CN107581434A - 一种富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法 - Google Patents

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CN107581434A CN201711019948.1A CN201711019948A CN107581434A CN 107581434 A CN107581434 A CN 107581434A CN 201711019948 A CN201711019948 A CN 201711019948A CN 107581434 A CN107581434 A CN 107581434A
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马长成
华木白
刘孔新锐
孙煜尧
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Shandong Seed Group Co ltd
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Abstract

本发明涉及益生菌应用技术领域,具体涉及一种富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法。所述乳酸菌饮品是通过将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合,进行同步酶解和发酵制备得到的。所述饮品中虾青素含量高,抗氧化性强,且富含氨基酸、维生素、无机盐等营养成分。该饮品富含乳酸菌,还具有调节胃肠功能、提高免疫力等效用,适合各种人群食用,市场前景广阔。

Description

一种富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法
技术领域
本发明涉及益生菌应用技术领域,具体涉及一种富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法。
背景技术
虾青素(Astaxanthin)是一种脂溶性的类胡萝卜素,呈现红色或橙色,最早是从水产动物组织、螯虾外壳及藻细胞中发现,具有极强的抗氧化活性,是到目前为止在自然界有机体中发现的最强的抗氧化剂,它的清除自由基和单线态氧淬灭的能力远远强于维生素E,也比玉米黄质、番茄红素及β-胡萝卜素等常见抗氧化物质的抗氧化能力要强10倍以上,因此虾青素具有抑制肿瘤、提高肌体免疫力、清除活性氧和自由基等作用,除此之外虾青素还具有良好的着色效果,可以进入生物体直接贮存在组织中,动物的羽毛和皮肤等就会呈现鲜亮的红色或金黄色,使某些动物的肌肉和皮肤呈现健康漂亮的颜色如红鳝鱼、大马哈鱼等。正是因为这些特性使得其在保健品、药物、食品、化妆品及养殖工业等方面得到了广泛的应用。
最初的虾青素是在虾、蟹壳中发现的,但是含量极少。无论出于安全性考虑,还是由于顺式结构在动物体内无法转化,化学合成虾青素都越来越受到严格的限制。目前自然界中天然的虾青素主要存在于某些藻类、酵母、细菌中,其中雨生红球藻是天然虾青素的最佳来源。雨生红球藻是一种淡水中的单细胞绿藻,在特定的条件下可以产生大量类胡萝卜素,其中大部分为虾青素。雨生红球藻中的虾青素积累速率和生物总量最高,其100%的左旋(3S,3'S)结构,具有最强的生物学活性,另外雨生红球藻所含虾青素的脂类配比与动物体内的虾青素配比极为相似,最容易被吸收,因此,雨生红球藻被公认为是自然界中生产天然虾青素的最好生物。
利用雨生红球藻提取虾青素无疑具有广阔的发展前景,已成为近年来国际上天然虾青素生产的研究热点,此种来源的虾青素备受人类的保健食品、高档化妆品、药品等领域的青睐。
发明内容
本发明的目的是提供一种富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法。所述乳酸菌饮品是通过将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合,进行同步酶解和发酵制备得到的。所述乳酸菌饮品中游离虾青素含量高,抗氧化性强,与乳酸菌配合食用,有助于维护机体健康。
一种乳酸菌饮品,是通过将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合发酵制备得到的。
所述乳酸菌饮品,是通过如下步骤制备得到的:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为150-200r/min,研磨3-5小时,得到雨生红球藻浆液;10kw微波灭菌1-2min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至40~42℃;再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5-5.0;
