CN110934922B - 一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 - Google Patents
一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110934922B CN110934922B CN201911288532.9A CN201911288532A CN110934922B CN 110934922 B CN110934922 B CN 110934922B CN 201911288532 A CN201911288532 A CN 201911288532A CN 110934922 B CN110934922 B CN 110934922B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lycium ruthenicum
- extraction
- flavone
- choline chloride
- extract
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000169546 Lycium ruthenicum Species 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 title claims abstract description 52
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 52
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 title claims abstract description 51
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 51
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 49
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000005496 eutectics Effects 0.000 claims abstract description 24
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 claims abstract description 15
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 claims abstract description 15
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 15
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims abstract description 3
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 25
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 25
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 24
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 20
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 14
- 229960001231 choline Drugs 0.000 claims description 13
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 6
- OASOQJKCZXXDMI-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;hydrochloride Chemical compound Cl.OCCO OASOQJKCZXXDMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 2
- 238000010025 steaming Methods 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 20
- JOOXCMJARBKPKM-UHFFFAOYSA-N 4-oxopentanoic acid Chemical compound CC(=O)CCC(O)=O JOOXCMJARBKPKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 4
- 229940040102 levulinic acid Drugs 0.000 abstract description 4
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 14
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- -1 flavonoid compounds Chemical class 0.000 description 8
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 7
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 7
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 101100322245 Caenorhabditis elegans des-2 gene Proteins 0.000 description 3
- 101100119767 Caenorhabditis elegans fat-4 gene Proteins 0.000 description 3
- 101100468762 Caenorhabditis elegans ric-3 gene Proteins 0.000 description 3
