CN107582729A - 一种颠茄提取物的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种颠茄提取物的制备方法及其应用,所述制备方法包括温水浸泡,醇提取和渗漉等工序,本发明药物制备方法在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,通过纤维素酶打破颠茄中由纤维素组成细胞壁,加速细胞内有效成分的浸出,较大提高原材料的利用率;由本制备方法制备得到的颠茄提取物可作为一种新型血管平滑肌舒张药物,用于制备治疗高血压的药物,可为临床治疗高血压提供一种新的方案。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种颠茄提取物的制备方法及其应用。
背景技术
颠茄是一种茄科草本植物。原产于西欧的多年草本植物,后来移植到北非、西亚、北美等地,中国也有引进栽培。原产地为山地背阴潮湿地带,在富含石灰质的土壤中群生。
颠茄中的有效成分为莨菪类生物碱,主要用于胃痉挛、十二指肠溃疡、输尿管结石等引起的腹痛,胃炎及胃痉挛引起的呕吐和腹泻。
根据《中国药典》(2010年版397页),颠茄浸膏的制备方法是:取颠茄草粗粉1000克,用85%乙醇作溶剂,浸渍48小时后,以每分钟1-3ml的速度缓缓渗漉,收集初漉液约3000ml,另器保存,继续渗漉,候生物碱完全漉出,续漉液作下次渗漉的溶剂用。将初漉液在60℃减压回收乙醇,放冷至室温,分离出去叶绿素,滤过,滤液在60-70℃蒸发至稠膏状,加10倍量的乙醇,搅拌均匀,静置,候沉淀完全,吸取上清液,在60℃减压回收乙醇,浓缩至稠膏状即得颠茄浸膏。
修正药业的高陆在专利CN100500186C采用醇提步骤后还用水提步骤,即醇提后的药渣加水煎煮1-4次,每次加水2-10倍,水煎时间各为1-3小时,滤过,合并滤液,浓缩至相对密度1-1.4;然后与乙醇提取的流浸膏合并,混合后继续减压浓缩至稠膏即得颠茄提取物。
上述各方法,工艺复杂,并且颠茄所含的生物碱提取不完全、耗时长、乙醇用量大。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的问题,一方面,开发全新的一种颠茄提取物的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、温水浸泡:将颠茄洗净干燥,磨粉,加水加热至30-40℃,搅拌1-2h,然后静置1-2h;过滤得到滤液A和滤渣B;
步骤二、醇提取:在滤渣B添加滤渣B质量10-15倍量的乙醇溶液浸渍1—2h;
步骤三、渗漉:先在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,然后将步骤二中混合液放置于所述渗漉筒中进行缓缓渗滤,收集滤液C,将滤液A和滤液C进行混合后减压浓缩得到颠茄提取物。
具体地,所述步骤二中纤维素酶膜为附着有一定纤维素酶的醋酸纤维素/聚丙烯复合膜。
具体地,所述步骤三中的渗漉在超声环境进行。
具体地,所述超声强度为20~80KHz。
另一方面,本发明提供一种颠茄提取物在在制备血管平滑肌舒张药物中的应用。
具体地,所述血管平滑肌舒张药物用于治疗高血压。
本发明方案提供的一个或多个技术方案,至少具有如下技术效果或优点:
1.本发明药物制备方法在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,通过纤维素酶打破颠茄中由纤维素组成细胞壁,加速细胞内有效成分的浸出,较大提高原材料的利用率,通过纤维素酶膜有效增快提取速率,且有效防止纤维素酶进入提取液体系中。
2.本发明药物制备方法中在渗漉操作中加入超声,一方面提高了提取效果,显著减少了溶剂用量、降低了浓缩过程溶剂回收的能耗,另一方面,超声的加入使得步骤三中经纤维素酶膜分解的细胞壁碎片能够迅速分散至提取体系中部,使得提取体系中暂未经纤维素酶分解的细胞便于与纤维素酶膜直接接触,从而使得纤维素酶膜的利用率显著提高。
3.本发明制备得到的颠茄提取物中生物碱的提取率高达95%,极大提高颠茄的利用率,也简化制备工艺,缩短制备时间,且其单独使用便能有效舒张血管平滑肌,用于高血压药物的制备和应用。
具体实施方式
本发明针对现有技术中存在的问题,一方面,开发全新的一种颠茄提取物的制备方法,另一方面,本发明提供一种颠茄提取物在在制备血管平滑肌舒张药物中的应用。
为了更好的理解本发明技术方案,下面将结合具体实施方式对上述技术方案进行详细的说明,应当理解本发明实施例以及实施例中的具体特征是对本发明技术方案的详细的说明,而不是对本发明技术方案的限定,在不冲突的情况下,本发明实施例以及实施例中的技术特征可以相互组合。
一、实施例
实施例1颠茄提取物的制备方法
步骤一、温水浸泡:将颠茄洗净干燥,磨粉,过60目筛,取100g颠茄粉末加水加热至30℃,搅拌2h,然后静置2h;过滤得到滤液A和滤渣B;
步骤二、醇提取:在滤渣B添加滤渣B质量10-15倍量的乙醇溶液浸渍2h;
步骤三、渗漉:将步骤二中混合液放置于所述渗漉筒中进行缓缓渗滤,收集滤液C,将滤液A和滤液C进行混合后减压浓缩得到颠茄提取物。
