EA032362B1

EA032362B1 - Производные индола в качестве ингибиторов репликации вирусов денге

Info

Publication number: EA032362B1
Application number: EA201791614A
Authority: EA
Inventors: Барт Рудольф Романи Кестелейн; Жан-Франсуа Бонфанти; Тим Хьюго Мария Йонкерс; Пьер Жан-Мари Бернар Рабуассон; Дороте Алис Мари-Эв Бардио; Арно Дидье М Маршан
Original assignee: Янссен Фармасьютикалз, Инк.; Католике Университейт Левен
Priority date: 2015-01-16
Filing date: 2016-01-15
Publication date: 2019-05-31
Also published as: SI3244886T1; ZA201704783B; BR112017015123A2; TW201632502A; KR20170103820A; MX2017009309A; IL253434B; CL2017001822A1; ES2904575T3; MA41341A; TWI700274B; DK3244886T3; AU2016208015A1; WO2016113371A1; CA2972329C; US20180002282A1; EP3244886A1; MY187068A; HK1247611A1; CN107428685B

Abstract

Изобретение относится к соединениям моно- или дизамещенных индолов формулы (I), способам предупреждения или лечения вирусных инфекций, вызывающих денге, посредством применения указанных соединений, а также относится к указанным соединениям для применения в качестве лекарственного средства, более предпочтительно для применения в качестве лекарственного средства для лечения или предупреждения вирусных инфекций, вызывающих денге. Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтическим композициям или комбинированным препаратам на основе соединений, к композициям или препаратам для применения в качестве лекарственного средства, более предпочтительно для предупреждения или лечения вирусных инфекций, вызывающих денге. Настоящее изобретение также относится к способам получения таких соединений.

Description

032362 В1

032362 Β1

Настоящее изобретение относится к соединениям моно- или дизамещенных индолов, способам предупреждения или лечения вирусных инфекций, вызывающих денге, посредством применения указанных соединений, а также относится к указанным соединениям для применения в качестве лекарственного средства, более предпочтительно для применения в качестве лекарственного средства для лечения или предупреждения вирусных инфекций, вызывающих денге. Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтическим композициям или комбинированным препаратам на основе соединений, к композициям или препаратам для применения в качестве лекарственного средства, более предпочтительно для предупреждения или лечения вирусных инфекций, вызывающих денге. Настоящее изобретение также относится к способам получения таких соединений.

Предпосылки изобретения

Флавивирусы, которые переносятся комарами или клещами, являются причиной угрожающих жизни инфекций у человека, таких как энцефалит и геморрагическая лихорадка. Известны четыре различных, но тесно связанных серотипа флавивируса, вызывающего денге, так называемые ΌΕΝν-1, -2, -3 и -4. Денге характерна для большинства тропических и субтропических регионов всего мира, преимущественно в городских и полугородских районах. Согласно Всемирной организации здравоохранения (^НО) 2,5 млрд людей, из которых 1 млрд детей, подвержены риску инфицирования ΌΕΝν (\УНО. 2002). По оценкам, ежегодно во всем мире происходит от 50 до 100 млн случаев лихорадки денге [ЭЕ], полмиллиона случаев заболевания денге в тяжелой форме (т.е. геморрагическая лихорадка денге [ЭНЕ] и шок при геморрагической лихорадке денге [Ό88]) и более чем 20000 смертей. ЭНЕ является основной причиной госпитализации и смерти среди детей в эндемических регионах. В целом, денге является наиболее распространенным следствием арбовирусного заболевания. Благодаря недавним крупным вспышкам в странах, расположенных в Латинской Америке, Юго-Восточной Азии и Западной части Тихого Океана (в том числе в Бразилии, Пуэрто-Рико, Венесуэле, Камбодже, Индонезии, Вьетнаме, Таиланде), количество случаев денге сильно возросло за последние годы. Число случаев денге не только увеличивается по мере распространения заболевания в новых районах, но и вспышки имеют склонность становится более тяжелыми.

Для предупреждения и/или контроля заболевания, ассоциированного с вирусной инфекцией, вызывающей денге, в настоящее время единственными доступными способами являются стратегии, направленные на уничтожение комаров с целью контроля переносчика инфекции. Хотя и имеет место прогресс в разработке вакцин против денге, существует много трудностей. Они включают существование явления, называемого зависимое от антитела усиление (ΑΌΕ). Выздоровление от инфекции, вызванной одним серотипом, обеспечивает пожизненный иммунитет против данного серотипа, однако придает лишь частичную и временную защиту против последующей инфекции, вызванной одним из трех остальных серотипов. При последующем инфицировании другим серотипом, уже существующие гетерологичные антитела формируют комплексы с вновь инфицирующим серотипом вируса денге, однако не нейтрализуют патоген. Вместе с тем предполагают, что облегчается вхождение вируса в клетки, что приводит к неконтролируемой репликации вируса и повышению пика концентрации вирусов. Как при первичной, так и при вторичной инфекциях повышение титров вируса ассоциировано с заболеванием денге в более тяжелой форме. Одной из причин того, что дети более подвержены заболеванию денге в тяжелой форме, чем взрослые, может быть факт того, что материнские антитела могут легко передаваться младенцам при грудном вскармливании.

В местах с двумя или несколькими серотипами, которые циркулируют одновременно, также называемыми регионами с повышенной эндемичностью, риск заболевания денге в опасной форме значительно выше из-за повышенного риска перенести вторичную, более тяжелую инфекцию. Более того, в условиях повышенной эндемичности вероятность появления более вирулентных штаммов является повышенной, что в свою очередь повышает вероятность геморрагической лихорадки денге (ЭНЕ) или шока при геморрагической лихорадке денге.

Комары, которые переносят возбудителей денге, в том числе Аебек аедурй и Аебек а1Ьор1с1и8 (желтолихорадочный комар), движутся на север земного шара. Согласно Центрам по контролю и профилактике заболеваний (СЭС) Соединенных Штатов (США) оба вида комаров в настоящее время являются повсеместными в южном Техасе. Распространение на север комаров, переносящих возбудителей денге, не ограничено распространением в США, но наблюдается также и в Европе.

Несмотря на большие усилия в течение последних 3 десятилетий, в настоящее время не существует вакцины, способной защитить людей от вирусного заболевания денге. Основной проблемой является создание разработки, которая предоставляла бы защиту от всех четырех серотипов (квадривалентной вакцины) в одинаковой степени. Более того, в настоящее время отсутствуют конкретные противовирусные лекарственные средства для лечения или предупреждения лихорадки денге, вызванной вирусной инфекцией. Очевидно, что все еще существует большая нереализованная потребность медицины в терапевтических средствах для предупреждения или лечения вирусных инфекций у животных, более конкретно у людей, а особенно для вирусных инфекций, вызванных флавивирусами, более конкретно вирусом денге. Чрезвычайно необходимыми являются соединения с хорошей противовирусной активностью, которые не имеют побочных эффектов или имеют низкие уровни побочных эффектов, характеризуются

- 1 032362 широким спектром активности против множества серотипов вируса денге, низкой токсичностью и/или подходящими фармакокинетическими или динамическими свойствами.

В настоящем изобретении предусматривают соединения, являющиеся производными моно- или дизамещенных индолов, которые проявляют сильную активность против всех четырех (4) серотипов вируса денге. Также соединения в соответствии с настоящим изобретением обладают хорошим фармакокинетическим профилем и, неожиданно, данные конкретные соединения проявляют улучшенную хиральную стабильность.

Краткое описание изобретения

Настоящее изобретение основано на неожиданном обнаружении того, что по меньшей мере одна из вышеупомянутых проблем может быть решена с помощью соединений по настоящему изобретению, применяющихся в настоящее время.

Настоящее изобретение предусматривает соединения, которые, как было показано, обладают высокой противовирусной активностью против всех четырех (4) серотипов, известных на сегодняшний день. Более того, в настоящем изобретении продемонстрировано, что эти соединения эффективно ингибируют пролиферацию вируса денге (ΌΕΝν). Следовательно, эти соединения составляют пригодный класс сильнодействующих соединений, которые можно применять при лечении и/или предупреждении вирусных инфекций у животных, млекопитающих и людей, более конкретно для лечения и/или предупреждения инфекций, вызванных вирусами денге.

Более того, настоящее изобретение относится к применению таких соединений в качестве лекарственных препаратов и к их применению для изготовления лекарственных препаратов для лечения и/или предупреждения вирусных инфекций, в частности вирусов, принадлежащих к семейству вирусов денге, у животных или млекопитающих, в частности у людей. Настоящее изобретение также относится к способам получения всех таких соединений и к фармацевтическим композициям, включающим их в эффективном количестве.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения или предупреждения вирусных инфекций, вызывающих денге у людей, с помощью введения эффективного количества одного или нескольких таких соединений или их фармацевтически приемлемых солей необязательно в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными препаратами, например с другим противовирусным средством, или вакцины против вируса денге или обоих пациенту, который нуждается в этом.

их стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли, сольвата или полиморфа, содержащих моно- или дизамещенную индольную группу;

при этом указанное соединение выбрано из группы, где

В! представляет собой Б, В₂ представляет собой Б, СН₃ или ОСН₃, и В₃ представляет собой Н,

В₁ представляет собой Н, В₂ представляет собой С1 или Б, и В₃ представляет собой СН₃,

В₁ представляет собой СН₃, В₂ представляет собой ОСН₃, Б или Н, и В₃ представляет собой Н,

В₁ представляет собой Н, В₂ представляет собой С1 или Б, и В₃ представляет собой Н,

В₁ представляет собой СН₃, В₂ представляет собой Н, и В₃ представляет собой Б,

В₁ представляет собой Б, В₂ представляет собой Н, и В₃ представляет собой СН₃,

В₁ представляет собой Н, В₂ представляет собой ОСН₃, и В₃ представляет собой Н или С1,

В! представляет собой Н, В₂ представляет собой Б, и В₃ представляет собой Б,

В1 представляет собой СБ₃ или ОСБ₃, В₂ представляет собой Н, и В₃ представляет собой Н,

В! представляет собой С1, В₂ представляет собой ОСН₃, и В₃ представляет собой Н.

В частности, соединения по настоящему изобретению или их стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль, сольват или полиморф выбраны из группы

- 2 032362

Другим аспектом настоящего изобретения является применение соединения, представленного следующей структурной формулой (I):

- 3 032362

его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли, сольвата или полиморфа, содер жащих моно- или дизамещенную индольную группу;

Κι представляет собой Г, Κ₂ представляет собой Г, СН₃ или ОСН₃, и Κ₃ представляет собой Н,

Κι представляет собой Н, Κ₂ представляет собой С1 или Г, и Κ₃ представляет собой СН₃,

Κ представляет собой СН₃, Κ₂ представляет собой ОСН₃, Г или Н, и Κ₃ представляет собой Н,

Κι представляет собой Н, Κ₂ представляет собой С1 или Г, и Κ₃ представляет собой Н,

Κι представляет собой СН₃, К₂ представляет собой Н, и К₃ представляет собой Г,

Κ представляет собой Г, К₂ представляет собой Н, и К₃ представляет собой СН₃,

Κι представляет собой Н, К₂ представляет собой ОСН₃, и К₃ представляет собой Н или С1,

Κι представляет собой Н, Κ₂ представляет собой Г, и Κ₃ представляет собой Г,

Κι представляет собой СГ₃ или ОСГ₃, Κ₂ представляет собой Н, и Κ₃ представляет собой Н,

Κι представляет собой С1, Κ₂ представляет собой ОСН₃, и Κ₃ представляет собой Н, для ингибирования репликации вируса(вирусов) денге в биологическом образце или у пациента. Частью настоящего изобретения также является фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль, сольват или полиморф вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями, разбавителями или носителями.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают их соли присоединения кислоты и основные соли. Подходящие соли присоединения кислоты образуются из кислот, которые образуют нетоксичные соли. Подходящие основные соли образуются из оснований, которые образуют нетоксичные соли.

Соединения по настоящему изобретению также могут существовать в несольватированной и сольватированной формах. Термин сольват используется в данном документе для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по настоящему изобретению и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола.

Термин полиморф относится к способности соединения по настоящему изобретению существовать в более чем одной форме или кристаллической структуре.

Соединения по настоящему изобретению можно вводить в виде кристаллических или аморфных продуктов. Они могут быть получены, например, в виде твердой прессованной массы, порошков или пленок посредством таких способов, как осаждение, кристаллизация, лиофильная сушка, сушка распылением или сушка выпариванием. Их можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими соединениями по настоящему изобретению, или в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами. Как правило, их будут вводить в виде состава в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями. Термин наполнитель используется в данном документе для описания любого ингредиента, отличного от соединения(соединений) по настоящему изобретению. Выбор наполнителя в большой степени зависит от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние наполнителя на растворимость и стабильность, а также природа лекарственной формы.

Соединения по настоящему изобретению или любая их подгруппа могут быть составлены в различные фармацевтические формы для целей введения. В качестве подходящих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно применяемые для системно вводимых лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме соли присоединения, в качестве активного ингредиента объединяют в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требующегося для введения. Эти фармацевтические композиции предпочтительно представлены в виде единичной лекарственной формы, подходящей, например, для перорального или ректального введения. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме может использоваться любая из общепринятых фармацевтических сред, такая как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п., в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, настойки, эмульсии и растворы; или твердых носителей, таких как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазывающие средства, связующие, средства для улучшения

- 4 032362 распадаемости таблеток и т.п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Благодаря своей простоте введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее предпочтительные пероральные единичные лекарственные формы, в случае которых очевидно используются твердые фармацевтические носители. Также включены препараты в твердой форме, которые могут быть преобразованы непосредственно перед применением в жидкие формы.

Особенно предпочтительным является составление вышеупомянутых фармацевтических композиций в виде единичной лекарственной формы для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, используемая в данном документе, относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения необходимого терапевтического эффекта, в сочетании с требующимся фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (в том числе делимые или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, пластинки, суппозитории, растворы или суспензии для инъекций и т.п., а также их отдельные множества.

Специалисты в области лечения инфекционных заболеваний смогут определить эффективное количество, исходя из результатов тестов, представленных в данном документе ниже. В целом, предполагается, что эффективное суточное количество будет составлять от 0,01 до 50 мг/кг веса тела, более предпочтительно от 0,1 до 10 мг/кг веса тела. Может оказаться целесообразным вводить требуемую дозу в виде двух, трех, четырех или более частей доз с соответствующими интервалами на протяжении дня. Указанные части дозы можно составлять в виде единичных лекарственных форм, например, содержащих от 1 до 1000 мг и, в частности, от 5 до 200 мг активного ингредиента на единичную лекарственную форму.

Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного используемого соединения формулы (I), конкретного состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста, веса и общего физического состояния конкретного пациента, а также другого медикаментозного лечения, которое может получать индивидуум, что хорошо известно специалистам в данной области. Более того, очевидно, что эффективное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения по настоящему изобретению. Таким образом, вышеупомянутые диапазоны эффективного количества являются лишь рекомендациями и не предназначены для ограничения в той или иной мере объема или применения настоящего изобретения.

Подразумевается, что настоящее раскрытие также включает в себя любые изотопы атомов, присутствующие в соединениях по настоящему изобретению. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают в себя С-13 и С-14.

Эти соединения, применяемые в настоящем изобретении, могут также существовать в стереохимически изомерной форме, охватывая все возможные соединения, составленные из одних и тех же атомов, связанных с помощью такой же последовательности связей, однако имеющие разные пространственные структуры, которые не являются взаимозаменяемыми. Если не упомянуто или не указано иное, то химическое обозначение соединений охватывает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, которыми могут обладать указанные соединения.

Указанная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры с основной молекулярной структурой указанного соединения. Подразумевается, что все стереохимически изомерные формы соединений, применяемые по настоящему изобретению либо в чистом виде, либо в смеси друг с другом, предназначены для включения в объем настоящего изобретения, в том числе любые рацемические смеси или рацематы.

