比，本发明的复合益生菌微生态制剂具有明显的协同增效作用。
(2)如表1所示，试验1组、试验2组、试验3组、试验4组、试验5组和试验6组的断奶仔猪与对照组比较，料重比分别降低了5.17％、5.75％、2.87％、2.30％、2.30％和2.87％，说明本发明具有降低料重比的作用，起到用的饲料少，但增长的肉多的效果，饲料转化率高；而且试验1组和试验2组与试验3组、试验4组、试验5组和试验6组相比，料重比降低效果明显，说明本发明的复合益生菌微生态制剂协同增效作用显著。
(3)如表1所示，试验1组和试验2组的断奶仔猪与对照组比较，腹泻率分别降低了74.99％和87.63％，说明本发明的复合益生菌微生态制剂具有降低动物腹泻率效果，可用于防治各种动物腹泻、提高免疫力和抗病力。
表1对断奶仔猪生产性能的影响
实施例7益生菌微生态固体制剂C对妊娠母猪生产性能的影响
1、选用36头妊娠时间基本相同的二元杂交母猪，分为3组，每组12头母猪，分别为：
(1)对照组母猪饲喂基础日粮；
(2)试验1组母猪在分娩前一个月开始饲喂添加益生菌微生态固体制剂C的基础日粮，添加量为0.2％；
(3)试验2组母猪在分娩前一个月开始饲喂添加益生菌微生态固体制剂C的基础日粮，添加量为0.4％。
2、试验结果如下：
如表2所示，试验1组、试验1组与对照组比较，总产仔数基本相同，但死产、畸形、木乃伊仔猪和弱仔猪的总数量比对照组分别减少了31.82％和45.45％，同时出生仔猪平均重比对照组分别增加了6.52％和8.13％。
试验结果说明，本发明的复配益生菌微生态制剂具有降低动物死产和畸形率，并可提高动物生产性能，增加肉、奶产量的作用。
表2对妊娠母猪生产性能的影响
实施例8益生菌微生态液体制剂B对三黄鸡生长性能的影响
选用96只1日龄三黄鸡，随机分为4组；三个试验组鸡的饮水中添加益生菌微生态液体制剂B，添加量分别为0.1％、0.5％和1.0％，试验期21d。
试验结果表明，试验鸡21日龄时，0.1％、0.5％和1.0％添加组的三黄鸡平均重量比对照组分别提高了15.75％、16.03％和16.94％，差异显著；三个试验组间比较差异不显著。
本发明通过大量的试验和探索，获得一种微生态制剂的最佳组合，并用实验验证了其应用效果，本发明的复配益生菌微生态制剂由乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母复合配制而成，其协同增效作用显著，具有调节肠道菌群平衡、拮抗病原菌、促进动物生长、提高饲料转化率和增强机体免疫功能等优点，可提高猪及三黄鸡的生长性能，尤其对妊娠母猪和断奶仔猪使用效果好。实验结果证明，本发明的益生菌微生态制剂能明显降低动物腹泻率、提高动物免疫力和抗病力、降低动物死产和畸形率，并可提高饲料转化率及动物生产性能，增加肉、蛋、奶产量，对各生长阶段的不同种类畜禽均有较好的效果，可应用于畜禽养殖业和饲料业，亦当作饲用抗生素的理想替代品。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例。凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种益生菌微生态制剂，其特征在于，包含有乳酸乳球菌、解淀粉芽孢杆菌和胶红酵母。
2.根据权利要求1所述的益生菌微生态制剂，其特征在于，按重量份计，包括乳酸乳球菌40～50份、解淀粉芽孢杆菌30～40份、胶红酵母20～30份。
3.根据权利要求1所述的益生菌微生态制剂，其特征在于，所述的乳酸乳球菌为乳酸乳球菌菌株CAMT22361，保藏编号为CCTCC NO：M2015295；所述的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌菌株ZJHD3-06，保藏编号为CCTCC NO：M2016756；所述的胶红酵母为胶红酵母菌株ZTHY2，保藏编号为CCTCC NO：M2015296。
4.根据权利要求1所述的益生菌微生态制剂，其特征在于，所述益生菌微生态制剂的剂型为液体制剂、固体制剂或半固体制剂。
5.根据权利要求4所述的益生菌微生态制剂，其特征在于，所述液体制剂中总活菌数为不低于1.0×1010 CFU/mL；所述固体制剂中总活菌数为不低于1.0×109 CFU/g。
6.根据权利要求4所述的益生菌微生态制剂，其特征在于，所述液体制剂中乳酸乳球菌活菌数为不低于1.0×1011 CFU/mL，解淀粉芽孢杆菌活菌数为不低于1.0×109 CFU/mL，胶红酵母活菌数为不低于1.0×1010 CFU/mL；所述固体制剂中乳酸乳球菌活菌数为不低于1.0×109 CFU/g，解淀粉芽孢杆菌活菌数为不低于1.0×108 CFU/g，胶红酵母活菌数为不低于1.0×108 CFU/g。
7.权利要求1～6任一项所述的益生菌微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1. 分别制备各菌株的液体制剂：分别将各菌株进行培养发酵，所得发酵液即为液体制剂；
S2. 分别制备各菌株的固体制剂：按重量比1：4～11将各菌株的液体制剂与麸皮混合，40℃～60℃风干，粉碎，获得各菌株的固体制剂；
S3. 益生菌微生态制剂的制备：将各菌株的液体制剂混合均匀，即得益生菌微生态液体制剂；将各菌株的固体制剂混合均匀，即得益生菌微生态固体制剂。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述菌株液体制剂的制备方法如下：将所述菌株经28℃～37℃活化培养24～48h后，经27℃～38℃扩大培养48～72h，获得所述菌株的液体制剂。
9.权利要求1～6任一项所述的益生菌微生态制剂在制备动物饲料添加剂中的应用。
10.一种包含权利要求1～6任一项所述的益生菌微生态制剂的制品，其特征在于，所述制品中益生菌微生态制剂添加的质量比为0.1%～1.0%。
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