CN107468746A - 一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法。该方法包括如下步骤:(1)将朱缨花的叶子清洗,干燥,磨碎;(2)将磨碎的朱缨花的叶子与溶剂按料液比1:10~30混合后恒温水浴提取或超声恒温水浴提取,得到多酚和黄酮;所述的溶剂为浓度为质量百分比30~100%的乙醇溶液;所述的恒温水浴提取或超声恒温水浴提取的温度为60~100℃;所述的恒温水浴提取的时间为30~150min;所述的超声的功率100~300W;所述的超声的时间20~80min;该方法还包括将得到的多酚和黄酮通过吸附树脂进行分离纯化,以提高其抗氧化能力。本发明的提取方法重复性好,提取时间短,提取效率高,提取产物可应用于食品和药品中。
Description
技术领域
本发明属于天然产物提取技术领域,特别涉及一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法。
背景技术
朱缨花(学名:Calliandra haematocephala Hassk.):豆科、朱缨花属落叶灌木或小乔木,花色美丽,在广东广泛种植,是无毒副作用的可食花卉。朱缨花气味甘、平、无毒,《本经》认为其主安五脏;《本草纲目》认为其可和血、消肿和止痛;《本草汇言》认为其皮甘温平补,有开达五神,消除五志之妙应。近年来的研究表明,朱缨花主要含有多酚和黄酮类物质,如金合欢酸内酯(acacicacidlactone),剑叶莎酸内酯(machaerinicacidlactone),7,3ˊ,4ˊ-三羟基黄酮(7,3ˊ,4ˊ-trihydroxyflavone)等,具有抗生育、抗过敏、抗肿瘤、促进消化道蠕动,促进消化吸收,提高食欲等作用。各种天然产物中,多酚和黄酮类化合物因其显著的药理作用,如抗氧化、抗突变、抗菌、抗炎、抗血管生成、抗过敏、酶活性调节和抗癌活性作用,已经引起了广泛的关注。
目前,朱缨花主要用于观赏,研究表明,朱缨花具有较高的多酚、黄酮含量和较强的自由基清除活性,因此有必要研究出提取其中多酚和黄酮类物质的最佳工艺,为朱缨花提取物在食品和药品中的应用提供可靠的方法。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足,提供一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法。
本发明的另一目的在于提供利用所述方法提取得到的多酚和黄酮提取物。
本发明的又一目的在于提供所述多酚和黄酮提取物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,包括如下步骤:
(1)将朱缨花的叶子清洗,干燥,磨碎;
(2)将磨碎的朱缨花的叶子与溶剂按料液比1:10~30(单位为g/mL)混合后恒温水浴提取或超声恒温水浴提取,得到多酚和黄酮。
步骤(1)中所述的朱缨花的叶子优选为生长良好、干净的朱缨花嫩叶,所述的叶子为新鲜叶子,采摘后放置时间不超过90分钟。
步骤(2)中所述的溶剂为乙醇;优选为浓度为质量百分比30~100%的乙醇溶液;更优选为浓度为质量百分比70%的乙醇溶液。
步骤(2)中所述的磨碎的朱缨花的叶子与溶剂的料液比优选为1:25(g/ml)。
步骤(2)中所述的恒温水浴提取或超声恒温水浴提取的温度为60~100℃,优选为80℃。
步骤(2)中所述的恒温水浴提取的时间为30~150min;优选为90~120min;更优选为120min。
步骤(2)中所述的超声的功率100~300W;优选为250~300W;更优选为250W。
步骤(2)中所述的超声的时间20~80min;优选为50min。
所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,还包括将步骤(2)中得到的多酚和黄酮进行离心、分离纯化、浓缩和冻干的步骤。
所述的离心优选为4 000r/min离心10min。
所述的分离纯化为采用吸附树脂进行分离纯化;优选为采用经过预处理的吸附树脂进行分离纯化。
所述的吸附树脂为大孔吸附树脂X-5、AB-8、NKA、D4020或聚酰胺树脂;优选为大孔吸附树脂X-5。
所述的预处理优选为通过如下方法实现:将吸附树脂依次用丙酮和乙醇密封浸泡,然后用NaOH溶液浸泡,用水洗至中性,再用盐酸溶液浸泡,用水洗至中性,得到预处理的吸附树脂。
所述的乙醇的浓度优选为体积百分比100%。
所述的用乙醇浸泡的时间优选为48h。
所述的水优选为蒸馏水。
所述的HCl溶液的浓度优选为1mol/L。
所述的用HCl溶液浸泡的时间优选为8h。
所述的NaOH溶液的浓度优选为1mol/L。
所述的用NaOH溶液浸泡的时间优选为8h。
所述的浓缩为采用真空旋转蒸发的方式进行浓缩。
一种朱缨花多酚和黄酮提取物,通过上述任一项所述的方法提取得到。
所述的朱缨花多酚和黄酮提取物在制备药物中的应用。