Чистые стереоизомерные формы соединений и упомянутых в настоящем документе промежуточных продуктов определяются как изомеры, по сути не содержащие другие энантиомерны или диастереомерные формы одной и той же основной молекулярной структуры указанных соединений или промежуточных продуктов. В частности, термин стереоизомерно чистый относится к соединениям или промежуточным продуктам, характеризующимся стереоизомерным избытком по меньшей мере от 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) до стереоизомерного избытка 100% (т. е. 100% одного изомера и отсутствие другого), более конкретно к соединениям или промежуточным продуктам, характеризующимся стереоизомерным избытком от 90 до 100%, еще более конкретно характеризующимся стереоизомерным избытком от 94 до 100% и наиболее конкретно характеризующимся стереоизомерным избытком от 97 до 100%. Термины энантиомерно чистый и диастереомерно чистый следует понимать подобным образом, но в таком случае в отношении соответственно энантиомерного избытка и диастереомерного избытка смеси, представляющей интерес.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений, применяемые в соответствии с настоящим изобретением, можно получить при применении процедур, известных из уровня техники. Например, энантиомеры можно разделять друг от друга с помощью селективной кристаллизации их диастереомерных солей с оптически активными кислотами или основаниями. Их примерами являются винная кислота, дибензоилвинная кислота, дитолуоилвинная кислота и камфорсульфоновая кислота. В качестве альтернативы энантиомеры можно разделять с помощью хроматографических методик

- 5 032362 с использованием хиральных неподвижных фаз. Указанные чистые стереохимически изомерные формы можно также получить из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм соответствующих исходных веществ при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Предпочтительно, если требуется определенный стереоизомер, указанное соединение будет синтезировано с помощью стереоспецифических способов получения. В данных способах преимущественно применяют энантиомерно чистые исходные вещества.

Общие подходы синтеза

Синтез соединений общей формулы I можно осуществлять как изложено на схеме 1. 2-(4-Фтор-2метоксифенил)уксусная кислота (II) может быть преобразована в соответствующий 2-(4-фтор-2метоксифенил)ацетилхлорид (III) с использованием реактива для хлорирования, например, такого как тионилхлорид. Реакцию Фриделя-Крафтса ацетилхлорида III с замещенным индолом общей формулы IV можно осуществлять с использованием реактива, представляющего собой кислоту Льюиса, например, такого как Е!₂А1С1 или Т1С1₄, в подходящем растворителе, например, таком как СН₂С1₂ или 1,2дихлорэтан, и при подходящих условиях реакции, которые, как правило (но не исключительно), включают охлаждение, с получением 3-ацилированного индола общей формулы V. Введение анилинового фрагмента в «-положение по отношению к карбонильному фрагменту соединения общей формулы V можно осуществлять с помощью последовательности реакций, которая включает, например, бромирование V реактивом, например, таким как трибромид фенилтриметиламмония, в подходящем растворителе, например, таком как ТНР, с получением соединений общей формулы VI, и последующее приведение в реакцию соединений общей формулы VI 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина (VII) в подходящем растворителе, например, таком как СН₃С\, и как правило с использованием основания, например, такого как ТЕА или Ό№ΕΑ, с получением соединений общей формулы I в виде рацемических смесей. Хиральное разделение соединений общей формулы I можно осуществлять с помощью, например, хиральной хроматографии для получения энантиомеров А и В общей формулы I.

Схема 1

В некоторых случаях синтез промежуточного соединения общей формулы V по методу синтеза Фриделя-Крафтса зависит от наличия защитной группы (РС) в индоле-Ν на стадии реакции ФриделяКрафтса, как указано на схеме 2. С этой целью замещенный индол общей формулы IV может быть сначала преобразован в Ν-защищенное промежуточное соединение общей формулы VIII, например, такое как Ν-тозилированное промежуточное соединение общей формулы VIII (РС=Т§), с использованием реагента, например, такого как тозилхлорид, в присутствии основания, например, такого как гидрид натрия. Реакцию Фриделя-Крафтса замещенного индола общей формулы IV с хлоридом кислоты III можно осуществлять с использованием реактива, представляющего собой кислоту Льюиса, например, такого как Е!₂А1С1 или Т1С1₄, в подходящем растворителе, например, таком как СН₂С1₂ или 1,2-дихлорэтан, и при подходящих условиях реакции, которые, как правило (но не исключительно), включают охлаждение, с получением 3-ацилированного Ν-защищенного индола общей формулы IX. Удаление защитной группы РС индола-Ν промежуточного соединения общей формулы IX может быть осуществлено с участием реактива, например, такого как Ι,ίϋΙI (для РС=Т§), в смеси растворителей, например, такой как ТНР/вода, и при подходящей температуре реакции, с получением 3-ацилированного индола общей формулы V.

- 6 032362

Схема 2

Примеры

Способы ИС/М8.

Измерения в ходе осуществления высокоэффективной жидкостной хроматографии (НРЕС) проводили с помощью насоса для ИС, детектора на диодной матрице (ИЛИ) или УФ-детектора и колонки, как описано в соответствующих способах. При необходимости включали дополнительные детекторы (см. приведенную ниже таблицу способов).

Поток из колонки направляли в масс-спектрометр (М8), который был оснащен источником ионизации при атмосферном давлении. В компетенции специалиста в данной области находится установка настраиваемых параметров (например, диапазона сканирования, минимального времени измерения и т.п.) с целью получения ионов, обеспечивающих определение номинального моноизотопного молекулярного веса (МШ) соединения. Сбор данных проводили с помощью соответствующего программного обеспече ния.

Соединения описывали по их экспериментальному времени удерживания (К) и ионам. Если не указано иное, то в таблице данных указанный молекулярный ион представляет собой [М+Н]⁺ (протонированную молекулу) и/или [М-Н]^- (депротонированную молекулу). В случае если соединение не было непосредственно способно к ионизации, указывают тип аддукта (т.е. [Μ+ΝΗ₄]⁺, [М+НСОО]' и т.д.). Для молекул со сложными изотопными распределениями (Вг, С1) описанное значение является таким значением, которое получено для наименьшей массы изотопа. Все результаты получали с экспериментальными погрешностями, которые обычно связаны с применяемым способом.

Далее в данном документе 8ρϋ означает одиночный квадрупольный детектор, Μ8Ό означает масс-селективный детектор, КТ означает комнатную температуру, ВЕН означает мостиковый гибрид этилсилоксана/диоксида кремния, ΌΆΌ означает детектор на диодной матрице, Н88 означает диоксид кремния повышенной прочности.

Коды способов ЕСМ8 (поток выражен в мл/мин; температура колонки (Т) в °С; время анализа в минутах). _________________________________________________________________

Код способа	Прибор	Колонка	Подвижная фаза	Градиент	Поток т колонки	Время анализа (мин.)
ЬС-А	ИаЕегз: Αοςιιίϋγ® ирье® - ΟΑϋ/3(2Ο	ВДаГегз: ВЕН С18 (1,7 мкм, 2,1x50 мм)	А: 10 мМ ΟΗ₃ΟΟΟΝΗ₄ в 95% Н₂О+5% ΟΗ₃ΟΝ В: ΟΗ₃ΟΝ	От 95% А до 5% А за 1,3 мин. , удерживание в течение 0,7 мин.	0,8 мл/мин 55°С	2
ьс-в	ИаЕегз: Αοςιιίϋγ® ирье® - ΟΑϋ/3(2Ο	ИаЕегз: НЗЗ ТЗ (1,8 мкм, 2,1x100 мм)	А: 10 мМ ΟΗ₃ΟΟΟΝΗ₄в 95% Н₂О+5% ΟΗ₃ΟΝ В: ΟΗ₃ΟΝ	От 100% А ДО 5% А за 2,10 мин., до 0% А за 0,90 мин., до 5% А за 0,5 мин.	0,7 мл/мин 55°С	3,5
ьс-с	ИаГегз: Αοςιιίϋγ® ирье® ϋΑϋ<2иаГГго Μι его™	ИаЕегз: ВЕН С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм)	А: 95% 7 мМ ΟΗ₃ΟΟΟΝΗ₄/5% ΟΗ₃ΟΝ, В: ΟΗ₃ΟΝ	От 84,2% А в течение 0,49 мин. до 10,5% А за 2,18 мин. , удерживание	0,343 мл/мин 40°С	6,2

- 7 032362

				в течение 1,94 мин., обратно до 84,2% А за 0,73 мин., удерживание в течение 0,73 мин.
ЬС-ϋ	ОЬопех®: и1Е1та® 3000® ϋΑϋ- Вгискег® Ездигге 6000	Х-Вггбде С18 (3,5 мкм, 3,0x100 мм) с защитной колонкой (3,5 мкм, 3,0x20 мм)	А: 10 мМ СН₃СООЫН₄в Н₂О с регулировани ем до значения рН 10 с помощью раствора аммиака В: СН₃СЫ	От 50% А в течение 0,20 мин. до 10% А за 5.8 мин., удерживание в течение 4.8 мин., обратно до 50% А за 0,20 мин., удерживание в течение 3,00 мин.	1,0 мл/мин 30°С	14
ЬС-Е	ϋίοηθχ®: Шипа® 3000® ϋΑϋ- Вгискег® Ездигге 6000	Х-Вггбде С18 (3,5 мкм, 3,0x100 мм) с защитной колонкой (3,5 мкм, 3,0x20 мм)	А: 10 мМ СН₃СООЫН₄в Н₂О с регулировани ем до значения рН 10 с помощью раствора аммиака В: СН₃СЫ	От 80% А в течение 0,20 мин. до 40% А за 6.8 мин., до 10% А за 1 мин., удерживание в течение 2.8 мин., обратно до 80% А за 0,20 мин., удерживание в течение 3,00 мин.	1,0 мл/мин 30°С	14
ЬС-Е	Иабегз: Асдигбу® ИРЬС® ϋΑϋ- Асдигбу® ТО детектор	Иабегз: НЗЗ С18 (1,8 мкм, 2,1x50 мм)	А: 0,1% муравьиная кислота В: ΟΗ₃ΟΝ	От 50% А до до 10% А за 3,5 мин., удерживание в течение 1,5 мин.	0,5 мл/мин 40°С	5

Способы 8БС-М8.

Измерения в ходе 8БС проводили с использованием аналитической системы хроматографии со сверхкритической подвижной фазой, укомплектованной насосом для двухкомпонентных смесей для доставки диоксида углерода (СО₂) и модификатором, автоматическим дозатором, термостатом для колонок, детектором на диодной матрице, оснащенным проточной кюветой для работы под высоким давлением, выдерживающим значения до 400 бар. При оснащении масс-спектрометром (М8) поток из колонки направляли в (М8). В компетенции специалиста в данной области находится установка настраиваемых параметров (например, диапазона сканирования, минимального времени измерения и т.п.) с целью получения ионов, обеспечивающих определение номинального моноизотопного молекулярного веса (М^) соединения. Сбор данных проводили с помощью соответствующего программного обеспечения.

Аналитические способы 8БС-М8 (скорость потока выражена в мл/мин; температура колонки (Т) в °С; противодавление (ВРВ) в барах).

- 8 032362

Код способа	Колонка	Подвижная фаза
ЗЕС-А	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® 1С (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: МеОН
ЗЕС-В	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® 1С (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: 1РгОН +0,3% 1РгЫН₂
ЗЕС-С	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Οϋ-Η (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: МеОН
ЗЕС-ϋ	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Αϋ-Η (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН
ЗЕС-Е	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® 1С (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: МеОН
ЗЕС-Е	Колонка Оа1се1 СЫга1рак® Αϋ (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: 1РгОН +0,3% 1РгЫН₂
ЗЕС-С	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® ΙΑ (5 мкм, 250x4,6 мм)	А: СО₂ В: МеОН
ЗЕС-Н	Колонка Оа1се1 СЫга1рак® Αϋ-Η (5 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: 1РгОН +0,3% 1РгЫН₂
ЗЕС-1	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® АЗЗ (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-Д	Колонка Оа1се1 СЫга1рак® АЗЗ (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-К	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Αϋ3 (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-Ь	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Αϋ3 (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: МеОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-М	Колонка 0а1се1 СК1га1рак® Οϋ3 (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-Ν	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Αϋ3 (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О
ЗЕС-0	Колонка Оа1се1 СК1га1рак® Αϋ3 (3 мкм, 150x4,6 мм)	А: СО₂ В: ЕЕОН +0,2% 1РгЫН₂+3% Н₂О

Градиент	Поток	Время анализа
т колонки
ВРВ
30% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
40% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
40% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
40% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
40% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
40% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
30% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
25% В, удерживание 7 мин.	3	7
35	100
25% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110
10% - 50% В за 6 мин., удерживание 3,5 мин.	2,5	9,5
40	110
40% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110
35% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110
35% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110
45% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110
35% В, удерживание 6 мин., до 50% за 1 мин., удерживание 2,5 мин.	2,5	9,5
40	110

Точки плавления.

Значения представляют собой либо максимальные значения, либо диапазоны точек плавления, и их получают с экспериментальными погрешностями, которые обычно связаны с данным аналитическим способом.

Э8С823е (обозначен как Э8С).

Для ряда соединений точки плавления определяли с помощью Э8С823е (МеИ1ег-То1ебо). Точки плавления измеряли при градиенте температуры 10°С/мин. Максимальная температура составляла 300°С.

- 9 032362

Углы оптического вращения.

Углы оптического вращения измеряли на поляриметре Регкш-Е1тег 341 с натриевой лампой и обозначали следующим образом: [α]° (λ, с г/100 мл, растворитель, Т°С).

[α]λ^τ= (100а)/(1хс), где 1 означает длину пути, дм, с означает концентрацию в г/100 мл для образца при температуре Т (°С) и длине волны λ (в нм). Если используемая длина волны света составляет 589 нм (Ό-линия натрия), то вместо этого можно использовать символ Ό. Всегда следует приводить знак направления вращения (+ или -). В случае использования данного уравнения концентрацию и растворитель всегда приводят в круглых скобках после угла вращения. Угол вращения указывают в градусах, а единицы концентрации не приводят (принято, что они представлены в г/100 мл).

Пример 1. Синтез 1-(6-фтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 1) и хиральное разделение на энантиомеры 1А и 1В.

Синтез промежуточного соединения 1 а.

2-(4-Фтор-2-метоксифенил)уксусную кислоту [СА8 886498-61-9] (28,9 г, 157 ммоль) добавляли небольшими порциями к тионилхлориду (150 мл) и полученный в результате раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель концентрировали при пониженном давлении и выпаривали совместно с толуолом с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (31,8 г) в виде маслянистого остатка, который применяли без дополнительной очистки на следующей стадии.

Синтез промежуточного соединения 1Ь.

Раствор 6-фтор-1Н-индола [СА8 399-51-9] (14,2 г, 105 ммоль) в СН₂С1₂ (400 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере Ν₂. К перемешиваемому раствору в течение периода 10 мин добавляли 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (160 мл, 160 ммоль) и полученную в результате смесь выдерживали при 0°С в течение 40 мин. Затем добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил) ацетилхлорида 1а (31,8 г, 157 ммоль) в СН₂С1₂ (300 мл) в течение периода 2,5 ч при поддержании внутренней температуры реакционной смеси ниже 5°С. Температуру перемешиваемой реакционной смеси поддерживали при 0°С в течение 3,5 ч. Ледяную баню удаляли и после перемешивания при комнатной температуре в течение 2,5 ч реакционную смесь снова охлаждали до 0°С, реакцию смесь гасили посредством медленного добавления раствора тетрагидрата тартрата калия-натрия [СА8 6100-16-9] (59,6 г, 210 ммоль) в воде (70 мл) при поддержании внутренней температуры смеси ниже 10°С. После перемешивания в течение дополнительных 30 мин при 0°С ледяную баню удаляли и полученную в результате смесь разбавляли ТНЕ (1 л). Добавляли Να₂8Ο₄ (150 г) и после перемешивания в течение ночи смесь фильтровали через ЭюаШе®. Осадок на фильтре промывали два раза ТНЕ (2x1 л). Объединенные фильтраты выпаривали при пониженном давлении до остаточного объема приблизительно 50 мл. Белый осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 1-(6-фтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 1Ь (22,3 г) в виде белого порошка.

Синтез соединения 1 и хиральное разделение энантиомеров 1 А и 1 В.

Перемешиваемый раствор 1-(6-фтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 1Ь (11,0 г, 36,3 ммоль) в ТНЕ (300 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-5 6-1] (14,3 г, 38,2 ммоль) в ТНЕ (100 мл) в течение периода 45 мин. Полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и выпаривали при пониженном давлении до белого остатка. Этот остаток, содержащий неочищенный 2-бром-1-(6фтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанон 1с, растворяли в ацетонитриле (300 мл). После добавления 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (14,8 г, 73 ммоль) и диизопропилэтиламина (13 мл, 75 ммоль) смесь перемешивали при 50°С в течение двух дней до полного превращения в соединение 1. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, остаток смешивали с водой (500 мл) и продукт экстрагировали с помощью 2-метил-ТНЕ (2x500 мл). Объединенные органические слои промывали 0,5н. НС1 (800 мл), насыщенным водным раствором ΝαΜ€Ο₃ (200 мл) и солевым

- 10 032362 раствором (200 мл), высушивали над Мд80₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток кристаллизовали из ЕЮАс (50 мл). Твердые вещества отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 1-(6-фтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 1, 9,9 г) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 1 (9,67 г) осуществляли посредством хиральной хроматографии с нормальной фазой (неподвижная фаза: А8 20 мкм (1 кг), подвижная фаза: 100% МеОН). Фракции, содержащие продукт, которые содержали первый элюированный энантиомер, объединяли и выпаривали при пониженном давлении (водяная баня, 38°С) до остаточного объема 30 мл. Полученную в результате суспензию фильтровали и твердые вещества промывали небольшими фракциями МеОН и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 1А (2,9 г) в виде белого твердого вещества. Объединенные фракции, содержащие продукт второго элюированного продукта, выпаривали при пониженном давлении (водяная баня, 37°С) до остаточного объема 90 мл. Твердые вещества отфильтровывали, промывали небольшими фракциями МеОН и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 1В (3,15 г).