- OYCJYCWINIEFBT-UHFFFAOYSA-N Cl.CC(O)CCO Chemical compound Cl.CC(O)CCO OYCJYCWINIEFBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000952227 Drosophila melanogaster Sphingolipid delta(4)-desaturase DES1 Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 102100037416 Sphingolipid delta(4)-desaturase DES1 Human genes 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 3
- HUSXNIFVQFHSEA-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(O)C(O)=O HUSXNIFVQFHSEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 2
- VYWQTJWGWLKBQA-UHFFFAOYSA-N [amino(hydroxy)methylidene]azanium;chloride Chemical compound Cl.NC(N)=O VYWQTJWGWLKBQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000874 microwave-assisted extraction Methods 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- WQFQVWDVWQLEQE-UHFFFAOYSA-N 1,2-diphenyl-1h-pyrrolizine Chemical compound C12=CC=CN2C=C(C=2C=CC=CC=2)C1C1=CC=CC=C1 WQFQVWDVWQLEQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 240000008853 Datura stramonium Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001106041 Lycium Species 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 description 1
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 description 1
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 description 1
- QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N Propyl levulinate Chemical compound CCCOC(=O)CCC(C)=O QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 1
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 1
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 1
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000001057 purple pigment Substances 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 230000003860 sleep quality Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002371 ultraviolet--visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/81—Solanaceae (Potato family), e.g. tobacco, nightshade, tomato, belladonna, capsicum or jimsonweed
- A61K36/815—Lycium (desert-thorn)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用，将黑枸杞洗净干燥后粉碎备用；使用氯化胆碱型低共熔溶剂作为提取剂，采用辅助提取获得黄酮提取液；氯化胆碱型低共熔溶剂中，合成低共熔溶剂的氢键受体为氯化胆碱，氢键供体为乙酰丙酸、乳酸、乙二醇、尿素和1,3‑丁二醇中的至少一种；将黄酮提取液采用大孔树脂吸附并采用有机试剂分离纯化得到纯化的黄酮提取液；将纯化的黄酮提取液旋蒸后添加聚乙二醇，真空冷冻干燥得到产品。本发明的方法简单可靠，提取率高，为提高黑枸杞黄酮的利用率提供了参考依据。低共熔溶剂提取是一种绿色提取方法，不需要采用大量的有机试剂提取，本发明所述的DES可以作为一种绿色环保，具有高提取率的黑枸杞黄酮提取剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物化工，尤其涉及的是一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用。
背景技术
随着人们生活水平的提高，心脑血管疾病的发病率也在上升，黄酮类化合物在心脑血管疾病的治疗上起到了重要的作用。黄酮广泛的药理作用，特别它具有抗自由基、防癌、抗癌的作用，故黄酮类化合物引起人们极大的开发兴趣。
黄酮类化合物能够降低氧化应激水平，具有显著地清除自由基和抗氧化作用，在医药、食品、化妆品和保健品等领域具有广泛的应用；同时黄酮类化合物可以阻止细胞的退化、衰老以及癌症的发生；另外黄酮类化合物也被称为花色苷酸，它可以降低39％的三元脂肪酸丙酯和26％的血糖，提高胰岛素敏感性，在一定程度上可以稳定胶原质，因此它对因糖尿病引起的毛细血管脆化和视网膜病有很好地作用；除此之外，黄酮也可以抑制炎性生物酶的渗出、止痛并增进伤口愈合等。
黑枸杞(LyciumruthenicumMurr)全称是黑果枸杞，属于茄科枸杞属。主要分布于盐渍沙地、高山沙林、干涸河床、河岸和荒漠河岸林，是我国西部特有的沙漠药用植物，在沙漠中被称为“软黄金”，具有超强的生命力。成熟后成紫黑色，果实中富含紫色色素。黑枸杞味甜多汁，性平，富含蛋白质、多糖、氨基酸、矿物质、维生素、微量元素等多种营养成分。它具有抗衰老、改善睡眠质量、增强视力、美容养颜的功效，同时黑枸杞中含有丰富的黄酮。从黑枸杞中提取出高抗氧化活性的黄酮化合物具有十分重要的医药作用。
