CN107428685B - 作为登革热病毒复制抑制剂的吲哚衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及单取代的或二取代的吲哚化合物、通过使用所述化合物预防或治疗登革热病毒感染的方法，并且还涉及所述化合物用作一种药物，更优选地用作一种治疗或预防登革热病毒感染的药物。此外，本发明涉及这些化合物的药物组合物或组合制剂，涉及用作一种药物，更优选地用于预防或治疗登革热病毒感染的组合物或制剂。本发明还涉及用于制备这些化合物的方法。

Description

作为登革热病毒复制抑制剂的吲哚衍生物
本发明涉及单取代的或二取代的吲哚化合物、通过使用所述化合物预防或治疗登革热病毒感染的方法，并且还涉及所述化合物用作一种药物，更优选地用作一种治疗或预防登革热病毒感染的药物。此外，本发明涉及这些化合物的药物组合物或组合制剂，涉及用作一种药物，更优选地用于预防或治疗登革热病毒感染的组合物或制剂。本发明还涉及用于制备这些化合物的方法。
发明背景
通过蚊子或蜱传播的黄病毒在人中引起危及生命的感染，如脑炎和出血热。已知黄病毒登革热的四种不同的但密切相关的血清型，所谓的DENV-1、-2、-3和-4。登革热是在全世界大多数热带和亚热带地区地方性的，主要在城市和半城市地区。根据世界卫生组织(WHO)，25亿人(其中10亿儿童)处于DENV感染的风险(WHO，2002)。估计每年在世界范围内发生5000万至1亿登革热[DF]病例、50万严重登革热疾病(即登革出血热[DHF]和登革休克综合征[DSS])病例以及超过20,000例死亡。DHF已经成为流行地区中儿童之中住院和死亡的一个主要原因。总而言之，登革热代表虫媒病毒(arboviral)疾病的最常见原因。由于在位于拉丁美洲、东南亚和西太平洋的国家(包括巴西、波多黎各、委内瑞拉、柬埔寨、印度尼西亚、越南、泰国)中的最近大暴发，登革热病例的数量已经在过去几年急剧上升。随着疾病传播至新的区域，不仅登革热病例的数量在增加，而且暴发倾向于更严重。
为了预防和/或控制与登革病毒感染相关的疾病，目前仅有的可用方法是灭蚊策略以便控制载体。虽然正在针对登革热的疫苗开发中取得进展，但是遇到许多困难。这些困难包括被称为抗体依赖性增强作用(ADE)的现象的存在。从一种血清型感染中恢复提供针对该血清型的终身免疫，但是仅赋予针对其他三种血清型中的一种的随后感染的部分和短暂保护。在感染另一种血清型之后，预先存在的异源抗体与新感染的登革病毒血清型形成复合物，但是不中和病原体。相反，据信促进病毒进入细胞，从而导致不受控制的病毒复制和更高的峰病毒滴度。在原发感染和继发感染两者中，更高的病毒滴度与更严重的登革热疾病相关。因为母体抗体能够容易地通过母乳喂养传递至婴儿，所以这可能是儿童比成年人更多受严重登革热疾病影响的原因之一。
在具有两种或更多种血清型同时流通的区域(还被称为超流行地区)，严重登革热疾病的风险显著更高，这是由于经历继发性、更严重感染的风险增加。此外，在超流行性的情况下，更强毒株出现的概率增加，这进而增加登革出血热(DHF)或登革休克综合征的概率。
携带登革热的蚊子，包括埃及伊蚊(Aedes aegypti)和白纹伊蚊(Aedesalbopictus)(虎斑蚊(tiger mosquito))在地球上向北方移动。根据美国(US)疾病控制与预防中心(CDC)，两种蚊子当前在得克萨斯州南部普遍存在。携带登革热的蚊子向北传播不限于美国，而且也已在欧洲观察到。
尽管在过去30年做出较大努力，但当前不存在可用于保护人免受登革病毒疾病的疫苗。主要问题是开发以相同程度提供针对所有四种血清型的保护的一种疫苗(一种四价疫苗)。此外，当前不可获得用于治疗或预防登革热病毒感染的特异性抗病毒药物。显然，对于用于预防或治疗动物中(更具体地人中)的病毒感染并且尤其是针对由黄病毒(更具体地登革病毒)引起的病毒感染的治疗剂仍然存在巨大未满足的医学需求。高度需要具有良好抗病毒效力、无副作用或低水平的副作用、针对多种登革热病毒血清型的广谱活性、低毒性和/或良好药代动力学或药效-动力学特性的化合物。
本发明现在提供化合物单取代或二取代的吲哚衍生物，这些化合物显示针对所有四种(4)登革热病毒血清型的高效活性。此外，根据本发明的这些化合物具有良好药代动力学特征，并且出人意料地这些特异性化合物显示改进的手性稳定性。
发明概述
本发明是基于上文提到的问题中的至少一个可以通过本发明的当前化合物来解决的出人意料的发现。
本发明提供化合物，这些化合物已显示具有针对当前已知的所有四种(4)血清型的有效抗病毒活性。此外，本发明证明这些化合物有效地抑制登革热病毒(DENV)的增殖。因此，这些化合物构成可用于治疗和/或预防动物、哺乳动物和人中的病毒感染，更具体地用于治疗和/或预防登革热病毒感染的一类有用的有效化合物。
此外，本发明涉及这类化合物作为药物的用途，并且涉及其用于制造用以治疗和/或预防动物或哺乳动物(更具体地人)中的病毒感染，特别是被属于登革热病毒家族的病毒感染的药剂的用途。本发明还涉及用于制备所有这类化合物的方法，并且涉及包含有效量的这些化合物的药物组合物。
本发明还涉及一种通过向有需要的患者给予有效量的一种或多种这类化合物或其药学上可接受的盐任选地与一种或多种其他药物(像另一种抗病毒剂或登革热疫苗或两者)的组合来治疗或预防人中的登革热病毒感染的方法。
本发明的一个方面是提供具有化学式(I)的化合物
Figure BDA0001350636490000031
其一种立体异构形式、一种药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，该化合物包含一个单取代的或二取代的吲哚基团；所述化合物选自下组，其中：
R1是F，R2是F、CH3或OCH3并且R3是H，
R1是H，R2是Cl或F并且R3是CH3，
R1是CH3，R2是OCH3、F或H并且R3＝H，
R1是H，R2是Cl或F并且R3是H，
R1是CH3，R2是H并且R3是F，
R1是F，R2是H并且R3是CH3，
R1是H，R2是OCH3并且R3是H或Cl，
R1是H，R2是F并且R3是F，
R1是CF3或OCF3，R2是H并且R3是H，
R1是Cl，R2是OCH3并且R3是H。
具体地说，本发明的化合物或其立体异构形式、其一种药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物选自下组：
Figure BDA0001350636490000041
Figure BDA0001350636490000051
本发明的另一个方面是一种由以下结构式(I)所表示的化合物
Figure BDA0001350636490000061
其一种立体异构形式、一种药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的用途，该化合物包含一个单取代的或二取代的吲哚基团；所述化合物选自下组，其中：
R1是F，R2是F、CH3或OCH3并且R3是H，
R1是H，R2是Cl或F并且R3是CH3，
R1是CH3，R2是OCH3、F或H并且R3＝H，
R1是H，R2是Cl或F并且R3是H，
R1是CH3，R2是H并且R3是F，
R1是F，R2是H并且R3是CH3，
R1是H，R2是OCH3并且R3是H或Cl，
R1是H，R2是F并且R3是F，
R1是CF3或OCF3，R2是H并且R3是H，
R1是Cl，R2是OCH3并且R3是H
用于抑制一种生物样品或患者中的一种或多种登革热病毒的复制。
本发明的一部分还是一种药物组合物，该药物组合物包含一种具有化学式(I)的化合物或其一种立体异构形式、一种药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，连同一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
具有化学式(I)的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐以及碱盐。合适的酸加成盐是从形成无毒盐的酸形成。合适的碱盐是从形成无毒盐的碱形成。
本发明的化合物还可以按非溶剂化的和溶剂化的形式存在。术语“溶剂化物”在此用以描述包含本发明的化合物以及一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如，乙醇)的一种分子复合物。
术语“多晶型物”是指本发明的化合物能够以一种以上的形式或晶体结构存在。
可以将本发明的化合物以晶态的或无定形的产品给予。其可通过如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥等方法以例如固体填料、粉末或膜形式获得。它们可以单独给予或与一种或多种本发明的其他化合物组合给予或与一种或多种其他药物组合给予。通常，它们将作为与一种或多种药学上可接受的赋形剂相缔合的一种配制品给予。术语“赋形剂”在此用以描述除本发明的一种或多种化合物之外的任何成分。赋形剂的选择大体上取决于如具体给予模式、赋形剂对溶解性和稳定性的影响以及剂型的性质等因素。
本发明的化合物或其任何亚群可以被配制成用于给予目的不同药物形式。作为适当的组合物，可以引用所有通常用于全身给予药物的组合物。为了制备本发明的药物组合物，将作为活性成分的一种有效量的具体化合物(任选地呈加成盐形式)与一种药学上可接受的载体组合在紧密混合物中，该载体取决于用于给予所希望的的制剂的形式可以采用多种形式。令人希望地，这些药物组合物处于适合于例如口服或经直肠给予的单位剂型。例如，在呈口服剂型的组合物的制备中，可采用任一常用药物介质，在口服液体制剂(例如悬浮液、糖浆、酏剂、乳液和溶液)的情形下采用例如像水、二醇、油、醇等；或在粉剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情形下采用固体载剂，例如淀粉、糖、高岭土、稀释剂、润滑剂、黏合剂、崩解剂等。因为其容易给予，片剂和胶囊剂代表最有利的口服单位剂型，在该情形下显然采用固体药物载体。还包括在使用之前不久可以被转变为液体形式的固体形式制剂。
为了便于给予和剂量的均一性，将上述药物组合物配制成单位剂型是特别有利的。如在此所用的单位剂型是指适合作为单位剂量的物理离散单位，各单位含有预定量的活性成分，该预定量的活性成分经计算与所需药物载体相缔合而产生所希望的治疗效果。此类单位剂型的实例是片剂(包括刻痕或包衣的片剂)、胶囊剂、丸剂、粉末包(powderpacket)、糯米纸囊剂(wafer)、栓剂、可注射溶液或悬浮液以及类似剂型，及其分离多倍剂(segregated multiple)。
在感染性疾病治疗领域中的普通技术人员将能够从下文所呈现的测试结果来确定有效量。通常，预期每日有效量将为0.01mg/kg至50mg/kg体重，更优选地0.1mg/kg至10mg/kg体重。可以适当地将所需剂量在全天中以适当的时间间隔作为两个、三个、四个或更多个子剂量给予。所述子剂量可配制成单位剂型，例如每单位剂型含有1至1000mg，且具体来说5mg至200mg活性成分。
如本领域的普通技术人员所熟知的，给予的精确剂量和频率取决于所使用的具有化学式(I)的具体化合物、正在被治疗的具体病状、正在被治疗的病状的严重性、具体患者的年龄、体重和总体身体状况以及个体可能服用的其他药物。另外，明显地，可根据所治疗个体的反应和/或根据用本发明化合物开处方的医师的评估来降低或增加有效量。因此，上文所述的有效量范围仅为指导且并不打算在任一程度上限制本发明的范围或使用。
本披露还旨在包括存在于本发明的化合物中的原子的任何同位素。例如，氢的同位素包括氚和氘，并且碳的同位素包括C-13和C-14。
用于本发明中的这些化合物还可以其立体化学异构形式存在，从而定义由相同键序列键合的相同原子组成但具有不同三维结构的不可互换的所有可能的化合物。除非另外提及或指明，化合物的化学命名涵盖所述化合物可以具有的所有可能的立体化学异构形式的混合物。
所述混合物可以包含所述化合物的基本分子结构的所有非对映异构体和/或对映异构体。用于本发明中的处于纯形式的或彼此混合的化合物的所有立体化学异构形式旨在被涵盖于本发明的范围内，包括任何外消旋混合物或外消旋体。
在此提到的化合物和中间体的纯的立体异构形式被定义为基本上不具有所述化合物或中间体的相同基本分子结构的其他对映异构或非对映异构形式的异构体。具体地说，术语‘立体异构纯’涉及具有至少80％立体异构过量(即，最少90％的一种异构体和最大10％的其他可能的异构体)到100％立体异构过量(即，100％的一种异构体并且没有其他异构体)的化合物或中间体，更具体地具有90％至100％立体异构过量，甚至更具体地具有94％至100％立体异构过量并且最具体地具有97％至100％立体异构过量的化合物或中间体。应当以类似的方式理解术语‘对映异构纯’和‘非对映异构纯’，但是讨论中的分别是关于混合物中的对映异构过量以及非对映异构过量。
可以通过领域已知的程序的应用来获得用于本发明中的化合物和中间体的纯的立体异构形式。例如，对映异构体可以通过用光学活性酸或碱使它们的非对映异构盐进行选择性结晶而得以彼此分离。它们的实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯甲酰基酒石酸以及樟脑磺酸。可替代地，可以通过使用手性固定相的层析技术分离对映异构体。所述纯的立体化学异构形式还可以衍生自适当起始材料的相对应的纯的立体化学异构形式，其条件是反应立体特异性地发生。优选地，如果一种具体的立体异构体是所希望的，那么所述化合物将通过立体专一的制备方法得以合成。这些方法将有利地使用对映异构体纯的起始材料。
通用合成方法
具有通式I的化合物的合成可以如方案1中所概述来进行。可以用一种氯化试剂例如像亚硫酰氯将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酸(II)转化成相对应的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯(III)。可以使用一种路易斯酸(Lewis acid)试剂(例如像Et2AlCl或TiCl4)在一种适合的溶剂例如像CH2Cl2或1,2-二氯乙烷中并且在典型地(但不排他地)涉及冷却的适合反应条件下进行酰氯III与具有通式IV的一种经取代的吲哚的弗里德尔-克拉夫茨(Friedel-Crafts)反应以提供具有通式V的3-酰化吲哚。在具有通式V的化合物的羰基部分的α位置中引入一个苯胺部分可以通过一个反应顺序来完成，该反应顺序涉及例如在一种适合的溶剂(例如像THF)中用一种试剂(例如像苯基三甲基三溴化铵)溴化V以提供具有通式VI的化合物，以及具有通式VI的化合物与3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺(VII)在一种适合的溶剂(例如像CH3CN)中的随后反应，并且典型地使用一种碱(例如像TEA或DIPEA)以提供作为外消旋混合物的具有通式I的化合物。具有通式I的化合物的手性分离可以通过例如手性层析来进行以提供具有通式I的对映异构体A和B。
Figure BDA0001350636490000091
方案1
在一些情况下，具有通式V的中间体经由弗里德尔-克拉夫茨合成途径的合成受益于在弗里德尔-克拉夫茨反应步骤期间在吲哚-N处的一种保护基(PG)的存在，如在方案2中所概述。为此，具有通式IV的经取代的吲哚可以使用一种试剂例如像甲苯磺酰氯在一种碱例如像氢化钠的存在下首先转化为具有通式VIII的N-保护的中间体，例如像具有通式VIII的N-甲苯磺酰化的中间体(PG＝Ts)。可以使用一种路易斯酸试剂(例如像Et2AlCl或TiCl4)在一种适合的溶剂例如像CH2Cl2或1,2-二氯乙烷中并且在典型地(但不排他地)涉及冷却的适合反应条件下进行具有通式IV的经取代的吲哚与酰氯III的弗里德尔-克拉夫茨反应以提供具有通式IX的3-酰化N-保护的吲哚。具有通式IX的中间体的吲哚-N保护基PG的除去可以用一种试剂例如像LiOH(用于PG＝Ts)在一种溶剂混合物(例如像THF/水)中在适合的反应温度下来完成，以提供具有通式V的3-酰化吲哚。
Figure BDA0001350636490000101
方案2
实例
LC/MS方法
使用一个LC泵、一个二极管阵列(DAD)或一个UV检测器以及如在对应的方法中所指定的一个柱进行高效液相层析(HPLC)测量。如果必要的话，包括另外的检测器(参见以下的方法表格)。
将来自柱的流带至配置有一个大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴别化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。使用适当的软件进行数据采集。
通过其实验保留时间(Rt)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么所报道的分子离子对应于[M+H]+(质子化的分子)和/或[M-H]-(去质子的分子)。在该化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物的类型(即[M+NH4]+、[M+HCOO]-等)。对于具有多种同位素模式的分子(Br、Cl)来说，所报道的值是针对最低同位素质量获得的值。获得的所有结果具有通常与所使用的方法相关的实验不确定性。
下文中，“SQD”意指单四极检测器，“MSD”质量选择性检测器，“RT”室温，“BEH”桥连乙基硅氧烷/二氧化硅杂化体，“DAD”二极管阵列检测器，“HSS”高强度二氧化硅。
LCMS方法代码(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间)。
Figure BDA0001350636490000102
Figure BDA0001350636490000111
Figure BDA0001350636490000121
SFC-MS方法
使用一种分析型超临界流体层析(SFC)系统来进行SFC测量，该系统由以下构成：用于递送二氧化碳(CO2)和改性剂的一个二元泵、一个自动进样器、一个柱烘箱、配备有一个经得起400巴的高压流动池的一个二极管阵列检测器。如果配置有一个质谱仪(MS)，来自该柱的流被引至该(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴别化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。使用适当的软件进行数据采集。
分析型SFC-MS方法(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间，以巴表示背压(BPR))。
Figure BDA0001350636490000122
Figure BDA0001350636490000131
Figure BDA0001350636490000141
熔点
值是峰值抑或熔融范围，并且所获得的值具有通常与这种分析方法相关的实验不确定性。
DSC823e(指示为DSC)
对于多种化合物，熔点是用DSC823e(梅特勒-托利多(Mettler-Toledo))来确定的。使用10℃/分钟的一个温度梯度来测量熔点。最高温度是300℃。
旋光度：
在具有钠灯的铂金-埃尔默(Perkin-Elmer)341旋光计上测量旋光度并且记录如下：[α]°(λ,c g/100ml，溶剂，T℃)。
[α]λ T＝(100α)/(lx c)：其中l是以dm计的路径长度并且c是针对在温度T(℃)和波长λ(以nm计)下的样品的以g/100ml计的浓度。如果使用的光波长是589nm(钠D线)，那么可以改为使用符号D。始终应给出旋转符号(+或-)。当使用这一等式时，常常在旋转后的括号中提供浓度和溶剂。使用度报道旋转并且浓度不带单位的给出(将其假定为g/100ml)。
实例1：1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物1)的合成以及手性分离成对映异构体1A和1B。
Figure BDA0001350636490000151
中间体1a的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酸[CAS 886498-61-9](28.9g，157mmol)以小部分添加至亚硫酰氯(150mL)并且将所得溶液在室温下搅拌过夜。将溶剂在减压下浓缩并且与甲苯共蒸发以给出呈一种油状残余物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(31.8g)，其不经进一步纯化用于下一步骤。
中间体1b的合成：