本实施例中渗漉时间为20h时,制得颠茄提取物生物碱的提取率为71%。其中所述提取率为单位质量原药中提取出的目标物质(生物碱)占单位质量原药中目标物质总质量的百分比。
实施例2颠茄提取物的制备方法
步骤一、温水浸泡:将颠茄洗净干燥,磨粉,过60目筛,取100g颠茄粉末加水加热至30℃,搅拌2h,然后静置2h;过滤得到滤液A和滤渣B;
步骤二、醇提取:在滤渣B添加滤渣B质量10-15倍量的乙醇溶液浸渍2h;
步骤三、渗漉:先在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,然后将步骤二中混合液放置于所述渗漉筒中进行缓缓渗滤,收集滤液C,将滤液A和滤液C进行混合后减压浓缩得到颠茄提取物。
其中所述纤维素酶膜通过如下工艺制得:将5g醋酸纤维素溶于100mL丙酮中,待溶解完全成均一的膜液后,取实验前制备好的聚丙烯膜浸于溶有醋酸纤维素的丙酮溶液中,自然成膜,以去离子水冲洗醋酸纤维素/聚丙烯复合膜数次干燥备用;将一定量的纤维素酶和缓冲液在其最适的条件下混合,并加入1cm2醋酸纤维素/聚丙烯复合膜,搅拌吸附一定时间制得所述纤维素酶膜,其中所述纤维束酶为2-10U/cm2,所述缓冲液为磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲液,
本实施例中渗漉时间为12h时,制得颠茄提取物生物碱的提取率为85%。
实施例3颠茄提取物的制备方法
步骤一、温水浸泡:将颠茄洗净干燥,磨粉,过60目筛,取100g颠茄粉末加水加热至30℃,搅拌2h,然后静置2h;过滤得到滤液A和滤渣B;
步骤二、醇提取:在滤渣B添加滤渣B质量10-15倍量的乙醇溶液浸渍2h;
步骤三、渗漉:先在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,然后将步骤二中混合液放置于所述渗漉筒中进行缓缓渗滤,收集滤液C,将滤液A和滤液C进行混合后减压浓缩得到颠茄提取物。具体地,将渗漉筒置于超声发送器中,将超声强度设置为50KHz左右。
其中所述纤维素酶膜通过如下工艺制得:将5g醋酸纤维素溶于100mL丙酮中,待溶解完全成均一的膜液后,取实验前制备好的聚丙烯膜浸于溶有醋酸纤维素的丙酮溶液中,自然成膜,以去离子水冲洗醋酸纤维素/聚丙烯复合膜数次干燥备用;将一定量的纤维素酶和缓冲液在其最适的条件下混合,并加入醋酸纤维素/聚丙烯复合膜,搅拌吸附一定时间制得所述纤维素酶膜。
本实施例中渗漉时间为5h时,制得颠茄提取物生物碱的提取率为96%。
二、实验例
1实验试剂
1.1高钙溶液(PSS)的配制
取135mmol NaCl、5mmol KCl、2mmol CaCl2、10mmol葡萄糖、10mmol 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、1mmol MgCl2·6H2O溶于800mL无菌水,用1mol/L的NaOH将溶液pH调节至7.40,定容到1000mL。
1.1高钾溶液的配制
取135mmol NaCl、140mmol KCl、2mmol CaCl2、10mmol葡萄糖、10mmol 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、1mmol MgCl2·6H2O溶于800mL无菌水,用1mol/L的NaOH将溶液pH调节至7.40,定容到1000mL。
1.3颠茄提取物溶液的配制
分别取0.3g实施例1-3的颠茄提取物,用3mL高钙溶液溶解,调节pH至7.40,制得实施例颠茄提取物溶液。
2血管的制备与预处理:
小鼠购买后,饲养2天让其适应环境。挑选生理状态正常的小鼠,先用颈椎脱臼法处死实验用的大鼠。将大鼠固定好后,将消毒酒精喷洒其全部的腹面。然后用消过毒的手术剪刀剪开大鼠的腹部,将大鼠的胸腔及腹部剪开之后,用镊子慢慢地扒开大鼠的内脏部分,可见大鼠的胸主动脉位于脊椎的上方,分别从心脏和主动脉与肠动脉的交接处剪出胸腔内的主动脉,然后将其放入PSS溶液中。
打开实验需要用的电脑和供氧阀,然后调节气泡,使速率保持在3-4个/秒。实验开始前,张力换能系统应先开机预热半小时。然后打开BL-420生物机能系统软件,并将四个通道的测量项目都应调节为张力,且将采样率调至100Hz,然后待机待用。随后打开恒温水浴设备,调节水温为37度。并将适量的PSS溶液进行预热,以备待用。
将离体主动脉置于解剖显微镜下面,将其固定住,然后利用维纳斯剪除去离体组织外周的组织,使用1000mL的移液枪将残留在血管中的血液冲洗出来。将离体的主动脉处理完成后,把动脉剪成每段长约6mm的小段,一共要剪下4小段。然后将小段的血管与三角挂钩连接好,再连接到张力换能器上,缓慢的将其置于6mL的PSS溶液(已37℃预热的)水浴槽内,水浴槽恒温并保持供氧适量,转动微调旋钮慢慢调节挂钩的位置,使血管环处于静息的状态。反复操作以上的步骤,将四道组织均装载到水浴槽内。再次调节好挂钩的位置和气泡的大小后,将四道组织的前负荷都调节到300mg,然后开始计时进行平衡。在平衡期间,每15分钟更换一次PSS溶液,共换液4次,总共平衡1小时。待平衡完毕后使用140mmol/L高钾溶液对离体主动脉进行预刺激处理,等充分刺激组织活性后用PSS溶液进行换液洗脱,等到恢复至基线。