Соединение 1:

’Н ЯМР (360 МГц, ΌΜ80-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,73 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,23 (ά, 1=7,75 Гц, 1Н),

6.56- 6,62 (т, 2Н), 6,74 (ΐά, 1=8,48, 2,48 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,46 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,35, 2,50 Гц, 1Н), 7,027,11 (т, 2Н), 7,28 (άά, >9,62, 2,38 Гц, 1Н), 7,37 (άά, 1=8,61, 6,83 Гц, 1Н), 8,15 (άά, >8,76, 5,59 Гц, 1Н), 8,44 (з, 1Н), 12,09 (Ьг. з., 1Н).

ЕС/М8 (способ ЬС-А): Кд 1,08 мин, МН⁺ 501.

Энантиомер 1А:

’Н ЯМР (600 МГц, ΌΜ80-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,23 (ά, >7,78 Гц, 1Н), 6,58-6,59 (т, 1Н), 6,59-6,60 (т, 1Н), 6,73 (ΐά, >8,44, 2,49 Гц, 1Н), 6,92 (ΐ, 1=1,61 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,30, 2,49 Гц, 1Н), 7,04 (ά, >7,80 Гц, 1Н), 7,06 (άάά, >9,68, 8,80, 2,35 Гц, 1Н), 7,27 (άά, 1=9,61, 2,27 Гц, 1Н), 7,37 (άά, >8,66, 6,90 Гц, 1Н), 8,15 (άά, >8,80, 5,58 Гц, 1Н), 8,43 (з, 1Н), 12,09 (Ьг. з., 1Н).

ЕС/М8 (способ ЬС-А): Кд 1,08 мин, МН⁺ 501.

[а]_о ²⁰: +131,7° (с 0,48, ΌΜΕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-К): Кд 2,22 мин, МН⁺ 501, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 241°С.

Энантиомер 1 В:

’Н ЯМР (360 МГц, ΌΜ80-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,23 (ά, >7,77 Гц, 1Н),

6.56- 6,61 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, >8,48, 2,46 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,83 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,36, 2,49 Гц, 1Н), 7,017,12 (т, 2Н), 7,27 (άά, >9,62, 2,38 Гц, 1Н), 7,36 (άά, >8,62, 6,85 Гц, 1Н), 8,15 (άά, >8,77, 5,59 Гц, 1Н), 8,44 (з, 1Н), 12,07 (Ьг. з, 1Н).

ЕС/М8 (способ ЬС-А): Кд 1,07 мин, МН⁺ 501.

[а]о²⁰: -127,7° (с 0,535, ОМЕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-К): Кд 3,68 мин, МН⁺ 501, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 249°С.

Пример 2. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 2) и хиральное разделение на энантиомеры 2А и 2В.

г, 36,2 ммоль) в

Синтез промежуточного соединения 2а.

Перемешиваемый раствор 6-фтор-7-метил-1Н-индола [СА8 57817-10-4] (5,41

СН₂С1₂ (100 мл) охлаждали на льду в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (54,4 мл, 54,4 ммоль). Через 15 мин при 0°С добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2метоксифенил)ацетилхлорида 1а (11,0 г, 54,4 ммоль, для синтеза, см. пример 1) в СН₂С1₂ (30 мл) при поддержании внутренней температуры ниже 5°С. Ледяную баню удаляли и полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь медленно вли

- 11 032362 вали в охлажденный (0°С) насыщенный водный раствор NаНСО₃. Смесь фильтровали через ЭкаШе® и осадок на фильтре промывали ТНЕ. Объединенные фильтраты экстрагировали с помощью ЕЮАс, высушивали над МдЗО₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с СН₂С1₂ и твердые вещества отфильтровывали с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3ил)этанона 2а (7,47 г) в виде белого порошка.

Синтез промежуточного соединения 2Ь.

Перемешиваемый раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 2а (7,43 г, 23,56 ммоль) в ТНЕ (100 мл) охлаждали при 0°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [САЗ 4207-56-1] (8,96 г, 23,8 ммоль) в ТНЕ (100 мл). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Суспензию фильтровали для удаления твердых веществ и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с СН2С12, твердые вещества отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 2-бром-2(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 2Ь (8,95 г).

Синтез соединения 2 и хиральное разделение энантиомеров 2А и 2В.

2-Бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 2Ь (3,07 г, 7,8 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [САЗ 62606-02-4] (1,63 г, 8,11 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,35 мл, 7,83 ммоль) смешивали в 04^Ν (100 мл) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: НР-ЗрЬег 25 мкм (340 г), подвижная фаза: гептан/ЕЮАс, градиент от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Небольшую аликвоту маслянистого остатка отверждали посредством растирания маслянистого остатка с СН2С12. Твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали СН2С12 и высушивали под вакуумом с получением 2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(6-фтор-7-метил-1Н-индол-3 -ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанон (соединение 2, 250 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 2 (787 мг) осуществляли посредством препаративной ЗЕС (неподвижная фаза: СЫга1рак® Э1асе1 Οι 30x250 мм, подвижная фаза: СО₂, МеОН с 0,2% ιΡγΝΉ₂) и фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Первый элюированный энантиомер дополнительно очищали посредством колоночной хроматографии (неподвижная фаза: НР-ЗрЬег 25 мкм (10 г), подвижная фаза: гептан/ЕЮАс, градиент от 100/0 до 0/100). Выпаривание фракций, содержащих продукт, и лиофилизация маслянистого остатка из смеси 04^Ν и воды обеспечили энантиомер 2 А (91 мг) в виде аморфного порошка. Второй элюированный энантиомер дополнительно очищали посредством колоночной хроматографии (неподвижная фаза: НР-ЗрЬег 25 мкм (10 г), подвижная фаза: гептан/ЕЮАс, градиент от 100/0 до 0/100). Выпаривание фракций, содержащих продукт, и лиофилизация маслянистого остатка из смеси 04^Ν и воды обеспечили энантиомер 2В (141 мг) в виде аморфного порошка.

Соединение 2:

' Н ЯМР (360 МГц, ЭМЗО-ά..) δ ррт 2,38 (8, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,25 (ά, 1=7,69 Гц, 1Н), 6,59 (ά, 1=10,28 Гц, 2Н), 6,73 (1, 1=8,32 Гц, 1Н), 6,88-7,10 (т, 4Н), 7,36 (1, 1=7,68 Гц, 1Н), 7,97 (άά, 1=8,00, 6,07 Гц, 1Н), 8,45 (8, 1Н), 12,23 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/МЗ (способ ЬС-А): К₁ 1,11 мин, МН⁺ 515.

Энантиомер 2А:

'|| ЯМР (360 МГц, ΌΜδΟ-άβ) δ ррт 2,38 (ά, 1=1,57 Гц, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н),

6,25 (ά, 1=7,74 Гц, 1Н), 6,56-6,62 (т, 2Н), 6,73 (ίά, 1=8,49, 2,49 Гц, 1Н), 6,90-7,07 (т, 4Н), 7,36 (άά, 1=8,62, 6,83 Гц, 1Н), 7,97 (άά, 1=8,71, 5,21 Гц, 1Н), 8,45 (8, 1Н), 12,22 (Ьг. 8., 1Н).

ЬС/МЗ (способ ЬС-В): К₁ 2,06 мин, МН⁺ 515.

|ιζ| ² : +110,6° (с 0,5, ЭМЕ).

Хиральная ЗЕС (способ ЗЕС-Ь): К, 2,86 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 2В:

'|| ЯМР (360 МГц, ЭМЗО-аД δ ррт 2,38 (ά, 1=1,59 Гц, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н),

6,25 (ά, 1=7,73 Гц, 1Н), 6,56-6,59 (т, 1Н), 6,59-6,62 (т, 1Н), 6,73 (ίά, 1=8,47, 2,46 Гц, 1Н), 6,87-7,10 (т, 4Н), 7,36 (άά, 1=8,60, 6,83 Гц, 1Н), 7,97 (άά, 1=8,68, 5,23 Гц, 1Н), 8,45 (8, 1Н), 12,22 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/МЗ (способ ЬС-В): Р 2,07 мин, МН⁺ 515.

|ιζ| ² : -104,1° (с 0,538, ЭМЕ).

Хиральная ЗЕС (способ ЗЕС-Ь): К, 3,38 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Пример 3. Синтез 1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-(метокси-5(метилсульфонил)фенил)этанона (соединение 3) и хиральное разделение на энантиомеры 3А и 3В.

- 12 032362

Синтез промежуточного соединения 3 а.

Перемешиваемый раствор 6-хлор-7-метил-1Н-индола [СА8 57817-09-1] (3,2 г, 19,3 ммоль) в СН₂С1₂(150 мл) в потоке Ν₂ охлаждали на охлаждающей бане лед-ЫаС1. Добавляли 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (29 мл, 29 ммоль) в течение периода 2 мин и охлажденный раствор перемешивали при -10°С в течение 30 мин. Добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (5,48 г, 27,1 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (30 мл) в течение 30 мин при поддержании внутренней температуры ниже -10°С, полученную в результате смесь перемешивали в течение дополнительных 2 ч при -10°С. Реакцию гасили посредством медленного добавления раствора тетрагидрата тартрата калия-натрия [СА8 6100-16-9] (10,9 г, 38,6 ммоль) в воде (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. В реакционной смеси присутствовал белый осадок. Осадок выделяли посредством фильтрации, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 3а (4200 мг) в виде серовато-белого твердого вещества.

Синтез промежуточного соединения 3Ь.

Раствор 1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 3а (2000 мг, 6,03 ммоль) в ТНГ (120 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СЛ8 4207-56-1] (2,38 г, 6,33 ммоль) в ТНГ (35 мл) и смесь перемешивали в течение дополнительных 90 мин при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением 2-бром-1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-(4фтор-2-метоксифенил)этанона 3Ь (2200 мг) в виде серовато-белого порошка.

Синтез соединения 3 и хиральное разделение энантиомеров 3А и 3В.

2-Бром-1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанон 3Ь (1,29 г, 3,15 ммоль) суспендировали в ΕΚ^Ν (60 мл). Добавляли 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [СА8 62606-02-4] (0,7 г, 3,46 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,2 мл, 6,9 ммоль), и перемешиваемую смесь нагревали при 65°С в течение 4 ч, смесь концентрировали в вакууме и остаток распределяли между ЕЮАс и водой. Органический слой отделяли, высушивали над Να₂8Ο₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии (неподвижная фаза: силикагель Огасе Κονο1βΓΪ8® (330 г), подвижная фаза: градиент ЕЮАс/гептан от 50/50 до 100/0) и затем посредством препаративной НРЬС (стационарная фаза: ЦрЕзрЬеге С18 ΟΌΒ - 10 мкм, 200 г, 5 см, подвижная фаза: 0,25% раствор N^^0 в воде, СН₃С\) с получением 1-(6-хлор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)амино)этанона (соединение 3, 725 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 3 (635 мг) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: А8 5 мкм, подвижная фаза: 100% МеОН, изократическое элюирование. Длина волны детектирования 308 нм, скорость потока 1 мл/мин). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали с получением энантиомера 3А (223 мг) в качестве первого элюированного продукта и энантиомера ЗВ (247 мг) в качестве второго элюированного продукта. Оба энантиомера 3 А и 3В представлены в виде аморфных порошков.

Соединение 3:

'И ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт 2,49 (8, 3Н), 2,94 (8, 3Н), 3,77 (8, 3Н), 4,12 (8, 3Н), 6,03 (б, 1=6,31 Гц, 1Н), 6,18 (б, 1=6,27 Гц, 1Н), 6,42 (1, 1=2,20 Гц, 1Н), 6,57 (1б, 1=8,36, 2,42 Гц, 1Н), 6,64 (бб, 1=10,56, 2,42 Гц, 1Н), 6,70 (бб, 1=2,21, 1,51 Гц, 1Н), 6,84 (1, 1=1,76 Гц, 1Н), 7,24-7,30 (т, 1Н), 7,28 (б, 1=8,58 Гц, 1Н), 8,15 (б, 1=8,61 Гц, 1Н), 8,17 (б, 1=3,07 Гц, 1Н), 8,70 (Ьг. 8., 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Β): Κ 2,16 мин, МН⁺ 531.

Энантиомер 3А:

'Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б₆) δ ррт 2,50 (8, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,26 (б, 1=7,68 Гц, 1Н), 6,57-6,59 (т, 1Н), 6,60-6,63 (т, 1Н), 6,73 (1б, 1=8,48, 2,50 Гц, 1Н), 6,90-6,93 (т, 1Н), 6,96 (бб,

- 13 032362

1=11,37, 2,55 Гц, 1Н), 7,02 (ά, 1=7,71 Гц, 1Н), 7,22 (ά, 1=8,53 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,62, 6,82 Гц, 1Н), 7,99 (ά, 1=8,50 Гц, 1Н), 8,45 (8, 1Н), 12,25 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-л): Κ_ΐ 1,18 мин, МН⁺ 531.

[а]_о ²⁰: +111,1° (с 0,515, ΌΜΓ).

Хиральная 8ГС (способ 8ГС-М): Κ_ΐ 2,07 мин, МН⁺ 531, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 3В:

¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Θ-ά₆) δ ррт 2,50 (8, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,26 (ά, ά=7,70 Гц, 1Н), 6,56-6,59 (т, 1Н), 6,60-6,62 (т, 1Н), 6,73 (ΐά, 1=8,48, 2,51 Гц, 1Н), 6,91-6,93 (т, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,33, 2,53 Гц, 1Н), 7,02 (ά, ά=7,72 Гц, 1Н), 7,22 (ά, ά=8,54 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,62, 6,82 Гц, 1Н), 7,99 (ά, 1=8,50 Гц, 1Н), 8,45 (8, 1Н), 12,25 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Л): Κ_ΐ 1,18 мин, МН⁺ 531.

[а]_о ²⁰: -100,7° (с 0,55, ОМЕ).

Хиральная 8ГС (способ 8ГС-М): Κ_ΐ 2,45 мин, МН⁺ 531, хиральная чистота 100%.

Пример 4. Синтез 1-(6-хлор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 4) и хиральное разделение на энантиомеры 4 А и 4В.

Синтез промежуточного соединения 4а.

Перемешиваемый раствор 6-хлор-1Н-индола [СА8 17422-33-2] (2,23 г, 14,7 ммоль) в СН₂С1₂ (125 мл) в потоке Ν₂ охлаждали до 0°С с использованием ледяной бани. Добавляли по каплям 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (22,1 мл, 22,1 ммоль) и смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°С. Затем добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (4,47 г, 22,1 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН2С12 (30 мл) в течение периода 50 мин и полученную в результате смесь выдерживали при 0°С в течение 1ч, затем перемешивали при 10°С в течение 1 ч. После повторного охлаждения до 0°С реакцию гасили посредством медленного добавления раствора тетрагидрата тартрата калия-натрия [СА8 6100-16-9] (8,31 г, 29,4 ммоль) в воде (9 мл) и обеспечивали нагревание смеси до комнатной температуры в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли посредством добавления 2-метилТНГ (150 мл) и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Добавляли Να₂8Ο₄ (30 г) и после перемешивания в течение 30 мин смесь фильтровали через ОюаШе®. Осадок на фильтре промывали несколько раз 2-метил-ТНГ и объединенные фильтраты концентрировали под вакуумом до остаточного объема 25 мл. После отстаивания в течение 2 ч образовывался осадок, и данный осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 1-(6-хлор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 4а (2,85 г).

Синтез соединения 4 и хиральное разделение энантиомеров 4А и 4В.