将6-氟-1H-吲哚[CAS 399-51-9](14.2g，105mmol)于CH2Cl2(400mL)中的溶液在N2-气氛下冷却至0℃。将二乙基氯化铝1M于己烷(160mL，160mmol)中的溶液在10min时间内添加至该搅拌溶液并且将所得混合物保持在0℃下持续40min。然后，在2.5h时间内逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(31.8g，157mmol)于CH2Cl2(300mL)中的溶液，同时将反应混合物的内部温度保持在5℃以下。将搅拌反应混合物的温度维持在0℃下持续3.5h。除去冰浴并且在室温下搅拌2.5h之后，将反应混合物再次冷却至0℃并且将反应通过缓慢添加四水合酒石酸钾钠[CAS 6100-16-9](59.6g，210mmol)于水(70mL)中的溶液来淬灭，同时将混合物的内部温度保持在10℃以下。在0℃下搅拌另外30min之后，除去冰浴并且用THF(1L)稀释所得混合物。添加Na2SO4(150g)并且在搅拌过夜之后，将混合物经
Figure BDA0001350636490000161
过滤。将滤饼用THF(2x1L)洗涤两次。将合并的滤液在减压下蒸发至大约50mL的残余体积。将白色沉淀物滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮1b(22.3g)。
化合物1的合成以及对映异构体1A和1B的手性分离：
将1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮1b(11.0g，36.3mmol)于THF(300mL)中的搅拌溶液在N2-气氛下冷却至0℃。在45min时间内逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](14.3g，38.2mmol)于THF(100mL)中的溶液。将所得悬浮液在室温下搅拌4h并且在减压下蒸发至白色残余物。将含有粗2-溴-1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮1c的此残余物溶解于乙腈(300mL)中。在添加3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](14.8g，73mmol)和二异丙基乙胺(13mL，75mmol)之后，将该混合物在50℃下搅拌两天–直到完全转化成化合物1。将该反应混合物在减压下浓缩，将残余物与水(500mL)混合，并且将产物用2-甲基-THF(2x500mL)进行萃取。将合并的有机层用0.5N HCl(800mL)、饱和NaHCO3水溶液(200mL)和盐水(200mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物从EtOAc(50mL)中结晶。将固体滤出并且在真空下在50℃下干燥以给出作为外消旋混合物的1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)-氨基)乙酮(化合物1，9.9g)。
经由正相手性层析(固定相：AS 20μm(1kg)，流动相：100％MeOH)进行化合物1(9.67g)的对映异构体的手性分离。合并含有第一洗脱的对映异构体的产物级分，并且在减压(水浴38℃)下蒸发至30mL的残余体积。将所得悬浮液过滤，并且将固体用小部分的MeOH洗涤并且在真空下在40℃下干燥，以提供呈白色固体的对映异构体1A(2.9g)。将合并的第二洗脱产物的产物级分在减压(水浴37℃)下蒸发至90mL的残余体积。将固体滤出，用小部分的MeOH洗涤并且在真空下在40℃下干燥，以提供对映异构体1B(3.15g)。
化合物1：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.73(s,3H)3.99(s,3H)6.23(d,J＝7.75Hz,1H)6.56-6.62(m,2H)6.74(td,J＝8.48,2.48Hz,1H)6.91(t,J＝1.46Hz,1H)6.96(dd,J＝11.35,2.50Hz,1H)7.02-7.11(m,2H)7.28(dd,J＝9.62,2.38Hz,1H)7.37(dd,J＝8.61,6.83Hz,1H)8.15(dd,J＝8.76,5.59Hz,1H)8.44(s,1H)12.09(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.08min，MH+501
对映异构体1A：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.23(d,J＝7.78Hz,1H)6.58-6.59(m,1H)6.59-6.60(m,1H)6.73(td,J＝8.44,2.49Hz,1H)6.92(t,J＝1.61Hz,1H)6.96(dd,J＝11.30,2.49Hz,1H)7.04(d,J＝7.80Hz,1H)7.06(ddd,J＝9.68,8.80,2.35Hz,1H)7.27(dd,J＝9.61,2.27Hz,1H)7.37(dd,J＝8.66,6.90Hz,1H)8.15(dd,J＝8.80,5.58Hz,1H)8.43(s,1H)12.09(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.08min，MH+501
[α]D 20：+131.7°(c 0.48，DMF)
手性SFC(方法SFC-K)：Rt 2.22min，MH+501，手性纯度100％。
熔点：241℃
对映异构体1B：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.23(d,J＝7.77Hz,1H)6.56-6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.48,2.46Hz,1H)6.91(t,J＝1.83Hz,1H)6.96(dd,J＝11.36,2.49Hz,1H)7.01-7.12(m,2H)7.27(dd,J＝9.62,2.38Hz,1H)7.36(dd,J＝8.62,6.85Hz,1H)8.15(dd,J＝8.77,5.59Hz,1H)8.44(s,1H)12.07(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.07min，MH+501
[α]D 20：-127.7°(c 0.535，DMF)
手性SFC(方法SFC-K)：Rt 3.68min，MH+501，手性纯度100％。
熔点：249℃
实例2：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物2)的合成以及手性分离成对映异构体2A和2B。
Figure BDA0001350636490000171
中间体2a的合成：
将6-氟-7-甲基-1H-吲哚[CAS 57817-10-4](5.41g，36.2mmol)于CH2Cl2(100mL)中的搅拌溶液在N2-气氛下在冰上冷却。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(54.4mL，54.4mmol)中的溶液。在0℃下15min之后，逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酰氯1a(11.0g，54.4mmol，关于合成：参见实例1)于CH2Cl2(30mL)中的溶液，同时将内部温度保持在5℃以下。除去冰浴，并且将所得悬浮液在室温下搅拌4h。将反应混合物缓慢倒入冷却的(0℃)饱和NaHCO3水溶液中。将混合物经
Figure BDA0001350636490000181
过滤并且用THF洗涤滤饼。将合并的滤液用EtOAc萃取，经MgSO4干燥，并且在减压下蒸发。将残余物用CH2Cl2研磨并且滤出固体以给出呈白色粉末的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮2a(7.47g)。
中间体2b的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮2a(7.43g，23.56mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液在N2-气氛下在0℃下冷却。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](8.96g，23.8mmol)于THF(100mL)中的溶液。添加之后，将反应混合物在室温下搅拌2h。过滤悬浮液以除去固体并且在减压下蒸发滤液。将残余物用CH2Cl2研磨，滤出固体且在真空下干燥以提供2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮2b(8.95g)。
化合物2的合成以及对映异构体2A和2B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮2b(3.07g，7.8mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](1.63g，8.11mmol)和二异丙基乙胺(1.35mL，7.83mmol)在CH3CN(100mL)中混合并且将混合物在回流下加热3h。在冷却至室温之后，在减压下蒸发溶剂并且将残余物通过二氧化硅柱层析(固定相：HP-Spher 25μM(340g)，流动相：庚烷/EtOAc梯度100/0至0/100)来纯化。将产物级分在减压下蒸发。将一小等分试样的油状残余物通过用CH2Cl2研磨来固化。将固体通过过滤分离，用CH2Cl2洗涤并且在真空下干燥，以提供作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物2，250mg)。
经由制备型SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000182
Diacel OJ 30x250mm；流动相：CO2，具有0.2％iPrNH2的MeOH)来进行化合物2(787g)的对映异构体的手性分离，并且将产物级分合并并且在减压下蒸发。将第一洗脱对映异构体通过柱层析(固定相：HP-Spher 25μM(10g)，流动相：庚烷/EtOAc梯度100/0至0/100)来进一步纯化。从CH3CN和水的混合物中蒸发产物级分并且冻干油状残余物提供了呈无定形粉末的对映异构体2A(91mg)。将第二洗脱对映异构体通过柱层析(固定相：HP-Spher 25μM(10g)，流动相：庚烷/EtOAc梯度100/0至0/100)来进一步纯化。从CH3CN和水的混合物中蒸发产物级分并且冻干油状残余物提供了呈无定形粉末的对映异构体2B(141mg)。
化合物2：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm2.38(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.25(d,J＝7.69Hz,1H)6.59(d,J＝10.28Hz,2H)6.73(t,J＝8.32Hz,1H)6.88-7.10(m,4H)7.36(t,J＝7.68Hz,1H)7.97(dd,J＝8.00,6.07Hz,1H)8.45(s,1H)12.23(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.11min，MH+515
对映异构体2A：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 2.38(d,J＝1.57Hz,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.25(d,J＝7.74Hz,1H)6.56-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.49,2.49Hz,1H)6.90-7.07(m,4H)7.36(dd,J＝8.62,6.83Hz,1H)7.97(dd,J＝8.71,5.21Hz,1H)8.45(s,1H)12.22(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.06min，MH+515
[α]D 20：+110.6°(c 0.5，DMF)
手性SFC(方法SFC-L)：Rt 2.86min，MH+515，手性纯度100％。
对映异构体2B：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 2.38(d,J＝1.59Hz,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.25(d,J＝7.73Hz,1H)6.56-6.59(m,1H)6.59-6.62(m,1H)6.73(td,J＝8.47,2.46Hz,1H)6.87-7.10(m,4H)7.36(dd,J＝8.60,6.83Hz,1H)7.97(dd,J＝8.68,5.23Hz,1H)8.45(s,1H)12.22(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.07min，MH+515
[α]D 20：-104.1°(c 0.538，DMF)
手性SFC(方法SFC-L)：Rt 3.38min，MH+515，手性纯度100％。
实例3：1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物3)的合成以及手性分离成对映异构体3A和3B。
Figure BDA0001350636490000201
中间体3a的合成：
在N2-流下将6-氯-7-甲基-1H-吲哚[CAS 57817-09-1](3.2g，19.3mmol)于CH2Cl2(150mL)中的搅拌溶液在冰-NaCl冷却浴上冷却。在2min时间内添加于己烷(29mL，29mmol)中的二乙基氯化铝1M并且将冷却的溶液在-10℃下搅拌30min。在30min内逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(5.48g，27.1mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(30mL)中的溶液，同时将内部温度保持在-10℃以下并且将所得混合物在-10℃下搅拌另外2h。通过缓慢添加四水合酒石酸钾钠[CAS 6100-16-9](10.9g，38.6mmol)于水(10mL)中的溶液来淬灭反应并且将混合物在室温下搅拌15min。白色沉淀物存在于该反应混合物中。将沉淀物通过过滤分离，用水洗涤且在真空下干燥以提供呈灰白色固体的1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮3a(4200mg)。
中间体3b的合成：
将1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮3a(2000mg，6.03mmol)于THF(120mL)中的溶液在N2-气氛下在室温下搅拌。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](2.38g，6.33mmol)于THF(35mL)中的溶液并且将该混合物在室温下搅拌另外90min。滤出沉淀物并且在真空下浓缩滤液以提供呈灰白色粉末的2-溴-1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮3b(2200mg)。
化合物3的合成以及对映异构体3A和3B的手性分离：
将2-溴-1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮3b(1.29g，3.15mmol)悬浮于CH3CN(60mL)中。添加3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS62606-02-4](0.7g，3.46mmol)和二异丙基乙胺(1.2mL，6.9mmol)并且将搅拌混合物在65℃下加热4h。将该混合物在真空下浓缩并且将残余物分配在EtOAc与水之间。分离有机层，经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过柱层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000211
二氧化硅(330g)，流动相：EtOAc/庚烷梯度50/50至100/0)并且随后通过制备型HPLC(固定相：Uptisphere C18 ODB-10μm，200g，5cm；流动相：于水中的0.25％NH4HCO3溶液，CH3CN)进行纯化以给出作为外消旋混合物的1-(6-氯-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物3，725mg)。
使用正相手性分离(固定相：AS 5μm，流动相：100％MeOH，等度洗脱，检测波长308nm，流量1mL/min)进行化合物3(635mg)的对映异构体的手性分离。合并产物级分且蒸发以提供作为第一洗脱产物的对映异构体3A(223mg)和作为第二洗脱产物的对映异构体3B(247mg)。对映异构体3A和3B两者均作为无定形粉末出现。
化合物3：
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 2.49(s,3H)2.94(s,3H)3.77(s,3H)4.12(s,3H)6.03(d,J＝6.31Hz,1H)6.18(d,J＝6.27Hz,1H)6.42(t,J＝2.20Hz,1H)6.57(td,J＝8.36,2.42Hz,1H)6.64(dd,J＝10.56,2.42Hz,1H)6.70(dd,J＝2.21,1.51Hz,1H)6.84(t,J＝1.76Hz,1H)7.24-7.30(m,1H)7.28(d,J＝8.58Hz,1H)8.15(d,J＝8.61Hz,1H)8.17(d,J＝3.07Hz,1H)8.70(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.16min，MH+531
对映异构体3A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm2.50(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.26(d,J＝7.68Hz,1H)6.57-6.59(m,1H)6.60-6.63(m,1H)6.73(td,J＝8.48,2.50Hz,1H)6.90-6.93(m,1H)6.96(dd,J＝11.37,2.55Hz,1H)7.02(d,J＝7.71Hz,1H)7.22(d,J＝8.53Hz,1H)7.36(dd,J＝8.62,6.82Hz,1H)7.99(d,J＝8.50Hz,1H)8.45(s,1H)12.25(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.18min，MH+531
[α]D 20：+111.1°(c 0.515，DMF)
手性SFC(方法SFC-M)：Rt 2.07min，MH+531，手性纯度100％。
对映异构体3B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm2.50(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.26(d,J＝7.70Hz,1H)6.56-6.59(m,1H)6.60-6.62(m,1H)6.73(td,J＝8.48,2.51Hz,1H)6.91-6.93(m,1H)6.96(dd,J＝11.33,2.53Hz,1H)7.02(d,J＝7.72Hz,1H)7.22(d,J＝8.54Hz,1H)7.36(dd,J＝8.62,6.82Hz,1H)7.99(d,J＝8.50Hz,1H)8.45(s,1H)12.25(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.18min，MH+531
[α]D 20：-100.7°(c 0.55，DMF)
手性SFC(方法SFC-M)：Rt 2.45min，MH+531，手性纯度100％。
实例4：1-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物4)的合成以及手性分离成对映异构体4A和4B。
Figure BDA0001350636490000221
中间体4a的合成：