到目前为止，使用传统的提取溶剂提取总黄酮的提取率低下、提取物活性较低且传统的提取方法耗时长，不够经济，难以在实际生产中使用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于：如何提高提取总黄酮的提取率，提供了一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用。
本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的，本发明的一种黑枸杞中总黄酮的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑枸杞洗净干燥后粉碎备用；
(2)使用氯化胆碱型低共熔溶剂作为提取剂，采用辅助提取获得黄酮提取液；
所述氯化胆碱型低共熔溶剂中，合成低共熔溶剂的氢键受体为氯化胆碱，氢键供体为乙酰丙酸、乳酸、乙二醇、尿素和1,3-丁二醇中的至少一种；
(3)将黄酮提取液采用大孔树脂吸附并采用有机试剂分离纯化得到纯化的黄酮提取液；
(4)将纯化的黄酮提取液旋蒸后添加聚乙二醇，真空冷冻干燥得到产品。
作为本发明的优选方式之一，所述低共熔溶剂提取黑枸杞中总黄酮的过程中黑枸杞与低共熔溶剂固液比范围为1:4～14。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中，辅助提取为超声辅助和/或微波辅助。
作为本发明的优选方式之一，所述超声辅助的温度为30～50℃，功率为300～1000W，超声时间为30～60min。
作为本发明的优选方式之一，所述微波辅助提取总时间为30～60min，每微波提取9min后停止微波1min再继续微波，至少三次得到提取液。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(3)的大孔树脂为D201型大孔树脂。
所述步骤(4)中，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇先冷却至0～3℃，再冷冻至-25℃以下，在真空冷冻干燥器中进行干燥，干燥24h以上，得到产品。
作为本发明的优选方式之一，所述聚乙二醇为聚乙二醇6000。
一种使用所述的黑枸杞中总黄酮的提取方法制备得到的黑枸杞总黄酮。
所述的黑枸杞总黄酮在制备抗氧化药物、食品、保健品中的应用。
低共熔溶剂能够选择性提取枸杞中黄酮类物质，除黄酮类物质还有其他杂志如多酚、多糖、脂肪等以及蛋白等物质，本发明能够克服的是选择性提取黄酮类物质，克服传统溶剂如水选择性差、有机溶剂残留及毒性等问题，通过低共熔溶剂辅助超声等提取工艺，本发明中所采用的配方制备得到的低共熔溶剂可回收循环再利用、无毒，具有选择性提取黄酮类物质的优点。
本发明相比现有技术具有以下优点：本发明的方法简单可靠，提取率高，为提高黑枸杞黄酮的利用率提供了参考依据。低共熔溶剂提取是一种绿色提取方法，不需要采用大量的有机试剂提取，本发明所述的DES可以作为一种绿色环保，具有高提取率的黑枸杞黄酮提取剂。
本发明获得的黑枸杞黄酮具有较高的抗氧化活性，易于推广应用。同时，该研究结果对其他茄科植物如番茄、马铃薯、曼陀罗等有效成分的提取具有参考和借鉴意义。
本发明方法所制备的黑枸杞黄酮可用于抗氧化、抗敏感、止痛、促进伤口愈合、抗衰老、美容养颜等相关功能的食品、保健食品和药品的生产和配料，具有重要的经济价值。
本发明方法所制备的黑枸杞黄酮可以与食品添加剂制备成功能性食品或保健食品，也可以与其他营养物质联合用于功能性食品或保健食品的加工制备，发挥抗氧化、抗敏感、止痛、促进伤口愈合、抗衰老、美容养颜等食疗功能。
此外，本发明的方法因提取溶剂绿色、无毒、可降解的特点，具有重要的环保意义。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
下述的实施例使用的低共熔溶剂(DES)均为氯化胆碱型DES，组成如表1所示。
表1不同的DES种类
首先分别制备各个DES：
(1)DES-1的制备
用万分之一电子天平称取11.170g(0.8mol)氯化胆碱和18.579g(0.16mol)乙酰丙酸，两者摩尔比为1:2，将两者放入烧杯中，然后把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，打开恒温磁力搅拌器开关，于70℃恒温条件下进行搅拌。待溶液变为无色透明的液体，冷却后仍为无色透明且均匀的液体时，将制备好的DES-1放入锥形瓶中备用。
(2)DES-2的制备
用万分之一电子天平称取11.170g(0.8mol)氯化胆碱和14.413g(0.16mol)乳酸，两者摩尔比为1:2，将两者放入烧杯中，然后把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，打开恒温磁力搅拌器开关，于65℃恒温条件下进行搅拌。待氯化胆碱完全溶于乳酸，溶液变为无色透明的液体，冷却后仍为无色透明且均匀的液体时，将制备好的DES-2放入锥形瓶中备用。
(3)DES-3的制备
用万分之一电子天平称取11.170g(0.8mol)氯化胆碱和9.931g(0.16mol)乙二醇，两者摩尔比为1:2，将两者放入烧杯中，然后把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，打开恒温磁力搅拌器开关，于60℃恒温条件下进行搅拌。待溶液变为无色透明的液体，冷却后仍为无色透明且均匀的液体时，将制备好的DES-3放入锥形瓶中备用。
(4)DES-4的制备
用万分之一电子天平称取11.170g(0.8mol)氯化胆碱和9.610g(0.16mol)尿素，两者摩尔比为1:2，将两者放入烧杯中，然后把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，打开恒温磁力搅拌器开关，于70℃恒温条件下进行搅拌。待溶液变为无色透明的液体，冷却后仍为无色透明且均匀的液体时，将制备好的DES-4放入锥形瓶中备用。
(5)DES-5的制备
用万分之一电子天平称取11.170g(0.8mol)氯化胆碱和18.894g(0.16mol)1，3-丁二醇，两者摩尔比为1:2，将两者放入烧杯中，然后把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，打开恒温磁力搅拌器开关，于80℃恒温条件下进行搅拌。待溶液变为无色透明的液体，冷却后仍为无色透明且均匀的液体时，将制备好的DES-5放入锥形瓶中备用。
黑枸杞总黄酮提取实施例
