CN107556394A - 一种茯苓多糖的提取纯化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种茯苓多糖的提取纯化方法,包括以下步骤:a、茯苓多糖的提取;b、蛋白质的去除;c、茯苓多糖的脱色;d、透析除小分子杂质;e、纯化。本发明提出的提取纯化方法显著提高了茯苓多糖的提取率,同时,缩短了提取时间,得到的茯苓多糖纯度高,从而节约了茯苓资源的利用,节约了生产成本,适应大规模工业化生产的要求。
Description
技术领域
本发明涉及中药有效成分的提出方法技术领域,具体涉及一种茯苓多糖的提取纯化方法。
背景技术
茯苓 Poria cocos(Schw.)Wolf 为常用中药,自古以来药食两用。史载于《神农本草经》,被列为上品,为多孔菌科真菌 Poria cocos(Schw.)Wolf 的干燥菌核。性味甘淡,平, 归入心脾肺经。具有祛湿利水、健脾和胃、宁心安神的作用。临床用于治疗小便不利,水肿 胀满,痰饮咳逆,呕秽,泄泻,遗精,淋浊,惊悸,健忘等。茯苓的主要成份为茯苓多糖、三萜类 化合物、蛋白质、脂肪及无机盐等。其中茯苓多糖和三萜为其主要活性成分,国内外学者对 茯苓多糖、三萜等成份的药理作用及临床应用方面作了较多的研究,并且有了较大的进展。研究表明,茯苓多糖具有抗肿瘤作用,能增高老年患者体液免疫功能,降低白血病 放疗中产生的副作用。茯苓中酸性多糖含量占茯苓药材中 50%以上,为水不溶性成分,但临床应用中多 采用水煎煮提取的方法,药理学研究也主要针对的是茯苓中水溶性部分,对其碱溶性部分 研究甚少,从而造成了茯苓中有效成分的损失。结合现代化学与药理研究成果,对茯苓多糖 类成分加以开发利用,发掘新药,将对传统中药茯苓的开发与应用有现实意义。
发明内容
本发明的目的是提拱一种操作方法,效率高的茯苓多糖的提取纯化方法。
本发明是通过以下技术方案来实现的:
一种茯苓多糖的提取纯化方法,包括以下步骤:
a、茯苓多糖的提取:称取茯苓粉末,加入温度为50~80的水中浸泡,同时加入蛋白酶或植物复合酶,酶解1~3h,过滤,对滤液减压浓缩,将浓缩液加入95%乙醇溶液中沉淀,静止5~8h,离心处理,然后对沉淀物进行洗涤,真空干燥得到茯苓多糖粗品;
b、蛋白质的去除:将得到的茯苓多糖粗品加入相比例的水中形成的茯苓多糖水溶液,在茯苓多糖水溶液中加入中性蛋白酶,并加入氯仿,和戊醇,搅拌20~30min,然后提纯,除去含有蛋白质的氯仿和戊醇混合液;
c、茯苓多糖的脱色,将步骤b中过滤得到的溶液中加入弱碱性树脂、DEAE纤维素吸附色素,然后洗脱得到脱色后的茯苓多糖溶液;
d、透析除小分子杂质:将脱钯后的茯苓多糖溶液通过半透膜透析袋中,进行透析,透析在逆向流水中进行,PH保持在6.0~6.5,透析浓缩后用乙醇沉淀多糖;
e、纯化:通过大孔吸附树脂对步骤d中得到多糖溶液进行杂质的吸附,得到纯化的茯苓多糖。
进一步地,所述步骤a中植物复合酶包括素酶、中性蛋白酶、果胶酶。
进一步地,所述步骤a中滤液减压溶液缩为浸提液的十分之一。
进一步地,所述步骤b中氯仿的加入量为茯苓多糖水溶液的0.25~0.34,所述戊醇的加入量为茯苓多糖水溶液0.2~0.3。
本发明的有益效果是:本发明提出的提取纯化方法显著提高了茯苓多糖的提取率,同时,缩短了提取时间,得到的茯苓多糖纯度高,从而节约了茯苓资源的利用,节约了生产成本,适应大规模工业化生产的要求。
具体实施方法
下面结合实施例对本发明做进一步地说明。
实施例1
一种茯苓多糖的提取纯化方法,包括以下步骤:
a、茯苓多糖的提取:称取茯苓粉末,加入温度为60的水中浸泡,同时加入蛋白酶或植物复合酶,酶解2h,过滤,对滤液减压浓缩,将浓缩液加入95%乙醇溶液中沉淀,静止6h,离心处理,然后对沉淀物进行洗涤,真空干燥得到茯苓多糖粗品;
b、蛋白质的去除:将得到的茯苓多糖粗品加入相比例的水中形成的茯苓多糖水溶液,在茯苓多糖水溶液中加入中性蛋白酶,并加入氯仿,和戊醇,搅拌30min,然后提纯,除去含有蛋白质的氯仿和戊醇混合液;
c、茯苓多糖的脱色,将步骤b中过滤得到的溶液中加入弱碱性树脂、DEAE纤维素吸附色素,然后洗脱得到脱色后的茯苓多糖溶液;
d、透析除小分子杂质:将脱钯后的茯苓多糖溶液通过半透膜透析袋中,进行透析,透析在逆向流水中进行,PH保持在6.0,透析浓缩后用乙醇沉淀多糖;