在N2-流下将6-氯-1H-吲哚[CAS 17422-33-2](2.23g，14.7mmol)于CH2Cl2(125mL)中的搅拌溶液使用冰浴冷却至0℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(22.1mL，22.1mmol)中的溶液并且将混合物在0℃下搅拌10min。然后，在50min时间内逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(4.47g，22.1mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(30mL)中的溶液并且将所得混合物保持在0℃下持续1h且随后在10℃下搅拌1h。再次冷却至0℃之后，通过缓慢添加四水合酒石酸钾钠[CAS 6100-16-9](8.31g，29.4mmol)于水(9mL)中的溶液来淬灭反应并且允许将混合物在1h内加温至室温。将反应混合物通过添加2-甲基-THF(150mL)稀释并且在室温下搅拌30min。添加Na2SO4(30g)并且在搅拌30min之后，将混合物经
Figure BDA0001350636490000222
过滤。将滤饼用2-甲基-THF洗涤几次并且将合并的滤液在真空下浓缩至25mL的残余体积。在静置2h之后，形成一种沉淀物并且将沉淀物滤出且在真空下干燥以提供1-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮4a(2.85g)。
化合物4的合成以及对映异构体4A和4B的手性分离：
将1-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮4a(0.8g，2.52mmol)于THF(40mL)中的溶液在N2-流下搅拌且在冰浴上冷却。分部分地添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](0.99g，2.64mmol)并且将混合物在0℃下搅拌1h，并且随后在室温下搅拌1h。将固体通过过滤从该反应混合物中除去。将包含粗2-溴-1-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮4b的滤液与3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](0.56g，2.77mmol)和二异丙基乙胺(1.3mL，7.55mmol)混合，并且将溶剂在减压下蒸发。将残余物用CH3CN(50mL)吸收并且在回流下加热18h。在冷却至室温之后，将该反应混合物倒入水(250mL)中。将产物用2-甲基-THF(2x)进行萃取，并且将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物在EtOAc(7.5mL)中搅拌并且将固体滤出。将滤液在减压下蒸发，并且将残余物通过二氧化硅快速层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000231
二氧化硅40g，流动相：庚烷/EtOAc梯度100/0至0/100)来纯化。将包含产物的级分合并且蒸发，并且将残余物经由制备型HPLC(固定相：Uptisphere C18 ODB-10μm，200g，5cm；流动相：于水中的0.25％NH4HCO3溶液，CH3CN)进一步纯化。将产物级分合并并且在减压下蒸发，并且将残余物与MeOH共蒸发。将固体残余物在Et2O(7.5mL)中搅拌，滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供外消旋的1-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物4，352mg)。
经由正相手性分离(固定相：AS 500g 20μm，流动相：100％MeOH)进行化合物4(352mg)的对映异构体的手性分离。将产物级分合并且在减压下蒸发。将第一洗脱产物在CH2Cl2(5mL)中搅拌，滤出并且在真空下在40℃下干燥以提供对映异构体4A(56mg)。将第二洗脱产物在CH2Cl2(3.5mL)中搅拌，滤出并且在真空下在40℃下干燥以提供对映异构体4B(68mg)。
化合物4：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.73(s,3H)3.99(s,3H)6.24(d,J＝7.9Hz,1H)6.59(s,2H)6.74(td,J＝8.4,2.2Hz,1H)6.92(s,1H)6.97(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)7.06(d,J＝7.9Hz,1H)7.23(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H)7.37(dd,J＝8.4,7.1Hz,1H)7.54(d,J＝1.6Hz,1H)8.15(d,J＝8.5Hz,1H)8.47(s,1H)11.82-12.42(bs,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.12min，MH+517
对映异构体4A：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.22(d,J＝7.75Hz,1H)6.56-6.60(m,2H)6.73(td,J＝8.45,2.51Hz,1H)6.91(t,J＝1.83Hz,1H)6.96(dd,J＝11.38,2.51Hz,1H)7.06(d,J＝7.73Hz,1H)7.20(dd,J＝8.49,1.96Hz,1H)7.36(dd,J＝8.66,6.83Hz,1H)7.52(d,J＝1.94Hz,1H)8.13(d,J＝8.49Hz,1H)8.45(s,1H)12.24(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.15min，MH+517
[α]D 20：+129.9°(c 0.525，DMF)
手性SFC(方法SFC-N)：Rt 2.77min，MH+517，手性纯度100％。
熔点：245℃
对映异构体4B：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.98(s,3H)6.22(d,J＝7.75Hz,1H)6.56-6.60(m,2H)6.73(td,J＝8.49,2.47Hz,1H)6.91(t,J＝1.65Hz,1H)6.96(dd,J＝11.35,2.48Hz,1H)7.06(d,J＝7.79Hz,1H)7.20(dd,J＝8.51,1.93Hz,1H)7.36(dd,J＝8.63,6.84Hz,1H)7.52(d,J＝1.92Hz,1H)8.13(d,J＝8.51Hz,1H)8.45(s,1H)12.10(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.15min，MH+517
[α]D 20：-123.3°(c 0.544，DMF)
手性SFC(方法SFC-N)：Rt 3.52min，MH+517，手性纯度100％。
熔点：247℃
实例5：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物5)的合成以及手性分离成对映异构体5A和5B。
Figure BDA0001350636490000241
中间体5a的合成：
在N2-流下将6-甲氧基-1H-吲哚[CAS 3189-13-7](2.54g，17.3mmol)于CH2Cl2(100mL)中的搅拌溶液使用低温恒温器控制的丙酮冷却浴冷却至-22℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(25.9mL，25.9mmol)中的溶液并且将混合物在-22℃下搅拌22min。然后，在90min时间内逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(5.24g，25.9mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(60mL)中的溶液，同时将内部温度保持在-20℃以下并且将所得混合物保持在-20℃下持续2.5h。通过缓慢添加四水合酒石酸钾钠[CAS 6100-16-9](9.74g，34.5mmol)于水(10mL)中的溶液来淬灭反应并且将混合物在-20℃下搅拌30min并且随后在室温下搅拌1h。将反应混合物通过添加THF(300mL)稀释并且在室温下搅拌1h。添加Na2SO4(32g)并且在搅拌18h之后，将混合物经
Figure BDA0001350636490000242
过滤。将滤饼用THF洗涤几次并且将合并的滤液在真空下浓缩至7.5mL的残余体积。在静置4h之后，形成一种沉淀物并且将沉淀物滤出且在真空下在50℃下干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-1-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酮5a(2.21g)。
化合物5的合成以及对映异构体5A和5B的手性分离：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酮5a(2.2g，7.02mmol)于THF(150mL)中的溶液在N2-流下搅拌并且在冰浴上冷却。分部分地添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](2.77g，7.37mmol)并且将混合物在0℃下搅拌1h，并且随后在室温下搅拌2h。添加3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](4.24g，21.1mmol)并且将大约125mL溶剂在减压下蒸发。添加CH3CN(50mL)，并且将反应混合物在室温下搅拌5天并且随后在50℃下搅拌2天。在冷却至室温之后，将该反应混合物倒入水(200mL)中。将产物用2-甲基-THF(2x)进行萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过二氧化硅快速层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000251
二氧化硅120g，流动相：庚烷/EtOAc梯度100/0至0/100)来纯化。将含有产物的级分合并，并且用1N HCl(100mL)、NaHCO3的水性饱和溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物从CH2Cl2(10mL)和二异丙基醚(15mL)的混合物中结晶，滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供外消旋的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物5，2.25g)。将一小等分试样的化合物5(150mg)通过在MeOH(4mL)中搅拌2h来进一步纯化。将固体滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供外消旋的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物5，112mg)。
经由正相手性分离(固定相：(S,S)-Whelk-O 1，流动相：100％EtOH)进行化合物5(2.1mg)的对映异构体的手性分离。将产物级分合并且蒸发。将第一洗脱产物在MeOH(6mL)中搅拌，滤出并且在真空下在40℃下干燥以提供对映异构体5A(825mg)。将第二洗脱产物在MeOH(5mL)中搅拌，滤出并且在真空下在40℃下干燥以提供对映异构体5B(784mg)。
化合物5：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.76(s,3H)4.00(s,3H)6.19(d,J＝7.66Hz,1H)6.55-6.61(m,2H)6.72(td,J＝8.47,2.49Hz,1H)6.83(dd,J＝8.71,2.30Hz,1H)6.90(t,J＝1.65Hz,1H)6.92-6.98(m,2H)7.00(d,J＝7.69Hz,1H)7.36(dd,J＝8.60,6.85Hz,1H)8.02(d,J＝8.71Hz,1H)8.29(s,1H)11.85(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.01min，MH+513
对映异构体5A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.77(s,3H)4.00(s,3H)6.20(d,J＝7.68Hz,1H)6.56-6.61(m,2H)6.72(td,J＝8.48,2.48Hz,1H)6.83(dd,J＝8.72,2.30Hz,1H)6.91(t,J＝1.65Hz,1H)6.92-6.98(m,2H)7.01(d,J＝7.70Hz,1H)7.36(dd,J＝8.61,6.85Hz,1H)8.02(d,J＝8.71Hz,1H)8.30(s,1H)11.76(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.04min，MH+513
[α]D 20：-127.5°(c 0.6，DMF)
手性SFC(方法SFC-I)：Rt 3.01min，MH+513，手性纯度100％。
熔点：190℃
对映异构体5B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.77(s,3H)4.00(s,3H)6.20(d,J＝7.67Hz,1H)6.55-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.48,2.49Hz,1H)6.83(dd,J＝8.72,2.30Hz,1H)6.91(t,J＝1.65Hz,1H)6.93-6.98(m,2H)7.01(d,J＝7.68Hz,1H)7.37(dd,J＝8.61,6.84Hz,1H)8.03(d,J＝8.71Hz,1H)8.30(s,1H)11.82(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.04min，MH+513
[α]D 20：+125.3°(c 0.455，DMF)
手性SFC(方法SFC-I)：Rt 2.51min，MH+513，手性纯度100％。
熔点：204℃
实例6：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物6)以及手性分离成对映异构体6A和6B。
Figure BDA0001350636490000261
中间体6a的合成：
在N2-流下将7-氟-5-甲基-1H-吲哚[CAS 442910-91-0](2.54g，17.0mmol)于CH2Cl2(150mL)中的搅拌溶液使用冰浴冷却至0℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(25.6mL，25.6mmol)中的溶液并且将混合物在0℃下搅拌30min。然后，逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(5.18g，25.6mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(150mL)中的溶液并且将所得混合物在0℃下搅拌1h并且随后在室温下搅拌3h。将该反应倒入包含过量四水合酒石酸钾钠[CAS 6100-16-9]的冰水中。将混合物经
Figure BDA0001350636490000262
过滤并且将滤饼用THF洗涤几次。将有机层分离，用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物悬浮于CH2Cl2(20mL)中。将固体滤出，用少量CH2Cl2/庚烷(1/1)的混合物洗涤，并且在真空下在50℃下干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮6a(4.13g)。
中间体6b的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮6a(4.11g，13.0mmol)于THF(100mL)中的溶液在N2-流下搅拌并且在冰浴上冷却。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](5.39g，14.3mmol)于THF(150mL)中的溶液并且将该混合物在室温下搅拌1h。将固体通过过滤除去，用THF洗涤并且将合并的滤液在减压下蒸发。将残余物用少量CH2Cl2研磨，将固体通过过滤分离并且在真空下干燥以提供呈白色粉末的2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮6b(4.81g)。
化合物6的合成以及对映异构体6A和6B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮6b(1.02g，2.59mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](782mg，3.89mmol)和二异丙基乙胺(670μL，3.89mmol)于CH3CN(25mL)中的溶液在室温下搅拌4天，并且随后将该混合物在70℃下加热10h。在冷却至室温之后，将溶剂在减压下蒸发。将残余物用CH2Cl2吸收，用0.5N HCl和水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过二氧化硅柱层析(固定相：
Figure BDA0001350636490000271
SNAP Ultra 100g，流动相：EtOAc:EtOH(3:1)/庚烷梯度0/100至50/50)来纯化。合并含有产物的级分并且在减压下蒸发以提供呈白色固体的外消旋的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(7-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物6，747mg)。
经由制备型SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000272
Diacel AD 20x250mm，流动相：CO2，具有0.2％iPrNH2的EtOH)进行化合物6(747mg)的对映异构体的手性分离。将产物级分合并，在减压下蒸发并且在真空下在50℃下干燥。该第一洗脱产物提供了呈白色无定形固体的对映异构体6A(275mg)。该第二洗脱产物提供了呈白色无定形粉末的对映异构体6B(259mg)。
化合物6：
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.13min，MH+515
对映异构体6A：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm2.39(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.24(d,J＝7.78Hz,1H)6.55-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.48,2.49Hz,1H)6.88-6.99(m,3H)7.01(d,J＝7.80Hz,1H)7.35(dd,J＝8.61,6.83Hz,1H)7.79(s,1H)8.40(s,1H)12.49(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.04min，MH+515
[α]D 20：+134.0°(c 0.332，DMF)
手性SFC(方法SFC-O)：Rt 2.24min，MH+515，手性纯度100％。
对映异构体6B：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm2.39(s,3H)3.10(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.25(d,J＝7.79Hz,1H)6.57-6.61(m,2H)6.74(td,J＝8.48,2.48Hz,1H)6.89-6.99(m,3H)7.02(d,J＝7.80Hz,1H)7.36(dd,J＝8.62,6.83Hz,1H)7.79(s,1H)8.41(s,1H)12.47(br.s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.04min，MH+515
[α]D 20：-129.2°(c 0.288，DMF)
