CN107501425A - 利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法 - Google Patents
利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法,粉碎玉竹,乙醇萃取,水提,酶解,醇沉得玉竹多糖;醇溶性成分与桑叶提取物在乙醇溶液反应,过滤,滤液减压浓缩,上大孔树脂层析,用40~60%乙醇溶液洗脱得到,减压浓缩至干得洗胰清糖素。本发明充分利用了玉竹资源,获得了玉竹多糖和洗胰清糖素功能性成分。通过添加桑叶提取物的方式,有效地降低了洗胰清糖素生产成本,缩短了生产工艺流程。
Description
技术领域
本发明具体涉及一种利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法,属于天然产物加工技术领域。
背景技术
玉竹是湖南野生三宝之一,是一种食药两用多年生草本植物。近年来随着玉竹野生资源的不断减少,而市场对于玉竹的需求量却在逐渐增加。
玉竹根茎的营养成分十分丰富,每100g玉竹鲜品中含蛋白质1.5g、粗纤维3.69、尼克酸0.3g、胡萝卜素5.4mg、维生素B2 0.4mg、维生素C 230mg,还含有多糖类、黄酮类、皂苷类、槲皮素、粘液质、碳水化合物等;而每100g玉竹干品中含有多种对人体有益的微量元素,其中含钙600mg、镁256mg、磷389mg、钠30mg、铁9.9mg、锰8.4mg、锌3.5mg、铜0.6mg。食用玉竹可起到养阴清热、生津止咳的作用,也可提高人体免疫力、平衡心脑血管系统,且有祛斑、养颜护肤、抗衰老等美容功效,同时也对风湿性关节炎、小便频繁、冠状动脉硬化性心脏病等病症有良好的食疗作用。玉竹提取类黄酮物质与桑叶提取物脱氧野尻霉素结合形成一种新物质——洗胰清糖素(cics),具有降血糖、血脂、血压等作用。
公开号为CN1557842的中国专利公开了一种玉竹多糖的提取方法、药物制剂制备方法及其用途。玉竹多糖的提取方法是将玉竹生药切成小块,加放4~16倍量水,煮沸提取1-4小时,提取液过滤,残渣另加入6~12倍的水,煮沸提取1~2小时,提取液过滤,将2次提取液合并,离心处理,得上清液减压浓缩,至相对密度1.08~1.25(45-60℃),放置至室温,加入4~8倍的95%的乙醇液,搅拌静置12-48小时,分离取沉淀物,加冷蒸馏水0.5~2倍洗涤,沉淀物加热蒸馏水溶解,加入0.5~4倍量的95%乙醇沉淀,静置12~48小时,分取沉淀物,以0.5~3倍量的95%乙醇洗涤三次,弃去醇洗液,沉淀物冷冻干燥一段时间后,再在温度为60℃下真空干燥至干,取出、粉碎,得白色粉末。玉竹多糖药物制剂的制备方法是将制得的玉竹多糖加入适当的辅料,可以制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口含片、咀嚼片、分散片类的固体剂型,也可以制备成口服液、合剂类的液体剂型。
公开号为CN101580551的中国专利公开了一种关玉竹多糖的提取方法,其特征是:超声提取:关玉竹生药粉碎筛分,取筛下粉末进行超声提取,水为提取溶剂,料液比1∶15~40,提取温度为20~80℃,超声频率为30~100kHz,提取时间0.5~3h,提取后过滤,滤渣进行重复提取;精制处理:将提取液减压浓缩,放至室温,加入无水乙醇液,摇匀,静置,过滤,分离沉淀物,沉淀物用丙酮洗涤,弃去洗涤液,沉淀物冷冻干燥、粉碎,得白色粉末。