通过本发明所述的方法提取得到的总黄酮具有较高提取率以及较高抗氧化活性，采用紫外可见分光光度法测定中总黄酮含量的测定(以芦丁计)，以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)为指示剂，采用DPPH检测法测定黑枸杞提取物中抗氧化活性。提取物中的抗氧化化合物与DPPH·自由基通过给氢作用，使DPPH还原为二苯基吡咯嗪。这种减少是在外观上观察到的，即通过深紫外到浅黄色样品的颜色变化，同时也可以通过紫外可见光谱的吸光度测定。按上述方法测定不同浓度黑枸杞总黄酮对DPPH清除率，并计算相应的IC50(半数清除率)，IC50的值越低，表明抗氧化活性越高。
实施例1
以氯化胆碱-乙酰丙酸型(DES-1)低共熔溶剂为提取溶剂
一种高抗氧化活性的黑枸杞总黄酮的提取方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-乙酰丙酸型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例2
以氯化胆碱-乳酸型(DES-2)低共熔溶剂为提取溶剂
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-乳酸型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例3
以氯化胆碱-乙二醇型(DES-3)低共熔溶剂为提取溶剂，
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-乙二醇型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例4
以氯化胆碱-尿素型(DES-4)低共熔溶剂为提取溶剂
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-尿素型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例5
以氯化胆碱-1，3-丁二醇型(DES-5)低共熔溶剂为提取溶剂
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-1，3-丁二醇型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例6
对比实施例：以70％乙醇作为提取剂
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以70％乙醇作为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下对其进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
实施例7
不同提取工艺下提取黑枸杞总黄酮
一种高抗氧化活性的黑枸杞黄酮的制备方法，包括以下步骤：
使用真空干燥器在40℃条件下将黑枸杞烘干至恒重，粉碎过100目筛，得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-乙二醇型低共熔溶剂为提取溶剂，微波辅助提取，微波功率600W，微波温度40℃，提取时间为60min后过滤得到滤液为总黄酮提取液，将提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到提取液，再将提取液经过旋转蒸发仪浓缩10倍，将所述提取液添加保护剂聚乙二醇6000并冷却至0℃，再冷冻至-85℃，保持真空度并进行程序升温，干燥24h以上，得到产品。分别采用分光光度法测定黑枸杞总黄酮提取率以及采用DPPH法测定提取物IC50值判断提取物抗氧化活性。
表2为实施例1-7制备方案所得的总黄酮提取率及其抗氧化活性对比，表中看出制备实施例所得总黄酮提取率范围在1.16～1.62％，IC50值在18.6～38.9μg/mL，说明通过本提取工艺得到总黄酮提取率较高，且具有较高的抗氧化活性。
表2不同工艺总黄酮提取率及抗氧化活性对比
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种黑枸杞总黄酮在制备抗氧化药物中的应用，所述黑枸杞总黄酮通过如下步骤制备：将黑枸杞洗净干燥后粉碎得到黑枸杞果粉，以氯化胆碱-乙二醇型低共熔溶剂为提取溶剂，在固液比为1:10、温度为50℃、功率为420W的条件下进行超声提取，提取时间为60min，过滤后取滤液，得总黄酮提取液，将总黄酮提取液用D201型大孔吸附树脂吸附分离纯化得到纯化的黄酮提取液，将纯化的黄酮提取液旋蒸后添加聚乙二醇，真空冷冻干燥即得；其中，氯化胆碱-乙二醇型低共熔溶剂中，氢键受体氯化胆碱与氢键供体乙二醇的摩尔比为1：2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911288532.9A CN110934922B (zh) | 2019-12-12 | 2019-12-12 | 一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911288532.9A CN110934922B (zh) | 2019-12-12 | 2019-12-12 | 一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110934922A CN110934922A (zh) | 2020-03-31 |
| CN110934922B true CN110934922B (zh) | 2022-04-05 |
Family
ID=69910496
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911288532.9A Active CN110934922B (zh) | 2019-12-12 | 2019-12-12 | 一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110934922B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111870572A (zh) * | 2020-08-18 | 2020-11-03 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种虎杖提取物及其制备方法和应用 |
| CN112645919A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-04-13 | 中国科学院兰州化学物理研究所 | 一种植物中黄酮类化合物的提取方法 |
| CN116251137B (zh) * | 2021-12-09 | 2024-01-30 | 北京农学院 | 一种从鸡血藤中提取黄酮类化合物的方法 |