Раствор 1-(6-хлор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 4а (0,8 г, 2,52 ммоль) в ТНГ (40 мл) перемешивали в потоке Ν2 и охлаждали на ледяной бане. Добавляли частями трибромид фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (0,99 г, 2,64 ммоль) и смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, а затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердые вещества удаляли из реакционной смеси посредством фильтрации. Фильтрат, содержащий неочищенный 2-бром-1-(6-хлор-1Н-индол-3-ил)-2-(4фтор-2-метоксифенил)этанон 4Ь, смешивали с 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилином [СА8 62606-024] (0,56 г, 2,77 ммоль) и диизопропилэтиламином (1,3 мл, 7,55 ммоль), растворители выпаривали при пониженном давлении. Остаток обрабатывали ΟΜ^Ν (50 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в воду (250 мл). Продукты экстрагировали 2-метил-ТНГ (2х) и объединенные органические слои высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в ЕЮАс (7,5 мл) и твердые вещества отфильтровывали. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: силикагель Огасе Кеуе1еп8® 40 г, подвижная фаза: гептан/ЕЮАс, градиент от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие продукт, объе

- 14 032362 диняли и выпаривали, а остаток далее очищали посредством препаративной НРРС (стационарная фаза: ирйзрНеге С18 ΟΟΒ - 10 мкм, 200 г, 5 см, подвижная фаза: 0,25% раствор ИЩНСО;} в воде, СН₃С^. Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали при пониженном давлении, а затем выпаривали совместно с МеОН. Твердый остаток перемешивали в Εΐ₂Ο (7,5 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением рацемического 1-(6-хлор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 4, 352 мг).

Хиральное разделение энантиомеров соединения 4 (352 мг) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: А8 500 г, 20 мкм, подвижная фаза: 100% МеОН). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Первый элюированный продукт перемешивали в СН₂С1₂ (5 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 4А (56 мг). Второй элюированный продукт перемешивали в СН₂С1₂ (3,5 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 4В (68 мг).

Соединение 4:

¹Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,73 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,59 (з, 2Н), 6,74 (ΐά, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 6,92 (з, 1Н), 6,97 (άά, 1=11,2, 2,4 Гц, 1н), 7,06 (ά, ά=7,9 Гц, 1н), 7,23 (άά, 1=8,5, 1,6 Гц, 1Н), 7,37 (άά, 1=8,4, 7,1 Гц, 1н), 7,54 (ά, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,15 (ά, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,47 (з, 1Н), 11,82-12,42 (Ьз, 1Н).

РС-М8 (способ ЬС-А): к, 1,12 мин, МН⁺ 517.

Энантиомер 4А:

¹Н ЯМР (360 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,22 (ά, >7,75 Гц, 1Н),

6,56-6,60 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, >8,45, 2,51 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,83 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,38, 2,51 Гц, 1Н), 7,06 (ά, >7,73 Гц, 1Н), 7,20 (άά, >8,49, 1,96 Гц, 1Н), 7,36 (άά, >8,66, 6,83 Гц, 1Н), 7,52 (ά, 1=1,94 Гц, 1н), 8,13 (ά, >8,49 Гц, 1н), 8,45 (з, 1Н), 12,24 (Ьг. з, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-А): К, 1,15 мин, МН⁺ 517.

[а]о²⁰: +129,9° (с 0,525, ΌΜΡ).

Хиральная 8РС (способ 8ΡΟ-Ν): К 2,77 мин, МН⁺ 517, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 245°С.

Энантиомер 4В:

¹Н ЯМР (360 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,08 (з, 3Н), 3,71 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,22 (ά, >7,75 Гц, 1Н),

6,56-6,60 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, >8,49, 2,47 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,65 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,35, 2,48 Гц, 1Н), 7,06 (ά, >7,79 Гц, 1Н), 7,20 (άά, 1=8,51, 1,93 Гц, 1Н), 7,36 (άά, >8,63, 6,84 Гц, 1Н), 7,52 (ά, 1=1,92 Гц, 1н), 8,13 (ά, 1=8,51 Гц, 1н), 8,45 (з, 1Н), 12,10 (Ьг. з, 1Н).

1.СЛ18 (способ ЬС-А): К 1,15 мин, МН⁺ 517.

[а]о²⁰: -123,3° (с 0,544, ΌΜΡ).

Хиральная 8РС (способ 8ΡΟ-Ν): к, 3,52 мин, МН⁺ 517, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 247°С.

Пример 5. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 5) и хиральное разделение на энантиомеры 5А и 5В.

Синтез промежуточного соединения 5а.

Перемешиваемый раствор 6-метокси-1Н-индола [СА8 3189-13-7] (2,54 г, 17,3 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) в потоке Ν₂ охлаждали до -22°С с использованием охлаждающей бани с ацетоном, управляемой криостатом. Добавляли по каплям 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (25,9 мл, 25,9 ммоль) и смесь перемешивали при -22°С в течение 20 мин. Затем добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2метоксифенил)ацетилхлорида 1а (5,24 г, 25,9 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (60 мл) в течение периода 90 мин при поддержании внутренней температуры ниже -20°С и полученную в результате смесь

- 15 032362 выдерживали при -20°С в течение 2,5 ч. Реакцию гасили посредством медленного добавления раствора тетрагидрата тартрата калия-натрия [СЛ8 6100-16-9] (9,74 г, 34,5 ммоль) в воде (10 мл) и смесь перемешивали при -20°С в течение 30 мин, а затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли посредством добавления ТНР (300 мл) и перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Добавляли №₂8О₄ (32 г) и после перемешивания в течение 18 ч смесь фильтровали через Э1са1йе®. Осадок на фильтре промывали несколько раз ТНБ и объединенные фильтраты концентрировали под вакуумом до остаточного объема 7,5 мл. После отстаивания в течение 4 ч образовывался осадок, и данный осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(6-метокси-1Н-индол-3-ил)этанона 5а (2,21 г).

Синтез соединения 5 и хиральное разделение энантиомеров 5 А и 5В.

Раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-1Н-индол-3-ил) этанона 5а (2,2 г, 7,02 ммоль) в ТНБ (150 мл) перемешивали в потоке Ν₂ и охлаждали на ледяной бане. Трибромид фенилтриметиламмония [СЛ8 4207-56-1] (2,77 г, 7,37 ммоль) добавляли частями и смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, а затем при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [СЛ8 62606-02-4] (4,24 г, 21,1 ммоль) и приблизительно 125 мл растворителя выпаривали при пониженном давлении. Добавляли НзСN (50 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней, а затем при 50°С в течение 2 дней. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в воду (200 мл). Продукты экстрагировали 2-метил-ТНБ (2х) и объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: силикагель Сгасе Веуе1еп8® 120 г, подвижная фаза: гептан/ЕЮЛс, градиент от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие продукт, объединяли и промывали 1н. НС1 (100 мл), водным насыщенным раствором NаНСΟз, высушивали с помощью Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток кристаллизовали из смеси СН2С12 (10 мл) и диизопропилового эфира (15 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением рацемического 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1(6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 5, 2,25). Небольшую аликвоту соединения 5 (150 мг) дополнительно очищали посредством взбалтывания в МеОН (4 мл) в течение 2 ч твердые вещества отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением рацемического 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 5, 112 мг).

Хиральное разделение энантиомеров соединения 5 (2,1 г) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: (8.8)-\УНе1к-О 1, подвижная фаза: 100% Е,ОН). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали. Первый элюированный продукт перемешивали в МеОН (6 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 5А (825 мг). Второй элюированный продукт перемешивали в МеОН (5 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 40°С с получением энантиомера 5В (7 84 мг).

Соединение 5:

¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-й₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,76 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,19 (й, 1=7,66 Гц, 1Н), 6,55-6,61 (т, 2Н), 6,72 (,й, 1=8,47, 2,49 Гц, 1Н), 6,83 (йй, 1=8,71, 2,30 Гц, 1Н), 6,90 (ΐ, 1=1,65 Гц, 1Н), 6,92-6,98 (т, 2Н), 7,00 (й, 1=7,69 Гц, 1Н), 7,36 (йй, 1=8,60, 6,85 Гц, 1Н), 8,02 (й, 1=8,71 Гц, 1Н), 8,29 (8, 1Н), 11,85 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Л): В 1,01 мин, МН⁺ 513.

Энантиомер 5А:

¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-й₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3.77 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,20 (й, 1=7,68 Гц, 1Н), 6,56-6,61 (т, 2Н), 6,72 (,й, 1=8,48, 2,48 Гц, 1Н), 6,83 (йй, 1=8,72, 2,30 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,65 Гц, 1Н), 6,92-6,98 (т, 2Н), 7,01 (й, 1=7,70 Гц, 1Н), 7,36 (йй, 1=8,61, 6,85 Гц, 1Н), 8,02 (й, 1=8,71 Гц, 1Н), 8,30 (8, 1Н), 11,76 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Л): В 1,04 мин, МН⁺ 513.

|ιζ| ² : -127,5° (с 0,6, ЭМБ).

Хиральная 8БС (способ 8БС-1): В, 3,01 мин, МН⁺ 513, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 190°С.

Энантиомер 5В:

¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-й₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,77 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,20 (й, 1=7,67 Гц, 1Н), 6,55-6,62 (т, 2Н), 6,73 (,й, 1=8,48, 2,49 Гц, 1Н), 6,83 (йй, 1=8,72, 2,30 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,65 Гц, 1Н), 6,93-6,98 (т, 2Н), 7,01 (й, 1=7,68 Гц, 1Н), 7,37 (йй, 1=8,61, 6,84 Гц, 1Н), 8,03 (й, 1=8,71 Гц, 1Н), 8,30 (8, 1Н), 11,82 (Ьг. 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Л): В 1,04 мин, МН⁺ 513.

|ιζ| ² : +125,3° (с 0,455, ЭМБ).

Хиральная 8БС (способ 8БС-1): В, 2,51 мин, МН⁺ 513, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 2 04°С.

Пример 6. 2-(4-Фтор-2-метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метил- 16 032362

Перемешиваемый раствор 7-фтор-5-метил-1Н-индола [СА8 442910-91-0] (2,54 г, 17,0 ммоль) в СН₂С1₂ (150 мл) в потоке Ν₂ охлаждали до 0°С с использованием ледяной бани. Добавляли по каплям 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (25,6 мл, 25,6 ммоль) и смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Затем добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (5,18 г, 25,6 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (150 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, а затем при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакцию выливали в ледяную воду, содержащую избыток тетрагидрата тартрата калия-натрия (СА8 6100-16-9). Смесь фильтровали через 1)1саШе® и осадок на фильтре промывали несколько раз с помощью ТНЕ. Органический слой отделяли, промывали водой, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток суспендировали в СН₂С1₂ (20 мл). Твердые вещества отфильтровывали, промывали небольшими количествами смеси СН₂С1₂/гептана (1/1) и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 6а (4,13 г).

Синтез промежуточного соединения 6Ь.

Раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 6а (4,11 г, 13,0 ммоль) в ТНЕ (100 мл) перемешивали в потоке Ν₂ и охлаждали на ледяной бане. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (5,39 г, 14,3 ммоль) в ТНЕ (150 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации, промывали с помощью ТНЕ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с небольшим количеством СН₂С1₂, твердые вещества выделяли посредством фильтрации и высушивали под вакуумом с получением 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 6Ь (4,81 г) в виде белого порошка.

Синтез соединения 6 и хиральное разделение энантиомеров 6А и 6В.

Раствор 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 6Ь (1,02 г,

2,59 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (782 мг, 3,89 ммоль) и диизопропилэтиламина (670 мкл, 3,89 ммоль) в СН₃СN (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней и смесь затем нагревали при 70°С в течение 10 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворители выпаривали при пониженном давлении. Остаток поглощали с помощью СН₂С1₂, промывали с помощью 0,5н. НС1 и воды, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: В1о1аде® 8NАР иЛга 100 г, подвижная фаза: ЕЮАс:ЕЮН (3:1)/гептан, градиент от 0/100 до 50/50). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали при пониженном давлении с получением рацемического 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(7-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метил- сульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 6, 747 мг) в виде белого твердого вещества.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 6 (747 мг) осуществляли посредством препаративной 8ЕС (неподвижная фаза: СЫга1рак® О1асе1 АО 20x250 мм, подвижная фаза: СО₂, Е1ОН с 0,2% 1Рг\11₂). Фракции, содержащие продукт, объединяли, выпаривали при пониженном давлении и высушивали под вакуумом при 50°С. С помощью первого элюированного продукта получили энантиомер 6А (275 мг) в виде белого аморфного твердого вещества. С помощью второго элюированного продукта получили энантиомер 6В (259 мг) в виде аморфного белого порошка.

Соединение 6.

ЬС/М8 (способ ЬС-А): Κ_ΐ 1,13 мин, МН⁺ 515.

Энантиомер 6А:

¹Н ЯМР (360 МГц, ΏΜ8Ο-ά₆) δ ррт 2,39 (з, 3Н), 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,78 Гц, 1Н), 6,55-6,62 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,48, 2,49 Гц, 1Н), 6,88-6,99 (т, 3Н), 7,01 (ά, 1=7,80 Гц, 1Н), 7,35 (άά, 1=8,61, 6,83 Гц, 1Н), 7,79 (з, 1Н), 8,40 (з, 1Н), 12,49 (Ьг. з, 1Н).

- 17 032362

1.С.М8 (способ ЬС-В): К₍ 2,04 мин, МН⁺ 515.

[α]_ο ²⁰: +134,0° (с 0,332, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-О): К₍ 2,24 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 6В:

¹Н ЯМР (360 МГц, ЭМ8О-йб) δ ррт 2,39 (з, 3Н), 3,10 (8, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,25 (й, 1=7,79 Гц, 1Н), 6,57-6,61 (т, 2Н), 6,74 (1й, 1=8,48, 2,48 Гц, 1Н), 6,89-6,99 (т, 3Н), 7,02 (й, 1=7,80 Гц, 1Н), 7,36 (йй, 1=8,62, 6,83 Гц, 1Н), 7,79 (з, 1Н), 8,41 (з, 1Н), 12,47 (Ьг. з, 1Н).

1.С.М8 (способ ЬС-В): К₍ 2,04 мин, МН⁺ 515.

[а]_о ²⁰: -129,2° (с 0,288, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-О): К₍ 3,40 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Пример 7. Синтез 1-(5,6-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 7) и хиральное разделение на энантиомеры 7А и 7В.

Синтез промежуточного соединения 7 а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (19,9 мл, 19,9 ммоль) при 0°С к раствору 5,6-дифтор-1Н-индола [СА8 169674-01-5] (2,0 г, 13,1 ммоль) в СН₂С1₂ (24 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (4,0 г, 19,6 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (24 мл). Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли 1 н раствор сегнетовой соли (50 мл) и реакционную смесь энергично перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1. Водную фазу экстрагировали с помощью ЕЮАс. Органические фазы объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(5,6-дифтор-1Ниндол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 7а (4,0 г).

Синтез промежуточного соединения 7Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (1,9 г, 2,37 ммоль) в ТНР (30 мл) при 0°С к раствору 1-(5,6-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)этанона 7а (1,5 г, 4,70 ммоль) в ТНР (50 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин и при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглощали минимальным количеством ацетонитрила. Осадок отфильтровывали с получением 2-бром-1-(5,6-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)этанона 7Ь (1,9 г).

Синтез соединения 7 и хиральное разделение энантиомеров 7А и 7В.

Смесь 2-бром-1-(5,6-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 7Ь (0,800 г, 2,01 ммоль) и 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (1,2 г, 6,03 ммоль) в ацетонитриле (8 мл) облучали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали 1н. НС1. Органическую фазу промывали водным насыщенным раствором NаНСОз и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток кристаллизовали из ацетонитрила с получением 1-(5,6-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 7, 640 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 7 (596 мг) осуществляли посредством препаративной хиральной 8РС (неподвижная фаза: СЫга1рак® 1А 5 мкм 250x20 мм, подвижная фаза: 70% СО₂, 30% МеОН) с получением 250 мг первого элюированного энантиомера и 250 мг второго элюированного энантиомера. Первый элюированный энантиомер отверждали посредством растирания с Е1₂О с получением энантиомера 7А (194 мг) в виде аморфного порошка. Второй элюированный энантиомер отверждали по

- 18 032362 средством растирания с Εΐ₂0 с получением энантиомера 7В (212 мг) в виде аморфного порошка.

Соединение 7:

Ίί ЯМР (300 МГц, ЭМ80М₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,23 (ά, >7,8 Гц, 1Н), 6,576,61 (т, 2Н), 6,74 (ΐά, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,91 (з, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,4, 2,5 Гц, 1Н), 7,06 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,9 Гц, 1Н), 7,54 (άά, 1=10,8, 7,0 Гц, 1Н), 8,01 (άά, 1=11,2, 8,1 Гц, 1н), 8,48 (з, 1Н), 12,19 (Ьг. з., 1Н).

