CN107573316A

CN107573316A - 一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺

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Publication number: CN107573316A
Application number: CN201710795541.1A
Authority: CN
Inventors: 杨成雄; 何佳丽; 李立威; 毛学荣
Original assignee: Jingmen Pharmaceutical Industry Technology Research Institute
Current assignee: Jingmen Pharmaceutical Industry Technology Research Institute
Priority date: 2017-09-06
Filing date: 2017-09-06
Publication date: 2018-01-12

Abstract

一种染料木素的酰化衍生物制备工艺，其工艺步骤是：①取染料木素，溶于有机溶剂，滴加催化剂，并控制pH为2‑7，并将溶液温度控制在0‑5℃；②取氯乙酰氯，溶于有机溶剂，加入恒压滴液漏斗，滴入溶液①中，滴加后有固体产生。TLC监控反应进程，随后将温度升至10℃，继续反应，17小时后停止反应。③反应液静置1小时后，抽滤，滤饼于40℃真空干燥，得到一种染料木素的酰化衍生物。优点是该化合物在水中有较好的溶解性，可大大提高其在体内的生物利用度，对肝癌细胞HepG2有较好的抑制率，有望开发出一种水溶性良好的具有抗肿瘤作用的新药物。

Description

一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺

技术领域

本发明涉及医药产品技术领域，特别涉及一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺。

背景技术

染料木素（Genistein）又称金雀异黄素、染料木黄酮、5，7，4′-三羟基异黄酮，主要是从大豆、三叶草、葛根、槐花、槐角、染料木（金雀花）和广豆根等豆科植物中提取出来的活性成分，是一种天然的酪氨酸激酶和大豆代谢物，被称为植物雌激素。染料木素为异黄酮类物质中活性功能最高的一种，为单一成分，是一种非雌激素类化合物，具有雌激素及抗雌激素的双重调节作用，同时广泛应用于制药、保健品等领域。经研究认为，染料木素具有如下功效：

（一）具有雌性激素及抗雌激素性质；

（二）具有抗氧化作用；

（三）可以抑制酪氨酸蛋白激酶（PTK）的活性；

（四）可以抑制拓扑异购酶Ⅱ的活性；

（五）抑制细胞周期：使细胞停止于G2/M期；诱导肿瘤细胞凋亡：通过上调相关促凋亡基因，下调相应抗凋亡基因，来促进肿瘤细胞的凋亡进而预防限制肿瘤的发生，因而具有诱发细胞程序性死亡、提高抗癌药效、抑制血管生成等作用。

由于染料木素药理活性的综述表明，染料木素具有明显的降血脂、抗癌、抗肿瘤、防治骨质疏松、抗氧化、抗动脉粥样硬化、雌激素样作用等生理活性，所以广泛应用于制药、保健品等领域，近年来染料木素已逐渐成为国内外学者研究的热点。但由于染料木素具强疏水性,几乎不溶于水、稀盐酸(0. 1mol·L- 1)、十二烷基硫酸钠水溶液(十二烷基磺酸钠水溶液)、人工肠液pH:6. 8),在一般的有机溶媒中溶解度较差,而易溶于二甲基亚砜，在甲醇、乙醇中亦有一定的溶解度,结构中含有酚羟基而显弱酸性,溶于稀碱。由于染料木素的亲脂性、亲水性均较弱，故影响了其在体内的吸收，直接口服生物利用度低，存在较强的首过效应，难以达到临床治疗疾病的目的，限制了其临床应用。

因而，为了有效利用染料木素，对其进行化学结构修饰研究，进行前药分子设计、寻找新的活性化合物提供依据变得十分必要。

本发明中的一种染料木素酰化衍生物是通过氯乙酰氯与染料木素在催化剂的作用下，合成了一种新的酰化衍生物，在水中具有较好的溶解性，可提高其在体内的吸收率和生物利用度，且对肝癌细胞HepG2有较好的抑制率，有望开发出一种新的具有抗肿瘤作用的药物，目前还没有此染料木素类似的结构修饰物报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，该酰化物在水中有较好的溶解性，对肝癌细胞HepG2有较好的抑制率，有望开发出一种水溶性的具有抗肿瘤作用的新药物。。

一种染料木素的酰化衍生物，结构式如下：

制备工艺步骤包括：

①取染料木素，溶于有机溶剂，滴加有机碱催化剂调节pH至1-8，并将溶液温度控制在0-5℃，得混合溶液；

②取氯乙酰氯，溶于非质子类溶剂，加入恒压滴液漏斗，滴入中上述混合溶液中，滴加后有固体产生。薄层色谱监控，随后将温度升至-10-30℃，继续反应，15-19小时后，遂停止反应；

