CN107502559A - 一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法 - Google Patents

一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法 Download PDF

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Abstract

发明涉及一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵；(2)培养基的配制：碳源0.5‑2％，玉米粉3‑8％，CaCl0.5‑2.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至4.5‑6.5；(3)液体发酵条件为pH4.5‑6.5、接种量10％、温度28‑32℃、摇床转速160r/min、培养42‑78h；(4)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中。本发明充分利用了淘米水的营养成分，其变废为宝,缩短了猪肚菌制菌周期和生产周期。

Description

一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法
技术领域
本发明涉及一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，属于食用菌液体发酵技术领域。
背景技术
猪肚菌[Panus gigianteus(Berk.)Corner]，又名大杯伞、大漏斗菌；俗名猪肚菇、笋菇(福建)、红银盘(山西)英文名Big Clitocybe。隶属于担子菌门、担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、革耳属。猪肚菌是一种较常见的野生食用菌，成群地生长在林中地上，被产区人民采集食用。因其风味独特，有似竹笋般的清脆，猪肚般的滑腻，因而被称之为"笋菇"和"猪肚菇"。猪肚菌的子实体具清脆、爽嫩、鲜美的口感，其蛋白质含量与金针菇等相仿。其菌盖中氨基酸含量为干物质的17％左右，其中8种人体必需氨基酸占氨基酸总量的45％，较一般食用菌要高，其亮氨酸、异亮氨酸含量居一般食用菌之冠；脂肪含量为11％左右；其菌柄转化糖含量高达48％，足知其营养之丰富和全面。此外，大杯伞子实体中还含有若干种对人体有益的微量元素，如钴、钡、铜、锌及磷、铁、钙等，其中多数元素对于调节人体营养平衡、促进代谢、提供机能等方面，有着其他元素不可替代的重要作用。
淘米水是一种洗过米后的水。因为洗掉了米表皮的营养，且混有糠麸和少量碎米粒，含有丰富的磷素、氮素和微量元素等菌株生长所需要的营养物质，施用淘米水浇灌对菌株生长发育十分有益。除此之外，在日常生活中，淘米水不但是可以扮演“多重角色”的天然去污剂，而且还具有很好的药用价值和很高的营养价值。现有技术有使用淘米水来浇灌花木，不但能促进植株生长健壮,还可促进花芽分化，使花木多开花，多结果，花香浓郁，还可以延长花期，并可防止黄化病的发生。用淘米水制成各种去污剂，用来刷洗碗碟、擦洗门窗、搪瓷器具、竹木家具、洗衣、猪肠、猪肚以及蔬菜等；还有把淘米水制成除锈剂、除腥剂等。目前尚未发现有用淘米水制成猪肚菌液体菌种的报道。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种以日常生活产生的淘米水为发酵原料,外加葡萄糖补充碳源，制备液体培养基。
本发明的技术方案是这样实现的：一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵。
(2)培养基的配制：碳源0.5-2％，玉米粉3-8％，CaCl0.5-2.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至4.5-6.5；
(3)液体发酵条件为pH4.5-6.5、接种量10％、温度28-32℃、摇床转速160r/min、培养42-78h；
(4)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中。
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(1)所述的淘米水是指生活中洗米后所得的洗米水。
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(1)所述的淘米水发酵时间，夏季十天左右，其他季节二十天左右；
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(2)所述碳源为果糖、麦芽糖、葡萄糖和蔗糖；
优选地，所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(2)所述碳源为葡萄糖；
优选地，所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(2)所述的葡萄糖底物应用比例为3％。
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(3)所述液体发酵时间优选30℃。
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(3)所述液体发酵终点时间选择为65h。
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(4)所述基质中的杂木屑和麦麸比例为2:3；
所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，步骤(4)所述的杂木屑和麦麸基质制作：用80-100℃热水淋湿杂木屑和麦麸，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在40-60℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气。发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
本发明有益效果：
1、本发明充分利用了生活废水，将其变废为宝，降低了环境污染，培养出的猪肚菌个头大，菌柄长；
2、使用葡萄糖作为碳源是因为葡萄糖比其他碳源获得的汉逊氏葡糖酸醋杆菌的产量及产率均要高；
3、加入杂木屑粉末可达到提前诱导纤维素酶、半纤维素酶的作用；
4、杂木屑和麦麸基质发酵2天，是为了获得发酵酶以有利于缩短猪肚菌的制种周期和生产周期。
关于本发明的有关对比研究说明：
试验1：不同碳源对BC产量和产率的影响
试验考察了以淘米水为主要原料，筛选了葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖四种不同碳源对汉逊氏葡糖酸醋杆菌(BC)合成的影响，结果显示，葡萄糖实验组BC的产量及产率均最高(见表1)，BC产率为9.84mg/g，分别是果糖和蔗糖的1.92和1.58倍；BC产量为491mg/L，分别是果糖和蔗糖的1.93和1.57倍。麦芽糖对BC合成的影响仅次于葡萄糖，高于果糖和麦芽糖。BC产量和产率高说明其生长及生产产物细菌纤维素多，将其接种至含本发明基质中能很快适应基质环境，萌发快，长速快，从而缩短制种时间。
表1.不同碳源对BC产量和产率的影响
试验2：菌龄对猪肚菌液体菌种在麦粒基质中长速的影响
本发明发酵时菌龄的选择与一般液体发酵时有所不同，液体培养条件筛选实验确定了菌龄即发酵时间为65h，一般制备食用菌液体培养目的是多糖等次生代谢产物时，使用菌龄处于稳定期的液体培养产物，因为此时的生物量最大；但本发明选择处于增殖生长期作为其发酵终点，即发酵至65h即进入使用，菌丝体活力最强。
表2菌龄对猪肚菌液体菌种在基质中长速的影响
由表2可以得出，发酵65h时的菌球数量和生物量为最大，但发酵至78h时的菌种接至麦粒基质中的长速虽然此时菌丝体数量少于稳定期，但菌丝活力强，接种至麦粒基质中，菌丝体萌发快，因而长速更快。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定，但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
实施例一
一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵时间为夏季十天左右，其他季节二十天左右。
(2)培养基的配制：果糖2％，玉米粉8％，CaCl2.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至6.5；
(3)液体发酵条件为pH6.5、接种量10％、温度32℃、摇床转速160r/min、培养78h；
(4)杂木屑和麦麸基质制作：用100℃热水淋湿杂木屑和麦麸，杂木屑和麦麸比例为2:3，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在60℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气。发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
(5)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中，培养后进入产业应用环节。
实施例二
一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵时间为夏季十天左右，其他季节二十天左右。
(2)培养基的配制：麦芽糖1％，玉米粉5％，CaCl1％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至5；
(3)液体发酵条件为pH5、接种量10％、温度30℃、摇床转速160r/min、培养65h；
(4)杂木屑和麦麸基质制作：用90℃热水淋湿杂木屑和麦麸，杂木屑和麦麸比例为2:3，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在50℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气。发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
(5)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中，培养后进入产业应用环节。
实施例三
一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵时间为夏季十天左右，其他季节二十天左右。
(2)培养基的配制：葡萄糖1.5％，玉米粉6％，CaCl1.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至6；
(3)液体发酵条件为pH6、接种量10％、温度30℃、摇床转速160r/min、培养54h；
(4)杂木屑和麦麸基质制作：用85℃热水淋湿杂木屑和麦麸，杂木屑和麦麸比例为2:3，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在45℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气。发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
(5)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中，培养后进入产业应用环节。
实施例四
一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵时间为夏季十天左右，其他季节二十天左右。
(2)培养基的配制：蔗糖0.5％，玉米粉3％，CaCl0.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至4.5；
(3)液体发酵条件为pH4.5、接种量10％、温度28℃、摇床转速160r/min、培养45h；
(4)杂木屑和麦麸基质制作：用80℃热水淋湿杂木屑和麦麸，杂木屑和麦麸比例为2:3，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在40℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气。发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
(5)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中，培养后进入产业应用环节。