1.С-М8 (способ ЬС-О) К 3,3 мин, МН⁺ 519.

Энантиомер 7А:

Ίί ЯМР (500 МГц, ЭМ80М₆) δ ррт 3,08 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,22 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,55-

6,60 (т, 2Н), 6,74 (ΐά, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,88-6,92 (т, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,2, 2,4 Гц, 1Н), 7,04 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,4, 6,9 Гц, 1Н), 7,53 (άά, 1=10,7, 6,9 Гц, 1Н), 8,00 (άά, 1=11,2, 8,0 Гц, 1Н), 8,47 (з, 1Н),

12,18 (Ьг. з., 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-С): К 3,00 мин, МН⁺ 519.

[а]_о ²⁰: +103,9° (с 0,282, ЭМЕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-О): Кд 3,16 мин, МН⁺ 519, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 7В:

6,61 (т, 2Н), 6,74 (ΐά, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,91 (з, 1н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,4 Гц, 1Н), 7,04 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,5, 6,9 Гц, 1Н), 7,53 (άά, 1=10,7, 6,9 Гц, 1Н), 8,00 (άά, 1=11,0, 8,2 Гц, 1н), 8,47 (з, 1Н), 12,18 (Ьг. з., 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-С): К 3,00 мин, МН⁺ 519.

[а]_о ²⁰: -109,2° (с 0,285, ЭМЕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-О): Кд 3,92 мин, МН⁺ 519, хиральная чистота 99,17%.

Пример 8. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 8) и хиральное разделение на энантиомеры 8А и 8В.

Синтез промежуточного соединения 8а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (22 г, 22 ммоль) при 0°С к раствору 5фтор-7-метил-1Н-индола [СА8 1082041-52-8] (1,62 г, 10,9 ммоль) в СН₂С1₂ (45 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (3,3 г, 16,3 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН2С12 (30 мл) при 0°С. Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли раствор сегнетовой соли (1 н., 75 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1. Органическую фазу промывали 1н. НС1 и солевым раствором, высушивали над Мд80₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглощали минимальным количеством ЕЮАс. Осадок отфильтровывали с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 8а (2,4 г).

Синтез промежуточного соединения 8Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (2,2 г, 5,85 ммоль) в ТНЕ (60 мл) при 0°С к раствору 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-7-метил-1Н-индол-3ил)этанона 8а (1,66 г, 5,26 ммоль) в ТНЕ (45 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-7метил-1Н-индол-3-ил)этанона 8Ь (1,9 г).

Синтез соединения 8 и хиральное разделение энантиомеров 8А и 8В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 8Ь (0,100 г, 0,254 ммоль) и 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (0,155 г, 0,770 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) облучали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбав

- 19 032362 ляли ЕЮАс и промывали 1н. НС1. Органическую фазу промывали водным насыщенным раствором ЫаНСО₃ и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток кристаллизовали из ЕЮАс и гептана с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1(5-фтор-7-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 8, 95 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 8 (4 91 мг) осуществляли посредством препаративной хиральной 8РС (неподвижная фаза: СЫга1рак 1С, 5 мкм, 250x30 мм, подвижная фаза: 60% СО₂, 40% 1РгОН) с получением 224 мг первого элюированного энантиомера и 212 мг второго элюированного энантиомера. Первый элюированный энантиомер кристаллизовали из Е1₂О и нескольких капель СН₃СЫ с получением энантиомера 8 А (174 мг) в виде белого порошка. Второй элюированный энантиомер кристаллизовали из Е1₂О и нескольких капель СН₃СЫ с получением энантиомера 8В (164 мг) в виде белого порошка.

Соединение 8:

¹Н ЯМР (300 МГц, ОМ8О-б₆) δ ррт 2,47 (₈, 3Н), 3,09 (₈, 3Н), 3,72 (₈, 3Н), 4,00 (₈, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,55-6,64 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,87-6,98 (т, 3Н), 7,04 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 7,66 (άά, 1=9,7, 2,5 Гц, 1Н), 8,46 (8, 1Н), 12,23 (Ьг. 8., 1Н).

ЕС-М8 (способ ЬС-Е): 8,5 мин, МН⁺ 515.

Энантиомер 8А:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О^₆) δ ррт 2,47 (8, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,53-6,65 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,8, 2,4 Гц, 1Н), 6,88-6,99 (т, 3Н), 7,05 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,8, 6,9 Гц, 1Н), 7,66 (άά, 1=9,6, 2,4 Гц, 1Н), 8,46 (8, 1Н), 12,24 (Ьг. 8., 1Н).

ЕС/М8 (Способ ЬС-С): 3,07 мин, МН⁺ 515.

[а]_о ²⁰: +101,1° (с 0,282, ЭМЕ).

Хиральная 8РС (способ 8РС-В): К 3,31 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 208°С.

Энантиомер 8В:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О^₆) δ ррт 2,47 (8, 3Н), 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,54-6,63 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,87-6,98 (т, 3Н), 7,04 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,35 (άά, 1=8,5, 6,9 Гц, 1Н), 7,66 (άά, 1=9,6, 2,4 Гц, 1Н), 8,46 (8, 1Н), 12,24 (Ьг. 8., 1Н).

ЕС/М8 (способ ЬС-С): К 3,07 мин, МН⁺ 515.

[а]_о ²⁰: -105,3° (с 0,264, ЭМР).

Хиральная 8рС (способ 8РС-В): К 4,39 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 99,67%.

Температура плавления: 208°С.

Пример 9. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 9) и хиральное разделение на энантиомеры 9А и 9В.

Синтез промежуточного соединения 9а.

Добавляли по каплям 1М раствор диэтилалюминийхлорида в гексане (13,5 мл, 13,5 ммоль) при -15°С к раствору 5-фтор-6-метил-1Н-индола [СА8 1000343-16-7] (1,0 г, 6,97 ммоль) в СН₂С1₂ (30 мл). Через 30 мин при -15°С медленно добавляли раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида (2,0 г, 10,0 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН2С12 (20 мл). Реакцию перемешивали при -15°С в течение 3 ч. Добавляли 1,5н. раствор сегнетовой соли (50 мл) и реакционную смесь энергично перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1. Органическую фазу промывали 1н. НС1 и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метил-1Ниндол-3-ил)этанона 9а (1,2 г).

Синтез промежуточного соединения 9Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (1,8 г, 4,81 ммоль) в ТНР (50 мл) при 0°С к раствору 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метил-1Н-индол-3

- 20 032362 ил)этанона 9а (1,2 г, 3,78 ммоль) в ТНР (40 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин и при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглощали с помощью минимального количества ЕЮАс. Осадок отфильтровывали с получением 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метил1Н-индол-3-ил)этанона 9Ь (1,2 г).

Синтез соединения 9 и хиральное разделение энантиомеров 9 А и 9В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 9Ь (0,204 г, 0,517 ммоль) и 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (0,309 г, 1,54 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) и ТНР (1 мл) облучали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали 1н. НС1. Органическую фазу промывали водным насыщенным раствором ЫаНСОз и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток кристаллизовали из ЕЮАс с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1(5-фтор-6-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 9, 162 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 9 (462 мг) осуществляли посредством препаративной хиральной 8РС (неподвижная фаза: СЫта1рак ΛΌ-Н 5 мкм 250x30 мм, подвижная фаза: 60% СО₂, 40% МеОН) с получением 160 мг первого элюированного энантиомера и 170 мг второго элюированного энантиомера. Первый элюированный энантиомер снова очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 4 г, СН₂С1₂/МеОН 99/1). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (120 мг) отверждали из ЕьО и нескольких капель СН₃СЫ с получением энантиомера 9А (83 мг) в виде белого порошка. Второй элюированный энантиомер снова очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 4 г, СН₂С1₂/ЕЮАс 98/2). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (110 мг) отверждали из ЕьО и нескольких капель ί.Ή₃ί.'Ν с получением энантиомера 9В (68 мг) в виде белого порошка.

Соединение 9:

+ ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-б₆) δ ррт 2,31 (б, 1=1,4 Гц, 3Н), 3,08 (в, 3Н), 3,72 (в, 3Н), 3,99 (в, 3Н), 6,20 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,56-6,61 (т, 2Н), 6,73 (1б, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,90 (т, 1Н), 6,95 (бб, 1=11,6, 2,4 Гц, 1Н), 7,03 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,28-7,42 (т, 2Н), 7,77 (б, 1=10,6 Гц, 1Н), 8,39 (в, 1Н), 12,02 (в, 1Н).

1.С-М8 (способ БС-Е): Г 8,6 мин, МН⁺ 515.

Энантиомер 9А:

+ ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-б₆) δ ррт 2,29-2,32 (т, 3Н), 3,08 (в, 3Н), 3,71 (в, 3Н), 3,99 (в, 3Н), 6,20 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,53-6,61 (т, 2Н), 6,73 (1б, 1=8,4, 2,5 Гц, 1Н), 6,90 (в, 1Н), 6,95 (бб, 1=11,4, 2,5 Гц, 1Н), 7,04 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,28-7,42 (т, 2Н), 7,77 (б, 1=10,4 Гц, 1Н), 8,40 (в, 1Н), 12,05 (Ьг. в., 1Н).

1.СА18 (способ БС-С): Г 3,05 мин, МН⁺ 515.

|ιζ| ² : +125,5° (с 0,3945, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-Э): Г, 2,54 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 99,05%.

Температура плавления: 206°С.

Энантиомер 9В:

+ ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-б₆) δ ррт 2,26-2,33 (т, 3Н), 3,08 (в, 3Н), 3,71 (в, 3Н), 3,99 (в, 3Н), 6,20 (б, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,53-6,60 (т, 2Н), 6,73 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,90 (в, 1Н), 6,95 (бб, 1=11,4, 2,5 Гц, 1Н), 7,04 (б, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,27-7,41 (т, 2Н), 7,77 (б, 1=10,7 Гц, 1Н), 8,40 (в, 1Н), 12,05 (Ьг. в., 1Н).

1.СА18 (способ БС-С): Г 3,05 мин, МН⁺ 515.

|ιζ| ² : -129,5° (с 0,3955, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-Э): Г, 2,98 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 99,18%.

Температура плавления: 206°С.

Пример 10. 2-(4-Фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1-(6метокси-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанон (соединение 10) и хиральное разделение на энантиомеры 10А и 10В.

- 21 032362

Синтез промежуточного соединения 10а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (18,6 мл, 18,6 ммоль) при 0°С к раствору 6-метокси-5-метил-1Н-индола [СА8 1071973-95-9] (2 г, 12,4 ммоль) в СН₂С1₂ (60 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорид 1а (3,3 г, 16,3 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (60 мл) при 0°С. Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли ледяную воду и осадок отфильтровывали, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 2-(4-фтор2-метоксифенил)-1-(6-метокси-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 10а (3,15 г).

Синтез промежуточного соединения 10Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (3,8 г, 10,1 ммоль) в ТНГ (90 мл) при 0°С к смеси 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-5-метил-1Н-индол-3ил)этанона 10а (3,15 г, 9,6 ммоль) в ТНГ (90 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Осадок отфильтровывали и промывали Е1ОАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный в результате остаток поглощали минимальным количеством СН₃СN и диизопропилового эфира. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом с образованием 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 10Ь (2,8 г).

Синтез соединения 10 и хиральное разделение энантиомеров 10А и 10В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-метокси-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 10Ь (1,0 г, 2,46 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (743 мг, 3,69 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,64 мл, 3,69 ммоль) в СН₃СN (15 мл) и ТНГ (15 мл) нагревали при 70°С в течение 12 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в Е1ОАс. Органический слой промывали два раза 1н. НС1, промывали водой, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Выполняли очистку посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, СН₂С1₂/СН₃ОН 99,8/0,2). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1-(6-метокси-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 10, 638 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 10 осуществляли посредством препаративной хиральной 8ГС (неподвижная фаза: СЫта1рак® А1)-11 5 мкм 250x30 мм, подвижная фаза: 70% СО₂, 30% 1РгОН) с получением 244 мг первого элюированного энантиомера и 163 мг второго элюированного энантиомера. Первый элюированный энантиомер снова очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, СН2С12/Е1ОАс 98/2). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (161 мг) отверждали из Е1₂О и нескольких капель СН₃СN с получением энантиомера 10А (136 мг). Второй элюированный энантиомер снова очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, СН2С12/Е1ОАс 98/2). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (158 мг) отверждали из Е1₂О и нескольких капель СН₃СN с получением энантиомера 10В (135 мг).

Соединение 10:

¹Н ЯМР (500 МГц, ПМ8О-66) δ ррт 2,21 (8, 3Н), 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,79 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н),

6,18 (б, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,55-6,60 (т, 2Н), 6,72 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,89-7,00 (т, 4Н), 7,35 (бб, 1=8,5, 7,1 Гц, 1Н), 7,90 (8, 1Н), 8,23 (8, 1Н), 11,75 (Ьг. 8., 1Н).

БС/М8 (способ ЬС-С): Κ 3,04 мин, МН⁺ 527.

Температура плавления: 224°С.

Энантиомер 10А:

¹Н ЯМР (500 МГц, ПМ8О-б6) δ ррт 2,21 (8, 3Н), 3,08 (8, 3Н), 3,71 (8, 3Н), 3,79 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н),

6,18 (б, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,53-6,60 (т, 2Н), 6,72 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,87-7,02 (т, 4Н), 7,35 (бб, 1=8,5, 7,1 Гц, 1Н), 7,90 (8, 1Н), 8,24 (б, 1=2,8 Гц, 1Н). 11,76 (Ьг. 8., 1Н).

БС/М8 (способ ЬС-С): Κ 3,03 мин, МН⁺ 527.

[а]_о ²⁰: -121,5° (с 0,284, ЭМТ).

- 22 032362

Хиральная 8ГС (способ 8ГС-Г): Κ_ΐ 2,35 мин, МН⁺ 527, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 242°С.

Энантиомер 10В:

¹Н ЯМР (500 МГц, ЭМ8ОХ) δ ррт 2,21 (8, 3Н), 3,08 (8, 3Н), 3,71 (8, 3Н), 3,79 (8, 3Н), 4,00 (8, 3Н),

6,18 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,54-6,60 (т, 2Н), 6,72 (ΐά, 1=8,5, 2,2 Гц, 1Н), 6,87-7,02 (т, 4Н), 7,35 (άά, 1=8,5, 6,9 Гц, 1Н), 7,90 (8, 1Н), 8,24 (8, 1Н), 11,76 (Ьг. 8., 1Н).

1.С..М18 (способ ЬС-С): К, 3,03 мин, МН⁺ 527.

[а]_о ²⁰: +122,9° (с 0,284, ЭМГ).

Хиральная 8ГС (способ 8ГС-Г): К 3,33 мин, МН⁺ 527, хиральная чистота 99,1%.

Температура плавления: 242°С.

Пример 10.1. Хиральная стабильность энантиомера 10В при рН 7,4.

Хиральную стабильность энантиомера 10В (К=ОМе) оценивали посредством определения энантиомерного избытка (ее%) после инкубирования в течение 24 и 48 ч в буферном растворе при рН 7,4 при 40 и 60°С. Для оценки влияния метокси-заместителя энантиомера 10В (К=ОМе) на стабильность по отношению к рацемизации, хиральную стабильность энантиомера 10'В (К=Н) тестировали при тех же усло виях.

С этой целью получали 5 мкМ забуференные (рН 7,4) растворы 10В и 10'В посредством смешивания 25 мкл 100 мкМ раствора 10В и 10'В в ЭМ8О с 475 мкл водного буфера, рН 7,4. Образцы отбирали через 24 и 48 ч после инкубирования при 40 и 60°С. Аналитические образцы анализировали с помощью хиральной 8ГС (определение М8) и хиральную чистоту выражали в виде энантиомерного избытка (ее%=% энантиомера В - % энантиомера А). Оба энантиомера 10В и 10'В характеризовались хиральной чистотой 100% перед началом их инкубирования.

Е

10В (Р = ОМе)

10'В (К= Н)

Соединение	Температура	ее%
Моменты времени отбора проб (ч.)
24	48
10В	40°С	100	100
60°С	97	97
10'В	40°С	96	73
60°С	22	9

Пример 11. 2-(4-Фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанон (соединение 11) и хиральное разделение на энантиомеры 11А и 11 В.

- 23 032362

Синтез промежуточного соединения 11а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (20 мл, 20 ммоль) при 0°С к раствору 5фтор-6-метокси-1Н-индола [САЗ 1211595-72-0] (2,2 г, 13,3 ммоль) в СН₂С1₂ (60 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорид 1а (3,85 г, 19 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (60 мл) при 0°С. Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли ледяную воду и водный раствор №НСО₃. Реакционную смесь экстрагировали с помощью СН₂С1₂/МеОН. Органический слой промывали водой, высушивали над МдЗО₄, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток поглощали минимальным количеством СН2С12. Осадок отфильтровывали и высушивали с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)этанона 11а (3,2 г).

