CN107686814A - 一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，涉及微藻藻种纯化技术领域。其首先对有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液进行离心，藻泥清洗除去培养基及生理代谢物质，然后将稀释的藻液在添加组合抗生素的抗性平板进行涂布，后进一步用抗性平板进行划线分离纯化，然后用无菌96孔细胞培养板进行批量微培养，进而转移至三角瓶中进行后续的扩大培养。利用本发明分离裸藻藻种，具有易操作、效率高、成本小等优点，在短时间内得到纯度较高的藻种，缩短生长周期，提高大规模生长的成功几率，从而达到增加产量降低成本的目的。

Description

一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法
技术领域
本发明涉及微藻藻种纯化技术领域，具体涉及一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法。
背景技术
裸藻是一种介于动、植物两者之间的中间型生物，具有动、植物的蛋白质组成，是良好的饵料生物；2013年，我国批准裸藻为新的食品原料，这使得裸藻具有很好的市场前景。近些年来，日本等国相继开发了裸藻作为鱼类饵料的专利产品，我国在此领域起步较晚，相关技术还并不成熟，致使目前的产业化发展水平相对较低。其中裸藻在藻种传代及规模培养过程中极易染菌，导致生产的连续性不足，产品品质不稳定以及增加生产成本等诸多问题。
目前,裸藻主要自养、异养及兼养三种培养方法。其中自养状态下裸藻生长速度缓慢,生产周期长、生产成本较高，不利于规模化生产；而异养和兼养培养时，培养基往往含有葡萄糖、尿素等有机物质，虽然裸藻生长速度较快，但在规模培养过程中极易受到细菌、杂菌藻和原生动物等污染,使得裸藻产品产量、品质不稳定，严重影响裸藻的工业化生产进程。
裸藻培养时，不管是利用光生物反应器进行自养培养还是利用发酵罐进行异养培养，都要求裸藻比较“纯”。目前报道的藻种除菌方法主要有显微镜挑取藻细胞法和藻液添加抗生素除菌法，前者操作复杂，对操作人员的技术要求较高，需要一定的藻类分类经验，同时单个藻细胞的培养难度较大，不易成活。后者在藻液中直接加入抗生素，虽然能够有效的抑制藻液中杂菌，但是无法完全除菌还会影响藻类生长甚至诱导突变。因此，开发一种适用于裸藻藻种的快速、有效的获得裸藻纯种的方法显得十分必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其通过在一种裸藻自养培养液中加入固体琼脂粉，配置成易于裸藻生长的固体培养基，通过添加抗生素能够显著抑制杂菌生长并促进裸藻的生长，可使裸藻迅速在培养平板上形成藻落，在短时间内得到纯度较高的藻种，缩短生长周期，提高大规模生长的成功几率。
其技术解决方案包括：
一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，依次包括以下步骤：
a取一定量的有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液，对所述裸藻藻液进行离心，将离心得到的藻泥清洗并收集；
b对步骤a收集的藻泥进行稀释，得稀释液，备用；
c配制裸藻自养所需液体培养基，向该液体培养基中加入琼脂粉，通过蒸汽灭菌锅灭菌，得灭菌后的培养基；
d待灭菌后的培养基冷却后，向其中加入抗生素，混匀，倾倒平板；
e取步骤b所得稀释液50～100μL，置于平板中，均匀涂布；
f将涂布平板置于恒温光照箱进行培养；
g挑取单藻克隆，将其置于步骤d的培养基中进行二次划线接种分离，然后将划线平板置于恒温光照箱进行培养；
h将划线平板中的单藻克隆转移至无菌96孔细胞培养板，恒温光照箱进行培养；
i将96孔细胞培养板的藻液转移至三角瓶中，恒温光照箱进行扩大培养，即得裸藻藻种。
作为本发明的一个优选方案，步骤a中离心步骤包括：
1)将裸藻藻液置于离心瓶中，设定离心转速为3000～5000rpm，时间为1.0～3.0min；
2)倾去上层液体，经离心后的藻泥沉淀在离心瓶底部，向该离心瓶中加入经灭菌后的生理盐水，涡旋混匀；
3)进行二次离心，设定离心转速为3000～5000rpm，时间为1.0～3.0min；