Claims (10)

1.一种以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)淘米水的发酵：将新鲜的淘米水过滤，分装，62℃灭菌30min，灭菌后倒入一个空坛子里，将坛口封严，发酵；
(2)培养基的配制：碳源0.5-2％，玉米粉3-8％，CaCl0.5-2.5％以预处理的淘米水补足100％，调节pH至4.5-6.5；
(3)液体发酵条件为pH4.5-6.5、接种量10％、温度28-32℃、摇床转速160r/min、培养42-78h；
(4)将步骤(3)发酵所得猪肚菌液体菌种按10％的接种量接至含杂木屑和麦麸基质的种瓶中。
2.根据权利要求1所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中淘米水是指生活中洗米后所得的洗米水。
3.根据权利要求2所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的淘米水发酵时间是夏季十天，其他季节二十天。
4.根据权利要求1所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中的碳源为果糖、麦芽糖、葡萄糖和蔗糖。
5.根据权利要求4所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的碳源为葡萄糖。
6.根据权利要求5所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的葡萄糖应用比例为3％。
7.根据权利要求1所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中液体发酵温度优选30℃。
8.根据权利要求1所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中液体发酵终点时间选择为65h。
9.根据权利要求1所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，步骤(4)所述的杂木屑和麦麸基质中杂木屑和麦麸比例为2:3。
10.根据权利要求9所述的以淘米水为主要原料制备猪肚菌液体菌种的方法，其特征在于，所述的杂木屑和麦麸基质制作方法为：用80-100℃热水淋湿杂木屑和麦麸，搅拌均匀，用塑料薄膜盖住或放在密封的容器内，在40-60℃下放置2天，塑料薄膜或容器盖子搓几个小洞洞，以防胀气；发酵后的基质分装在250g种瓶中，装量为120g，121℃高压灭菌30min，温度降至常温后接种。
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