Синтез промежуточного соединения 11Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [САЗ 4207-56-1] (3,22 г, 8,56 ммоль) в ТНЕ (80 мл) при 0°С к смеси 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3ил)этанона 11а (2,7 г, 8,15 ммоль) в ТНЕ (80 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Осадок отфильтровывали, промывали ЕЮАс и водой и высушивали с получением первой партии 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3ил)этанона 11Ь (1, 5 г). Органический слой фильтрата отделяли, высушивали над МдЗО₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный в результате остаток поглощали минимальным количеством ΟΜ^Ν и диизопропилового эфира. Осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением второй партии 11Ь (1,7 г).

Синтез соединения 11 и хиральное разделение энантиомеров 11А и 11В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)этанона 11Ь (0,8 г, 1,95 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [САЗ 62606-02-4] (589 мг, 2,93 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,51 мл, 2,93 ммоль) в ΕΜ^Ν (15 мл) и ТНЕ (15 мл) нагревали при 70°С в течение 72 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в ЕЮАс. Органический слой промывали два раза 1н. НС1, промывали водой, высушивали над МдЗО₄, фильтровали и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Выполняли очистку посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, СН₂С1₂/СН₃ОН 99,5/0,5). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-фтор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-((3метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 11, 450 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 11 (380 мг) осуществляли посредством препаративной хиральной ЗЕС (неподвижная фаза: СЫга1рак® 1С 5 мкм, 250x20 мм, подвижная фаза: 70% СО₂, 30% МеОН) с получением после кристаллизации из СН₃СХ/диизопропилового эфира, 174 мг первого элюированного энантиомера (энантиомер 11 А) и 165 мг второго элюированного энантиомера (энантиомер 11 В).

Соединение 11:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМЗО-й₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,85 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,20 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,58 (8, 2Н), 6,73 (ίά, 1=8,4, 2,5 Гц, 1Н), 6,87-6,92 (т, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,5 Гц, 1Н), 7,03 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,15 (ά, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,4, 6,9 Гц, 1Н), 7,83 (ά, 1=12,0 Гц, 1Н), 8,34 (8, 1Н), 11,95 (Ьг. 8., 1Н).

ЕС/МЗ (способ ЕС-С): к, 2,89 мин, МН⁺ 531.

Температура плавления: 172°С.

Энантиомер 11А:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМЗОЛб) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,71 (8, 3Н), 3,85 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,19 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,53-6,61 (т, 2Н), 6,73 (ίά, 1=8,4, 2,5 Гц, 1н), 6,90 (8, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,5 Гц, 1Н), 7,04 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,15 (ά, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,35 (άά, 1=8,4, 6,8 Гц, 1Н), 7,82 (ά, 1=12,0 Гц, 1Н), 8,34 (8, 1Н), 11,96 (Ьг. 8., 1Н).

- 24 032362

БС/М8 (способ ЬС-С): Κ 2,89 мин, МН⁺ 531.

[а]_о ²⁰: +104,9° (с 0,264, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-Е): Κ_ΐ 2,92 мин, МН⁺ 531, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 247°С.

Энантиомер 11В:

'Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,08 (δ, 3Н), 3,71 (в, 3Н), 3,85 (в, 3Н) 3,99 (в, 3Н), 6,20 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,53-6,61 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,4, 2,5 Гц, 1Н), 6,90 (в, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,5 Гц, 1Н), 7,04 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,15 (ά, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,35 (άά, 1=8,4, 6,9 Гц, 1Н), 7,82 (ά, 1=11,7 Гц, 1Н), 8,34 (в, 1Н), 11,95 (Ьг. в., 1Н).

1.С/М8 (способ ЬС-С): Κ, 2,89 мин, МН⁺ 531.

[а]_о ²⁰: -105,7° (с 0,279, ЭМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-Е): Κ_ΐ 3,92 мин, МН⁺ 531, хиральная чистота 99,37%.

Температура плавления: 245°С.

Пример 12. 1 -(7 -Хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-(метокси-5(метилсульфонил)фенил)этанона (соединение 12) и хиральное разделение на энантиомеры 12А и 12В.

Синтез промежуточного соединения 12а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (16,5 мл, 16,5 ммоль) при 0°С к раствору 7-хлор-6-метокси-1Н-индола [СЛ8 1227604-21-8] (2 г, 11 ммоль) в СН₂С1₂ (60 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорид 1а (3,3 г, 16,3 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (60 мл) при 0°С. Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли ледяную воду и осадок отфильтровывали, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 1-(7-хлор-6метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 12а (2,7 г).

Синтез промежуточного соединения 12Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СЛ8 4207-56-1] (3,06 г, 8,15 ммоль) в ТНР (80 мл) при 0°С к смеси 1-(7-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил) этанона 12а (2,7 г, 7,76 ммоль) в ТНР (80 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Осадок отфильтровывали и промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, солюбилизировали в ЕЮАс и промывали водой. Органический слой отделяли, высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный в результате остаток поглощали минимальным количеством СН₃СХ и диизопропилового эфира. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 2-бром-1-(7-хлор-6-метокси-1Ниндол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 12Ь (3,2 г).

Синтез соединения 12 и хиральное разделение энантиомеров 12А и 12В.

Смесь 2-бром-1-(7-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 12Ь (0,9 г, 2,11 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (637 мг, 3,16 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,55 мл, 3,16 ммоль) в СН₃СХ (20 мл) и ТНР (20 мл) нагревали при 45°С в течение 72 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в ЕЮАс. Органический слой промывали два раза 1н. НС1, промывали водой, высушивали над М§§0₄, фильтровали и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Выполняли очистку посредством флэш-хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, СН₂С1₂/СН₃ОН 99,5/0,5). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния с получением 1-(7-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 12, 820 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 12 (750 мг) осуществляли посредством препара тивной хиральной 8РС (неподвижная фаза: СЫга1се1® 0Э-Н 5 мкм 250x30 мм, подвижная фаза: 60%

- 25 032362

СО₂, 40% МеОН) с получением после кристаллизации в диизопропиловом эфире, 285 мг первого элюированного энантиомера (энантиомер 12 А) и 260 мг второго элюированного энантиомера (энантиомер 12В) в виде аморфных порошков.

Соединение 12:

¹Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,87 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,24 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,51-6,64 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 6,92 (з, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,4, 2,2 Гц, 1Н), 7,03 (ά, >7,6 Гц, 1Н), 7,11 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 7,32-7,41 (т, 1Н), 8,05 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 8,36 (з, 1Н), 12,20 (з, 1Н).

1.СЛ18 (способ ЬС-С): К, 3,02 мин, МН⁺ 547.

Энантиомер 12 А:

¹Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,87 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,24 (ά, >7,6 Гц, 1Н), 6,53-6,64 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 6,92 (з, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,4, 2,2 Гц, 1Н), 7,03 (ά, >7,6 Гц, 1Н), 7,11 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,4, 7,6 Гц, 1Н), 8,05 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 8,36 (з, 1Н), 12,20 (Ьг. з., 1Н).

1.СЛ18 (способ ЬС-С): К, 3,01 мин, МН⁺ 547.

[а]_о ²⁰: +89,7° (с 0,262, ΌΜΕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-С): К 2,79 мин, МН⁺ 547, хиральная чистота 98,98%.

Энантиомер 12В:

¹Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-ά₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,87 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,24 (ά, >7,6 Гц, 1Н), 6,54-6,62 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,2 Гц, 1Н), 6,92 (з, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,2, 2,2 Гц, 1Н), 7,03 (ά, >7,6 Гц, 1Н), 7,11 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,5, 7,6 Гц, 1Н), 8,05 (ά, >8,8 Гц, 1Н), 8,36 (з, 1Н), 12,20 (Ьг. з., 1Н).

1.СЛ18 (способ ЬС-С): К 3,01 мин, МН⁺ 547.

[а]_о ²⁰: -93,2° (с 0,236, ΌΜΕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-С): К 3,76 мин, МН⁺ 547, хиральная чистота 99,66%.

Пример 13. Синтез 1-(6,7-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5хиральное разделение на энантиомеры 13А и (метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 13) и 13В.

Синтез промежуточного соединения 13 а.

Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (20 мл, 20 ммоль) при 0°С к раствору 6,7-дифтор-1Н-индола [СА8 271780-84-8] (1,5 г, 10,1 ммоль) в СН₂С1₂ (45 мл). Через 30 мин при 0°С медленно добавляли раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (3,1 г, 15,04 ммоль, синтез, см. пример 1) в СН₂С1₂ (30 мл). Реакцию перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Добавляли 1н. раствор сегнетовой соли (50 мл) и реакционную смесь энергично перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и распределяли между ЕЮАс и 1н. НС1. Водную фазу экстрагировали с помощью ЕЮАс. Органический фазы объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над Μ§8Ο₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(6,7-дифтор-1Ниндол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 13а (1,6 г).

Синтез промежуточного соединения 13Ь.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (2,3 г, 6,06 ммоль) в ТНЕ (45 мл) при 0°С к раствору 1-(6,7-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)этанона 13а (1,8 г, 5,57 ммоль) в ТНЕ (55 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин и при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и промывали ЕЮАс. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглощали минимальным количеством ацетонитрила. Осадок отфильтровывали с получением 2-бром-1-(6,7-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)этанона 13Ь (2,0 г).

Синтез соединения 13 и хиральное разделение энантиомеров 13А и 13В.

- 26 032362

Смесь 2-бром-1-(6,7-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 13Ь (1,3 г, 3,29 ммоль) и 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [СА8 62606-02-4] (2,0 г, 9,91 ммоль) в ацетонитриле (13 мл) облучали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, промывали 1н. НС1 и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали с ацетонитрилом, этилацетатом и диэтиловым эфиром с получением 1-(6,7-дифтор-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил) фенил)амино)этанона (соединение 13, 750 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 13 (1,27 г) осуществляли посредством препаративной хиральной 8РС (неподвижная фаза: СЫга1рак® 1С 5 мкм, 250x30 мм, подвижная фаза: 70% СО₂, 30% МеОН) с получением после кристаллизации из СН₂С1₂/диизопропилового эфира, 409 мг первого элюированного энантиомера (энантиомер 13 А) и 385 мг второго элюированного энантиомера (энантиомер 13В).

Соединение 13:

¹Н ЯМР (300 МГц, ОМ8О-й₆) δ ррт 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,98 (з, 3Н), 6,27 (й, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,566,63 (т, 2Н), 6,74 (1й, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (з, 1н), 6,96 (йй, 1=11,3, 2,4 Гц, 1Н), 7,06 (й, 1=7,9 Гц, 1Н),

7,25 (т, 1Н), 7,36 (йй, 1=8,6, 6,9 Гц, 1Н), 7,93 (йй, 1=8,8, 4,4 Гц, 1Н), 8,51 (й, 1= 2,8 Гц, 1Н), 12,8 (Ьг. з., 1Н). ₊

ЬС-М8 (способ ЬС-Р) К₁ 1,41 мин, МН⁺ 519.

Энантиомер 13 А:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-й₆) δ ррт 12,80 (Ьг. з, 1Н), 8,50 (з., 1Н), 7,93 (т, 1Н), 7,37 (1, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,16-7,29 (т, 1Н), 7,06 (й, 1=7,3 Гц, 1Н), 6,86-6,99 (т, 2Н), 6,74 (1, 1=7,3 Гц, 1Н), 6,60 (т, 2Н), 6,26 (й, 1=7,3 Гц, 1Н), 3,98 (з., 3Н), 3,73 (з., 3Н), 3,10 (з., 3Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-С): 3,05 мин, МН⁺ 519.

[а]_о ²⁰: -47,8° (с 0,2827, БМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-А): К1 2,52 мин, МН⁺ 519, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 226°С.

Энантиомер 13В:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-й₆) δ ррт 12,78 (Ьг. з, 1Н), 8,49 (з, 1Н), 7,92 (йй, 1=8,7, 4,3 Гц, 1Н), 7,36 (1, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,16-7,28 (т, 1Н), 7,04 (й, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,86-6,99 (т, 2Н), 6,74 (1й, 1=8,5, 1,9 Гц, 1Н), 6,546,65 (т, 2Н), 6,26 (й, 1=7,9 Гц, 1Н), 3,98 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,09 (з, 3Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-С): К₁ 3,05 мин, МН⁺ 519.

[а]п²⁰: +48,2° (с 0,3009, БМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-А): К₁ 3,04 мин, МН⁺ 519, хиральная чистота 99,57%.

Температура плавления: 222°С.

Пример 14. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 14) и хиральное разделение на энантиомеры 14А и 14В.

Синтез промежуточного соединения 14а.

Раствор 6-фтор-5-метил-1Н-индола [СА8 162100-95-0] (880 г, 5,9 ммоль) в СН2С12 (50 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (8,85 мл, 8,85 ммоль) и полученную в результате смесь выдерживали при 0°С в течение 15 мин. Добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (1,67 г, 8,26 ммоль) в СН2С12 (25 мл). Перемешивание продолжали при 0°С в течение 1 ч и реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливали в перемешиваемый раствор льда/сегнетовой соли. Смесь фильтровали через Б1са1йе® и осадок на фильтре промывали несколько раз с помощью ТНР. Фильтраты объединяли. Слои разделяли и органический слой промывали солевым раствором и водой,

- 27 032362 высушивали над Μ§8Ο₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Твердый остаток суспендировали в СН₂С1₂ (30 мл). Осадок отфильтровывали, промывали небольшим количеством СН₂С1₂ и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Ниндол-3-ил)этанона 14а (1,22 г).

Синтез промежуточного соединения 14Ь.

Перемешивали раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанон 14а (1,22 г, 3,87 ммоль) в ТНР (125 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (1,6 г, 4,26 ммоль) в ТНР (25 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 2 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации и промывали ТНР. Объединенные фильтраты выпаривали при пониженном давлении. Остаток смешивали с ЕЮАс (50 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали небольшим количеством ЕЮАс и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-бром-2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 14Ь (1,48 г), который использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.

Синтез соединения 14 и хиральное разделение энантиомеров 14А и 14В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 14Ь (1,5 г, 3,65 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (1,10 г, 5,48 ммоль) и диизопропилэтиламина (629 мкл, 3,65 ммоль) в СНзСN (100 мл) перемешивали при 85°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в СН2С12 (100 мл), промывали 1н. НС1 (100 мл) и водой (100 мл), высушивали над Μ§8Ο₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: силикагель Сгасе К.еуе1епз® 120 г, подвижная фаза: ЕЮАс:ЕЮН (3:1)/гептан, градиент от 0/100 до 50/50). Требуемые фракции объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Оставшееся твердое вещество перемешивали в СН2С12 (20 мл). Осадок отфильтровывали и промывали СН2С12. Твердое вещество перемешивали в МеОН (20 мл). Осадок отфильтровывали и промывали с помощью МеОН. Твердое вещество (630 мг) дополнительно очищали посредством препаративной НРЬС (неподвижная фаза: ЦрйзрЬеге® С18 ΟΌΒ - 10 мкм, 200 г, 5 см, подвижная фаза: 0,25% раствор ΝΗ.·|Ηί.Ό₃, в воде, ί.Ή₃ί.’Ν). Требуемые фракции объединяли, выпаривали при пониженном давлении и выпаривали совместно с ЕЮАс (20 мл) с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(6-фтор-5-метил-1Н-индол-3-ил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 14, 426 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 14 (426 мг) осуществляли посредством препаративной 8РС (неподвижная фаза: СЫга1рак® Э1асе1 АО 20x250 мм, подвижная фаза: СО₂, ЕЮН+0,4% ιΓγΝΗ® Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали с образованием энантиомера 14А в качестве первого элюированного продукта и энантиомера 14В в качестве второго элюированного продукта. Энантиомеры как 14 А, так и 14В отверждали следующим образом: остатки, полученные в результате выпаривания, перемешивали в Н2О/МеОН 1/1 (5 мл) в течение 1 ч, осадок выделяли посредством фильтрации, промывали Н₂О/МеОН 1/1 и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 14А (113 мг) и энантиомера 14В (97 мг) в виде белых порошков.

Соединение 14:

¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜ8Ο-ά₆) δ ррт 2,30 (ά, 1=1,3 Гц, 3Н), 3,08 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,21 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,58 (ά, 1=1,8 Гц, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,8 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,4,

2.4 Гц, 1Н), 6,99 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,22 (ά, 1=10,3 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 8,03 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 8,37 (з, 1Н), 11,95 (Ьг з, 1Н).