手性SFC(方法SFC-O)：Rt 3.40min，MH+515，手性纯度100％。
实例7：1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物7)的合成以及手性分离成对映异构体7A和7B。
Figure BDA0001350636490000281
中间体7a的合成：
在0℃下将二乙基氯化铝1M于己烷(19.9mL，19.9mmol)中的溶液逐滴添加至5,6-二氟-1H-吲哚[CAS 169674-01-5](2.0g，13.1mmol)于CH2Cl2(24mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，缓慢添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(4.0g，19.6mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(24mL)中的溶液。将反应在0℃下搅拌3h。添加1N罗谢尔盐溶液(50mL)并且将反应混合物在室温下剧烈搅拌1h。将沉淀物滤出并且分配在EtOAc与1N HCl之间。用EtOAc萃取水相。将有机相合并，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩，以给出1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮7a(4.0g)。
中间体7b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](1.9g，2.37mmol)于THF(30mL)中的溶液逐滴添加至1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮7a(1.5g，4.70mmol)于THF(50mL)中的溶液中。将混合物在0℃下搅拌15min，并且在室温下搅拌过夜。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物用最少的乙腈吸收。将沉淀物滤出以给出2-溴-1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮7b(1.9g)。
化合物7的合成以及对映异构体7A和7B的手性分离：
将2-溴-1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮7b(0.800g，2.01mmol)和3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](1.2g，6.03mmol)于乙腈(8mL)中的混合物在微波烘箱中在100℃下辐照10min。将该反应混合物用EtOAc稀释并且用1N HCl洗涤。将有机相用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物从乙腈中结晶以提供作为外消旋混合物的1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物7，640mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000291
IA 5μm 250x20mm，流动相：70％CO2，30％MeOH)进行化合物7(596mg)的对映异构体的手性分离，从而产生250mg的第一洗脱对映异构体和250mg的第二洗脱对映异构体。将第一洗脱对映异构体通过用Et2O研磨来固化以提供呈无定形粉末的对映异构体7A(194mg)。将第二洗脱对映异构体通过用Et2O研磨来固化以提供呈无定形粉末的对映异构体7B(212mg)。
化合物7：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.23(d,J＝7.8Hz,1H)6.57-6.61(m,2H)6.74(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.91(s,1H)6.96(dd,J＝11.4,2.5Hz,1H)7.06(d,J＝7.9Hz,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.9Hz,1H)7.54(dd,J＝10.8,7.0Hz,1H)8.01(dd,J＝11.2,8.1Hz,1H)8.48(s,1H)12.19(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-D)：Rt 3.3min，MH+519
对映异构体7A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.22(d,J＝7.9Hz,1H)6.55-6.60(m,2H)6.74(td,J＝8.4,2.4Hz,1H)6.88-6.92(m,1H)6.95(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.36(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H)7.53(dd,J＝10.7,6.9Hz,1H)8.00(dd,J＝11.2,8.0Hz,1H)8.47(s,1H)12.18(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.00min，MH+519
[α]D 20：+103.9°(c 0.282，DMF)
手性SFC(方法SFC-G)：Rt 3.16min，MH+519，手性纯度100％。
对映异构体7B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.22(d,J＝7.9Hz,1H)6.55-6.61(m,2H)6.74(td,J＝8.4,2.4Hz,1H)6.91(s,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.4Hz,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.36(dd,J＝8.5,6.9Hz,1H)7.53(dd,J＝10.7,6.9Hz,1H)8.00(dd,J＝11.0,8.2Hz,1H)8.47(s,1H)12.18(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.00min，MH+519
[α]D 20：-109.2°(c 0.285，DMF)
手性SFC(方法SFC-G)：Rt 3.92min，MH+519，手性纯度99.17％。
实例8：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物8)的合成以及手性分离成对映异构体8A和8B。
Figure BDA0001350636490000301
中间体8a的合成：
在0℃下将于己烷(22mL，22mmol)中的二乙基氯化铝1M逐滴添加至5-氟-7-甲基-1H-吲哚[CAS 1082041-52-8](1.62g，10.9mmol)于CH2Cl2(45mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，在0℃下缓慢添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(3.3g，16.3mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(30mL)中的溶液。将反应在0℃下搅拌3h。添加罗谢尔盐溶液(1N，75mL)，并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。将沉淀物滤出并且分配在EtOAc与1N HCl之间。将有机相用1N HCl和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物用最少的EtOAc吸收。将沉淀物滤出以给出2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮8a(2.4g)。
中间体8b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](2.2g，5.85mmol)于THF(60mL)中的溶液逐滴添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮8a(1.66g，5.26mmol)于THF(45mL)中的溶液中。将混合物在0℃下搅拌1h，并且在室温下搅拌过夜。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩以给出2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮8b(1.9g)。
化合物8的合成以及对映异构体8A和8B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮8b(0.100g，0.254mmol)和3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](0.155g，0.770mmol)于乙腈(1mL)中的混合物在微波烘箱中在100℃下辐照10min。将该反应混合物用EtOAc稀释并且用1N HCl洗涤。将有机相用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将该残余物从EtOAc和庚烷中结晶以提供作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-7-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物8，95mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：Chiralpak IC 5μm 250x30mm，流动相：60％CO2，40％iPrOH)进行化合物8(491mg)的对映异构体的手性分离，从而产生224mg的第一洗脱对映异构体和212mg的第二洗脱对映异构体。将第一洗脱对映异构体从Et2O和几滴CH3CN中结晶以提供呈白色粉末的对映异构体8A(174mg)。将第二洗脱对映异构体从Et2O和几滴CH3CN中结晶以提供呈白色粉末的对映异构体8B(164mg)。
化合物8：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm2.47(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.24(d,J＝7.7Hz,1H)6.55-6.64(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.4Hz,1H)6.87-6.98(m,3H)7.04(d,J＝7.7Hz,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)7.66(dd,J＝9.7,2.5Hz,1H)8.46(s,1H)12.23(br.s.,1H)
LC-MS(方法LC-E)：Rt 8.5min，MH+515
对映异构体8A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.47(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.24(d,J＝7.9Hz,1H)6.53-6.65(m,2H)6.73(td,J＝8.8,2.4Hz,1H)6.88-6.99(m,3H)7.05(d,J＝7.9Hz,1H)7.36(dd,J＝8.8,6.9Hz,1H)7.66(dd,J＝9.6,2.4Hz,1H)8.46(s,1H)12.24(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.07min，MH+515
[α]D 20：+101.1°(c 0.282，DMF)
手性SFC(方法SFC-B)：Rt 3.31min，MH+515，手性纯度100％。
熔点：208℃
对映异构体8B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.47(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.24(d,J＝7.9Hz,1H)6.54-6.63(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.87-6.98(m,3H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.35(dd,J＝8.5,6.9Hz,1H)7.66(dd,J＝9.6,2.4Hz,1H)8.46(s,1H)12.24(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.07min，MH+515
[α]D 20：-105.3°(c 0.264，DMF)
手性SFC(方法SFC-B)：Rt4.39min，MH+515，手性纯度99.67％。
熔点：208℃
实例9：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物9)的合成以及手性分离成对映异构体9A和9B。
Figure BDA0001350636490000321
中间体9a的合成：
在-15℃下将二乙基氯化铝1M于己烷(13.5mL，13.5mmol)中的溶液逐滴添加至5-氟-6-甲基-1H-吲哚[CAS 1000343-16-7](1.0g，6.97mmol)于CH2Cl2(30mL)中的溶液中。在-15℃下30min之后，缓慢添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯(2.0g，10.0mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(20mL)中的溶液。将反应在-15℃下搅拌3h。添加1N罗谢尔盐溶液(50mL)并且将反应混合物在室温下剧烈搅拌1.5h。将沉淀物滤出并且分配在EtOAc与1N HCl之间。将有机相用1N HCl和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且在减压下浓缩以给出2-(4-氯-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮9a(1.2g)。
中间体9b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](1.8g，4.81mmol)于THF(50mL)中的溶液逐滴添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮9a(1.2g，3.78mmol)于THF(40mL)中的溶液中。将混合物在0℃下搅拌15min，并且在室温下搅拌过夜。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物用最少的EtOAc吸收。将沉淀物滤出以给出2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮9b(1.2g)。
化合物9的合成以及对映异构体9A和9B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮9b(0.204g，0.517mmol)和3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](0.309g，1.54mmol)于乙腈(1mL)和THF(1mL)中的混合物在微波烘箱中在100℃下辐照10min。将该反应混合物用EtOAc稀释并且用1N HCl洗涤。将有机相用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将该残余物从EtOAc中结晶以提供作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物9，162mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：ChiralpakAD-H 5μm250x30mm，流动相：60％CO2，40％MeOH)进行化合物9(462mg)的对映异构体的手性分离，从而产生160mg的第一洗脱对映异构体和170mg的第二洗脱对映异构体。将第一洗脱对映异构体通过硅胶快速层析(15-40μm，4g，CH2Cl2/MeOH 99/1)再次纯化。收集纯级分且蒸发至干。将残余物(120mg)从Et2O和几滴CH3CN中固化以提供呈白色粉末的对映异构体9A(83mg)。将第二洗脱对映异构体通过硅胶快速层析(15-40μm，4g，CH2Cl2/EtOAc 98/2)再次纯化。收集纯级分且蒸发至干。将残余物(110mg)从Et2O和几滴CH3CN中固化以提供呈白色粉末的对映异构体9B(68mg)。
化合物9：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 2.31(d,J＝1.4Hz,3H)3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.7Hz,1H)6.56–6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.90(m,1H)6.95(dd,J＝11.6,2.4Hz,1H)7.03(d,J＝7.7Hz,1H)7.28–7.42(m,2H)7.77(d,J＝10.6Hz,1H)8.39(s,1H)12.02(s,1H)
LC/MS(方法LC-E)：Rt 8.6min，MH+515
对映异构体9A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 2.29-2.32(m,3H)3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.9Hz,1H)6.53-6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.5Hz,1H)6.90(s,1H)6.95(dd,J＝11.4,2.5Hz,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.28-7.42(m,2H)7.77(d,J＝10.4Hz,1H)8.40(s,1H)12.05(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.05min，MH+515
[α]D 20：+125.5°(c 0.3945，DMF)
手性SFC(方法SFC-D)：Rt 2.54min，MH+515，手性纯度99.05％。
熔点：206℃
对映异构体9B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 2.26-2.33(m,3H)3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.6Hz,1H)6.53-6.60(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.90(s,1H)6.95(dd,J＝11.4,2.5Hz,1H)7.04(d,J＝7.6Hz,1H)7.27-7.41(m,2H)7.77(d,J＝10.7Hz,1H)8.40(s,1H)12.05(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.05min，MH+515
[α]D 20：-129.5°(c 0.3955，DMF)
手性SFC(方法SFC-D)：Rt 2.98min，MH+515，手性纯度99.18％。
熔点：206℃
实例10：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)-苯基)氨基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物10)以及手性分离成对映异构体10A和10B。
Figure BDA0001350636490000341
中间体10a的合成：
