CN107460639A - 一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种γ‑聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,将γ‑聚谷氨酸和聚乳酸按照一定比例(1∶10‑3∶10)溶解于体积比为1∶1的三氟乙酸与三氯甲烷复配溶剂中,配置成一定浓度(15%‑18%,wt)的均匀溶液,通过静电纺丝技术制备纳米纤维膜。γ‑聚谷氨酸有着良好的保水性、生物相容性,无毒无害、可食用;聚乳酸可再生、可降解,生物相容性好,是一种环境友好型高分子材料。本发明制备所得的复合纳米纤维膜,其优点表现为:具备良好的生物相容性,无毒性,可降解,无有害物质产生,具备良好的机械性能,改善了聚乳酸的疏水性,产品可广泛的应用于生体组织培养、医用辅料,药物载体等领域。
Description
技术领域
本发明属于生物材料领域,涉及具有良好生物相容性的γ-聚谷氨酸纳米复合纤维膜的制备方法,尤其涉及一种通过静电纺丝工艺制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜的方法。
技术背景
通过静电纺丝制备纳米纤维膜是一种相对简单易行的技术,制备的纳米纤维膜材料具有网状结构,比表面积大,微孔隙率高、贯通性好,在过滤分离、组织工程、医用材料、生物细胞培养等领域都有良好的应用前景。
γ-聚谷氨酸是一种高分子阴离子型多肽型聚合物,分子中含大量的酰胺键和可游离的羧基,主要是由D-谷氨酸和L-谷氨酸以聚合的方式组成。γ-聚谷氨酸水溶性极好,吸附性能强,可自然降解,无毒无害,生物相容性好,在食品、医药等领域具有广泛的应用前景。
聚乳酸主要由乳酸为原料合成的疏水性高分子材料,可再生、可降解,对生体组织无毒害,相容性好,在食品、药学等方面同样具有广泛应用。
现有的技术中,γ-聚谷氨酸由于具有大量的亲水性基团,分子间纠缠度较高,采用静电纺丝技术无法制备稳定的纳米纤维。本发明通过静电纺丝工艺制备的γ-聚谷氨酸-聚乳酸复合纳米纤维膜成型良好,结构稳定,不需要后处理就可以保持稳定的状态和性能,具备一定的可润湿性,疏水性得到改善;另一方面,本发明制备的γ-聚谷氨酸/聚乳酸复合纳米纤维膜生物相容性好,无毒性,在细胞培养方面也有十分突出的表现。
发明内容
本发明的目的是提供一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法。
本发明为实现上述目的需要解决的技术问题是,寻找适合于γ-聚谷氨酸、聚乳酸静电纺丝液制备的溶剂以及γ-聚谷氨酸、聚乳酸的原料比例。
本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是:一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
使用三氟乙酸、三氯甲烷作为溶剂,配置出体积比为1∶1的复配溶剂,备用;
使用γ-聚谷氨酸和聚乳酸为溶质,备用;
按照质量百分比浓度为15%-18%(wt),分别计算、称量上述复配溶剂和溶质,其中溶质中γ-聚谷氨酸和聚乳酸按质量比1∶10-3∶10,分别称取;
将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A。
将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。
将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝原液;
利用静电纺丝设备,制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸复合纳米纤维膜。
上述技术方案直接带来的技术效果是,制备工艺流程短,纺丝液均匀、稳定,工艺可控性高,纳米纤维膜产形态、性能稳定,不需后处理,在常态下可在降解期内长时间稳定存在。
所制备的γ-聚谷氨酸/聚乳酸纳米纤维膜可广泛的应用于生体细胞、组织培养、药物载体、医用辅料等领域。
上述技术方案中,技术关键点之一是溶剂中三氟乙酸、三氯甲烷的复配比例:
γ-聚谷氨酸溶于三氟乙酸,难溶于三氯甲烷。三氟乙酸的比例低则会影响γ-聚谷氨酸的溶解,难以形成稳定均匀的纺丝液;三氟乙酸的比例高,静电纺丝成本增加,对设备和防护要求提高。
上述技术方案中,另一技术关键点是纺丝液的配置方式:
在制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸静电纺丝液时,若用三氟乙酸和三氯甲烷分别溶解γ-聚谷氨酸和聚乳酸,然后再将两种溶液混合时,则会出现γ-聚谷氨酸絮状不溶物。为解决该问题,本方案中,首先制备复配溶剂,在复配溶剂中先添加γ-聚谷氨酸,持续搅拌至溶解形成稳定均相溶液,然后再向该溶液中添加聚乳酸粉末,直至搅拌溶解成稳定均相的混合溶液。通过这样的先后加料顺序,可以有效的防止γ-聚谷氨酸出现凝絮现象。
上述技术方案中,一方面通过γ-聚谷氨酸来改善复合纳米纤维膜的亲水性,增强膜的生物相容性;另一方面,需要控制γ-聚谷氨酸和聚乳酸质量比最大为3∶10,主要目的在于防止γ-聚谷氨酸含量增加,引起分子之间的过度纠缠,造成复合纳米纤维膜的串珠现象和可纺性能的降低。
附图说明
图1 实施例2制备得到的γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜扫描电镜图
图2 实施例2制备得到的γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜样品细胞培养实验(4小时)
图3 实施例2制备得到的γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜细胞培养实验(第4天)
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明进行详细说明。
说明:
1下列各实施例中,γ-聚谷氨酸分子量为70万,聚乳酸的分子量为15万。
2 γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜拉伸断裂强力测试方法如下:
裁取γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜样品,将试样夹持于材料电子强力机上,夹持距离为15mm,拉伸速度100mm/min,参照国际标准ISO 9073-3-1989测试其拉伸断裂强力。
3 γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜表面接触角测试方法如下:
裁取3*3cm的γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜,置于样品夹持器中,测定其表面接触角。
4 γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于小鼠细胞培养,通过MTT法检测细胞增殖情况,吸光值OD值表示细胞增殖情况。
5 γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜进行溶血实验,测量并计算溶血率HR。
实施例1
(1)以三氟乙酸、三氯甲烷复配溶液作为溶剂,其中配置体积比1∶1,配置溶剂25ml。
(2)按照浓度15%(wt),计算、称量溶质,其中溶质中γ-聚谷氨酸和聚乳酸按质量比为3∶10;
(3)将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A。将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝原液;
(4)利用静电纺丝,在纺丝电压为25KV,喷头至接收器的距离为20cm,纺丝原液进给流速为0.2ml/h条件下,制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜。