ЬС^8 (способ ЬС-Β): К 2,07 мин, МН⁺ 515.

Энантиомер 14А:

¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜ8Ο-ά₆) δ ррт 2,30 (ά, 1=1,5 Гц, 3Н), 3,08 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,21 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6.58 (ά, 1=1,5 Гц, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,6 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,7 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,3,

2.5 Гц, 1Н), 6,98 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,22 (ά, 1=10,3 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 8,03 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 8,37 (з, 1Н), 11,95 (Ьг з, 1Н).

ЬС^8 (способ ЬС-Β): К 2,06 мин, МН⁺ 515.

[а]_с ²⁰: +150,0° (с 0,51, ΏΜΕ).

Хиральная 8РС (способ 8РС-1): К, 3,49 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 14В:

¹Н ЯМР (400 МГц, ΏΜ8Ο-ά₆) δ ррт 2,31 (ά, 1=1,3 Гц, 3Н), 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 3,99 (з, 3Н), 6,21 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6.59 (ά, 1=1,8 Гц, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (ΐ, 1=1,8 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,99 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,22 (ά, 1=10,3 Гц, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 7,0 Гц, 1Н), 8,03 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 8,37 (з, 1Н), 11,95 (Ьг з, 1Н).

ЬС^8 (способ ЬС-Β): К 2,06 мин, МН⁺ 515.

[а]_с ²⁰: -137,3° (с 0,52, ^ΜР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-1): К, 3,85 мин, МН⁺ 515, хиральная чистота 100%.

Пример 15. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1- 28 032362 (5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 15) и хиральное разделение на энантиомеры 15А и 15В.

Синтез промежуточного соединения 15а.

Раствор 5-метил-1Н-индола [СА8 614-96-0] (5 г, 38,1 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) охлаждали до -10°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (57,2 мл, 57,2 ммоль) и полученную в результате смесь выдерживали при -10°С в течение 10 мин. Добавляли по каплям раствор 2(4-фтор-2-метоксифенил) ацетилхлорида 1а (11,6 г, 57,2 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 ч. Реакционную смесь выливали в перемешиваемый раствор льда/сегнетовой соли. Смесь фильтровали через ЭюаШе® и осадок на фильтре промывали несколько раз с помощью ТНГ. Фильтраты объединяли. Слои разделяли и органический слой промывали водой, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Твердый остаток суспендировали в СН₂С1₂ (30 мл). Осадок отфильтровывали, промывали (2х) небольшим количеством СН₂С1₂ и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5метил-1Н-индол-3-ил)этанона 15а (7,19 г).

Синтез промежуточного соединения 15Ь.

Перемешиваемый раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-метил-1Н-индол-3-ил) этанон 15а (7,19 г, 24,2 ммоль) в ТНГ (500 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (10 г, 26,6 ммоль) в ТНГ (150 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации и промывали ТНГ. Объединенные фильтраты выпаривали при пониженном давлении. Остаток смешивали с Е,ОАс (50 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали небольшим количеством ЕЮАс и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-метил-1Ниндол-3-ил)этанона 15Ь (8,02 г).

Синтез соединения 15 и хиральное разделение энантиомеров 15А и 15В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона 15Ь (3,5 г, 9,3 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [СА8 62606-02-4] (2,81 г, 14 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,60 мл, 9,3 ммоль) в СНзСN перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Температуру реакции повышали до 80°С в течение 1ч и смесь затем перемешивали снова при комнатной температуре в течение 2 дней. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в СН₂С1₂ (100 мл), промывали 1н. НС1 (100 мл) и солевым раствором (100 мл), высушивали над фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии (неподвижная фаза: силикагель Стасе Кеуе1еп8® 120 г, подвижная фаза: ЕЮАс/гептан, градиент от 35/65 до 45/55). Требуемые фракции объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Остаток (3,96 г) дополнительно очищали посредством препаративной ИРЬС (неподвижная фаза: ЦрЙ8рИеге® С18 ООВ - 10 мкм, 200 г, 5 см, подвижная фаза: 0,25% раствор NН₄НСΟз в воде, С11₃С\). Требуемые фракции объединяли, выпаривали при пониженном давлении и выпаривали совместно с ЕЮАс (20 мл). Оставшееся твердое вещество перемешивали в смеси МеОН (5 мл) и воды (5 мл) в течение 1. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1-(5-метил-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 15, 1,92 ч.г) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 15 (1,50 г) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: А8 20 мкм, подвижная фаза: 100% метанол). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали с получением энантиомера 15А (742 г) в качестве первого элюированного продукта и энантиомера 15В (745 г) в качестве второго элюированного продукта. Энантиомер 15А дополнительно очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: силикагель Сгасе Кеуе1еп8® 40 г, подвижная фаза: СН₂С1₂/МеОН, градиент от 100/0 до 90/10). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали. Твердый остаток пере

- 29 032362 мешивали в МеОН/воде (1/1) (14 мл) в течение 2 ч. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 15А (361 мг) в виде белого порошка. Энантиомер 15В перемешивали в МеОН/воде (1/1) (14 мл) в течение 5 ч. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 15В (445 мг) в виде белого порошка.

Соединение 15:

¹Н ЯМР (360 МГц, ВМ80-4_б) δ ррт 2,39 (з, 3Н), 3,09 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 4,00 (з, 3Н), 6,22 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,55-6,62 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (Ьг з, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,6 Гц, 1Н), 6,99-7,06 (т, 2Н), 7,31-7,39 (т, 2Н), 7,98 (з, 1Н), 8,37 (з, 1Н), 11,94 (Ьг з, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-А): Εΐ 1,09 мин, МН⁺ 497.

Энантиомер 15А:

¹Н ЯМР (400 МГц, ВМ80-4_б) δ ррт 2,39 (з, 3Н), 3,08 (з, 3Н), 3,72 (з, 3Н), 4,00 (з, 3Н), 6,21 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,56-6,61 (т, 2Н), 6,72 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (ΐ, 1=1,7 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,2, 2,4 Гц, 1Н), 6,99 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,04 (άά, 1=8,4, 1,3 Гц, 1Н), 7,32-7,39 (т, 2Н), 7,98 (з, 1Н), 8,36 (з, 1Н), 11,92 (Ьг з, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Б): Εΐ 2,03 мин, МН⁺ 497.

[а]_о ²⁰: +149,8° (с 0,49, ОМЕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-1): Ε_ΐ 3,67 мин, МН⁺ 497, хиральная чистота 100%.

Энантиомер 15 В:

¹Н ЯМР (360 МГц, ВМ80-4_б) δ ррт 2,39 (з, 3Н), 3,09 (з, 3Н) 3,72 (з, 3Н), 4,00 (з, 3Н), 6,21 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,55-6,61 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (ΐ, 1=1,6 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,3, 2,2 Гц, 1Н), 7,00-7,06 (т, 2Н), 7,31-7,39 (т, 2Н), 7,98 (з, 1Н), 8,37 (з, 1Н), 11,95 (Ьг з, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Б): К 2,03 мин, МН⁺ 497.

[а]_о ²⁰: -149,3° (с 0,515, ОМЕ).

Хиральная 8ЕС (способ 8ЕС-1): К, 4,06 мин, МН⁺ 497, хиральная чистота 99,6%.

Пример 16. Синтез 1-(5-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси5-(метилсульфонил)фенил)амино)этанона (соединение 16) и хиральное разделение на энантиомеры 16А и 16В.

Синтез промежуточного соединения 16а.

Раствор 5-хлор-6-метокси-1Н-индола [СА8 90721-60-1] (4 г, 22 ммоль) в СН₂С1₂ (150 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (33 мл, 33 ммоль) и полученную в результате смесь выдерживали при 0°С в течение 15 мин. Добавляли по каплям раствор 2(4-фтор-2-метоксифенил) ацетилхлорида 1а (6,25 г, 30,8 ммоль) в СН₂С1₂ (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, а затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь выливали в перемешиваемый раствор льда/сегнетовой соли. Смесь фильтровали через О|са1йс® и осадок на фильтре промывали несколько раз с помощью ТНЕ. Фильтраты объединяли. Слои разделяли и органический слой промывали солевым раствором, высушивали над М§80₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток смешивали с СН₂С1₂ (50 мл). Твердые вещества отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 1-(5-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2метоксифенил)этанона 16а (4,01 г) в виде порошка. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток поглощали с помощью СН₂С1₂ (10 мл). Твердые вещества отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением второго выхода 16а (369 мг).

Синтез промежуточного соединения 16Ь.

Перемешиваемый раствор 1-(5-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 16а (3,5 г, 8,96 ммоль) в ТНЕ (500 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям раствор трибромида фе

- 30 032362 нилтриметиламмония [СА8 4207-56-1] (3,7 г, 9,85 ммоль) в ТНР (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при охлаждении (0°С) в течение 5 ч, а затем при комнатной температуре в течение 2 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации и промывали ТНР. Объединенные фильтраты выпаривали при пониженном давлении. Остаток смешивали с ЕЮАс (50 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали небольшим количеством ЕЮАс и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-бром-1-(5-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 16Ь (3,02 г).

Синтез соединения 16 и хиральное разделение энантиомеров 16А и 16В.

Смесь 2-бром-1-(5-хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)этанона 16Ь (3,02 г, 6,58 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [СА8 62606-02-4] (1,81 г, 8,99 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,13 мл, 6,58 ммоль) в СН₃СЫ (120 мл) перемешивали в течение ночи при 60°С. Температуру реакции повышали до 80°С в течение 8 ч и наконец до 90°С с перемешиванием в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в СН2С12 (100 мл), промывали 1н. НС1 (100 мл) и водой (100 мл), высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством препаративной НРЬС (неподвижная фаза: КР ХВгИде® Ргер С18 ОВЭ - 10 мкм, 50x150 мм, подвижная фаза: 0,25% раствор КН-|НСО₃ в воде, СН₃СЫ). Требуемые фракции объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в ЕЮАс (20 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации с получением первого выхода 1-(5хлор-6-метокси-1Н-индол-3-ил)-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил) амино)этанона (соединение 16, 309 мг) в виде рацемической смеси. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Добавляли МеОН и полученную в результате суспензию перемешивали в течение 30 мин. Твердые вещества отфильтровывали с получением второго выхода рацемического соединения 16 (423 мг).

Хиральное разделение энантиомеров соединения 16 (4 93 мг) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: А8 20 мкм, подвижная фаза: 100% метанол). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали с образованием энантиомера 16А в качестве первого элюированного продукта и энантиомера 16В в качестве второго элюированного продукта. Энантиомер 16А перемешивали в МеОН (5 мл) в течение 30 мин, осадок отфильтровывали, промывали МеОН (2x2 мл) и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 16А (156 мг) в виде белого порошка. Энантиомер 16В перемешивали в МеОН (5 мл) в течение 30 мин, осадок отфильтровывали, промывали МеОН (2x2 мл) и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 16В (146 мг) в виде белого порошка.

Соединение 16:

'Н ЯМР (400 МГц, :ЭМ§О-а₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,87 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,20 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,59 (ά, 1=1,3 Гц, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,8 Гц, 1Н), 6,96 (άά, 1=11,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,01 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,14 (8, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 8,12 (8, 1Н), 8,35 (8, 1Н), 11,98 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-В): К 2,02 мин, МН⁺ 547.

Энантиомер 16А:

'|| ЯМР (400 МГц, БМ8О^) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,86 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,20 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,55-6,62 (т, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,90 (ΐ, 1=1,2 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,3, 2,5 Гц, 1Н), 7,00 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,14 (8, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 8,11 (8, 1Н), 8,34 (8, 1Н), 11,97 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-А): К 1,10 мин, МН⁺ 547.

|ιζ| ² : +138,1° (с 0,565, ОМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-1): Κ_ΐ 4,17 мин, МН+ 547, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 252°С.

Энантиомер 16В:

'|| ЯМР (400 МГц, ПМ8ОД₆) δ ррт 3,08 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,86 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,20 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,58 (ά, 1=1,3 Гц, 2Н), 6,73 (ΐά, 1=8,5, 2,4 Гц, 1Н), 6,91 (ΐ, 1=1,5 Гц, 1Н), 6,95 (άά, 1=11,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,00 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,14 (8, 1Н), 7,36 (άά, 1=8,6, 7,0 Гц, 1Н), 8,11 (8, 1Н), 8,34 (8, 1Н), 11,98 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-А): К 1,11 мин, МН⁺ 547.

|ιζ| ² : -121,7° (с 0,545, ОМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-1): К 4,57 мин, МН⁺ 547, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 253°С.

Пример 17. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1(5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 17) и хиральное разделение на энантиомеры 17А и 17В.

- 31 032362

0°С, в потоке Ν₂ (2,48 г,

64,81 ммоль) к смеси 5Синтез промежуточного соединения 17 а.

Гидрид натрия добавляли частями при (трифторметил)-1Н-индола [САЗ 100846-24-0] (10 г, 54,01 ммоль) в ОМЕ (150 мл) и смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. По каплям добавляли раствор тозилхлорида (11,3 г, 59,4 ммоль) в ОМЕ (50 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После охлаждения до 0°С реакцию гасили посредством добавления воды. Полученный в результате осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 70°С в течение ночи с получением 1-тозил-5-(трифторметил)1Н-индола 17а (18,4 г).

Синтез промежуточного соединения 17Ь.

По каплям добавляли хлорид титана(>) (2,32 мл, 21,2 ммоль) при комнатной температуре к перемешиваемому раствору 1-тозил-5-(трифторметил)-1Н-индола 17а (3,6 г, 10,6 ммоль) и 2-(4-фтор-2метоксифенил)ацетилхлорида 1а (3,85 г, 19 ммоль, синтез: см. пример 1) в 1,2-дихлорэтане (70 мл). Реакцию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли ледяную воду. Реакционную смесь экстрагировали с помощью Е1ОАс. Органический слой высушивали над МдЗО₄, фильтровали, и растворитель концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 80 г в СН₂С1₂/МеОН 99,5/0,5) . Фракции, содержащие соединение 17Ь, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Соединение перемешивали в СН₃Одиизопропиловом эфире. Осадок отфильтровывали и высушивали с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(1-тозил-5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона 17Ь (3 г).

Синтез промежуточного соединения 17с.

Гидроксид лития (0,6б г, 15,8 ммоль) добавляли к раствору 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(1-тозил5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил) этанона 17Ь (3,2 г, 6,33 ммоль) в ТНЕ (18 мл) и воде (6 мл). Смесь перемешивали при 30°С в течение 1 ч. Добавляли воду и Е1ОАс. Органический слой отделяли, высушивали над МдЗО₄, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Твердый остаток перемешивали в диизопропиловом эфире. Осадок отфильтровывали и высушивали с получением 2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона 17с (2,1 г).

Синтез промежуточного соединения 17ά.

Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [САЗ 4207-56-1] (1,6 г, 4,27 ммоль) в ТНЕ (50 мл) при 0°С к смеси 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-(трифторметил)-1Н-индол-3ил)этанона 17с (1,5 г, 4,27 ммоль) в ТНЕ (50 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 4 ч. Осадок отфильтровывали и промывали Е1ОАс. Объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в Е1ОАс. Органический слой промывали водой, высушивали над МдЗО4, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в диизопропиловом эфире. Осадок отфильтровывали и высушивали с получением 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона 17ά (1,8 г).

Синтез соединения 17 и хиральное разделение энантиомеров 17А и 17В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона 17ά (1,2 г, 2,79 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилина [САЗ 62606-02-4] (617 мг, 3,07 ммоль) и диизопро

- 32 032362 пилэтиламина (0,48 мл, 2,79 ммоль) в Ο^ΟΝ (60 мл) и ТНБ (30 мл) перемешивали при 70°С в течение 24 ч. Раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в ЕЮАс и раствор промывали 1н. НС1. Органический слой отделяли, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, СН₂С1₂/МеОН 99,5/0,5). Фракции, содержащие соединение 17, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Соединение кристаллизовали из диизопропилового эфира/СНзСN с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1-(5-(трифторметил)-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 17, 410 мг) в виде рацемической смеси.

Энантиомеры соединения 17 разделяли посредством препаративной хиральной 8БС (неподвижная фаза: СЫга1рак® АЭ-Н 5 мкм 250x20 мм, подвижная фаза: 75% СО₂, 25% 1РгОН) с получением после кристаллизации из петролейного эфира/диизопропилового эфира, 147 мг первого элюированного энантиомера 17А и 150 мг второго элюированного энантиомера 17В.