4)重复步骤2)和3)后，将所得藻泥合并收集。
作为本发明的另一个优选方案，步骤b中，通过灭菌后的生理盐水对藻泥进行稀释，稀释倍数为10-3～10-6。
优选的，裸藻自养所需液体培养基，每升去离子水中其它组分配比为：硝酸钠50～100mg/L、磷酸二氢钾5～10mg/L、乙二胺四乙酸钠3～6mg/L、硫酸锌0.010～0.030mg/L、硫酸铜0.01～0.02mg/L、氯化锰0.010～0.020mg/L、硫酸镁20～40mg/L、硫酸铁30～70mg/L、氯化钙1.0～1.5mg/L、钼酸铵0.003～0.007mg/L、维生素B1 0.001mg/L、维生素B120.005mg/L、生物素0.005mg/L和氯化钴0.010～0.020mg/L。
优选的，步骤c中，所述琼脂粉的加入量占液体培养基质量的0.5％～1.0％。
优选的，步骤d中，所述抗生素及添加浓度分别为青霉素20～60ppm、氯霉素20～60ppm、土霉素30～70ppm、链霉素40～80ppm。
进一步的，所述步骤f、g、h、i中的恒温光照箱培养条件为：光照度1000～3000lx，温度22～28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养2～5天。
进一步的，步骤i所述的96孔细胞培养板中，每孔液体培养基的添加量为0.3～0.5mL。
本发明所带来的有益技术效果为：
本发明利用裸藻可在固体培养基生长以及对多种抗生素具有一定耐受性的特点，在一种裸藻自养培养液中加入固体琼脂粉，配置成易于裸藻生长的固体培养基。通过在固体培养基中添加多种常见的抗生素如青霉素、链霉素、土霉素、氯霉素,不仅仅原料丰富易得而且价格成本低廉使用量小，能够显著抑制杂菌生长并促进裸藻的生长,可使裸藻迅速在培养平板上形成藻落,在短时间内得到纯度较高的藻种,缩短生长周期,提高大规模生长的成功几率。从而达到增加产量降低成本的目的。
本发明针对裸藻藻种传代过程及规模培养过程中极易染菌的问题，采用添加低浓度的混合抗生素的平板培养基，涂布加划线进行快速分离纯化裸藻藻种。发明了一种成本低廉、操作简易的藻种纯化程序，从而达到快速获得裸藻纯种、适应规模化裸藻生产的目的。
与现有技术相比，本发明提供了一种高效、简易分离纯化裸藻藻种的方法，从而获得无细菌污染的裸藻藻种，起到降低藻种维护成本和快速获得批量藻种的目的。
具体实施方式
本发明提出了一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，为了使本发明的优点、技术方案更加清楚、明确，下面结合具体实施例对本发明做详细说明。
首先对本发明所选主要原料做简要说明：
本发明使用的染菌未纯化的裸藻藻液来自青岛科源生物有限公司，其中的细菌主要为革兰氏阴性菌。
实施例1：
平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，具体包括以下步骤：
(1)取有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液(在培养过程中发现其成长不良，藻种培养液中出现絮凝沉淀的现象)1.0L；
(2)对裸藻藻液进行离心，离心步骤为：
第一步、将1.0L的藻液分装在50ml的离心瓶中若干；
第二步、进行离心操作，离心条件：3000rpm，2.0min；
第三步、倾去上层液体，向有沉淀藻泥的离心瓶中加注20.0mL的灭菌生理盐水，涡旋混匀；
第四步、继续离心操作，离心条件同上；
第五步、重复步骤三～步骤四两次；
第六步、将藻泥进行合并收集；
(3)对合并的藻泥进行稀释，稀释液选用灭菌的生理盐水，稀释倍数为10-6，待用；
(4)配制裸藻自养所需液体培养基，向培养基中加入琼脂粉，琼脂粉的添加量为培养基质量的0.5％，蒸汽灭菌锅灭菌；
(5)待灭菌培养基冷却到50℃，向培养基中加入抗生素，抗生素选取浓度为20ppm的青霉素，混匀，倾倒平板；
(6)取步骤(3)中的稀释液100μL，置于平板中，均匀涂布；
(7)将涂布平板置于恒温光照箱进行培养，光照度3000lx，温度22℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养5天；
(8)挑取单藻克隆，在步骤(5)的培养基中进行二次划线接种分离；挑取的单藻克隆，应选择形态圆润、长势良好及远离杂菌的单藻克隆；划线操作遵循一般的细菌划线操作，应注意控制接种量；