所述的药物优选为抗氧化药物、抗突变药物、抗菌药物、抗炎药物、抗血管生成药物、抗过敏药物、酶活性调节药物或抗癌药物。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
1、本发明提供了一种从朱缨花中提取多酚和黄酮类化合物的方法,该方法成本低,提取时间短,提取效率高,原料来源广泛,具有实用价值,可应用于保健品、化妆品、食品和药品中。
2、本发明通过含量及抗氧化能力和还原能力测定结果表明,用超声提取法提取得到的多酚和黄酮含量及其抗氧化能力和还原力显著高于未经超声处理工艺得到的结果,该方法工艺稳定,重复性好,操作简单。
附图说明
图1是不同提取浓度对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图2是不同提取时间对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图3是不同提取温度对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图4是不同料液比对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图5是不同超声功率对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图6是不同超声时间对多酚和黄酮提取含量的影响图。
图7是不同吸附树脂对多酚黄酮的静态吸附量结果图。
图8是不同吸附树脂对多酚黄酮的静态解吸率统计图。
图9是相同剂量下超声处理和未经超声处理工艺提取物的抗氧化能力比较图。
图10是相同剂量下超声处理和未经超声处理工艺提取物的还原力比较图。
图11是纯化浓缩后多酚黄酮含量及抗氧化能力比较图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
1、本发明中多酚、黄酮含量的测定以及抗氧化能力和还原力的测定方法如下:
(1)、多酚含量测定
取1mL提取液(朱缨花嫩叶的提取液)、l mL 10%(w/w)福林-酚试剂、2mL 6%(w/w)Na2C03,混匀,25℃反应l h,测定在765nm波长处吸光度。
标准曲线制作:取10mg没食子酸,定容至100mL,配制成0.1mg/mL溶液,再分别取0、0.8、1.6、2.0、2.8、3.6、4.4mL定容至10mL,配制成浓度为0、8、16、20、28、36、44μg/mL标准溶液。分别取1mL标准溶液、l mL 10%(w/w)福林-酚试剂、2mL(w/w)Na2C03,混匀,25℃反应lh,测定在765nm波长处吸光度。以浓度为X轴,吸光度为Y轴,做标准曲线,并计算回归方程。
(2)、黄酮含量测定
方法:1ml提取液加入4ml蒸馏水,放置5min后加入0.3ml 5%(w/w)的亚硝酸钠和0.3ml 10%(w/w)的AlCl3,放置6min,再加入1mol/L氢氧化钠溶液2ml,用水定容至10ml,充分混合,510nm处测定吸光度。
标准曲线的制备:精密称取干燥至恒重的芦丁对照品20.0mg,置于10ml量瓶中,加甲醇溶解定容,摇匀,得浓度为2mg/ml的芦丁标准溶液。精确移取芦丁的标准品溶液0,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50ml分别置于10ml量瓶中,用甲醇补足1ml。得0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml浓度的芦丁的标准品溶液,分别加入蒸馏水4ml,混合放置5min后,加5%(w/w)亚硝酸钠溶液0.3ml和10%(w/w)氯化铝溶液0.3ml,摇匀,放置6min,加1mol/L氢氧化钠溶液2ml后,用水定容至10ml,充分混合。510nm处测定吸光度。
(3)、抗氧化能力测定
取2.5ml 120μmol/L DPPH·(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)溶液,加入10μl(0.2mg,fw)(fw表示鲜重)的待测提取试样中(A样),以相同剂量的双蒸水代替试样加入同体积的DPPH·溶液中作为最大光吸收值(A0);用2.5ml 50%乙醇调零。室温放置20min后,在520nm波长处测定DPPH·混合液的吸光值,每个样品设3个平行,用下列公式计算DPPH·自由基清除百分率(%):
DPPH·清除率(%)=(A0-A样)×100%/A0
(4)、还原力测定
标准曲线:准确称取0.17613g Vc(维生素C)用蒸馏水定容至100ml配制成10mmol/L Vc标准溶液。取上述溶液即为10mmol/L Vc标准溶液。分别取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml定容至10ml配制0mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L、2.5mmol/L标准溶液,在593nm处测定吸光值,绘制标准曲线。