(5)产品性能检验与检测结果:γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜拉伸断裂强力为546.1cN/mm;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜表面接触角为89.3°;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于小鼠细胞培养,空白细胞培养实验第一天OD值为13800,第三天为16500;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜培养细胞样品第一天OD值达到20400,第三天达到23100;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于溶血实验,溶血率为2.96%。
实施例2
(1)以三氟乙酸、三氯甲烷复配溶液作为溶剂,其中配置体积比1∶1,配置溶剂25ml。
(2)按照浓度16%(wt),计算、称量溶质,其中溶质中γ-聚谷氨酸和聚乳酸按质量比为2∶10;
(3)将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A。将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝原液;
(4)利用静电纺丝,在纺丝电压为25KV,喷头至接收器的距离为20cm,纺丝原液进给流速为0.5ml/h条件下,制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜。
(5)产品性能检验与检测结果:γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜拉伸断裂强力为418.0cN/mm;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜表面接触角为99.7°;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于小鼠细胞培养,空白细胞培养实验第一天OD值为13800,第三天为16500;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜培养细胞样品第一天OD值达到19500,第三天达到22400;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于溶血实验,溶血率为3.17%。
实施例3
(1)以三氟乙酸、三氯甲烷复配溶液作为溶剂,其中配置体积比1∶1,配置溶剂25ml。
(2)按照浓度17%(wt),计算、称量溶质,其中溶质中γ-聚谷氨酸和聚乳酸按质量比为1∶10;
(3)将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A。将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝原液;
(4)利用静电纺丝,在纺丝电压为22KV,喷头至接收器的距离为18cm,纺丝原液进给流速为0.5ml/h条件下,制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜。
(5)产品性能检验与检测结果:γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜拉伸断裂强力为401.6cN/mm;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜表面接触角为110.3°;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于小鼠细胞培养,空白细胞培养实验第一天OD值为13800,第三天为16500;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜培养细胞样品第一天OD值达到17200,第三天达到19800;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于溶血实验,溶血率为3.41%。
实施例4
(1)以三氟乙酸、三氯甲烷复配溶液作为溶剂,其中配置体积比1∶1,配置溶剂25ml。
(2)按照浓度18%(wt),计算、称量溶质,其中溶质中γ-聚谷氨酸和聚乳酸按质量比为1∶10;
(3)将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A。将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝原液;
(4)利用静电纺丝,在纺丝电压为24KV,喷头至接收器的距离为20cm,纺丝原液进给流速为0.8ml/h条件下,制备γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜。
(5)产品性能检验与检测结果:γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜拉伸断裂强力为418.3cN/mm;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜表面接触角为98.5°;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于小鼠细胞培养,空白细胞培养实验第一天OD值为13800,第三天为16500;γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜培养细胞样品第一天OD值达到18100,第三天达到21300;将γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜用于溶血实验,溶血率为3.29%。
Claims (5)
1.一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其由三氟乙酸、三氯甲烷作为溶剂,γ-聚谷氨酸、聚乳酸为溶质,配置纺丝液,通过静电纺丝设备制备成膜。其特征在于,所用的原材料包括:γ-聚谷氨酸、聚乳酸、三氟乙酸、三氯甲烷。
2.根据权利要求1所述的一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其特征在于,所用原料γ-聚谷氨酸的分子量为70万,聚乳酸的分子量为15万。
3.根据权利要求1所述的一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其特征在于,所述的溶剂为三氟乙酸、三氯甲烷。
4.一种如权利要求1~3所述的一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)使用三氟乙酸、三氯甲烷作为复配溶剂,使用γ-聚谷氨酸和聚乳酸为溶质,按照一定质量比分别计算、称量上述复配溶剂和溶质。
(2)将所称取的γ-聚谷氨酸加入到上述的复配溶剂中,充分搅拌制成均匀的溶液A;然后,将所称取的聚乳酸粉末加入到溶液A中,充分搅拌,制得均匀的混合溶液B。
(3)将所得的混合溶液B置于超声波发生器内进行脱泡,制得纺丝液;
(4)利用静电纺丝设备,制备γ-聚谷氨酸-聚乳酸复合纳米纤维膜。
5.根据权利要求4所述的一种γ-聚谷氨酸/聚乳酸生物相容纳米纤维膜及制备方法,其特征在于:
所述步骤1中,三氟乙酸、三氯甲烷复配体积比为1∶1;
所述步骤1中,γ-聚谷氨酸、聚乳酸复配质量比为1∶10-3∶10;
所述步骤1中,溶质和溶剂质量比为15%-18%,wt;
所述步骤4中,静电纺丝采用的纺丝电压为20-25KV,喷头至接收器的距离为10-20cm,纺丝原液进给流速为0.1-0.8ml/h。
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