(9)将划线平板置于恒温光照箱进行培养，光照培养箱培养条件：光照度3000lx，温度22℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养2天；步骤(9)中，如培养的划线平板中出现杂菌，重复步骤(8)～(9)；
(10)将划线平板中的单藻克隆转移至无菌24孔细胞培养板，恒温光照箱进行培养；96孔细胞培养板中，每孔液体培养基的添加量为0.5mL,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度3000lx，温度22℃，光暗比L:D＝12h:12h。培养3天；
(11)将24孔细胞培养板的藻液转移至50ml的三角瓶中，恒温光照箱进行扩大培养，50mL三角瓶中加入液体培养基的添加量为20mL,接种比例为1:40,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度3000lx，温度22℃，光暗比L:D＝12h:12h。培养3天。
上述步骤(4)中，裸藻自养液体培养基，采用3％的海水养殖液，每升海水中其他组分配比如表1：
表1
组分 含量mg/L 组分 含量mg/L
硝酸钠 70 硫酸铁 30
磷酸二氢钾 7 氯化钙 1.15
乙二胺四乙酸钠 4.20 钼酸铵 0.005
硫酸锌 0.029 维生素B1 0.001
硫酸铜 0.01 维生素B12 0.005
氯化锰 0.010 生物素 0.005
硫酸镁 30 氯化钴 0.010
上述步骤(3)、(5)、(6)、(8)、(9)、(10)(11)均在无菌操作平台中进行。
实施例2：
平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，具体包括以下步骤：
(1)取有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液(在培养过程中发现其成长不良，藻种培养液中出现絮凝沉淀的现象)1.0L；
(2)对裸藻藻液进行离心，离心步骤为：
第一步、将1.0L的藻液分装在50ml的离心瓶中若干；
第二步、进行离心操作，离心条件：5 000rpm，3.0min；
第三步、倾去上层液体，向有沉淀藻泥的离心瓶中加注20.0mL的灭菌生理盐水，涡旋混匀；
第四步、继续离心操作，离心条件同上；
第五步、重复步骤三～步骤四两次；
第六步、将藻泥进行合并收集；
(3)对合并的藻泥进行稀释，稀释液选用灭菌的生理盐水，稀释程度为10-3待用；
(4)配制裸藻自养所需液体培养基，向培养基中加入琼脂粉，琼脂粉的添加量为培养基质量的1.0％，蒸汽灭菌锅灭菌；
(5)待灭菌培养基冷却到50℃，向培养基中加入抗生素，抗生素选取浓度为40ppm的氯霉素，混匀，倾倒平板；
(6)取步骤(3)中的稀释液100μL，置于平板中，均匀涂布；
(7)将涂布平板置于恒温光照箱进行培养，光照度1000lx，温度28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养3天；
(8)挑取单藻克隆，在步骤(5)的培养基中进行二次划线接种分离；挑取的单藻克隆，应选择形态圆润、长势良好及远离杂菌的单藻克隆；划线操作遵循一般的细菌划线操作，应注意控制接种量；
(9)将划线平板置于恒温光照箱进行培养，光照培养箱培养条件：光照度1000lx，温度28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养3天；步骤(9)中，如培养的划线平板中出现杂菌，重复步骤(8)～(9)；
(10)将划线平板中的单藻克隆转移至无菌24孔细胞培养板，恒温光照箱进行培养；96孔细胞培养板中，每孔液体培养基的添加量为0.5mL,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度1000lx，温度28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养3天；
(11)将24孔细胞培养板的藻液转移至50ml的三角瓶中，恒温光照箱进行扩大培养，50mL三角瓶中加入液体培养基的添加量为20mL，接种比例为1:40,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度1000lx，温度28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养3天。即得裸藻藻种。
上述步骤(4)中，裸藻自养液体培养基，采用3％的海水养殖液，每升海水中其他组分配比如表2：
表2
组分 含量mg/L 组分 含量mg/L
硝酸钠 50 硫酸铁 30
磷酸二氢钾 10 氯化钙 1.5
乙二胺四乙酸钠 3 钼酸铵 0.003
硫酸锌 0.030 维生素B1 0.001
硫酸铜 0.02 维生素B12 0.005
氯化锰 0.02 生物素 0.005
硫酸镁 40 氯化钴 0.020
上述步骤(3)、(5)、(6)、(8)、(9)、(10)(11)均在无菌操作平台中进行。
实施例3：
与实施例1不同之处在于：步骤(5)中的抗生素选取浓度为70ppm的土霉素。
实施例4：
与实施例1不同之处在于：步骤(5)中的抗生素选取浓度为30ppm的土霉素。
实施例5：
与实施例1不同之处在于：步骤(5)中的抗生素选取浓度为40～80ppm的链霉素。
实施例6：
平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，具体包括以下步骤：
(1)取有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液(在培养过程中发现其成长不良，藻种培养液中出现絮凝沉淀的现象)1.0L；
(2)对裸藻藻液进行离心，离心步骤为：
第一步、将1.0L的藻液分装在50ml的离心瓶中若干；
第二步、进行离心操作，离心条件：4000rpm，1.0min；
第三步、倾去上层液体，向有沉淀藻泥的离心瓶中加注20.0mL的灭菌生理盐水，涡旋混匀；
第四步、继续离心操作，离心条件同上；
第五步、重复步骤三～步骤四两次；
第六步、将藻泥进行合并收集；
(3)对合并的藻泥进行稀释，稀释液选用灭菌的生理盐水，稀释程度为10-4待用；
(4)配制裸藻自养所需液体培养基，向培养基中加入琼脂粉，琼脂粉的添加量为培养基质量的0.8％，蒸汽灭菌锅灭菌；
(5)待灭菌培养基冷却到50℃，向培养基中加入抗生素，抗生素选取浓度为20ppm的青霉素，混匀，倾倒平板；
(6)取步骤(3)中的稀释液100μL，置于平板中，均匀涂布；
(7)将涂布平板置于恒温光照箱进行培养，光照度2000lx，温度25℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养4天；
(8)挑取单藻克隆，在步骤(5)的培养基中进行二次划线接种分离；挑取的单藻克隆，应选择形态圆润、长势良好及远离杂菌的单藻克隆；划线操作遵循一般的细菌划线操作，应注意控制接种量；
(9)将划线平板置于恒温光照箱进行培养，光照培养箱培养条件：光照度2000lx，温度25℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养4天；步骤(9)中，如培养的划线平板中出现杂菌，重复步骤(8)～(9)；
(10)将划线平板中的单藻克隆转移至无菌24孔细胞培养板，恒温光照箱进行培养；96孔细胞培养板中，每孔液体培养基的添加量为0.5mL,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度2000lx，温度25℃，光暗比L:D＝12h:12h。培养4天；
(11)将24孔细胞培养板的藻液转移至50ml的三角瓶中，恒温光照箱进行扩大培养，50mL三角瓶中加入液体培养基的添加量为20mL,接种比例为1:40,液体培养基同步骤(4)中裸藻自养液体培养基；恒温光照培养箱培养条件：光照度2000lx，温度25℃，光暗比L:D＝12h:12h。培养4天。
上述步骤(4)中，裸藻自养液体培养基，采用3％的海水养殖液，每升海水中其他组分配比如表3：
表3
上述步骤(3)、(5)、(6)、(8)、(9)、(10)(11)均在无菌操作平台中进行。
上述方式中未述及的有关技术内容采取或借鉴已有技术即可实现。
需要说明的是，在本说明书的教导下本领域技术人员还可以做出这样或那样的容易变化方式，诸如等同方式，或明显变形方式。上述的变化方式均应在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于，依次包括以下步骤：
a取一定量的有细菌污染未分离纯化的裸藻藻液，对所述裸藻藻液进行离心，将离心得到的藻泥清洗并收集；
b对步骤a收集的藻泥进行稀释，得稀释液，备用；
c配制裸藻自养所需液体培养基，向该液体培养基中加入琼脂粉，通过蒸汽灭菌锅灭菌，得灭菌后的培养基；
d待灭菌后的培养基冷却后，向其中加入抗生素，混匀，倾倒平板；
e取步骤b所得稀释液50～100μL，置于平板中，均匀涂布；
f将涂布平板置于恒温光照箱进行培养；
g挑取单藻克隆，将其置于步骤d的培养基中进行二次划线接种分离，然后将划线平板置于恒温光照箱进行培养；
h将划线平板中的单藻克隆转移至无菌96孔细胞培养板，恒温光照箱进行培养；
i将96孔细胞培养板的藻液转移至三角瓶中，恒温光照箱进行扩大培养，即得裸藻藻种。
2.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于步骤a中离心步骤包括：
1)将裸藻藻液置于离心瓶中，设定离心转速为3000～5000rpm，时间为1.0～3.0min；
2)倾去上层液体，经离心后的藻泥沉淀在离心瓶底部，向该离心瓶中加入经灭菌后的生理盐水，涡旋混匀；
3)进行二次离心，设定离心转速为3000～5000rpm，时间为1.0～3.0min；
4)重复步骤2)和3)后，将所得藻泥合并收集。
3.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：步骤b中，通过灭菌后的生理盐水对藻泥进行稀释，稀释倍数为10-3～10-6。
4.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：裸藻自养所需液体培养基，每升去离子水中其它组分配比为：硝酸钠50～100mg/L、磷酸二氢钾5～10mg/L、乙二胺四乙酸钠3～6mg/L、硫酸锌0.010～0.030mg/L、硫酸铜0.01～0.02mg/L、氯化锰0.010～0.020mg/L、硫酸镁20～40mg/L、硫酸铁30～70mg/L、氯化钙1.0～1.5mg/L、钼酸铵0.003～0.007mg/L、维生素B1 0.001mg/L、维生素B12 0.005mg/L、生物素0.005mg/L和氯化钴0.010～0.020mg/L。
5.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：步骤c中，所述琼脂粉的加入量占液体培养基质量的0.5％～1.0％。
6.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：步骤d中，所述抗生素及添加浓度分别为青霉素20～60ppm、氯霉素20～60ppm、土霉素30～70ppm、链霉素40～80ppm。
7.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：所述步骤f、g、h、i中的恒温光照箱培养条件为：光照度1000～3000lx，温度22～28℃，光暗比L:D＝12h:12h，培养2～5天。
8.根据权利要求1所述的一种平板固体培养基分离纯化裸藻藻种的方法，其特征在于：步骤i所述的96孔细胞培养板中，每孔液体培养基的添加量为0.3～0.5mL。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108277163A (zh) * 2018-04-17 2018-07-13 宁波浮田生物技术有限公司 一种分离纯化裸藻藻种的方法
CN109182133A (zh) * 2018-10-25 2019-01-11 攀枝花学院 微藻纯化培养基及分离纯化微藻的方法
CN110846271A (zh) * 2019-11-27 2020-02-28 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种制备虾夷扇贝肌肉单细胞悬液的方法
CN112877216A (zh) * 2021-02-05 2021-06-01 优格天成生物技术(义乌)有限公司 一种在琼脂平板上纯化裸藻的方法
CN115125184A (zh) * 2021-03-25 2022-09-30 青岛科海生物有限公司 一种裸藻的异养培养基和异养发酵方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1887353A (zh) * 2006-07-24 2007-01-03 厦门大学 塔玛亚历山大藻培养液除菌方法
CN101608164A (zh) * 2009-07-17 2009-12-23 四川大学 一种采用组合抑菌剂从天然水域中快速分离异养微藻的方法
CN101805743A (zh) * 2010-03-26 2010-08-18 郑州大学 一种提高光合作用效率转基因盐藻的制备方法
CN102154110A (zh) * 2011-01-27 2011-08-17 华东理工大学 一种高产率的微藻培养方法
CN105199957A (zh) * 2015-10-16 2015-12-30 青岛科海生物有限公司 一种杜氏盐藻的优化培育方法
CN105483014A (zh) * 2016-01-14 2016-04-13 青岛科海生物有限公司 发酵法高密度培养小球藻生产工艺

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1887353A (zh) * 2006-07-24 2007-01-03 厦门大学 塔玛亚历山大藻培养液除菌方法
CN101608164A (zh) * 2009-07-17 2009-12-23 四川大学 一种采用组合抑菌剂从天然水域中快速分离异养微藻的方法
CN101805743A (zh) * 2010-03-26 2010-08-18 郑州大学 一种提高光合作用效率转基因盐藻的制备方法
CN102154110A (zh) * 2011-01-27 2011-08-17 华东理工大学 一种高产率的微藻培养方法
CN105199957A (zh) * 2015-10-16 2015-12-30 青岛科海生物有限公司 一种杜氏盐藻的优化培育方法
CN105483014A (zh) * 2016-01-14 2016-04-13 青岛科海生物有限公司 发酵法高密度培养小球藻生产工艺

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. K. JONES等: "The use of antibiotics to obtain axenic cultures of algae", 《BR.PHYCOL.J》 *
张彦慧等: "5种抗生素对纤细裸藻蛋白含量的影响", 《河北渔业》 *
班剑娇: "山西省高脂微藻的分离筛选及培养条件优化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108277163A (zh) * 2018-04-17 2018-07-13 宁波浮田生物技术有限公司 一种分离纯化裸藻藻种的方法
CN108277163B (zh) * 2018-04-17 2022-02-01 宁波浮田生物技术有限公司 一种分离纯化裸藻藻种的方法
CN109182133A (zh) * 2018-10-25 2019-01-11 攀枝花学院 微藻纯化培养基及分离纯化微藻的方法
CN110846271A (zh) * 2019-11-27 2020-02-28 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种制备虾夷扇贝肌肉单细胞悬液的方法
CN110846271B (zh) * 2019-11-27 2021-06-25 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种制备虾夷扇贝肌肉单细胞悬液的方法
CN112877216A (zh) * 2021-02-05 2021-06-01 优格天成生物技术(义乌)有限公司 一种在琼脂平板上纯化裸藻的方法
CN115125184A (zh) * 2021-03-25 2022-09-30 青岛科海生物有限公司 一种裸藻的异养培养基和异养发酵方法
CN115125184B (zh) * 2021-03-25 2024-05-28 青岛科海生物有限公司 一种裸藻的异养培养基和异养发酵方法

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