样液测定:取10μl(0.2mg,fw)提取液,加入3ml TPTZ(三吡啶基三嗪)工作液(由0.3mol/L、pH3.6的醋酸盐缓冲液25ml,10mmol/L TPTZ溶液2.5ml,20mmol/L FeCl3溶液2.5ml组成),混匀后37℃反应10min,在593nm下测定吸光度,每个样品设3个平行。
2、数据分析:采用SPSS16.0软件进行方差分析,采用Duncan进行多重比较。
实施例1:
1、一种从朱缨花中提取多酚和黄酮类化合物的方法,具体如下:
1.1预处理:采摘生长良好,干净的朱缨花嫩叶(来源于广东广州),90min送到实验室,清洗表面附着物,干燥,称重。
1.2、提取液制备:将新鲜叶子磨碎,按料液比1:10~30加入提取溶剂(浓度为质量百分比30~100%的乙醇)定容,置于三角瓶中,密封,根据不同处理条件恒温水浴(温度为60~100℃)或超声(超声功率:100~300W,超声时间:20~80min)恒温水浴处理,取出冷却后4000r/min离心10min,取上清液备用。
1.3、分离纯化和干燥:将上述得到的提取液经过不同吸附树脂(大孔吸附树脂X-5、AB-8、NKA、D4020或聚酰胺树脂)进行提纯,然后真空旋转蒸发浓缩、冷冻干燥,得到朱缨花多酚和黄酮提取物。
2、选取乙醇浓度、提取时间、提取温度、提取料液比、超声提取功率和、超声提取时间为影响因素,进行单因素试验:
2.1乙醇浓度对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用不同浓度的乙醇:浓度为质量百分比30%、50%、70%、90%、100%,固定提取时间为120min,提取温度为60℃(恒温水浴),提取料液比为1:20(g/ml),研究不同乙醇浓度对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图1所示,在时间120min、温度60℃、料液比1:20情况下,由图1可以看出乙醇浓度低于质量百分比70%时,随着乙醇浓度增加,叶子多酚提取量也逐渐提高;乙醇浓度高于70%时,多酚提取量随着乙醇浓度的增加而下降。乙醇浓度过低,多酚提取量少,可能是因为多酚类物质在植物体内通常与蛋白质、多糖等以氢键和疏水键形成稳定的分子复合物,而水断裂氢键的作用较弱,提取液中水的比例过高时,不足以破坏样品中多酚类物质与蛋白、多糖或其他物质的连接,多酚提取量少;乙醇浓度过高,多酚提取量少,可能是因为溶出较多醇溶性杂质、色素、亲脂性较强的成分,这些成分与多酚类化合物竞争同一乙醇水分子,因此最佳乙醇浓度为质量百分比70%。
2.2提取时间对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用不同提取时间:30min、60min、90min、120min、150min,乙醇浓度为2.1中最佳的乙醇浓度(质量百分比70%),提取温度为60℃(恒温水浴),提取料液比为1:20(g/ml),研究不同提取时间对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图2所示,从图中可以看出,当提取时间达到120min,多酚和黄酮提取量最高,继续延长提取时间,多酚和黄酮提取量开始下降。这是因为随着时间加长,可以使多酚和黄酮充分溶解于溶剂中,但时间过长会因为温度的影响发生降解、缩合、氧化等化学反应。此外,时间越长,耗能越大。故选取最佳提取时间为120min。
2.3提取温度对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用不同提取温度(恒温水浴):60、70、80、90、100℃,乙醇浓度为2.1中最佳的乙醇浓度(质量百分比70%),提取时间为2.2中最佳的提取时间(120min),提取料液比1:20(g/ml),研究不同提取温度对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图3所示,从图中可以看出,在60~100℃的温度范围内,多酚和黄酮提取量随温度的升高而呈增加趋势。在20~60℃之间多酚和黄酮提取量上升速率最慢,60~80℃之间,多酚和黄酮提取量的升高最明显,80~100℃之间,多酚和黄酮提取量的增量有所下降。可能是由于随着温度的升高,一方面有利于未游离出来的多酚和黄酮的浸出,另一方面,也促进已经提取出来的多酚和黄酮的氧化与降解。故综合考虑选择最佳提取温度为80℃。