(3)按105-106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种乳酸菌,搅拌15min;发酵温度40~42℃,发酵时间18~24小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,均质后,进行无菌灌装、包装,即得到本发明所述乳酸菌饮品。
所述步骤(2)中的发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液20-25%,复合酶2-3%,奶粉5-10%,白砂糖2.5-5%,葡萄糖2%-5.5%。
进一步优选地,所述发酵培养基中各原料的质量体积比分别为雨生红球藻浆液22%,复合酶2.5%,奶粉8%,白砂糖4%,葡萄糖2%。
所述步骤(2)中的复合酶包含纤维素酶、果胶酶和碳酸钠。
所述复合酶中纤维素酶,果胶酶和碳酸钠的质量比为:3:2:0.2-0.4。
进一步优选地,所述复合酶中纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为3:2:0.4。
所述步骤(3)中乳酸菌优选植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
所述植物乳杆菌的保藏号为CCTCC NO:M 2016137。
所述步骤(3)中发酵温度优选42℃。
本发明提供的乳酸菌饮品中虾青素含量高,抗氧化性强,且富含氨基酸、维生素、无机盐等营养成分。且饮品富含乳酸菌,活菌量达到20亿/mL,具有调节胃肠功能、提高免疫力等效用,适合各种人群食用,市场前景广阔。
本发明提供的乳酸菌饮品中游离虾青素的含量高达0.278mg/ml,雨生红球藻中虾青素的提取率高达69.5%,从而说明本发明提供的将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合发酵的方法,使雨生红球藻的酶解与乳酸菌的发酵同步进行,不仅大大节省了时间,还能有效提高雨生红球藻中虾青素的提取效率,取得了显著的效果。
其中,在雨生红球藻的酶解过程中,碳酸钠可以与纤维素酶和果胶酶产生协同作用,促进纤维素酶和果胶酶对于雨生红球藻细胞壁的降解,尤其是当纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为3:2:0.2-0.4时,三者的协同促进作用最强,雨生红球藻中虾青素的提取效率达到62.4%-69.5%,取得了意料不到的效果。
而在乳酸菌发酵过程中,本发明选用的植物乳杆菌产生的代谢产物也可以有效促进纤维素酶和果胶酶对雨生红球藻细胞壁的酶解作用,使虾青素的提取效率进一步提高了13.9%,效果显著。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容作进一步的说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
本发明实施例中所述菌种、原料、试剂可选自市售任意一种,例如:
所述雨生红球藻粉可购自陕西绿清生物工程有限公司,虾青素含量2.0%(GB/T31520-2015);所述纤维素酶和果胶酶均为食品级,可购自潍坊康地恩生物科技有限公司,其中纤维素酶酶活为5000U/g,果胶酶酶活为3000U/g;所述葡萄糖、白砂糖、碳酸钠可购自国药集团;所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)可选用保藏号为CCTCC NO:M2016137的植物乳杆菌。
本发明实施例中采用的虾青素含量检测方法,具体步骤如下:
1、样品稀释
把样品中虾青素含量稀释到约5mg/L,12000r/min离心10min,静置5min,过0.22um的有机系膜,为待测样。
2、测定步骤
2.1标准曲线
将虾青素标准溶液稀释10倍,再按下表进行标准曲线的稀释;
虾青素标准溶液(mL) 甲醇(mL) 总体积(mL)
0.1 0.9 1
0.3 0.7 1
0.5 0.5 1
0.7 0.3 1
1 0 1
2.2实验条件
高效液相色谱仪:waters 2695;检测器:waters 2489紫外检测器流速:1.0mL/min;检测波长:475nm;色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C18,4.6mm×250mm;柱温:30℃;进样温度:25℃;进样量:10μL;流动相:甲醇:乙腈=90:10,提前混合配制;运行时间:15min。
3、实验结果与计算
3.1标准曲线的制作
以虾青素系列浓度为横坐标,色谱峰面积响应值为纵坐标,列出直线回归方程:Y=ac+b;
其中,Y为虾青素峰面积;a、b为标准方程系数;c为虾青素浓度。
3.2样品含量计算
P=C*n;
其中,P为样品中虾青素含量;C为由标准曲线计算出来的虾青素浓度;n为稀释倍数。一、富含虾青素的乳酸菌饮品及其制备方法
实施例1
一种乳酸菌饮品,是通过如下步骤制备得到的:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为200r/min,研磨3小时,得到雨生红球藻浆液,10kw微波灭菌2min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至40℃;
再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,所述复合酶溶液中纤维素酶,果胶酶和碳酸钠的质量比为:3:2:0.2,经0.2μm滤膜过滤除菌;
最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为5.0;发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液20%,复合酶2%,奶粉10%,白砂糖5%,葡萄糖5%;
(3)按105CFU/ml的比例向发酵培养基中接种植物乳杆菌,搅拌15min;40℃发酵24小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,均质后,进行无菌灌装、包装,即得到本发明所述乳酸菌饮品。
实施例2
一种乳酸菌饮品,是通过如下步骤制备得到的:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为150r/min,研磨5小时,得到雨生红球藻浆液,10kw微波灭菌1min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至42℃;
再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,所述复合酶溶液中纤维素酶,果胶酶和碳酸钠的质量比为:3:2:0.4,经0.2μm滤膜过滤除菌;
最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5;发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液22%,复合酶2.5%,奶粉8%,白砂糖4%,葡萄糖2%;
(3)按106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种植物乳杆菌,搅拌15min;42℃发酵18小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,均质后,进行无菌灌装、包装,即得到本发明所述乳酸菌饮品。
实施例3
一种乳酸菌饮品,是通过如下步骤制备得到的:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为180r/min,研磨4.5小时,得到雨生红球藻浆液,10kw微波灭菌2min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至41℃;
再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,所述复合酶溶液中纤维素酶,果胶酶和碳酸钠的质量比为:3:2:0.3,经0.2μm滤膜过滤除菌;
最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5;发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液25%,复合酶3%,奶粉5%,白砂糖2.5%,葡萄糖5.5%;
(3)按106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种植物乳杆菌,搅拌15min;41℃发酵22小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,均质后,进行无菌灌装、包装,即得到本发明所述乳酸菌饮品。
二、乳酸菌饮品的性能检测
分别取实施例1-3制备得到的乳酸菌饮品各100ml,5000rmp离心10min,取上清液,测定上清液中游离虾青素的含量,计算雨生红球藻中虾青素的提取效率,并检测饮品中乳酸菌的总活菌数,具体结果见表1。
将实施例1-3所述乳酸菌饮品在2~10℃条件下冷藏保存6个月后,重复检测上述数据。具体的检测结果见表2。
表1乳酸菌饮品出厂时的性能指标
表2乳酸菌饮品保存6个月后的性能指标
从表1的结果可知,本发明提供的乳酸菌饮品中游离虾青素的含量高达0.278mg/ml,雨生红球藻中虾青素的提取率高达69.5%,从而说明本发明提供的将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合发酵的方法,使雨生红球藻的酶解与乳酸菌的发酵同步进行,不仅大大节省了时间,还能有效提高雨生红球藻中虾青素的提取效率,取得了显著的效果。
从表2的结果可知,与出厂时的指标相比,本发明提供的乳酸菌饮品在冷藏条件下保存6个月后,游离虾青素的含量提高了3.3%-4.7%,乳酸菌的活菌量也提高了6%-10%,从而说明本发明所述乳酸菌饮品能有效延长货期,且货期内产品品质高,有利于该产品的推广和销售,市场前景广阔。
三、碳酸钠对雨生红球藻中虾青素提取效率的影响
申请人为了进一步验证复合酶中碳酸钠的添加对于雨生红球藻酶解效果的影响,申请人选用实施例2所述乳酸菌饮品制备过程进行了如下实验设计:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为150r/min,研磨5小时,得到雨生红球藻浆液,10kw微波灭菌1min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至42℃;
再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,所述复合酶溶液经0.2μm滤膜过滤除菌;
最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5;发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液22%,复合酶2.5%,奶粉8%,白砂糖4%,葡萄糖2%;
(3)按106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种植物乳杆菌,搅拌15min;42℃发酵18小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,得到乳酸菌饮品。
各实验组步骤(2)所述的复合酶中碳酸钠的添加量不同,分别取各实验组制备得到的乳酸菌饮品100mL,5000rmp离心10min,取上清液,分别测定上清液中游离虾青素的含量,计算雨生红球藻中虾青素的提取效率。同时,以不加复合酶的情况作为对照组,具体结果见表3。
表3碳酸钠的添加量对于虾青素提取效率的影响
乳酸菌饮品 复合酶组分及含量 虾青素提取效率
对照组 - 5.6%
实验组1 纤维素酶 41.3%
实验组2 果胶酶 30.4%
实验组3 碳酸钠 5.6%
实验组4 纤维素酶:果胶酶=3:2 48.9%
实验组5 纤维素酶:果胶酶:碳酸钠=3:2:0.1 49.1%
实验组6 纤维素酶:果胶酶:碳酸钠=3:2:0.2 62.4%
实验组7 纤维素酶:果胶酶:碳酸钠=3:2:0.3 66.1%
实验组8 纤维素酶:果胶酶:碳酸钠=3:2:0.4 69.5%
实验组9 纤维素酶:果胶酶:碳酸钠=3:2:0.5 60.2%
从表3的结果可以看出,与对照组相比,添加纤维素酶和/或果胶酶的各实验组中虾青素的提取效率普遍提高了24.8%-63.9%,从而说明纤维素酶和/或果胶酶能有效促进雨生红球藻细胞壁的降解,进而有利于藻体中虾青素的释放,提高乳酸菌饮品中游离虾青素的含量。
与单独添加纤维素酶或果胶酶的实验组1和实验组2相比,实验组4使用的复合酶中纤维素酶与果胶酶以3:2的比例组合添加,虾青素提取效率分别提高了7.6%和18.5%,从而说明纤维素酶和果胶酶能协同作用促进对雨生红球藻细胞壁的降解,效果显著。
与实验组4相比,实验组5-9中使用的复合酶在纤维素酶和果胶酶的基础上,进一步添加了碳酸钠。其中,当所述复合酶中纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为3:2:0.1时,实验组5中虾青素的提取效率未有明显提高;但当碳酸钠的添加量进一步增加,三者的质量比达到3:2:0.2时,实验组6中虾青素的提取效率迅速提高,超过了60%;随着碳酸钠添加量的继续增加,虾青素的提取效率不断提高,当三者的质量比达到3:2:0.4时,实验组8中虾青素的提取效率达到最高,为69.5%;而后,随着碳酸钠添加量的继续增加,实验组9中虾青素的提取效率却迅速降低。
上述结果表明,碳酸钠可以与纤维素酶和果胶酶产生协同作用,促进纤维素酶和果胶酶对于雨生红球藻细胞壁的降解,尤其是当纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为3:2:0.2-0.4时,三者的协同促进作用最强,能大幅度提高雨生红球藻中虾青素的提取效率,提高乳酸菌饮品中虾青素的含量,取得了意料不到的效果。
四、乳酸菌发酵对雨生红球藻中虾青素提取效率的影响
申请人为了进一步验证乳酸菌发酵对于雨生红球藻酶解效果的影响,申请人选用实施例2所述乳酸菌饮品制备过程进行了如下实验设计:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1:10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为150r/min,研磨5小时,得到雨生红球藻浆液,10kw微波灭菌1min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至42℃;
再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,所述复合酶溶液中纤维素酶,果胶酶和碳酸钠的质量比为:3:2:0.4,经0.2μm滤膜过滤除菌;
最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5;发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液22%,复合酶2.5%,奶粉8%,白砂糖4%,葡萄糖2%;
(3)按106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种乳酸菌,搅拌15min;42℃发酵18小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,得到乳酸菌饮品。
各实验组步骤(3)中分别选用不同的乳酸菌菌株;同时设置对照组,步骤(3)中不接种任何菌株,其他实验条件均相同。分别取各实验组和对照组制备得到的乳酸菌饮品各100mL,5000rmp离心10min,取上清液,分别测定上清液中游离虾青素的含量,计算雨生红球藻中虾青素的提取效率,具体结果见表4。
表4乳酸菌发酵对于虾青素提取效率的影响
乳酸菌饮品 乳酸菌种类 虾青素提取效率
对照组 - 55.6%
实验组1 短乳杆菌 41.3%
实验组2 布氏乳杆菌 56.4%
实验组3 青春双歧杆菌 55.3%
实验组4 嗜热链球菌 58.9%
实验组5 植物乳杆菌 69.5%
实验组6 保加利亚乳杆菌 50.2%
实验组7 嗜酸乳杆菌 59.5%
实验组8 德氏乳酸杆菌 55.5%
实验组9 肠膜状明串珠菌 55.2%
从表4的结果可知,有些乳酸菌(青春双歧杆菌,德氏乳酸杆菌,肠膜状明串珠菌)的发酵对雨生红球藻的酶解过程没有任何影响;有些乳酸菌(短乳杆菌,保加利亚乳杆菌)的发酵甚至使其酶解效果更差了,虾青素的提取效率低于对照组;而有些乳酸菌(布氏乳杆菌,嗜热链球菌,嗜酸乳杆菌)虽然能提高虾青素的提取效率,但与对照组相比,提高幅度低于5%,效果不显著。只有选用植物乳杆菌的实验组5,其虾青素的提取效率比对照组提高了13.9%。上述结果也表明,植物乳杆菌在发酵过程中产生的代谢产物可以有效促进纤维素酶和果胶酶对雨生红球藻细胞壁的酶解作用,从而显著提高虾青素的提取效率,取得了意料不到的技术效果。
综上所述,本发明提供的乳酸菌饮品酸度适中,质地细腻,易储存、便携带,开罐即可饮用。所述饮品中虾青素含量高,抗氧化性强,且富含氨基酸、维生素、无机盐等营养成分。该饮品富含乳酸菌,还具有调节胃肠功能、提高免疫力等效用,适合各种人群食用,市场前景广阔。

Claims (10)

1.一种乳酸菌饮品,其特征在于,所述的乳酸菌饮品是通过将雨生红球藻粉与复合酶和乳酸菌混合发酵制备得到的。
2.如权利要求1所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述的乳酸菌饮品是通过如下步骤制备得到的:
(1)将雨生红球藻粉与纯净水按1: 10的质量比添加到球磨罐,调整球磨转速为150-200r/min,研磨3-5小时,得到雨生红球藻浆液;10kw微波灭菌1-2min;
(2)在发酵罐中先加入适量水,再加入奶粉、白砂糖、葡萄糖,搅拌溶解;利用高温蒸汽控制发酵罐内压力0.09~0.10MPa,使温度控制在115℃~121℃,灭菌25~45min,结束后冷却降温至40~42℃;再加入灭菌后的雨生红球藻浆液和复合酶溶液,最后定容,得到发酵培养基,调整发酵培养基pH为4.5-5.0;
(3)按105-106CFU/ml的比例向发酵培养基中接种乳酸菌,搅拌15min;发酵温度40~42℃,发酵时间18~24小时;
(4)发酵结束后,将发酵液迅速降温至2-10℃,均质后,进行无菌灌装、包装,即得到本发明所述乳酸菌饮品。
3.如权利要求2所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述步骤(2)中的发酵培养基中各原料的质量体积比(g/ml)分别为:雨生红球藻浆液20-25%,复合酶2-3%,奶粉5-10%,白砂糖2.5-5%,葡萄糖2%-5.5%。
4.如权利要求3所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述发酵培养基中各原料的质量体积比分别为雨生红球藻浆液22%,复合酶2.5%,奶粉8%,白砂糖4%,葡萄糖2%。
5.如权利要求2所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述步骤(2)中的复合酶包含纤维素酶、果胶酶和碳酸钠。
6.如权利要求5所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述复合酶中纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为: 3:2:0.2-0.4。
7.如权利要求6所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述复合酶中纤维素酶、果胶酶和碳酸钠的质量比为3:2:0.4。
8.如权利要求1-7任一所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
9.如权利要求8所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述植物乳杆菌的保藏号为CCTCCNO:M 2016137。
10.如权利要求2所述的乳酸菌饮品,其特征在于,所述步骤(3)中发酵温度为42℃。
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