③反应液静置0.5-1.5小时后抽滤，滤饼于20-80℃真空干燥，得一种染料木素的酰化衍生物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物；反应式如下：

混合溶液pH最优调为4-7。

步骤①所述的加热温度控制范围控制优选控制在3-4℃；

步骤①所述的有机碱催化剂为吡啶、三乙胺，三乙烯二胺（DABCO），DBU，DBN，DMAP，N-甲基吗啉，四甲基乙二胺，TMG代替；或者由吡啶、三乙胺，三乙烯二胺（DABCO），DBU，DBN，DMAP，N-甲基吗啉，四甲基乙二胺，TMG中的任意二种或二种以上的混合物代替。

步骤②中非质子类溶剂优选二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、溶剂油、正己烷、四氢呋喃、正庚烷、甲苯中的任意二种或二种以上的混合物代替。

步骤②所述的反应温度最优控制在-1-10℃。

步骤②所述的真空干燥的最优温度为30-50℃；

一种染料木素衍生物采用MTT法试验，显示可抑制肝癌细胞HepG2的生长。

本发明的优点: 本发明的一种新的染料木素酰化物，在水中有较好的溶解性，对肝癌细胞HepG2有较好的抑制率，有望开发出一种水溶性的具有抗肿瘤作用的新药物。一种新的染料木素酰化物的制备生产工艺的对环境污染小，成本低廉，操作简单，便于大量生产应用，目前市场上未有类似的染料木素酰化物报道。

附图说明

图1为染料木素酰化物物HPLC图谱。

图2染料木素酰化物NMR图谱。

具体实施方式

下面以具体实施例子，进一步阐述本发明。这些实施例子仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

称取染料木素20g，投入500ml三口圆底烧瓶，300ml四氢呋喃做溶剂，滴加三乙胺调节pH至5-7左右。称取氯乙酰氯8.36g，溶于50ml四氢呋喃，用恒压滴液漏斗以每分钟6-10滴的速度滴入反应液。反应温度控制在0-5℃，薄层色谱监控。反应完成后，真空抽滤，并在40℃真空干燥。

实施例2

称取染料木素19g，投入500ml三口圆底烧瓶，200ml二氯甲烷做溶剂，滴加三乙胺调节pH至5-7左右。称取氯乙酰氯9.36g，溶于45ml二氯甲烷，用恒压滴液漏斗以每分钟6-10滴的速度滴入反应液。反应温度控制在0-5℃，薄层色谱监控。反应完成后，抽滤，并40℃真空干燥。

实施例3

称取染料木素21g，投入500ml三口圆底烧瓶，250ml二氯乙烷做溶剂，滴加三乙胺调节pH至5-7左右。称取氯乙酰氯9.5g，溶于40ml二氯乙烷，用恒压滴液漏斗以每分钟6-10滴的速度滴入反应液。反应温度控制在0-5℃，薄层色谱监控。反应完成后，抽滤，并40℃真空干燥。

对制得的新酰化物采用MTT法的抗肿瘤细胞毒活性测定实验：

a）对肝癌HepG2细胞抑制率

细胞个数为5000个/孔，药物作用时间为24h。

Claims

1.一种染料木素的酰化衍生物，其特征在于结构式如下：

。

2.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于制备工艺步骤包括：

②取氯乙酰氯，溶于非质子类溶剂，加入恒压滴液漏斗，滴入中上述混合溶液中，滴加后有固体产生，

薄层色谱监控，

随后将温度升至-10-30℃，继续反应，15-19小时后，遂停止反应；

③反应液静置0.5-1.5小时后抽滤，滤饼于20-80℃真空干燥，得一种染料木素的酰化衍生物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物。

3.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于混合溶液pH调为4-7。

4.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于，步骤①所述的加热温度控制范围控制优选控制在3-4℃。

5.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于，步骤①所述的有机碱催化剂为吡啶、三乙胺，三乙烯二胺，DBU，DBN，DMAP，N-甲基吗啉，四甲基乙二胺，TMG代替；或者由吡啶、三乙胺，三乙烯二胺，DBU，DBN，DMAP，N-甲基吗啉，四甲基乙二胺，TMG中的任意二种或二种以上的混合物代替。

6.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于，步骤②中非质子类溶剂优选二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、溶剂油、正己烷、四氢呋喃、正庚烷、甲苯中的任意二种或二种以上的混合物代替。

7.根据权利要求1所述一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于，步骤②所述的反应温度控制在-1-10℃。

8.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于，步骤②所述的真空干燥的温度是为30-50℃。

9.根据权利要求1所述的一种染料木素的酰化衍生物及其制备工艺，其特征在于一种染料木素衍生物采用MTT法试验，显示可抑制肝癌细胞HepG2的生长。