2.4料液比对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用不同料液比:1:10、1:15、1:20、1:25、1:30(g/ml),乙醇浓度为2.1中最佳的乙醇浓度(质量百分比70%),提取时间为2.2中最佳的提取时间(120min),提取温度为2.3中最佳的提取温度(80℃恒温水浴),研究不同料液比对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图4所示,从图中可以看出,随着料液比的增大,多酚和黄酮提取量逐渐增加,当料液比到达1:15之前,料液比增大,多酚和黄酮提取量增加缓慢。继续增加料液比,多酚的提取量增加迅速,在1:25(g/ml)时达到最高。但如果料液比过高,不利于回收,而且造成浪费。因此,从提取效果、经济角度方面考虑,料液比选择1:25(g/ml)较为合适。
2.5超声功率对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用乙醇浓度为2.1中最佳的乙醇浓度(质量百分比70%),提取温度为2.3中最佳的提取温度(80℃恒温水浴),料液比为2.4中最佳的料液比(料液比1:25),分别用功率为100,150,200,250,300W的超声波处理30min,研究不同超声功率对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图5所示,从图中可以看出,超声功率低时,提高功率能极显著提高多酚和黄酮得率,当超声功率达250W后,多酚和黄酮含量不再上升,反而下降,这是因为提高超声功率能增强超声波的空化作用,从而促进多酚和黄酮的浸出,但功率过大,反而会破坏多酚和黄酮的结构可增加其他物质的溶出而抑制多酚和黄酮的得率。
2.6超声时间对叶子多酚、黄酮得率的影响
采用乙醇浓度为2.1中最佳的乙醇浓度(质量百分比70%),提取温度为4.4中最佳的提取温度(80℃恒温水浴),料液比为2.4中最佳的料液比(料液比1:25),2.5的最佳超声功率(250W),分别超声20,35,50,65,80min,研究超声对植物叶子多酚、黄酮得率的影响。
结果如图6所示,从图中可以看出,在50min内,随着时间的延长,多酚和黄酮的得率显著升高,但当提取时间超过50min后,多酚和黄酮的得率不再提高。使用超声提取50min后,多酚和黄酮的得率与未使用超声时提取120min的得率相当,因此,使用超声能明显缩短提取时间。
3、正交实验优化提取条件
在单因素的基础上,根据四种单因素对朱缨花植物叶子多酚和黄酮得率的影响不同,选取各因素的三个水平进行L9(34)正交试验。
在单因素试验的基础上,选取最理想的乙醇浓度、提取时间、提取温度、提取料液比对朱缨花多酚、黄酮得率的影响,4个因素3水平L9(34)的正交试验,结果如表1所示。
表1 L9(34)正交试验设计因素及水平
影响因素的估测边际均值:将提取时间作为误差项,得出正交试验结果如表2所示,通过Spss软件进行统计分析,得出多酚,黄酮各影响因素的估测边际均值见表3和表4。
表2 L9(34)正交试验结果(多酚)
表3多酚各因素估测边际均值
3-1.A乙醇浓度
因变量(Dependent Variable):多酚
3-2.B温度
因变量(Dependent Variable):多酚
3-3.C料液比
因变量(Dependent Variable):多酚
从表3结果直观分析,各因素水平对结果影响的强弱顺序是:A2>A1>A3,B2>B3>B1,C2>C3>C1,其极差(R)RB>RC>RA,因为极差R越大,其对应因素对朱缨花多酚提取量影响越大。所以各因素的主次顺序为B>C>A即提取温度、料液比、乙醇浓度。因此确定最佳工艺为A2B2C2,即乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃,提取时间为120min,提取料液比为1:25(g/ml)。
表4黄酮各因素估测边际均值
4-1.A乙醇浓度
因变量(Dependent Variable):黄酮
4-2.B温度
因变量(Dependent Variable):黄酮
4-3.C料液比
因变量(Dependent Variable):黄酮
同理根据表4得本试验影响因子的先后顺序为提取温度>提取料液比>乙醇浓度,可得出黄酮的最佳提取条件是:乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃,提取时间为120min,提取料液比为1:25(g/ml)。
4、不同吸附树脂对多酚黄酮的静态吸附及解吸率
选取大孔吸附树脂X-5、AB-8、NKA、D4020和聚酰胺树脂(均购于天津市海光化工有限公司)进行多酚黄酮的静态吸附及解吸率实验,得到最佳浓缩大孔树脂,具体过程为:
选取不同的树脂,先依次用丙酮、100%乙醇在室温下密封浸泡48h,然后用1mol/LNaOH溶液浸泡8h,用蒸馏水洗至中性,再用1mol/L盐酸浸泡8h,用蒸馏水洗至中性,且洗出液加蒸馏水不显浑浊为止,上样,用浓度为质量百分比75%的乙醇进行解吸实验,测定解吸后的多酚黄酮平均含量,得到最佳解吸树脂。
不同吸附树脂对多酚黄酮的静态吸附及解吸率如图7和8所示,其中:5种树脂对多酚黄酮的静态吸附如图7所示,聚酰胺树脂吸附量最大,且很快就能达到饱和吸附。其次是X-5树脂,起始时吸附量随吸附时间的延长而快速增加,在吸附6小时后吸附速度趋于缓慢。用吸附树脂分离多酚黄酮,不仅要求对多酚黄酮的吸附量大,还要求被吸附的多酚黄酮容易被洗脱下来,这样才能保证产物的得率。5种树脂对多酚黄酮的解吸率如图8所示,聚酰胺树脂虽然其饱和吸附量比较大,但是解吸率非常低,吸附的多酚不容易解吸下来,会降低产物的得率,同时树脂的再生处理困难,循环利用效率低,会增加生产成本。X-5树脂饱和吸附量较大,且其解吸率高达90%以上,比较适合多酚黄酮的分离。因此,X-5树脂是分离朱缨花多酚黄酮的最佳材料,对多酚黄酮的吸附量大,解吸率最高,故采用X-5树脂作为多酚黄酮分离纯化的柱填充材料。
实施例2不同提取工艺多酚、黄酮抗氧化能力的比较
将未经超声处理最佳提取条件(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),提取时间为120min,提取料液比为1:25)和超声处理最佳提取条件(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),超声提取时间为50min,提取料液比为1:25),得到的提取物用DPPH·清除率表示的抗氧化能力测定,结果如图9所示,表明超声处理提取得到的提取物在相同剂量的条件下,其抗氧化能力明显高于常规处理工艺提取得到的抗氧化能力,表明用超声提取得到的多酚和黄酮抗氧化活性更显著。
实施例3不同提取工艺多酚、黄酮还原力的比较
将未经超声处理最佳提取条件(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),提取时间为120min,提取料液比为1:25),和超声处理最佳提取条件(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),超声提取时间为50min,提取料液比为1:25),得到的提取物测定其还原能力,结果如图10所示,表明在相同剂量的条件下,超声处理工艺提取得到的提取物还原能力明显高于常规处理工艺提取得到的还原能力,同样表明用超声提取得到的多酚和黄酮还原力活性更显著。
实施例4纯化浓缩后多酚黄酮含量主抗氧化能力比较
(1)将实施例1中得到的提取液经过超声处理(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),超声提取时间为50min,提取料液比为1:25)的粗提物冻干,得到粗提物冻干粉。
(2)将得到的提取液先经过超声处理(乙醇浓度为质量百分比70%,提取温度为80℃(恒温水浴),超声提取时间为50min,提取料液比为1:25)、然后经大孔吸附树脂X-5柱纯化,具体过程为:采用X-5树脂作为柱填充材料,湿法装柱,直径为2cm时,树脂用量为1.8g(湿树脂)/cm,9.2g(干树脂)/cm;用浓度为质量百分比75%乙醇作为洗脱液,粗提液pH值为3,NaCl浓度为0.5mol/L,洗脱流速为4BV/h。所得产物经真空旋转蒸发浓缩、冷冻干燥,得到多酚黄酮冻干粉。
(3)称取上述粗提物冻干粉和多酚黄酮冻干粉各0.1g,用蒸馏水配成0.1%(w/w)的溶液,测定多酚黄酮含量。分别稀释3倍后测定其对DPPH·的清除率。结果如图11所示,表明取物经过X-5大孔吸附树脂纯化后,多酚含量达到51.5%,黄酮含量达到50.1%,黄酮含量大约是未纯化前的两倍,抗氧化能力大大提高。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将朱缨花的叶子清洗,干燥,磨碎;
(2)将磨碎的朱缨花的叶子与溶剂按料液比1:10~30混合后恒温水浴提取或超声恒温水浴提取,得到多酚和黄酮。
2.根据权利要求1所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的溶剂为浓度为质量百分比30~100%的乙醇溶液;
步骤(2)中所述的恒温水浴提取或超声恒温水浴提取的温度为60~100℃;
步骤(2)中所述的恒温水浴提取的时间为30~150min。
3.根据权利要求1所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的超声的功率100~300W;
步骤(2)中所述的超声的时间20~80min。
4.根据权利要求1所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的溶剂为浓度为质量百分比70%的乙醇溶液;
步骤(2)中所述的恒温水浴提取或超声恒温水浴提取的温度80℃;
步骤(2)中所述的恒温水浴提取的时间为120min;
步骤(2)中所述的超声的功率250W;
步骤(2)中所述的超声的时间50min。
5.根据权利要求1所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:还包括将步骤(2)中得到的多酚和黄酮进行离心、分离纯化、浓缩和冻干的步骤。
6.根据权利要求5所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:所述的分离纯化为采用吸附树脂进行分离纯化;所述的吸附树脂为大孔吸附树脂X-5、AB-8、NKA、D4020或聚酰胺树脂。
7.根据权利要求6所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:所述的分离纯化为采用经过预处理的吸附树脂进行分离纯化;所述的预处理通过如下方法实现:将吸附树脂依次用丙酮和乙醇密封浸泡,然后用NaOH溶液浸泡,用水洗至中性,再用盐酸溶液浸泡,用水洗至中性,得到预处理的吸附树脂。
8.根据权利要求5所述的从朱缨花中提取多酚和黄酮的方法,其特征在于:所述的离心为4000r/min离心10min;所述的浓缩为采用真空旋转蒸发的方式进行浓缩。
9.一种朱缨花多酚和黄酮提取物,其特征在于:通过权利要求1~8任一项所述的方法提取得到。
10.权利要求9所述的朱缨花多酚和黄酮提取物在制备药物中的应用。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108752393A (zh) * | 2018-05-22 | 2018-11-06 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用天然多酚和类黄酮的提取方法 |
CN112353824A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-02-12 | 内蒙古自治区农牧业科学院 | 一种草麻黄根多酚超声提取工艺 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006232750A (ja) * | 2005-02-25 | 2006-09-07 | Tokyo Univ Of Marine Science & Technology | 血糖値上昇抑制剤及びこれを含む食品 |
CN106038738A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-10-26 | 四川师范大学 | 一种栘*属植物多酚提取物及其制备方法 |
-
2017
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006232750A (ja) * | 2005-02-25 | 2006-09-07 | Tokyo Univ Of Marine Science & Technology | 血糖値上昇抑制剤及びこれを含む食品 |
CN106038738A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-10-26 | 四川师范大学 | 一种栘*属植物多酚提取物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
RAMCHANDRA GUPTA等: "Formulation and Evaluation of Herbal Effervescent Granules Incorporated with Calliandra Haematocephala Leaves Extract", 《INDO AMERICAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL RESEARCH》 * |
卫阳飞等: "窄叶鲜卑花叶中黄酮和多酚的超声提取工艺及抗氧化性研究", 《中药材》 * |
张立华等: "石榴皮提取物的大孔树脂纯化及其抗氧化性能", 《农业工程学报》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108752393A (zh) * | 2018-05-22 | 2018-11-06 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用天然多酚和类黄酮的提取方法 |
CN112353824A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-02-12 | 内蒙古自治区农牧业科学院 | 一种草麻黄根多酚超声提取工艺 |
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