在0℃下将于己烷(18.6mL，18.6mmol)中的二乙基氯化铝1M逐滴添加至6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚[CAS 1071973-95-9](2g，12.4mmol)于CH2Cl2(60mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，在0℃下缓慢添加于CH2Cl2(60mL)中的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(3.3g，16.3mmol，合成：参见实例1)。将反应在0℃下搅拌3h。添加冰水且滤出沉淀物，用水洗涤，并且在真空下干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮10a(3.15g)。
中间体10b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](3.8g，10.1mmol)于THF(90mL)中的溶液逐滴添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮10a(3.15g，9.6mmol)于THF(90mL)中的混合物中。将混合物在0℃下搅拌1h，并且在室温下搅拌2.5h。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩。将所得残余物用最少量的CH3CN和二异丙基醚吸收。将沉淀物滤出并且在真空下干燥以提供2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮10b(2.8g)。
化合物10的合成以及对映异构体10A和10B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮10b(1.0g，2.46mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](743mg，3.69mmol)和二异丙基乙胺(0.64mL，3.69mmol)于CH3CN(15mL)和THF(15mL)中的混合物在70℃下加热12h。将溶剂在减压下除去。将残余物溶解于EtOAc中。将有机层用1N HCl洗涤两次，用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂。通过硅胶快速层析(15-40μm，40g，CH2Cl2/CH3OH 99.8/0.2)进行纯化。收集纯级分并且蒸发至干以给出作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-1-(6-甲氧基-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物10，638mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000351
AD-H 5μm 250x30mm，流动相：70％CO2，30％iPrOH)进行化合物10的对映异构体的手性分离，从而产生244mg的第一洗脱对映异构体和163mg的第二洗脱对映异构体。将第一洗脱对映异构体通过硅胶快速层析(15-40μm，40g，CH2Cl2/EtOAc98/2)再次纯化。收集纯级分且蒸发至干。将残余物(161mg)从Et2O和几滴CH3CN中固化以提供对映异构体10A(136mg)。将第二洗脱对映异构体通过硅胶快速层析(15-40μm，40g，CH2Cl2/EtOAc 98/2)再次纯化。收集纯级分且蒸发至干。将残余物(158mg)从Et2O和几滴CH3CN中固化以提供对映异构体10B(135mg)。
化合物10：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.21(s,3H)3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.79(s,3H)4.00(s,3H)6.18(d,J＝7.6Hz,1H)6.55-6.60(m,2H)6.72(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.89-7.00(m,4H)7.35(dd,J＝8.5,7.1Hz,1H)7.90(s,1H)8.23(s,1H)11.75(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.04min，MH+527
熔点：224℃
对映异构体10A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.21(s,3H)3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.79(s,3H)4.00(s,3H)6.18(d,J＝7.6Hz,1H)6.53-6.60(m,2H)6.72(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.87-7.02(m,4H)7.35(dd,J＝8.5,7.1Hz,1H)7.90(s,1H)8.24(d,J＝2.8Hz,1H)11.76(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.03min，MH+527
[α]D 20：-121.5°(c 0.284，DMF)
手性SFC(方法SFC-F)：Rt 2.35min，MH+527，手性纯度100％
熔点：242℃
对映异构体10B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.21(s,3H)3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.79(s,3H)4.00(s,3H)6.18(d,J＝7.9Hz,1H)6.54-6.60(m,2H)6.72(td,J＝8.5,2.2Hz,1H)6.87-7.02(m,4H)7.35(dd,J＝8.5,6.9Hz,1H)7.90(s,1H)8.24(s,1H)11.76(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.03min，MH+527
[α]D 20：+122.9°(c 0.284，DMF)
手性SFC(方法SFC-F)：Rt 3.33min，MH+527，手性纯度99.1％。
熔点：242℃
实例10.1：在pH 7.4下对映异构体10B的手性稳定性
通过在pH 7.4下在40℃和60℃下在缓冲溶液中孵育24h和48h之后测定对映异构过量(ee％)来评价对映异构体10B(R＝OMe)的手性稳定性。为了评定对映异构体10B(R＝OMe)的甲氧基取代基对针对外消旋化的稳定性的影响，在相同条件下测试对映异构体10’B(R＝H)的手性稳定性。
为此，通过将25μL的10B和10’B于DMSO中的100μM溶液与475μL水性缓冲液(pH7.4)混合来制备10B和10’B的5μM缓冲(pH＝7.4)溶液。在40℃和60℃下孵育之后24h和48h取得样品。将分析样品通过手性SFC(MS检测)进行分析并且将手性纯度表示为对映异构过量(ee％＝％对映异构体B-％对映异构体A)。对映异构体10B和10’B两者在其孵育之前具有100％的手性纯度。
Figure BDA0001350636490000361
Figure BDA0001350636490000362
实例11：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物11)以及手性分离成对映异构体11A和11B。
Figure BDA0001350636490000371
中间体11a的合成：
在0℃下将于己烷(20mL，20mmol)中的二乙基氯化铝1M逐滴添加至5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚[CAS 1211595-72-0](2.2g，13.3mmol)于CH2Cl2(60mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，在0℃下缓慢添加于CH2Cl2(60mL)中的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酰氯1a(3.85g，19mmol，合成：参见实例1)。将反应在0℃下搅拌3h。添加冰水和NaHCO3水溶液。将反应混合物用CH2Cl2/MeOH萃取。将有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂。将残余物用最少的CH2Cl2吸收。将沉淀物滤出并且干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-乙酮11a(3.2g)。
中间体11b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](3.22g，8.56mmol)于THF(80mL)中的溶液逐滴添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酮11a(2.7g，8.15mmol)于THF(80mL)中的混合物中。将混合物在0℃下搅拌1h，并且在室温下搅拌2.5h。将沉淀物滤出，用EtOAc和水洗涤并且干燥以提供第一批2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酮11b(1.5g)。将滤液的有机层分离，经MgSO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物用最少量的CH3CN和二异丙基醚吸收。将沉淀物滤出且在真空下干燥以给出第二批11b(1.7g)。
化合物11的合成以及对映异构体11A和11B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酮11b(0.8g，1.95mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](589mg，2.93mmol)和二异丙基乙胺(0.51mL，2.93mmol)于CH3CN(15mL)和THF(15mL)中的混合物在70℃下加热72h。将溶剂在减压下除去。将残余物溶解于EtOAc中。将有机层用1N HCl洗涤两次，用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂。通过硅胶快速层析(15-40μm，40g，CH2Cl2/CH3OH 99.5/0.5)进行纯化。收集纯级分并且蒸发至干以给出作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-氟-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物11，450mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000381
IC 5μm 250x20mm，流动相：70％CO2，30％MeOH)进行化合物11(380mg)的对映异构体的手性分离，从而在CH3CN/二异丙基醚中结晶之后产生174mg的第一洗脱对映异构体(对映异构体11A)和165mg的第二洗脱对映异构体(对映异构体11B)。
化合物11：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.85(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.6Hz,1H)6.58(s,2H)6.73(td,J＝8.4,2.5Hz,1H)6.87-6.92(m,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)7.03(d,J＝7.6Hz,1H)7.15(d,J＝7.3Hz,1H)7.36(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H)7.83(d,J＝12.0Hz,1H)8.34(s,1H)11.95(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 2.89min，MH+531
熔点：172℃
对映异构体11A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.85(s,3H)3.99(s,3H)6.19(d,J＝7.6Hz,1H)6.53-6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.5Hz,1H)6.90(s,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)7.04(d,J＝7.6Hz,1H)7.15(d,J＝7.3Hz,1H)7.35(dd,J＝8.4,6.8Hz,1H)7.82(d,J＝12.0Hz,1H)8.34(s,1H)11.96(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 2.89min，MH+531
[α]D 20：+104.9°(c 0.264，DMF)
手性SFC(方法SFC-E)：Rt 2.92min，MH+531，手性纯度100％。
熔点：247℃
对映异构体11B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.71(s,3H)3.85(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.6Hz,1H)6.53-6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.5Hz,1H)6.90(s,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)7.04(d,J＝7.6Hz,1H)7.15(d,J＝7.3Hz,1H)7.35(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H)7.82(d,J＝11.7Hz,1H)8.34(s,1H)11.95(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 2.89min，MH+531
[α]D 20：-105.7°(c 0.279，DMF)
手性SFC(方法SFC-E)：Rt 3.92min，MH+531，手性纯度99.37％。
熔点：245℃
实例12：1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物12)以及手性分离成对映异构体12A和12B。
Figure BDA0001350636490000391
中间体12a的合成：
在0℃下将于己烷(16.5mL，16.5mmol)中的二乙基氯化铝1M逐滴添加至7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚[CAS 1227604-21-8](2g，11mmol)于CH2Cl2(60mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，在0℃下缓慢添加于CH2Cl2(60mL)中的2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)乙酰氯1a(3.3g，16.3mmol，合成：参见实例1)。将反应在0℃下搅拌3h。添加冰水且滤出沉淀物，用水洗涤，并且在真空下干燥以给出1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮12a(2.7g)。
中间体12b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](3.06g，8.15mmol)于THF(80mL)中的溶液逐滴添加至1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮12a(2.7g，7.76mmol)于THF(80mL)中的混合物中。将混合物在0℃下搅拌1h，并且在室温下搅拌2.5h。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩，溶解于EtOAc中且用水洗涤。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物用最少量的CH3CN和二异丙基醚吸收。将沉淀物滤出并且在真空下干燥以给出2-溴-1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮12b(3.2g)。
化合物12的合成以及对映异构体12A和12B的手性分离：
将2-溴-1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)乙酮12b(0.9g，2.11mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](637mg，3.16mmol)和二异丙基乙胺(0.55mL，3.16mmol)于CH3CN(20mL)和THF(20mL)中的混合物在45℃下加热72h。将溶剂在减压下除去。将残余物溶解于EtOAc中。将有机层用1N HCl洗涤两次，用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩溶剂。通过硅胶快速层析(15-40μm，80g，CH2Cl2/CH3OH 99.5/0.5)进行纯化。收集纯级分并且蒸发至干以给出作为外消旋混合物的1-(7-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物12，820mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000401
OD-H 5μm 250x30mm，流动相：60％CO2，40％MeOH)进行化合物12(750mg)的对映异构体的手性分离，从而在二异丙基醚中固化之后产生呈无定形粉末的285mg第一洗脱对映异构体(对映异构体12A)和260mg第二洗脱对映异构体(对映异构体12B)。
化合物12：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.87(s,3H)3.99(s,3H)6.24(d,J＝7.6Hz,1H)6.51-6.64(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.2Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(dd,J＝11.4,2.2Hz,1H)7.03(d,J＝7.6Hz,1H)7.11(d,J＝8.8Hz,1H)7.32-7.41(m,1H)8.05(d,J＝8.8Hz,1H)8.36(s,1H)12.20(s,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.02min，MH+547
对映异构体12A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.87(s,3H)3.99(s,3H)6.24(d,J＝7.6Hz,1H)6.53-6.64(m,2H)6.73(td,J＝8.4,2.2Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(dd,J＝11.4,2.2Hz,1H)7.03(d,J＝7.6Hz,1H)7.11(d,J＝8.8Hz,1H)7.36(dd,J＝8.4,7.6Hz,1H)8.05(d,J＝8.8Hz,1H)8.36(s,1H)12.20(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.01min，MH+547
[α]D 20：+89.7°(c 0.262，DMF)
手性SFC(方法SFC-C)：Rt 2.79min，MH+547，手性纯度98.98％。
对映异构体12B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.87(s,3H)3.99(s,3H)6.24(d,J＝7.6Hz,1H)6.54-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.2Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(dd,J＝11.2,2.2Hz,1H)7.03(d,J＝7.6Hz,1H)7.11(d,J＝8.8Hz,1H)7.36(dd,J＝8.5,7.6Hz,1H)8.05(d,J＝8.8Hz,1H)8.36(s,1H)12.20(br.s.,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.01min，MH+547
[α]D 20：-93.2°(c 0.236，DMF)
手性SFC(方法SFC-C)：Rt 3.76min，MH+547，手性纯度99.66％。
实例13：1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物13)的合成以及手性分离成对映异构体13A和13B。
Figure BDA0001350636490000411
中间体13a的合成：
在0℃下将二乙基氯化铝1M于己烷(20mL，20mmol)中的溶液逐滴添加至6,7-二氟-1H-吲哚[CAS 271780-84-8](1.5g，10.1mmol)于CH2Cl2(45mL)中的溶液中。在0℃下30min之后，缓慢添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(3.1g，15.04mmol，合成：参见实例1)于CH2Cl2(30mL)中的溶液。将反应在0℃下搅拌3h。添加1N罗谢尔盐溶液(50mL)并且将反应混合物在室温下剧烈搅拌1h。将沉淀物滤出并且分配在EtOAc与1N HCl之间。用EtOAc萃取水相。将有机相合并，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩，以给出1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮13a(1.6g)。
中间体13b的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](2.3g，6.06mmol)于THF(45mL)中的溶液逐滴添加至1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮13a(1.8g，5.57mmol)于THF(55mL)中的溶液中。将混合物在0℃下搅拌15min，并且在室温下搅拌过夜。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物用最少的乙腈吸收。将沉淀物滤出以给出2-溴-1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮13b(2.0g)。
化合物13的合成以及对映异构体13A和13B的手性分离：
将2-溴-1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮13b(1.3g，3.29mmol)和3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](2.0g，9.91mmol)于乙腈(13mL)中的混合物在微波烘箱中在100℃下辐照10min。将反应混合物用EtOAc稀释，用1NHCl和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物用乙腈、乙酸乙酯和二乙醚研磨以提供作为外消旋混合物的1-(6,7-二氟-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物13，750mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000421
IC 5μm 250x30mm，流动相：70％CO2，30％MeOH)进行化合物13(1.27g)的对映异构体的手性分离，从而在CH2Cl2/二异丙基醚中结晶之后产生409mg的第一洗脱对映异构体(对映异构体13A)和385mg的第二洗脱对映异构体(对映异构体13B)。
化合物13：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.27(d,J＝7.9Hz,1H)6.56-6.63(m,2H)6.74(td,J＝8.4,2.4Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.4Hz,1H)7.06(d,J＝7.9Hz,1H)7.25(m,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.9Hz,1H)7.93(dd,J＝8.8,4.4Hz,1H)8.51(d,J＝2.8Hz,1H)12.8(br.s.,1H)
LC-MS(方法LC-F)Rt 1.41min，MH+519
对映异构体13A：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.80(br.s,1H)8.50(s.,1H)7.93(m,1H)7.37(t,J＝7.3Hz,1H)7.16-7.29(m,1H)7.06(d,J＝7.3Hz,1H)6.86-6.99(m,2H)6.74(t,J＝7.3Hz,1H)6.60(m,2H)6.26(d,J＝7.3Hz,1H)3.98(s.,3H)3.73(s.,3H)3.10(s.,3H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.05min，MH+519
[α]D 20：-47.8°(c 0.2827，DMF)
手性SFC(方法SFC-A)：Rt 2.52min，MH+519，手性纯度100％。
熔点：226℃
对映异构体13B：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.78(br.s,1H)8.49(s,1H)7.92(dd,J＝8.7,4.3Hz,1H)7.36(t,J＝7.7Hz,1H)7.16-7.28(m,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)6.86-6.99(m,2H)6.74(td,J＝8.5,1.9Hz,1H)6.54-6.65(m,2H)6.26(d,J＝7.9Hz,1H)3.98(s,3H)3.72(s,3H)3.09(s,3H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.05min，MH+519
[α]D 20：+48.2°(c 0.3009，DMF)
手性SFC(方法SFC-A)：Rt 3.04min，MH+519，手性纯度99.57％。
熔点：222℃
实例14：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物14)的合成以及手性分离成对映异构体14A和14B。
Figure BDA0001350636490000431
中间体14a的合成：
将6-氟-5-甲基-1H-吲哚[CAS 162100-95-0](880mg，5.9mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液在N2-气氛下冷却至0℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(8.85mL，8.85mmol)中的溶液并且将所得混合物保持在0℃下持续15min。逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(1.67g，8.26mmol)于CH2Cl2(25mL)中的溶液。在0℃下继续搅拌1h并且随后将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物倒入正搅拌的冰/罗谢尔盐溶液中。将混合物经
Figure BDA0001350636490000432
过滤并且将滤饼用THF洗涤几次。合并滤液。分离各层并将有机层用盐水和水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将固体残余物悬浮于CH2Cl2(30mL)中。将沉淀物滤出，用少量CH2Cl2洗涤并且在真空下在50℃下干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮14a(1.22g)。
中间体14b的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮14a(1.22g，3.87mmol)于THF(125mL)中的搅拌溶液冷却至0℃。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS4207-56-1](1.6g，4.26mmol)于THF(25mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2h并且在室温下搅拌2h。将固体通过过滤除去并且用THF洗涤。在减压下蒸发合并的滤液。将残余物与EtOAc(50mL)混合。将固体通过过滤分离，用少量EtOAc洗涤并且在真空下在50℃下干燥以提供2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮14b(1.48g)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。
化合物14的合成以及对映异构体14A和14B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮14b(1.5g，3.65mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](1.10g，5.48mmol)和二异丙基乙胺(629μL，3.65mmol)于CH3CN(100mL)中的混合物在85℃下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2(100mL)中，用1N HCl(100mL)和水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过二氧化硅快速层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000441
二氧化硅120g，流动相：EtOAc:EtOH(3:1)/庚烷梯度0/100至50/50)来纯化。将所希望的级分合并且在减压下蒸发。将残余固体在CH2Cl2(20mL)中搅拌。将沉淀物滤出并且用CH2Cl2洗涤。将固体在MeOH(20mL)中搅拌。将沉淀物滤出并且用MeOH洗涤。将固体(630mg)经由制备型HPLC(固定相：
Figure BDA0001350636490000442
C18 ODB-10μm，200g，5cm，流动相：于水中的0.25％NH4HCO3溶液，CH3CN)进一步纯化。将所希望的级分合并，在减压下蒸发，并且与EtOAc(20mL)共蒸发，以给出作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(6-氟-5-甲基-1H-吲哚-3-基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物14，426mg)。
经由制备型SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000443
Diacel AD 20x250mm，流动相：CO2，EtOH+0.4％iPrNH2)进行化合物14(426mg)的对映异构体的手性分离。合并产物级分且蒸发以提供作为第一洗脱产物的对映异构体14A和作为第二洗脱产物的对映异构体14B。将对映异构体14A和14B两者如下固化：将蒸发残余物在H2O/MeOH 1/1(5mL)中搅拌1h，将沉淀物通过过滤分离，用H2O/MeOH 1/1洗涤并且在真空下在50℃下干燥，以提供呈白色粉末的对映异构体14A(113mg)和对映异构体14B(97mg)。
化合物14：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.30(d,J＝1.3Hz,3H)3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.21(d,J＝7.7Hz,1H)6.58(d,J＝1.8Hz,2H)6.73(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.91(t,J＝1.8Hz,1H)6.95(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)6.99(d,J＝7.7Hz,1H)7.22(d,J＝10.3Hz,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)8.03(d,J＝7.9Hz,1H)8.37(s,1H)11.95(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.07min，MH+515
对映异构体14A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.30(d,J＝1.5Hz,3H)3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.21(d,J＝7.7Hz,1H)6.58(d,J＝1.5Hz,2H)6.73(td,J＝8.5,2.6Hz,1H)6.91(t,J＝1.7Hz,1H)6.95(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)6.98(d,J＝7.7Hz,1H)7.22(d,J＝10.3Hz,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)8.03(d,J＝7.9Hz,1H)8.37(s,1H)11.95(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.06min，MH+515
[α]D 20：+150.0°(c 0.51，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt 3.49min，MH+515，手性纯度100％。
对映异构体14B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.31(d,J＝1.3Hz,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.21(d,J＝7.9Hz,1H)6.59(d,J＝1.8Hz,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.92(t,J＝1.8Hz,1H)6.95(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)6.99(d,J＝7.7Hz,1H)7.22(d,J＝10.3Hz,1H)7.36(dd,J＝8.6,7.0Hz,1H)8.03(d,J＝7.9Hz,1H)8.37(s,1H)11.95(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.06min，MH+515
[α]D 20：-137.3°(c 0.52，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt 3.85min，MH+515，手性纯度100％。
实例15：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基-磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物15)的合成以及手性分离成对映异构体15A和15B。
Figure BDA0001350636490000451
中间体15a的合成：
将5-甲基-1H-吲哚[CAS 614-96-0](5g，38.1mmol)于CH2Cl2(100mL)中的溶液在N2-气氛下冷却至-10℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(57.2mL，57.2mmol)中的溶液并且将所得混合物保持在-10℃下持续10min。逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(11.6g，57.2mmol)于CH2Cl2(100mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3.5h。将反应混合物倒入正搅拌的冰/罗谢尔盐溶液中。将混合物经
Figure BDA0001350636490000452
过滤并且将滤饼用THF洗涤几次。合并滤液。分离各层并将有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将固体残余物悬浮于CH2Cl2(30mL)中。将沉淀物滤出，用少量CH2Cl2洗涤(2x)并且在真空下在50℃下干燥以提供2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮15a(7.19g)。
中间体15b的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮15a(7.19g，24.2mmol)于THF(500mL)中的搅拌溶液冷却至0℃。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS4207-56-1](10g，26.6mmol)于THF(150mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌4h。将固体通过过滤除去并且用THF洗涤。在减压下蒸发合并的滤液。将残余物与EtOAc(50mL)混合。将固体通过过滤分离，用少量EtOAc洗涤并且在真空下在50℃下干燥，以提供2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮15b(8.02g)。
化合物15的合成以及对映异构体15A和15B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酮15b(3.5g，9.3mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](2.81g，14mmol)和二异丙基乙胺(1.60mL，9.3mmol)于CH3CN中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应温度增加至80℃持续1h，并且随后将混合物在室温下再次搅拌2天。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2(100mL)中，用1N HCl(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过柱层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000462
二氧化硅120g，流动相：EtOAc/庚烷梯度35/65至45/55)来纯化。将所希望的级分合并且在减压下蒸发。将残余物(3.96g)经由制备型HPLC(固定相：
Figure BDA0001350636490000463
C18 ODB-10μm，200g，5cm，流动相：于水中的0.25％NH4HCO3溶液，CH3CN)进一步纯化。将所希望的级分合并，在减压下蒸发，并且与EtOAc(20mL)共蒸发。将残余固体在MeOH(5mL)和水(5mL)的混合物中搅拌1h。将沉淀物滤出并且在真空下干燥以给出作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物15，1.92g)。
经由正相手性分离(固定相：AS 20μm，流动相：100％甲醇)进行化合物15(1.50g)的对映异构体的手性分离。合并产物级分且蒸发以提供作为第一洗脱产物的对映异构体15A(742mg)和作为第二洗脱产物的对映异构体15B(745mg)。将对映异构体15A通过二氧化硅柱层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000461
二氧化硅40g，流动相：CH2Cl2/MeOH梯度100/0至90/10)进一步纯化。将含有产物的级分合并，并且蒸发。将固体残余物在MeOH/水(1/1)(14mL)中搅拌2h。将沉淀物滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体15A(361mg)。将对映异构体15B在MeOH/水(1/1)(14mL)中搅拌5h。将沉淀物滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体15B(445mg)。
化合物15：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm2.39(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.22(d,J＝7.7Hz,1H)6.55-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.92(br s,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.6Hz,1H)6.99-7.06(m,2H)7.31-7.39(m,2H)7.98(s,1H)8.37(s,1H)11.94(brs,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.09min，MH+497
对映异构体15A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm2.39(s,3H)3.08(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.21(d,J＝7.7Hz,1H)6.56-6.61(m,2H)6.72(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.92(t,J＝1.7Hz,1H)6.95(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)6.99(d,J＝7.7Hz,1H)7.04(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H)7.32-7.39(m,2H)7.98(s,1H)8.36(s,1H)11.92(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.03min，MH+497
[α]D 20：+149.8°(c 0.49，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt 3.67min，MH+497，手性纯度100％。
对映异构体15B：
1H NMR(360MHz,DMSO-d6)δppm2.39(s,3H)3.09(s,3H)3.72(s,3H)4.00(s,3H)6.21(d,J＝7.7Hz,1H)6.55-6.61(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.92(t,J＝1.6Hz,1H)6.96(dd,J＝11.3,2.2Hz,1H)7.00-7.06(m,2H)7.31-7.39(m,2H)7.98(s,1H)8.37(s,1H)11.95(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.03min，MH+497
[α]D 20：-149.3°(c 0.515，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt4.06min，MH+497，手性纯度99.6％。
实例16：1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)乙酮(化合物16)的合成以及手性分离成对映异构体16A和16B。
Figure BDA0001350636490000471
中间体16a的合成：
将5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚[CAS 90721-60-1](4g，22mmol)于CH2Cl2(150mL)中的溶液在N2-气氛下冷却至0℃。逐滴添加二乙基-氯化铝1M于己烷(33mL，33mmol)中的溶液并且将所得混合物保持在0℃下持续15min。逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)乙酰氯1a(6.25g，30.8mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1h并且随后在室温下搅拌1h。将反应混合物倒入正搅拌的冰/罗谢尔盐溶液中。将混合物经
Figure BDA0001350636490000472
过滤并且将滤饼用THF洗涤几次。合并滤液。分离各层并将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物与CH2Cl2(50mL)混合。将固体滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈粉末的1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-乙酮16a(4.01g)。将滤液在减压下蒸发。将残余物用CH2Cl2(10mL)吸收。将固体滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供第二批16a(369mg)。
中间体16b的合成：
将1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)乙酮16a(3.5g，8.96mmol)于THF(500mL)中的搅拌溶液冷却至0℃。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS4207-56-1](3.7g，9.85mmol)于THF(100mL)中的溶液。将反应混合物在冷却(0℃)下搅拌5h并且随后在室温下搅拌2h。将固体通过过滤除去并且用THF洗涤。在减压下蒸发合并的滤液。将残余物与EtOAc(50mL)混合。将固体通过过滤分离，用少量EtOAc洗涤并且在真空下在50℃下干燥，以提供2-溴-1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酮16b(3.02g)。
化合物16的合成以及对映异构体16A和16B的手性分离：
将2-溴-1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)乙酮16b(3.02g，6.58mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](1.81g，8.99mmol)和二异丙基乙胺(1.13mL，6.58mmol)于CH3CN(120mL)中的混合物在60℃下搅拌过夜。将反应温度增加至80℃持续8h并且伴随过夜搅拌最终增加至90℃。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2(100mL)中，用1N HCl(100mL)和水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物经由制备型HPLC(固定相：RP
Figure BDA0001350636490000481
制备型C18 OBD-10μm，50x150mm；流动相：于水中的0.25％NH4HCO3溶液，CH3CN)来纯化。将所希望的级分合并且在减压下蒸发。将残余物在EtOAc(20mL)中搅拌。将固体通过过滤分离以提供第一批作为外消旋混合物的1-(5-氯-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)-氨基)乙酮(化合物16，309mg)。将滤液在减压下蒸发。添加MeOH并且将所得悬浮液搅拌30min。将固体过滤以提供第二批外消旋化合物16(423mg)。
经由正相手性分离(固定相：AS 20μm，流动相：100％甲醇)进行化合物16(493mg)的对映异构体的手性分离。合并产物级分且蒸发以提供作为第一洗脱产物的对映异构体16A和作为第二洗脱产物的对映异构体16B。将对映异构体16A在MeOH(5mL)中搅拌30min。将沉淀物滤出，用MeOH(2x2mL)洗涤并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体16A(156mg)。将对映异构体16B在MeOH(5mL)中搅拌30min。将沉淀物滤出，用MeOH(2x2mL)洗涤并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体16B(146mg)。
化合物16：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.87(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.7Hz,1H)6.59(d,J＝1.3Hz,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.91(t,J＝1.8Hz,1H)6.96(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)7.01(d,J＝7.9Hz,1H)7.14(s,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)8.12(s,1H)8.35(s,1H)11.98(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.02min，MH+547
对映异构体16A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.86(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.7Hz,1H)6.55-6.62(m,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.90(t,J＝1.2Hz,1H)6.95(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)7.00(d,J＝7.9Hz,1H)7.14(s,1H)7.36(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)8.11(s,1H)8.34(s,1H)11.97(br s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.10min，MH+547
[α]D 20：+138.1°(c 0.565，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt4.17min，MH+547，手性纯度100％。
熔点：252℃
对映异构体16B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.08(s,3H)3.72(s,3H)3.86(s,3H)3.99(s,3H)6.20(d,J＝7.9Hz,1H)6.58(d,J＝1.3Hz,2H)6.73(td,J＝8.5,2.4Hz,1H)6.91(t,J＝1.5Hz,1H)6.95(dd,J＝11.4,2.4Hz,1H)7.00(d,J＝7.7Hz,1H)7.14(s,1H)7.36(dd,J＝8.6,7.0Hz,1H)8.11(s,1H)8.34(s,1H)11.98(br s,1H)
LC/MS(方法LC-A)：Rt 1.11min，MH+547
[α]D 20：-121.7°(c 0.545，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt4.57min，MH+547，手性纯度100％。
熔点：253℃
实例17：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基-磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物17)的合成以及手性分离成对映异构体17A和17B。
Figure BDA0001350636490000501
中间体17a的合成：
在0℃下，在N2流下，将氢化钠(2.48g，64.81mmol)分部分地添加至5-(三氟甲基)-1H-吲哚[CAS 100846-24-0](10g，54.01mmol)于DMF(150mL)中的混合物中，并且将该混合物在0℃下搅拌30min。逐滴添加甲苯磺酰氯(11.3g，59.4mmol)于DMF(50mL)中的溶液，并且将所得混合物在室温下搅拌3h。在冷却至0℃之后，将反应通过添加水来淬灭。将所得沉淀物滤出并且在真空下在70℃下干燥过夜，以给出1-甲苯磺酰基-5-(三氟甲基)-1H-吲哚17a(18.4g)。
中间体17b的合成：
在室温下，将氯化钛(IV)(2.32mL，21.2mmol)逐滴添加至1-甲苯磺酰基-5-(三氟甲基)-1H-吲哚17a(3.6g，10.6mmol)和2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(3.85g，19mmol，合成：参见实例1)于1,2-二氯乙烷(70mL)中的搅拌溶液中。将该反应在室温下搅拌2h。添加冰水。将反应混合物用EtOAc萃取。将有机层经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩溶剂。将粗化合物通过硅胶柱层析(15-40μm，80g，CH2Cl2/MeOH 99.5/0.5)纯化。将含有化合物17b的级分合并，并且在减压下蒸发溶剂。将化合物在CH3CN/二异丙基醚中搅拌。将沉淀物滤出并且干燥以给出2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(1-甲苯磺酰基-5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮17b(3g)。
中间体17c的合成：
将氢氧化锂(0.66g，15.8mmol)添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(1-甲苯磺酰基-5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮17b(3.2g，6.33mmol)于THF(18mL)和水(6mL)中的溶液中。将该混合物在30℃下搅拌1h。添加水和EtOAc。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发溶剂。将固体残余物在二异丙基醚中搅拌。将沉淀物滤出并且干燥以给出2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)-乙酮17c(2.1g)。
中间体17d的合成：
在0℃下，将苯基三甲基三溴化铵[CAS 4207-56-1](1.6g，4.27mmol)于THF(50mL)中的溶液逐滴添加至2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮17c(1.5g，4.27mmol)于THF(50mL)中的混合物中。将混合物在0℃下搅拌1h，并且在室温下搅拌4h。将沉淀物滤出并且用EtOAc洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩。将残余物溶解于EtOAc中。将有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发溶剂。将残余物在二异丙基醚中搅拌。将沉淀物滤出并且干燥以给出2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)-乙酮17d(1.8g)。
化合物17的合成以及对映异构体17A和17B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮17d(1.2g，2.79mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](617mg，3.07mmol)和二异丙基乙胺(0.48mL，2.79mmol)于CH3CN(60mL)和THF(30mL)中的混合物在70℃下搅拌24h。将溶液在减压下浓缩。将该残余物溶解于EtOAc中并且将溶液用1N HCl洗涤。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤且在减压下蒸发。将残余物通过硅胶柱层析(15-40μm，80g，CH2Cl2/MeOH 99.5/0.5)纯化。将含有化合物17的级分合并，并且在减压下蒸发溶剂。将化合物从二异丙基醚/CH3CN中结晶以给出作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物17，410mg)。
经由制备型手性SFC(固定相：
Figure BDA0001350636490000511
AD-H 5μm 250x20mm，流动相：75％CO2，25％iPrOH)分离化合物17的对映异构体，以在从石油醚/二异丙基醚中结晶之后给出147mg的第一洗脱对映异构体17A和150mg的第二洗脱对映异构体17B。
化合物17：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.27(d,J＝7.9Hz,1H)6.59(d,J＝1.3Hz,2H)6.74(td,J＝8.4,2.4Hz,1H)6.92(s,1H)6.97(dd,J＝11.3,2.5Hz,1H)7.06(d,J＝7.9Hz,1H)7.37(dd,J＝8.5,6.9Hz,1H)7.54(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H)7.69(d,J＝8.5Hz,1H)8.49(s,1H)8.60(s,1H)12.43(br s,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.09min，MH+551
熔点：160℃
对映异构体17A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.98(s,3H)6.27(d,J＝7.6Hz,1H)6.59(d,J＝1.5Hz,2H)6.74(td,J＝8.5,2.3Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(dd,J＝11.4,2.3Hz,1H)7.04(d,J＝7.6Hz,1H)7.37(dd,J＝8.6,7.1Hz,1H)7.53(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H)7.69(d,J＝8.6Hz,1H)8.49(s,1H)8.59(s,1H)12.39(br s,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.13min，MH+551
[α]D 20：-119.3°(c 0.2364，DMF)
手性SFC(方法SFC-H)：Rt 3.40min，MH+551，手性纯度100％。
熔点：231℃
对映异构体17B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.73(s,3H)3.99(s,3H)6.27(br d,J＝8.1Hz,1H)6.59(s,2H)6.74(td,J＝8.2,2.3Hz,1H)6.92(s,1H)6.96(br d,J＝11.6Hz,1H)7.05(br d,J＝8.1Hz,1H)7.33-7.41(m,1H)7.54(br d,J＝8.6Hz,1H)7.69(brd,J＝8.6Hz,1H)8.49(s,1H)8.60(s,1H)12.37(br s,1H)
LC/MS(方法LC-C)：Rt 3.13min，MH+551
[α]D 20：+112.8°(c 0.2545，DMF)
手性SFC(方法SFC-H)：Rt4.45min，MH+551，手性纯度100％。
熔点：230℃
实例18：2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基-磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物18)的合成以及手性分离成对映异构体18A和18B。
Figure BDA0001350636490000521
中间体18a的合成：
将5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚[CAS 262593-63-5](5g，24.9mmol)于CH2Cl2(150mL)中的溶液在N2-气氛下冷却至0℃。逐滴添加二乙基氯化铝1M于己烷(37.3mL，37.3mmol)中的溶液并且将所得混合物保持在0℃下持续15min。逐滴添加2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯1a(7.05g，34.8mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液。在0℃下继续搅拌1h，并且在室温下搅拌1.5h。将反应混合物倒入正搅拌的冰/罗谢尔盐溶液中。在冰已熔融之后，将混合物经
Figure BDA0001350636490000531
过滤并且将滤饼用THF洗涤几次。合并滤液。分离各层并将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物用CH2Cl2(50mL)研磨并且将沉淀滤出以提供2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮18a(7.36g)。将滤液在真空下浓缩，并将固体残余物在CH2Cl2(10mL)中搅拌。过滤固体提供第二批18a(431mg)。
中间体18b的合成：
将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮18a(7.35g，20.0mmol)于THF(200mL)中的搅拌溶液冷却至0℃。逐滴添加苯基三甲基三溴化铵[CAS4207-56-1](8.28g，22.0mmol)于THF(100mL)中的溶液。将所得悬浮液在室温下搅拌2h。将固体通过过滤除去并且用THF洗涤。在减压下蒸发合并的滤液。将残余物与EtOAc(30mL)混合。将固体通过过滤分离，用少量EtOAc洗涤并且在真空下在50℃下干燥，以提供2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮18b(7.8g)。
化合物18的合成以及对映异构体18A和18B的手性分离：
将2-溴-2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮18b(3g，6.72mmol)、3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺[CAS 62606-02-4](1.85g，9.18mmol)和二异丙基乙胺(1.16mL，6.72mmol)于CH3CN(120mL)中的混合物在90℃下搅拌24h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2(100mL)中，用1N HCl(100mL)和水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且在减压下蒸发。将残余物通过二氧化硅柱层析(固定相：Grace
Figure BDA0001350636490000532
二氧化硅120g，流动相：EtOAc:EtOH(3:1)/庚烷梯度0/100至50/50)来纯化。将所希望的级分合并且在减压下蒸发。将残余物在EtOAc(20mL)中搅拌。将固体通过过滤分离并在真空下在50℃下干燥以提供作为外消旋混合物的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)-2-((3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯基)氨基)-1-(5-(三氟甲氧基)-1H-吲哚-3-基)乙酮(化合物18，608mg)。
经由正相手性分离(固定相：AS 20μm，流动相：100％甲醇)进行化合物18(578mg)的对映异构体的手性分离。合并产物级分且蒸发以提供作为第一洗脱产物的对映异构体18A和作为第二洗脱产物的对映异构体18B。将对映异构体18A通过过夜搅拌从MeOH/水中沉淀。将沉淀物滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体18A(123mg)。将对映异构体18B通过过夜搅拌从MeOH/水中沉淀。将沉淀物滤出并且在真空下在50℃下干燥以提供呈白色粉末的对映异构体18B(91mg)。
化合物18：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.73(s,3H)3.99(s,3H)6.25(d,J＝7.7Hz,1H)6.59(d,J＝1.3Hz,2H)6.74(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.92(t,J＝1.3Hz,1H)6.96(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)7.05(d,J＝7.7Hz,1H)7.21(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H)7.38(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)7.59(d,J＝8.8Hz,1H)8.07(br s,1H)8.54(s,1H)12.28(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.13min，MH+567
对映异构体18A：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.25(d,J＝7.7Hz,1H)6.59(d,J＝1.5Hz,2H)6.74(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.91(t,J＝1.7Hz,1H)6.96(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.21(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H)7.37(dd,J＝8.7,6.9Hz,1H)7.59(d,J＝8.8Hz,1H)8.07(d,J＝1.1Hz,1H)8.54(s,1H)12.29(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.12min，MH+567
[α]D 20：+112.0°(c 0.465，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt 2.85min，MH+547，手性纯度100％。
熔点：215℃
对映异构体18B：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.09(s,3H)3.72(s,3H)3.99(s,3H)6.25(d,J＝7.7Hz,1H)6.59(d,J＝1.3Hz,2H)6.74(td,J＝8.5,2.5Hz,1H)6.91(t,J＝1.7Hz,1H)6.96(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H)7.04(d,J＝7.9Hz,1H)7.21(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H)7.37(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H)7.59(d,J＝8.8Hz,1H)8.07(d,J＝0.9Hz,1H)8.54(s,1H)12.28(br s,1H)
LC/MS(方法LC-B)：Rt 2.12min，MH+567
[α]D 20：-116.7°(c 0.425，DMF)
手性SFC(方法SFC-J)：Rt 3.17min，MH+547，手性纯度100％。
熔点：214℃
本发明的化合物的抗病毒活性
DENV-2抗病毒测定
本发明的所有化合物的抗病毒活性针对DENV-216681株进行测试，该株用增强型绿色荧光蛋白标记(eGPF；表1)。培养基由补充有2％热灭活的胎牛血清、0.04％庆大霉素(50mg/mL)以及2mM L-谷氨酰胺的最低必需培养基组成。将获自ECACC的Vero细胞悬浮于培养基中，并且将25μL添加至384孔板(2500个细胞/孔)，这些板已经含有抗病毒化合物。通常，这些板含有测试化合物的9个稀释步骤的4倍连续稀释液，在于100％DMSO(200nL)中的最终浓度的200倍下。此外，每种化合物浓度一式四份地进行测试(最终浓度范围：25μM-0.00038μM)。最后，每个板包含被指定为病毒对照(在不存在化合物的情况下含有细胞和病毒)、细胞对照(在不存在病毒和化合物的情况下含有细胞)和培养基对照(在不存在细胞、病毒和化合物的情况下含有培养基)的孔。向被指定为培养基对照的这些孔添加25μL的培养基而不是Vero细胞。一旦细胞被添加到这些板，就将这些板在室温下孵育30分钟以便允许这些细胞在这些孔内均匀地分布。接着，将这些板在一个完全润湿的孵育箱(37℃，5％CO2)中孵育直到第二天。然后，以0.5的感染复数(MOI)添加用eGFP标记的DENV-2株16681。因此，将15μL的病毒悬浮液添加至所有含有测试化合物的孔中并且添加至被指定为病毒对照的孔中。并行地，将15μL的培养基添加至培养基对照和细胞对照。接着，将这些板在一个完全润湿的孵育箱(37℃，5％CO2)中孵育3天。在读出当天，使用一个自动化荧光显微镜在488nm(蓝色激光)下测量eGFP荧光。使用一种内部LIMS系统，计算每种化合物的抑制剂量反应曲线并且测定半最大有效浓度(EC50)。因此，使用以下公式来计算每一测试浓度的抑制百分比(I)：I＝100*(ST-SCC)/(SVC-SCC)；ST、SCC和SVC分别是测试化合物孔、细胞对照孔和病毒对照孔中的eGFP信号的量。EC50表示如通过相较于病毒对照的eGFP荧光强度的50％降低所测量，病毒复制被抑制50％的化合物的浓度。使用线性内插法计算EC50。
并行地，在相同板上评定这些化合物的毒性。一旦进行eGFP信号的读出，就将10μL的刃天青(一种细胞存活力染色剂)添加至384孔板的所有孔。刃天青测定是基于通过由这些细胞产生的NADH将蓝色刃天青还原成高度荧光产物试卤灵。粉色荧光试卤灵的形成与孔中存活细胞的数目直接相关。将这些板在一个完全润湿的孵育箱(37℃，5％CO2)中育育另外5小时。接着，在一个无限阅读器(帝肯(Tecan))上使用530nm的激发波长对这些板进行测量。还测定了半最大细胞毒性浓度(CC50)，其被定义为使刃天青转化相较于细胞对照孔的转化降低50％所需的浓度。最后，测定这些化合物的选择性指数(SI)，该指数如下计算：SI＝CC50/EC50。
表1：在DENV-2抗病毒测定中本发明的化合物的EC50、CC50和SI
Figure BDA0001350636490000551
Figure BDA0001350636490000561
N＝对这些化合物进行测试的独立实验的数目。
四价逆转录酶定量-PCR(RT-qPCR)测定：方案A。
在一个RT-qPCR测定中测试本发明的化合物针对DENV-1株TC974#666(NCPV；表6)、DENV-2株16681(表7)、DENV-3株H87(NCPV；表8)以及DENV-4株H241(NCPV；表9)的抗病毒活性。因此，在存在或不存在测试化合物的情况下用DENV-1抑或-2抑或-3抑或-4感染Vero细胞。在感染后第3天，将细胞溶解并且细胞溶解产物用于制备一种病毒靶标(DENV的3’UTR；表2)和一种细胞参考基因(β-肌动蛋白，表2)两者的cDNA。随后，在一个Lightcycler480仪器上进行双重实时PCR。所生成的Cp值与这些靶标的RNA表达的量成反比。通过一种测试化合物抑制DENV复制导致3’UTR基因的Cp的移位。另一方面，如果一种测试化合物对这些细胞来说是具有毒性的，那么将观察到对β-肌动蛋白表达的类似作用。对比ΔΔCp方法用于计算EC50，该方法是基于用细胞管家基因(β-肌动蛋白)标准化的靶基因(3’UTR)的相对基因表达。
表2：用于实时定量RT-PCR的引物和探针。
Figure BDA0001350636490000571
a报道染料(FAM，HEX)和淬灭剂(BHQ1)元素以粗体和斜体指示。
b这些引物和探针的核苷酸序列选自登革热病毒基因组的3’UTR区中的保守区，其是基于保藏在Genbank的四种登革热血清型的300个核苷酸序列的比对(宫(Gong)等人，2013，分子生物学方法(Methods Mol Biol)，第16章)。
培养基由补充有2％热灭活的胎牛血清、0.04％庆大霉素(50mg/mL)以及2mM L-谷氨酰胺的最低必需培养基组成。将获自ECACC的Vero细胞悬浮于培养基中，并且将75μL/孔添加在96孔板(10000个细胞/孔)中，这些板已经含有抗病毒化合物。通常，这些板含有测试化合物的9个稀释步骤的4倍连续稀释液，在于100％DMSO(500nL；最终浓度范围：25μM-0.00038μM)中的最终浓度的200倍下。此外，每个板包含被指定为病毒对照(在不存在化合物的情况下含有细胞和病毒)和细胞对照(在不存在病毒和化合物的情况下含有细胞)的孔。一旦将这些细胞添加在这些板中，就将这些板在一个完全润湿的孵育箱(37℃，5％CO2)中孵育直到第二天。然后，以0.6的MOI添加DENV-1株TC974#666，以0.01的MOI添加DENV-2株16681，以1.0的MOI添加DENV-3株H87并且以0.2的MOI添加DENV-4株H241并且以0.16的MOI添加SG/06K2270DK1/2005。因此，将25μL的病毒悬浮液添加至所有含有测试化合物的孔中并且添加至被指定为病毒对照的孔中。并行地，将25μL的培养基添加至细胞对照。接着，将这些板在一个完全润湿的孵育箱(37℃，5％CO2)中孵育3天。在3天之后，将上清液从这些孔中除去并且将这些孔用冰冷PBS(约100μL)洗涤两次。将这些96孔板内的细胞沉淀储存在-80℃下持续至少1天。接着，根据制造商的指导(应用生物系统公司(Applied Biosystems))使用Cells-to-CTTM溶解试剂盒提取RNA。这些细胞溶解产物可以储存在-80℃下或立即用于逆转录步骤中。
在逆转录步骤的准备中，制备混合物A(表3A)并且将7.57μL/孔分配在一个96孔板中。在添加5μL的细胞溶解产物之后，进行在75℃下的一个五分钟变性步骤(表3B)。之后，添加7.43μL的混合物B(表3C)并且起始逆转录步骤(表3D)以产生cDNA。
最后，制备一种RT-qPCR混合物，混合物C(表4A)，将该混合物分配在96孔LightCycler qPCR板中，向这些板添加3μL的cDNA，并且根据表4B中的条件在一个LightCycler480上进行qPCR。
使用LightCycler软件和一种内部LIMS系统，计算每种化合物的剂量反应曲线，并且测定半最大有效浓度(EC50)和半最大细胞毒性浓度(CC50)。
表3：使用混合物A、变性、混合物B和逆转录进行cDNA合成。
A混合物A
Figure BDA0001350636490000581
B变性步骤：
步骤 温度 时间
变性 75℃ 5'
保持 4℃ 保持
C混合物B
Figure BDA0001350636490000591
D方案cDNA合成
步骤 温度 时间
逆转录 42℃ 30'
变性 99℃ 5'
保持 4℃ 保持
表4：qPCR混合物和方案。
A混合物C
Figure BDA0001350636490000592
Figure BDA0001350636490000601
B方案qPCR3
Figure BDA0001350636490000602
表6：在RT-qPCR测定中化合物针对血清型1的EC50、CC50和SI
Figure BDA0001350636490000603
N＝对这些化合物进行测试的独立实验的数目。NA：未批准。ND：未确定。
表7：在RT-qPCR测定中化合物针对血清型2的EC50、CC50和SI
Figure BDA0001350636490000611
N＝对这些化合物进行测试的独立实验的数目。NA：未批准。ND：未确定。
表8：在RT-qPCR测定中化合物针对血清型3的EC50、CC50和SI
Figure BDA0001350636490000612
Figure BDA0001350636490000621
N＝对这些化合物进行测试的独立实验的数目。NA：未批准；ND：未确定。
表9：在RT-qPCR测定中化合物针对血清型4的EC50、CC50和SI
Figure BDA0001350636490000622
N＝对这些化合物进行测试的独立实验的数目。NA：未批准。
Figure IDA0001350636520000011
Figure IDA0001350636520000021

Claims (7)

1.化合物或其立体异构形式或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自下组：
Figure FDF0000011736060000011
Figure FDF0000011736060000021
2.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求1所述的化合物或其立体异构形式或药学上可接受的盐，连同一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
3.根据权利要求1所述的化合物或其立体异构形式或药学上可接受的盐，或根据权利要求2所述的药物组合物，用于制备药剂的用途。
4.根据权利要求1所述的化合物或其立体异构形式或药学上可接受的盐，或根据权利要求2所述的药物组合物，在制备用于治疗登革热的药物中的用途。
5.一种化合物或其立体异构形式或药学上可接受的盐在制备用于抑制生物样品或患者中的一种或多种登革热病毒的复制的药物中的用途；其中所述化合物选自：
Figure FDF0000011736060000031
Figure FDF0000011736060000041
6.用于合成根据权利要求1所述的化合物的方法，其包括以下步骤
a)用氯化试剂将2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酸(II)转化成相对应的2-(4-氟-2-甲氧基苯基)乙酰氯(III)，
b)使用路易斯酸试剂在适合的溶剂中并且在适合反应条件下进行酰氯(III)与具有通式(IV)的经取代的吲哚的弗里德尔-克拉夫茨反应，以提供具有通式(V)的3-酰化吲哚，其中R1、R2和R3各自对应于权利要求1的化合物的不同取代基，
c)在适合的溶剂中用试剂溴化(V)以提供具有通式(VI)的化合物，
d)使具有通式(VI)的化合物与3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺(VII)在适合的溶剂中并且典型地使用碱进行反应，以提供作为外消旋混合物的具有通式I的化合物，
e)手性分离具有通式I的化合物，以提供具有通式I的对映异构体A和B
Figure FDF0000011736060000051
7.用于合成根据权利要求1所述的化合物的方法，其包括以下步骤：
i)使用试剂在碱的存在下将具有通式(IV)的经取代的吲哚转化为具有通式(VIII)的N-保护的中间体，其中PG是保护基团，并且R1、R2和R3各自对应于权利要求1的化合物的不同取代基；
ii)使用路易斯酸试剂在适合的溶剂中并且在适合反应条件下进行具有通式(VIII)的经取代的吲哚与酰氯(III)的弗里德尔-克拉夫茨反应，以提供具有通式(IX)的3-酰化的吲哚；
iii)用试剂在溶剂混合物中并且在适合的反应温度下除去具有通式(IX)的中间体的吲哚-N保护基，以提供具有通式(V)的3-酰化吲哚；
iv)在适合的溶剂中用试剂溴化(V)以提供具有通式(VI)的化合物，
v)使具有通式(VI)的化合物与3-甲氧基-5-(甲基磺酰基)苯胺(VII)在适合的溶剂中并且典型地使用碱进行反应，以提供作为外消旋混合物的具有通式I的化合物，
vi)手性分离具有通式I的化合物，以提供具有通式I的对映异构体A和B
Figure FDF0000011736060000061
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