e、纯化:通过大孔吸附树脂对步骤d中得到多糖溶液进行杂质的吸附,得到纯化的茯苓多糖。
在本实施例中,所述步骤a中植物复合酶包括素酶、中性蛋白酶、果胶酶。
在本实施例中,所述步骤a中滤液减压溶液缩为浸提液的十分之一。
在本实施例中,所述步骤b中氯仿的加入量为茯苓多糖水溶液的0.25,所述戊醇的加入量为茯苓多糖水溶液0.2。
实施例2
一种茯苓多糖的提取纯化方法,包括以下步骤:
a、茯苓多糖的提取:称取茯苓粉末,加入温度为50的水中浸泡,同时加入蛋白酶或植物复合酶,酶解1h,过滤,对滤液减压浓缩,将浓缩液加入95%乙醇溶液中沉淀,静止5h,离心处理,然后对沉淀物进行洗涤,真空干燥得到茯苓多糖粗品;
b、蛋白质的去除:将得到的茯苓多糖粗品加入相比例的水中形成的茯苓多糖水溶液,在茯苓多糖水溶液中加入中性蛋白酶,并加入氯仿,和戊醇,搅拌20min,然后提纯,除去含有蛋白质的氯仿和戊醇混合液;
c、茯苓多糖的脱色,将步骤b中过滤得到的溶液中加入弱碱性树脂、DEAE纤维素吸附色素,然后洗脱得到脱色后的茯苓多糖溶液;
d、透析除小分子杂质:将脱钯后的茯苓多糖溶液通过半透膜透析袋中,进行透析,透析在逆向流水中进行,PH保持在66.5,透析浓缩后用乙醇沉淀多糖;
e、纯化:通过大孔吸附树脂对步骤d中得到多糖溶液进行杂质的吸附,得到纯化的茯苓多糖。
在本实施例中,所述步骤a中植物复合酶包括素酶、中性蛋白酶、果胶酶。
在本实施例中,所述步骤a中滤液减压溶液缩为浸提液的十分之一。
在本实施例中,所述步骤b中氯仿的加入量为茯苓多糖水溶液的0.34,所述戊醇的加入量为茯苓多糖水溶液0.3。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种茯苓多糖的提取纯化方法,其特征在于:包括以下步骤:
a、茯苓多糖的提取:称取茯苓粉末,加入温度为50~80的水中浸泡,同时加入蛋白酶或植物复合酶,酶解1~3h,过滤,对滤液减压浓缩,将浓缩液加入95%乙醇溶液中沉淀,静止5~8h,离心处理,然后对沉淀物进行洗涤,真空干燥得到茯苓多糖粗品;
b、蛋白质的去除:将得到的茯苓多糖粗品加入相比例的水中形成的茯苓多糖水溶液,在茯苓多糖水溶液中加入中性蛋白酶,并加入氯仿,和戊醇,搅拌20~30min,然后提纯,除去含有蛋白质的氯仿和戊醇混合液;
c、茯苓多糖的脱色,将步骤b中过滤得到的溶液中加入弱碱性树脂、DEAE纤维素吸附色素,然后洗脱得到脱色后的茯苓多糖溶液;
d、透析除小分子杂质:将脱钯后的茯苓多糖溶液通过半透膜透析袋中,进行透析,透析在逆向流水中进行,PH保持在6.0~6.5,透析浓缩后用乙醇沉淀多糖;
e、纯化:通过大孔吸附树脂对步骤d中得到多糖溶液进行杂质的吸附,得到纯化的茯苓多糖。
2.根据权利要求1所述一种茯苓多糖的提取纯化方法,其特征在于:所述步骤a中植物复合酶包括素酶、中性蛋白酶、果胶酶。
3.根据权利要求1所述一种茯苓多糖的提取纯化方法,其特征在于:所述步骤a中滤液减压溶液缩为浸提液的十分之一。
4.根据权利要求1所述一种茯苓多糖的提取纯化方法,其特征在于:所述步骤b中氯仿的加入量为茯苓多糖水溶液的0.25~0.34,所述戊醇的加入量为茯苓多糖水溶液0.2~0.3。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109400749A (zh) * | 2018-08-31 | 2019-03-01 | 华南理工大学 | 一种羧甲基茯苓多糖cmp44及其制备方法与应用 |
CN112778436A (zh) * | 2019-11-08 | 2021-05-11 | 天津一瑞生物科技股份有限公司 | 茯苓中提取β-1,3-D-葡聚糖的方法 |
Citations (2)
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CN102715390A (zh) * | 2012-05-03 | 2012-10-10 | 湖北炎帝农业科技股份有限公司 | 一种护肝功能食品及其制备方法 |
CN103980376A (zh) * | 2014-05-20 | 2014-08-13 | 河南中烟工业有限责任公司 | 茯苓多糖、提取纯化方法及其作为烟草保润剂的应用 |
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