将处理好的大鼠血管环与三角勾连接好后,将样本衔接到张力换能器上,然后放入装有6mLPSS的恒温水浴槽中,将水浴槽中的PSS溶液换成已预热的PSS溶液,调节水浴槽里的氧气大小合适后,将通道的前负荷调到300mg。调节好气泡和前负荷后便可开始平衡,其中每15分钟换一次PSS溶液,总共要换四次。等到平衡的时间够一个小时之后,用浓度为140mmol/L的高钾溶液进行预刺激处理,等到血管肌张力处于最佳的紧缩状态后,用PSS溶液将高钾溶液洗脱掉,等到血管的肌张力恢复到300mg的基线之后,再加入高钾溶液使血管预收缩,再次使张力达到最佳的紧缩状态,模拟高血压患者血管平滑肌模型,开始加药试验。
3检测颠茄提取物对血管平滑肌的舒张作用
首先用高钾溶液对离体血管平滑肌进行预收缩处理,达稳态后,分别在浴槽中加入50μL实施例1-3颠茄提取物的溶液,检测血管张力变化。
为了对比不同提取工艺制得颠茄提取物溶液对小鼠血管平滑肌的舒张作用,再设置两个对照实验:一是空白对照组,即对小鼠血管平滑肌不作任何处理;二是高钾溶液组,即仅加入高钾溶液刺激血管平滑肌收缩。
不同实验组对小鼠血管平滑肌舒张作用的实验结果列于下表2中。
表2不同实验组对小鼠血管平滑肌舒张作用的实验结果a
a小鼠血管张力(mN)为单位重量的血管平滑肌拉力;
舒张率=(加入颠茄提取物前小鼠血管平滑肌张力—加入颠茄提取物后小鼠血管平滑肌张力)/(加入高钾溶液后小鼠血管平滑肌张力—加入高钾溶液前小鼠血管平滑肌张力)×100%,其中,加入颠茄提取物后小鼠血管平滑肌张力为加入颠茄提取物10min后小鼠血管平滑肌张力。
从表2中可以得出以下结论:
1、空白实验组对气管不做任何处理,气管张力稳定在1.4mN;仅加入高钾溶液刺激血管平滑肌收缩,离体血管张力从1.4mN增加到9.9mN,并且在不添加对比例或实施例中药物的条件下,血管张力能够有效保持60分钟。
2、实施例1、实施例2和实施例3制得的颠茄提取物对应舒张率分别为62.4%、82.4%和98.8%。从这一结果可以得出,在渗漉过程中不添加纤维素酶膜,制备得到的颠茄提取物可以在一定程度上舒张血管平滑肌,然而在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,制备得到的颠茄提取物,舒张血管平滑肌的舒张率提高近30%,在提取工艺中增加超声装置,舒张血管平滑肌的舒张率提高近57%。由此说明,本实验技术既可以简化制备工艺,缩短制备时间,提高生物碱的提取率,又能够有效提高颠茄提取物的舒张血管平滑肌的舒张率。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (6)
1.一种颠茄提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一、温水浸泡:将颠茄洗净干燥,磨粉,加水加热至30-40℃,搅拌1-2h,然后静置1-2h;过滤得到滤液A和滤渣B;
步骤二、醇提取:在滤渣B添加滤渣B质量10-15倍量的乙醇溶液浸渍3—4h;
步骤三、渗漉:先在渗漉筒内覆盖多层纤维素酶膜,然后将步骤二中混合液放置于所述渗漉筒中进行缓缓渗滤,收集滤液C,将滤液A和滤液C进行混合后减压浓缩得到颠茄提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤二中纤维素酶膜为附着有纤维素酶的醋酸纤维素/聚丙烯复合膜。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤三中的渗漉在超声环境进行。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述超声强度为20~80KHz。
5.根据权利要求1-4中任意一项权利要求所述制备方法制得提取物在制备血管平滑肌舒张药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述血管平滑肌舒张药物用于治疗高血压。
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110859887A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-03-06 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄浸膏的渗漉提取方法 |
CN110882329A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-03-17 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄流浸膏的生产工艺 |
CN111297972A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-06-19 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄浸膏的生产工艺 |
CN111450169A (zh) * | 2020-04-09 | 2020-07-28 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄中生物碱的高得率提取工艺 |
CN113786437A (zh) * | 2021-11-03 | 2021-12-14 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄流浸膏的生产工艺 |
CN114651719A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-06-24 | 贵州大学 | 一种利用钙信号抑制剂提高颠茄发根中托品烷类生物碱含量的方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1846752A (zh) * | 2006-02-21 | 2006-10-18 | 高陆 | 一种颠茄提取物的制备方法 |
CN102839045A (zh) * | 2012-09-10 | 2012-12-26 | 东北农业大学 | 一种利用复合酶膜处理大豆胚片的方法 |
CN104611322A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-13 | 黑龙江省大豆技术开发研究中心 | 一种固定化纤维素酶制备的方法 |
CN104840603A (zh) * | 2015-05-29 | 2015-08-19 | 重庆希尔安药业有限公司 | 一种颠茄提取物及其制备方法 |
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1846752A (zh) * | 2006-02-21 | 2006-10-18 | 高陆 | 一种颠茄提取物的制备方法 |
CN102839045A (zh) * | 2012-09-10 | 2012-12-26 | 东北农业大学 | 一种利用复合酶膜处理大豆胚片的方法 |
CN104611322A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-13 | 黑龙江省大豆技术开发研究中心 | 一种固定化纤维素酶制备的方法 |
CN104840603A (zh) * | 2015-05-29 | 2015-08-19 | 重庆希尔安药业有限公司 | 一种颠茄提取物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
中山医学院: "《药理学》", 31 January 1981, 人民卫生出版社 * |
于永军: "《天然药物化学及实验技术》", 30 April 2012, 人民军医出版社 * |
汤其群: "《生物化学与分子生物学》", 30 September 2015 * |
王宗玉等: "《中国原料植物药》", 28 February 2002, 云南科学技术出版社 * |
王顺年 等: "《实用急性中毒救治手册》", 31 January 2017, 河南科学技术出版社 * |
董方言: "《现代实用中药新剂型新技术》", 30 April 2001, 人民卫生出版社 * |
韩丽: "《实用中药制剂新技术》", 30 November 2001, 化学工业出版社 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110859887A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-03-06 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄浸膏的渗漉提取方法 |
CN110882329A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-03-17 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄流浸膏的生产工艺 |
CN111297972A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-06-19 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄浸膏的生产工艺 |
CN111450169A (zh) * | 2020-04-09 | 2020-07-28 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄中生物碱的高得率提取工艺 |
CN113786437A (zh) * | 2021-11-03 | 2021-12-14 | 安徽恒达药业有限公司 | 一种颠茄流浸膏的生产工艺 |
CN114651719A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-06-24 | 贵州大学 | 一种利用钙信号抑制剂提高颠茄发根中托品烷类生物碱含量的方法 |
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