| CN117100789A (zh) * | 2022-11-29 | 2023-11-24 | 上海应用技术大学 | 一种低共熔溶剂提取柠檬桉叶黄酮的方法及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108619202A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-10-09 | 临沂大学 | 一种低共熔溶剂提取、大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶总黄酮的方法 |
| CN109010504A (zh) * | 2018-09-05 | 2018-12-18 | 杨鑫 | 一种黑枸杞总黄酮的提取方法 |
-
2019
- 2019-12-12 CN CN201911288532.9A patent/CN110934922B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108619202A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-10-09 | 临沂大学 | 一种低共熔溶剂提取、大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶总黄酮的方法 |
| CN109010504A (zh) * | 2018-09-05 | 2018-12-18 | 杨鑫 | 一种黑枸杞总黄酮的提取方法 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| Deep eutectic solvent-based extraction couple with green two-dimensional HPLC-DAD-ESI-MS/MS for the determination of anthocyanins from Lycium ruthenicum Murr. fruit;Jun Sang;《Analytical Methods》;20180314;第10卷(第10期);第1247-1257页 * |
| Effective extraction of flavonoids from Lycium barbarum L. fruits by deep;Ali;《TALANTA》;20191001;第203卷;第16-22页 * |
| Jun Sang.Deep eutectic solvent-based extraction couple with green two-dimensional HPLC-DAD-ESI-MS/MS for the determination of anthocyanins from Lycium ruthenicum Murr. fruit.《Analytical Methods》.2018,第10卷(第10期),第1247-1257页. * |
| 宁夏枸杞与黑果枸杞总黄酮含量及;李兆君;《食品研究与开发》;20141231;第35卷(第24期);第39-41页 * |
| 黑枸杞总黄酮微波辅助提取及其抗氧化活性研究;杨洁;《保鲜与加工》;20180430;第18卷(第4期);第55-60页 * |
| 黑枸杞提取物与红枸杞提取物抗氧化效果的比较;杨丰绮;《江苏调味副食品》;20180131(第152期);第31-33页 * |
| 黑枸杞花青素的提取及其抗氧化活性研究;张玲艳;《食品工业》;20141231;第35卷(第12期);第88-91页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110934922A (zh) | 2020-03-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110934922B (zh) | 一种黑枸杞中总黄酮、提取方法、应用 | |
| CN103230473B (zh) | 黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用 | |
| CN102008081B (zh) | 一种黄秋葵叶提取物及其保健速溶茶的生产方法 | |
| JP5324084B2 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| JP2009013159A6 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| CN101828593A (zh) | 冻干马齿苋及马齿苋/海苔复合绿色保健食品的制备方法 | |
| CN111821233B (zh) | 一种植物美白天然活性复配组合物及其制备方法及应用 | |
| CN106317243A (zh) | 一种枸杞多糖的制备方法 | |
| CN108991471B (zh) | 一种具有强效抗氧化活性的天然食品添加剂 | |
| CN106543129A (zh) | 一种纯化黑米皮中花青素的方法 | |
| CN113925081A (zh) | 一种天然植物防腐组合物、制备方法及其应用 | |
| KR20130093371A (ko) | 항고혈압, 항당뇨 및 항노화성 플라보노이드 함유 뽕나무 잎 추출물의 신규한 제조 방법 및 그 산물 | |
| CN102050789A (zh) | 从紫山药中提取纯化尿囊素的方法 | |
| CN107417696A (zh) | 一种从树莓中提取树莓苷和鞣花酸的方法 | |
| CN102217755B (zh) | 罗汉松实提取物制品的生产方法 | |
| JPWO2003091237A1 (ja) | プロアントシアニジン高含有物の製造方法 | |
| CN107353273B (zh) | 从山莓中提取木犀草素和山莓素的方法 | |
| CN109678834A (zh) | 一种从山竹果皮中提取花青素的制备方法 | |
| CN109394610A (zh) | 一种黑豆芽提取物及其制备方法和在美白化妆品中的应用 | |
| CN114904294A (zh) | 一种高得率茶黄酮的制备方法 | |
| CN103666895A (zh) | 一种枸杞葡萄利口酒的制备方法 | |
| CN102813683B (zh) | 一种具有延缓衰老功效的银杏叶提取物及其制备方法与应用 | |
| CN110680847A (zh) | 一种提取及纯化大麻黄酮的方法 | |
| CN115368334B (zh) | 一种提高竹叶总黄酮浸取效率的方法 | |
| CN109662236A (zh) | 一种富硒多糖多皂苷的食品添加剂、制备方法及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |