CN107593543B - 一种淡水有核珍珠细胞小片处理液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的制备方法，该细胞小片处理液由三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液组成，本发明的细胞小片处理液能够加快育珠贝伤口愈合，促进小片贴合，提高蚌体的存活率；同时细胞小片在植入蚌体之前，先置于本发明的细胞小片处理液中浸泡，然后再将其贴敷在珠核表面，可以促进珍珠质分泌，提高了留核率和圆形珍珠率；本发明方法简单，容易实现，效果显著，效率高，同时价格低廉，具有极为广阔的应用前景。

Description

一种淡水有核珍珠细胞小片处理液及其制备方法
技术领域
本发明属于珍珠珠核加工技术领域，具体涉及一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的制备方法。
背景技术
淡水珍珠产量约占世界总产量的95％，但销售额仅占世界珍珠销售总额的5％左右，主要在于淡水珍珠主要为无核珍珠，其直径较小，市场售价较低，经济效益不高。近几年，尽管淡水河蚌有核珍珠培育初步获得成功，但仍然存在吐核率高、成圆率低等问题。针对上述问题，国内外开展了大量的研究，主要围绕提高细胞的活力和分泌机能，利用各类溶液处理小片进行研究，一般用抗生素配置的药液浸泡珠核以抗感染或用红外、紫外照射的活化处理方法。
中国专利CN103947593B公开了一种有核珍珠的培育方法，该方法先取珠核放入第一处理液浸泡培育，再取蚌体后半部边缘膜的细胞小片，放入第二处理液浸泡培育，采用该方法处理后，蚌体的死亡率大大降低，留核率大大提高。但是该方法需要配置两种处理液，操作较为复杂，同时这两种处理液的配置所需的材料不易获得，多为中药材，价格较为昂贵，不适合大规模生产培育。因此，亟需寻找一种操作简单，价格低廉的适合大规模培育的方法。
发明内容
为了解决现有淡水珍珠养殖技术中吐核率高、成圆率低的问题，本发明提供了一种淡水有核珍珠细胞小片处理液及其制备方法，本发明的细胞小片处理液能够加快育珠贝伤口愈合，促进小片贴合，提高蚌体的存活率；促进珍珠质分泌，提高留核率和圆形珍珠率。
一种淡水有核珍珠细胞小片处理液，该细胞小片处理液由三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液组成，其中三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure BDA0001443348350000011
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
其中，所述三氮唑铬配合物的制备工艺如下：将0.1mol/L的CrCl3与0.1mol/L的1,2,3-三氮唑-4,5-二羧酸等体积在烧杯中充分混合均匀，采用1mol/L NaOH调节溶液pH为中性，常温下放置15d，有淡紫色晶体析出，即为目标配合物三氮唑铬配合物[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
其中，所述10％的蚌体组织匀浆液的制备工艺如下：选取蚌体外套膜组织，用生理盐水清洗干净，称量蚌体外套膜组织的重量，放入蚌体外套膜组织重量9倍的0.9％生理盐水，用组织捣碎机研磨制成10％组织匀浆，得10％的蚌体组织匀浆液。
在一个优选的实施方案中，所述三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure BDA0001443348350000021
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
在一个优选的实施方案中，所述三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure BDA0001443348350000022
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的制备方法包括以下步骤：
按上述比例称取三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖和10％的蚌体组织匀浆液，搅拌均匀即得。
一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的使用方法：将育珠蚌外套膜切割成细胞小片，用镊子夹取细胞小片，将其浸泡在处理液中3-5min，再移放到育珠蚌珠核表面。
作为优选，所述使用方法中切割成的细胞小片的尺寸优选为2mm×2mm。
本发明的细胞小片处理液能够加快育珠贝伤口愈合，促进小片贴合，提高蚌体的存活率；同时细胞小片在植入蚌体之前，先置于本发明的细胞小片处理液中浸泡，然后再将其贴敷在珠核表面，可以促进珍珠质分泌，提高了留核率和圆形珍珠率；本发明方法简单，容易实现，效果显著，效率高，同时价格低廉，具有极为广阔的应用前景。
附图说明
图1为三氮唑铬配合物[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O的分子结构图。
具体实施方式
三氮唑铬配合物的制备工艺如下：将0.1mol/L的CrCl3与0.1mol/L的1,2,3-三氮唑-4,5-二羧酸等体积在烧杯中充分混合均匀，采用1mol/L NaOH调节溶液pH为中性，常温下放置15d，有淡紫色晶体析出，即为目标配合物三氮唑铬配合物[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O，其分子结构见图1。
蚌体组织匀浆液的制备工艺如下：选取蚌体外套膜组织，用生理盐水清洗干净，称量蚌体外套膜组织重量，放入外套膜组织重量9倍的0.9％生理盐水，用组织捣碎机研磨制成10％组织匀浆，即得10％的蚌体组织匀浆液。
实施例1
Figure BDA0001443348350000031
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
按上述比例称取三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖和10％的蚌体组织匀浆液，搅拌均匀即得1KG细胞小片处理液。
实施例2
Figure BDA0001443348350000032
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
按上述比例称取三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖和10％的蚌体组织匀浆液，搅拌均匀即得1KG细胞小片处理液。
实施例3
Figure BDA0001443348350000041
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
按上述比例称取三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖和10％的蚌体组织匀浆液，搅拌均匀即得1KG细胞小片处理液。
实施例4
将育珠蚌外套膜切割成2mm×2mm细胞小片，用镊子夹取细胞小片，将其浸泡在实施例1中细胞小片处理液中5min，再移放到育珠蚌珠核表面。将细胞小片和珠核插入到育珠蚌后放入休养池中休养30天，期间记录插片贝死亡数量和脱核贝数量，休养结束后，将珠蚌移到养殖场进行常规养殖，养殖3年后，统计圆形珍珠率、光泽度及表面光滑度。
实施例5
将育珠蚌外套膜切割成2mm×2mm细胞小片，用镊子夹取细胞小片，将其浸泡在实施例2中细胞小片处理液中3min，再移放到育珠蚌珠核表面。将细胞小片和珠核插入到育珠蚌后放入休养池中休养30天，期间记录插片贝死亡数量和脱核贝数量，休养结束后，将珠蚌移到养殖场进行常规养殖，养殖3年后，统计圆形珍珠率、光泽度及表面光滑度。
实施例6
将育珠蚌外套膜切割成2mm×2mm细胞小片，用镊子夹取细胞小片，将其浸泡在实施例3中细胞小片处理液中4min，再移放到育珠蚌珠核表面。将细胞小片和珠核插入到育珠蚌后放入休养池中休养30天，期间记录插片贝死亡数量和脱核贝数量，休养结束后，将珠蚌移到养殖场进行常规养殖，养殖3年后，统计圆形珍珠率、光泽度及表面光滑度。
对比实施例1
涉及一种有核珍珠的培育方法，其方法同实施例4，不同之处在于，细胞小片仅用0.9％生理盐水浸泡处理。
对比实施例2
涉及一种有核珍珠的培育方法，其方法同实施例5，不同之处在于，细胞小片仅用0.9％的生理盐水浸泡处理。
对比实施例3
涉及一种有核珍珠的培育方法，其方法同实施例6，不同之处在于，细胞小片仅用0.9％生理盐水浸泡处理。
实施例4-6及对比实施例1-3的统计结果如下，见表1。
表1
测试项目 对比实施例1 对比实施例2 对比实施例3 实施例4 实施例5 实施例6
死亡率/％ 15.1 15.3 12.7 2.8 2.9 3.4
留核率/％ 55.7 53.5 54.1 88.1 90.2 87.1
圆形珍珠率/％ 60.1 59.4 62.1 79.8 84.6 81.2
光泽度 一般 较差 一般 好 好 好
表面光滑度 有瑕疵 一般光滑 一般光滑 非常光滑 非常光滑 非常光滑
本处实施例对本发明要求保护的技术范围中点值未穷尽之处以及在实施例技术方案中对单个或者多个技术特征的同等替换所形成的新的技术方案，同样都在本发明要求保护的范围内；同时本发明方案所有列举或者未列举的实施例中，在同一实施例中的各个参数仅仅表示其技术方案的一个实例(即一种可行性方案)，而各个参数之间并不存在严格的配合与限定关系，其中各参数在不违背公理以及本发明述求时可以相互替换，特别声明的除外。
本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述技术手段所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。以上所述是本发明的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种淡水有核珍珠细胞小片处理液，其特征在于所述细胞小片处理液由三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液组成，其中所述三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure FDA0002155091840000011
其中，所述三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O，所述三氮唑铬配合物的制备工艺如下：将0.1mol/L的CrCl3与0.1mol/L的1,2,3-三氮唑-4,5-二羧酸等体积在烧杯中充分混合均匀，采用1mol/L NaOH调节溶液pH为中性，常温下放置15d，有淡紫色晶体析出，即为目标配合物三氮唑铬配合物[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O；
所述10％的蚌体组织匀浆液的制备工艺如下：选取蚌体外套膜组织，用生理盐水清洗干净，称量蚌体外套膜组织的重量，放入蚌体外套膜组织重量9倍的0.9％生理盐水，用组织捣碎机研磨制成10％的组织匀浆，得10％的蚌体组织匀浆液。
2.根据权利要求1所述一种淡水有核珍珠细胞小片处理液，其特征在于所述三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure FDA0002155091840000012
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
3.根据权利要求1所述一种淡水有核珍珠细胞小片处理液，其特征在于所述三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖、10％的蚌体组织匀浆液的重量百分含量为：
Figure FDA0002155091840000013
Figure FDA0002155091840000021
其中，三氮唑铬配合物为[Cr(H2O)6][Na2(C8H4N6O8)2]·2H2O。
4.如权利要求1中所述的一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的制备方法，其特征在于包括以下步骤：按权利要求1中的比例称取三氮唑铬配合物、透明质酸、壳聚糖和10％的蚌体组织匀浆液，搅拌均匀即得。
5.如权利要求1中所述的一种淡水有核珍珠细胞小片处理液的使用方法：其特征在于包括以下步骤：将育珠蚌外套膜切割成细胞小片，用镊子夹取细胞小片，将细胞小片浸泡在处理液中3-5min，再移放到育珠蚌珠核表面，所述切割成的细胞小片的尺寸为2mm×2mm。
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