公开号为CN101585885的中国专利公开了一种一种玉竹多糖的制备方法,包括下述步骤:1)将玉竹生药材切成小块,加入其重量的12~20倍水,浸泡20min后,超声浸提20min,提取液过筛后离心;所得残渣另加入残渣重量的8~16倍水,浸泡20min后,超声浸提20min,将两次提取液合并,再离心处理,得上清液减压浓缩至两次提取液合并体积的1/6;2)在上述浓缩液中缓慢加入无水乙醇并搅拌,当乙醇体积含量达到95%时,调整溶液pH为7,静置数小时后分取沉淀物,沉淀物用乙醇再洗涤三次,弃去醇洗液,真空干燥后得醇沉物;3)用5~10倍的水溶解醇沉物,在60℃水浴锅预热10min后,按100ml醇沉物水溶液中加入0.5~1.0克重量木瓜蛋白酶的比例,混匀含有木瓜蛋白酶醇沉物水溶液,保温酶解2h,然后80℃水浴下灭酶至少10min,冷却至室温后,再加入相当于醇沉物水溶液2~6%体积的4mol·L-1的三氯乙酸溶液,混匀后静置过夜,离心过滤,取其滤液。4)将脱蛋白后的滤液通过大孔吸附树脂柱,用进柱液体积3~5倍的纯净水清洗树脂,以去除未吸附溶液中的色素,当流出液变浅时,收集流出液,流速:1ml/min,Molish反应鉴定呈阴性后停止收集;5)对步骤4)所得脱色滤液浓缩后真空干燥、粉碎得玉竹多糖白色粉末。
公开号为CN102492051A的中国专利公开了一种玉竹的深加工及综合利用工艺,包括将玉竹依次进行粉碎、二次浸取、板框压滤、硅藻土精过滤、大孔吸附树脂吸附后将得到的液体在45-70℃,进料压力PC=0.1-0.5MPa的条件下,将玉竹多糖精液通过20-50nm的无机陶瓷膜超滤3-5小时。最后将浓缩玉竹多糖液通过刮板式二效蒸发机进一步蒸发浓缩2.5-3倍,此时玉竹多糖浓缩液中玉竹多糖的质量含量在5-9%。在进风温度为140-170℃,出风温度为80-90℃的条件下玉竹多糖浓缩液离心喷雾干燥,得到玉竹多糖白色粉末。
公开号为CN103169098A的中国专利公开了一种一种可溶性膳食纤维提取方法,包括以下步骤:A、采用二氧化碳爆破挤压膨化的方法处理膳食纤维原料,获得改性膳食纤维原料;B、用混合微生物菌液对步骤A获得的改性膳食纤维原料进行微生物发酵处理,获得发酵混合物;C、对所述发酵混合物进行抽滤,将抽滤获得的滤渣洗涤至中性后干燥即制得水溶性膳食纤维产品。
公开号为CN105361189A的中国专利公开了一种不可溶于水的植物性膳食纤维提取工艺,包括如下步骤:(1)将豆渣烘干粉碎得到豆渣粉;(2)向每克豆渣粉中加入蒸馏水5~7ml以及PH6.5~7.0的磷酸缓冲液5~7ml,得到豆渣桨;(3)向豆渣桨中加入中性蛋白酶进行第一次酶解,中性蛋白酶的加入量为步骤(1)所述豆渣粉:中性蛋白酶=1g:0.7~1mg,得到第一酶解豆渣桨;(4)对第一酶解豆渣桨进行第一次灭酶处理,得到第一灭酶豆渣桨;(5)向第一灭酶豆渣桨中加入耐热α-淀粉酶进行第二次酶解,耐热α-淀粉酶的加入量为步骤(1)所述豆渣粉:耐热α-淀粉酶=1g:10~20μl,得到第二酶解豆渣桨;(6)对第二酶解豆渣桨进行第二次灭酶处理,得到第二灭酶豆渣桨;(7)对第二灭酶豆渣桨进行离心分离,过滤后取滤渣,将滤渣洗涤并烘干后,得到所述豆渣中不可溶性膳食纤维。
发明内容
为了弥补现有技术的缺陷,本发明提供一种利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法,该法利用大量的玉竹下脚料,生产出了优质的玉竹多糖和洗胰清糖素,玉竹多糖和洗胰清糖素具有价格低更易于保健品的添加,填补了市场上该类产品的空白,且能满足并丰富产品和人群的需求。
本发明提供一种利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法,其具体技术方案如下:
(1)称量粉碎后玉竹颗粒,加入乙醇进行常温萃取4~15h,分离收集乙醇部分,进行在40~55℃下减压浓缩回收乙醇,得醇溶性成分,其中乙醇的体积L与玉竹颗粒的重量kg比为2~4:1。
(2)再向乙醇萃取后的残渣中加入水,在60~85℃下提取4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤液和滤渣Ⅰ,滤液进行在60~75℃下减压浓缩至原有体积的1/10~1/20得浓缩液,其中水的体积L与玉竹颗粒的重量kg比为4~8:1。
(3)滤渣Ⅰ再加入三倍至五倍重量的水进行冲洗,对其在35~45℃下进行烘干得膳食纤维。
(4)向浓缩液中加入中性蛋白酶,使酶浓度达到5U以上,在20~30℃下进行酶解60~90min,再加入乙醇,搅拌均匀后静置4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅱ,加入水进行溶解后,得溶解液,其中乙醇的体积L与浓缩液的体积L比为5~10:1,水的体积L与滤渣Ⅱ的重量kg比为0.5~1.5:1。
(5)向溶解液再加入乙醇,搅拌均匀后静置4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅲ,在35~45℃下进行烘干得玉竹多糖,其中乙醇的体积L与溶解液的体积L比为5~8:1。
(6)向醇溶性成分中加入桑叶提取物(其中含有脱氧野尻霉素),再加入一定量的20~50%乙醇溶液进行搅拌均匀在35~45℃下进行保温4~20h,得反应液,其中醇溶性成分与桑叶提取物的重量kg比2~5:1。
(7)反应液经陶瓷膜过滤一次,所得滤渣再加入20~50%乙醇溶液进行搅拌提取30~90min,合并两次滤液,在40~55℃下减压浓缩至原有体积的1/5~1/10,上大孔树脂柱层析,用三倍体积至六倍体积的40~60%乙醇溶液洗脱得到洗脱液,在40~55℃下减压浓缩至干得洗胰清糖素。
在一个具体实施方案中,步骤(4)中所述中性蛋白酶活性达到1000U/g以上。
在一个具体实施方案中,步骤(6)中所述乙醇溶液的体积L与醇溶性成分的重量kg比为3~6:1,其中50%乙醇溶液的配制为50mL无水乙醇与50mL水混合而成。
在一个具体实施方案中,步骤(7)中所述乙醇溶液的体积L与与醇溶性成分的重量kg比为1~3:1。
在一个具体实施方案中,步骤(7)中所述大孔树脂柱可以选用AB-8、S-9、HPD-300等树脂型号。
技术效果
1、本发明充分利用了玉竹资源,获得了玉竹多糖和洗胰清糖素功能性成分。
2、通过添加桑叶提取物的方式,有效地降低了洗胰清糖素生产成本,缩短了生产工艺流程。
具体实施方式
实施例1
各地收集玉竹下脚料,去除腐烂和有虫部分根茎,用水进行冲洗,70~85℃下烘干,粉碎至5目以下即可。称量粉碎后玉竹颗粒100kg,加入400L乙醇进行常温萃取12h,分离收集乙醇部分,进行在45℃下减压浓缩回收乙醇,得醇溶性成分6.86kg。再向乙醇萃取后的残渣中加入600L水,在75℃下提取7h,陶瓷膜过滤一次得滤液和滤渣Ⅰ,滤液进行在75℃下减压浓缩至50L得浓缩液。滤渣Ⅰ再加入五倍重量的水进行冲洗,对其在40℃下进行烘干得膳食纤维。向浓缩液中加入中性蛋白酶,使酶浓度达到10U以上,在25℃下进行酶解90min,再加入400L乙醇,搅拌均匀后静置6h,陶瓷膜过滤一次得3.56kg滤渣Ⅱ,加入5L水进行溶解后,得溶解液。向溶解液再加入45L乙醇,搅拌均匀后静置6h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅲ,在45℃下进行烘干得2.47kg玉竹多糖。向醇溶性成分中加入2.5kg桑叶提取物(其中含有0.5%脱氧野尻霉素),再加入25L的30%乙醇溶液进行搅拌均匀在40℃下进行保温15h,得反应液。反应液经过滤,所得滤渣再加入230%乙醇溶液10L进行搅拌提取60min,合并两次滤液32L,在45℃下减压浓缩至4L,上AB-8大孔树脂柱层析,用20L的50%乙醇溶液洗脱得到洗脱液,在45℃下减压浓缩至干得洗胰清糖素0.48kg。
实施例2
各地收集玉竹下脚料,去除腐烂和有虫部分根茎,用水进行冲洗,70~85℃下烘干,粉碎至5目以下即可。称量粉碎后玉竹颗粒200kg,加入700L乙醇进行常温萃取15h,分离收集乙醇部分,进行在45℃下减压浓缩回收乙醇,得醇溶性成分14.57kg。再向乙醇萃取后的残渣中加入1100L水,在70℃下提取8h,陶瓷膜过滤一次得滤液和滤渣Ⅰ,滤液进行在75℃下减压浓缩至80L得浓缩液1。滤渣Ⅰ再加入五倍重量的水进行冲洗,对其在35~45℃下进行烘干得膳食纤维。向浓缩液中加入中性蛋白酶,使酶浓度达到15U以上,在30℃下进行酶解90min,再加入700L乙醇,搅拌均匀后静置8h,陶瓷膜过滤一次得8.48kg滤渣Ⅱ,加入10L水进行溶解后,得溶解液。向溶解液再加入80L乙醇,搅拌均匀后静置4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅲ,在35~45℃下进行烘干得2.47kg玉竹多糖。向醇溶性成分中加入6kg桑叶提取物(其中含有0.5%脱氧野尻霉素),再加入60L的35%乙醇溶液进行搅拌均匀在35℃下进行保温20h,得反应液。反应液经过滤,所得滤渣再加入35%乙醇溶液25L进行搅拌提取80min,合并两次滤液80L,在45℃下减压浓缩至9L,上S-9大孔树脂柱层析,用50L的50%乙醇溶液洗脱得到洗脱液,在45℃下减压浓缩至干得洗胰清糖素1.04kg。
Claims (3)
1.利用玉竹下脚料进行玉竹多糖和洗胰清糖素的制备方法,其具体技术方案如下:
(1)称量粉碎后玉竹颗粒,加入乙醇进行常温萃取4~15h,分离收集乙醇部分,进行在40~55℃下减压浓缩回收乙醇,得醇溶性成分,其中乙醇的体积L与玉竹颗粒的重量kg比为2~4:1。
(2)再向乙醇萃取后的残渣中加入水,在60~85℃下提取4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤液和滤渣Ⅰ,滤液进行在60~75℃下减压浓缩至原有体积的1/10~1/20得浓缩液,其中水的体积L与玉竹颗粒的重量kg比为4~8:1。
(3)滤渣Ⅰ再加入三倍至五倍重量的水进行冲洗,对其在35~45℃下进行烘干得膳食纤维。
(4)向浓缩液中加入中性蛋白酶,使酶浓度达到5U以上,在20~30℃下进行酶解60~90min,再加入乙醇,搅拌均匀后静置4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅱ,加入水进行溶解后,得溶解液,其中乙醇的体积L与浓缩液的体积L比为5~10:1,水的体积L与滤渣Ⅱ的重量kg比为0.5~1.5:1。
(5)向溶解液再加入乙醇,搅拌均匀后静置4~8h,陶瓷膜过滤一次得滤渣Ⅲ,在35~45℃下进行烘干得玉竹多糖,其中乙醇的体积L与溶解液的体积L比为5~8:1。
(6)向醇溶性成分中加入桑叶提取物(其中含有脱氧野尻霉素),再加入一定量的20~50%乙醇溶液进行搅拌均匀在35~45℃下进行保温4~20h,得反应液,其中醇溶性成分与桑叶提取物的重量kg比2~5:1。
(7)反应液经过滤,所得滤渣再加入20~50%乙醇溶液进行搅拌提取30~90min,合并两次滤液,在40~55℃下减压浓缩至原有体积的1/5~1/10,上大孔树脂层析,用三倍体积至六倍体积的40~60%乙醇溶液洗脱得到洗脱液,在40~55℃下减压浓缩至干得洗胰清糖素。
2.根据权利要求1的方法,其中步骤(6)中所述乙醇溶液的体积L与醇溶性成分的重量kg比为3~6:1。
3.根据权利要求1的方法,其中步骤(7)中所述乙醇溶液的体积L与与醇溶性成分的重量kg比为1~3:1。
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