Соединение 17:

¹Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-б6) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,98 (8, 3Н), 6,27 (й, 1=7,9 Гц, 1Н), 6,59 (й, 1=1,3 Гц, 2Н), 6,74 (16, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 6,92 (8, 1Н), 6,97 (66, 1=11,3, 2,5 Гц, 1Н), 7,06 (6, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,37 (йй, 1=8,5, 6,9 Гц, 1Н), 7,54 (йй, 1=8,5, 1,6 Гц, 1Н), 7,69 (й, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,49 (8, 1Н), 8,60 (8, 1Н), 12,43 (Ьг 8, 1Н).

ГС.М8 (способ ЬС-С): В, 3,09 мин, МН⁺ 551.

Температура плавления: 160°С.

Энантиомер 17А:

¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,98 (8, 3Н), 6,27 (й, 1=7,6 Гц, 1Н), 6,59 (й, 1=1,5 Гц, 2Н), 6,74 (1й, 1=8,5, 2,3 Гц, 1Н), 6,92 (8, 1Н), 6,96 (йй, 1=11,4, 2,3 Гц, 1Н), 7,04 (й, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,37 (йй, 1=8,6, 7,1 Гц, 1Н), 7,53 (йй, 1=8,6, 1,5 Гц, 1Н), 7,69 (й, 1=8,6 Гц, 1Н), 8,49 (8, 1Н), 8,59 (8, 1Н), 12,39 (Ьг 8, 1Н).

ГС.М8 (способ ЬС-С): В, 3,13 мин, МН⁺ 551.

[а]_о ²⁰: -119,3° (с 0,2364, ЭМБ).

Хиральная 8БС (способ 8БС-Н): В, 3,40 мин, МН⁺ 551, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 231°С.

Энантиомер 17В:

¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,73 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,27 (Ьг й, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,59 (8, 2Н), 6,74 (1й, 1=8,2, 2,3 Гц, 1Н), 6,92 (8, 1Н), 6,96 (Ьг й, 1=11,6 Гц, 1Н), 7,05 (Ьг й, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,33-7,41 (т, 1Н), 7,54 (Ьг й, 1=8,6 Гц, 1Н), 7,69 (Ьг й, 1=8,6 Гц, 1Н), 8,49 (8, 1Н), 8,60 (8, 1Н), 12,37 (Ьг 8, 1Н).

ГС.М8 (способ ЬС-С): В, 3,13 мин, МН⁺ 551.

[а]_о ²⁰: +112,8° (с 0,2545, ЭМБ).

Хиральная 8БС (способ 8БС-Н): В, 4,45 мин, МН⁺ 551, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 230°С.

Пример 18. Синтез 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1(5-(трифторметокси)-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 18) и хиральное разделение на энантиомеры 18А и 18В.

Синтез промежуточного соединения 18а.

Раствор 5-(трифторметокси)-1Н-индола [СА8 262593-63-5] (5 г, 24,9 ммоль) в СН2С12 (150 мл) охлаждали до 0°С в атмосфере Ν₂. Добавляли по каплям 1М диэтилалюминийхлорид в гексане (37,3 мл, 37,3 ммоль) и полученную в результате смесь выдерживали при 0°С в течение 15 мин. Добавляли по каплям раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)ацетилхлорида 1а (7,05 г, 34,8 ммоль) в СН₂С1₂ (50 мл). Пере

- 33 032362 мешивание продолжали при 0°С в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь выливали в перемешиваемый раствор льда/сегнетовой соли. После того как лед растаял, смесь фильтровали через ОюаШе® и осадок на фильтре промывали несколько раз с помощью ТНР. Фильтраты объединяли. Слои разделяли и органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с СН₂С1₂ (50 мл) и осадок отфильтровывали с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-(трифторметокси)-1Н-индол-3ил)этанона 18а (7,36 г). Фильтрат концентрировали под вакуумом и твердый остаток перемешивали в СН₂С1₂ (10 мл). Фильтрацией твердых веществ получали второй выход 18а (431 мг).

Синтез промежуточного соединения 18Ь.

Перемешиваемый раствор 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-трифторметокси-1Н-индол-3 -ил)этанон 18а (7,35 г, 20,0 ммоль) в ТНР (200 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям раствор трибромида фенилтриметиламмония [СА8 4207-5 6-1] (8,28 г, 22,0 ммоль) в ТНГ (100 мл). Полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации и промывали ТНГ. Объединенные фильтраты выпаривали при пониженном давлении. Остаток смешивали с ЕЮАс (30 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали небольшим количеством ЕЮАс и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-бром-2-(4-фтор-2метоксифенил)-1-(5-(трифторметокси)-1Н-индол-3-ил)этанона 18Ь (7,8 г).

Синтез соединения 18 и хиральное разделение энантиомеров 18А и 18В.

Смесь 2-бром-2-(4-фтор-2-метоксифенил)-1-(5-(трифторметокси)-1Н-индол-3-ил)этанона 18Ь (3 г, 6,72 ммоль), 3-метокси-5-(метилсульфонил)анилин [СА8 62606-02-4] (1,85 г, 9,18 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,16 мл, 6,72 ммоль) в СН₃С№ (120 мл) перемешивали при 90°С в течение 24 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в СН2С12 (100 мл), промывали 1н. НС1 (100 мл) и водой (100 мл), высушивали над Мд8О₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (неподвижная фаза: силикагель Огасе Κеνе1е^^8® 120 г, подвижная фаза: Е1ОАс:Е1ОН (3:1)/гептан, градиент от 0/100 до 50/50). Требуемые фракции объединяли и выпаривали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в Е1ОАс (20 мл). Твердые вещества выделяли посредством фильтрации и высушивали под вакуумом при 50°С с получением 2-(4-фтор-2-метоксифенил)-2-((3-метокси-5-(метилсульфонил)фенил)амино)-1(5-(трифторметокси)-1Н-индол-3-ил)этанона (соединение 18, 608 мг) в виде рацемической смеси.

Хиральное разделение энантиомеров соединения 18 (578 мг) осуществляли посредством хирального разделения с использованием нормальной фазы (неподвижная фаза: А8 20 мкм, подвижная фаза: 100% метанол). Фракции, содержащие продукт, объединяли и выпаривали с образованием энантиомера 18А в качестве первого элюированного продукта и энантиомера 18В в качестве второго элюированного продукта. Энантиомер 18А осаждали посредством перемешивания в течение ночи из МеОН/воды. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 18А (123 мг) в виде белого порошка. Энантиомер 18В осаждали посредством перемешивания в течение ночи из МеОН/воды. Осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом при 50°С с получением энантиомера 18В (91 мг) в виде белого порошка.

Соединение 18:

)| ЯМР (400 МГц, ЬМ8О-б₆) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,73 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,25 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,59 (б, 1=1,3 Гц, 2Н), 6,74 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,92 (1, 1=1,3 Гц, 1Н), 6,96 (бб, 1=11,2, 2,4 Гц, 1Н), 7,05 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,21 (бб, 1=8,7, 1,9 Гц, 1Н), 7,38 (бб, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 7,59 (б, 1=8,8 Гц, 1Н), 8,07 (Ьг 8, 1Н), 8,54 (8, 1Н), 12,28 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Β): Κ₁ 2,13 мин, МН⁺ 567.

Энантиомер 18А:

)| ЯМР (400 МГц, ЬМ8О-б₆) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,25 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,59 (б, 1=1,5 Гц, 2Н), 6,74 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,91 (1, 1=1,7 Гц, 1Н), 6,96 (бб, 1=11,2, 2,4 Гц, 1Н), 7,04 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,21 (бб, 1=8,8, 2,0 Гц, 1Н), 7,37 (бб, 1=8,7, 6,9 Гц, 1Н), 7,59 (б, 1=8,8 Гц, 1Н), 8,07 (б, 1=1,1 Гц, 1Н), 8,54 (8, 1Н), 12,29 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Β): Κ₁ 2,12 мин, МН⁺ 567.

|а| ² : +112,0° (с 0,465, ПМР).

Хиральная 8РС (способ 8РС-1): Κ, 2,85 мин, МН⁺ 547, хиральная чистота 100%.

Температура плавления: 215°С.

Энантиомер 18В:

)| ЯМР (400 МГц, ЬМ8О-б₆) δ ррт 3,09 (8, 3Н), 3,72 (8, 3Н), 3,99 (8, 3Н), 6,25 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 6,59 (б, 1=1,3 Гц, 2Н), 6,74 (1б, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н), 6,91 (1, 1=1,7 Гц, 1Н), 6,96 (бб, 1=11,2, 2,4 Гц, 1Н), 7,04 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,21 (бб, 1=8,7, 1,9 Гц, 1Н), 7,37 (бб, 1=8,6, 6,8 Гц, 1Н), 7,59 (б, 1=8,8 Гц, 1Н), 8,07 (б, 1=0,9 Гц, 1Н), 8,54 (8, 1Н), 12,28 (Ьг 8, 1Н).

ЬС/М8 (способ ЬС-Β): Κ₁ 2,12 мин, МН⁺ 567.

|а| ² : -116,7° (с 0,425, ПМР).

Хиральная 8ГС (способ 8РС-1): Κ₁ 3,17 мин, МН⁺ 547, хиральная чистота 100%.

- 34 032362

Температура плавления: 214°С.

Противовирусная активность соединений по настоящему изобретению

Противовирусный анализ в отношении ΩΞΝν-2.

Тестировали противовирусную активность всех соединений по настоящему изобретению против штамма 16681 ΩΞΝν-2, который метили усиленным зеленым флуоресцентным белком (еСРР, табл. 1). Среда для культивирования состояла из минимальной поддерживающей среды, дополненной 2% термически инактивированной околоплодной сывороткой теленка, 0,04% гентамицином (50 мг/мл) и 2 мМ Ьглутамином. Клетки Vе^ο, полученные из ЕСАСС, суспендировали в среде для культивирования и добавляли по 25 мкл в 384-луночные планшеты (2500 клеток/лунка), которые уже содержали противовирусные соединения. Как правило, эти планшеты содержали 4-кратное серийное разбавление, состоящее из 9 стадий разбавления тестируемого соединения при 200-кратной конечной концентрации в 100% ЭМ8О (200 нл). Кроме того, тестировали каждую концентрацию соединения в четырех параллельных анализах (конечная концентрация варьировала в диапазоне: 25-0,00038 мкМ). В результате каждый планшет содержал лунки, которые принимали за вирусные контрольные образцы (содержащие клетки и вирус при отсутствии соединения), клеточные контрольные образцы (содержащие клетки при отсутствии вируса и соединения) и контрольные образцы со средой (содержащие среду при отсутствии клеток, вируса и соединений). В случае с лунками, которые принимали за контрольный образец со средой, добавляли 25 мкл среды для культивирования вместо клеток Vе^ο. После того как клетки добавляли в планшеты, планшеты инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре, что позволило клеткам равномерно распространится в лунках. Далее планшеты инкубировали в полностью увлажненном инкубаторе (37°С, 5% СО₂) до следующего дня. Затем штамм ^ЕNV-2 16681, меченный еСРР, добавляли при множественности инфекции (МО1), равной 0,5. Следовательно, 15 мкл вирусной суспензии добавляли во все лунки, содержащие тестируемое соединение, и во все лунки, которые принимали за вирусный контрольный образец. Одновременно добавляли 15 мкл среды для культивирования к контрольному образцу со средой и клеточным контрольным образцам. Далее планшеты инкубировали в течение 3 дней в полностью увлажненном инкубаторе (37°С, 5% СО₂). В день считывания измеряли флуоресценцию еСРР с применением автоматизированного флуоресцентного микроскопа при 488 нм (голубой лазер). Применяя служебную систему ЫМ8, рассчитывали дозу ингибирования кривой отклика для каждого соединения и определяли полумаксимальную эффективную концентрацию (ЕС50). Следовательно, рассчитывали процент ингибирования (I) для каждой тестируемой концентрации с использованием следующей формулы: 1=100х(8_Т-8_СС)/(8тс-8_СС); при этом 8_Т, 8_СС и δ_ν(2 представляют собой соответственно количества сигнала еСРР в тестируемом соединении, лунках клеточного контрольного образца и вирусного контрольного образца. ЕС50 представляет собой концентрацию соединения, при которой репликация вируса ингибируется на 50%, что измерено с помощью 50% восстановления интенсивности флуоресценции еСРР по сравнению с вирусным контрольным образцом. Рассчитывали ЕС₅₀ с применением линейной интерполяции.

Одновременно оценивали токсичность соединений в одних и тех же планшетах. После того как проводили считывание сигнала еСРР, во все лунки 384-луночных планшетов добавляли 10 мкл резазурина, -красителя, регистрирующего жизнеспособность клеток. Анализ с резазурином основан на восстановлении голубого резазурина с помощью КАОН, продуцируемого клетками, в высокофлуоресцентный продукт резоруфин. Образование розового флуоресцентного резоруфина непосредственно связано с количеством жизнеспособных клеток в лунке. Планшеты инкубировали в течение дополнительных 5 ч в полностью увлажненном инкубаторе (37°С, 5% СО₂). Далее планшеты измеряли на сверхчувствительном считывающем устройстве (Тесап) с использованием длины волны возбуждения, составляющей 530 нм. Также определяли полумаксимальную эффективную концентрацию (СС₅₀), определенную как концентрацию, необходимую для уменьшения превращения резазурина на 50% по сравнению с лунками клеточного контрольного образца. В результате определяли индекс избирательности (81) для соединений, который рассчитывали, как указано ниже.

81=СС₅₀/ЕС₅₀.

Таблица 1 ЕС₅₀, СС₅₀ и 81 для соединений по настоящему изобретению в противовирусном анализе в отношении ЭЕКУ-2

- 35 032362

2А*	0,00077	5	6,1	5	7834	5
2В	0,055	7	8,0	7	146	7
3	0,00058	4	7,2	4	10845	4
ЗА*	0,00030	5	4,8	4	17249	4
ЗВ	0,032	4	11	4	324	4
4	0,0011	4	6, 6	4	6211	4
4А*	0,0005	6	4,4	5	8726	5
4В	0,018	4	16	4	814	4
5	0,0020	3	24	4	10164	3
5А	0,070	3	24	3	530	3
5В*	0,0010	4	> 13	3	14546	3
6А*	0,0027	3	5,0	3	1887	3
6В	0,20	3	12	3	67	3
7	0,0015	3	5,0	3	3411	3
7А*	0,00076	4	4,4	4	5733	4
7В	0,043	3	9,6	4	216	3
8	0,0028	3	7,6	3	2710	3
8А*	0,0010	3	5,1	3	5071	3
8В	0,24	3	11	3	45	3
9	0,0016	3	8,8	3	5457	3
9А*	0,0011	3	4,8	3	4398	3
9В	0,098	3	21	3	212	3
10	0,0011	3	7,8	3	7070	3
10А	0,054	4	18	4	550	4
10В*	0,00067	6	4,5	6	6770	6
11	0,0030	3	12	3	4058	3
НА*	0,0011	3	6, 6	3	6248	3
11В	0,055	3	> 25	3	>1617	3
12	0,00060	4	> 25	4	>65542	4
12 А*	0,00042	3	> 25	3	>36121	3
12В	0,021	3	> 25	4	>1373	3
13	0,0014	3	7,6	3	5298	3
13А	0,017	7	9,5	7	484	6
13В*	0,0011	4	6,7	4	6211	4
14	0,0015	3	5,3	4	3360	3
14 А*	0,00044	4	3,4	3	8101	3
14В	0,041	3	11	3	262	3
15	0,0015	3	7,8	3	5240	3
15 А*	0,00080	3	5,4	3	>4057	3

- 36 032362

15В	0,073	3	17	3	196	3
16	0,00066	3	8,8	3	13287	3
16А*	0,00042	5	3,7	7	8049	5
16В	0,013	3	22	3	1692	3
17	0,00024	6	3,5	7	19799	6
17А	0,038	3	14	3	353	3
17В*	0,00020	5	3,6	5	>27559	5
18	0,00025	5	3,3	8	>15249	5
18 А*	0,000086	6	3,1	7	>28953	6
18В	0,0092	3	10	3	1132	3

N=количество независимых экспериментов, в которых тестировали соединения.

Количественный РСК-анализ с обратной транскриптазой (КТ-цРСК) в отношении квадривалентной вакцины.

Протокол А.

Тестировали противовирусную активность соединений по настоящему изобретению против штамма ТС974#666 ОЕ\\'-1 (ЛСРУ; табл. 6), штамма 16681 ОЕ\\'-2 (табл. 7), штамма Н87 ОЕ\\'-3 ^СРУ; табл. 8) и штаммов Н241 ОЕ\\'-4 (ЛСРУ; табл. 9) в анализе с КТ-цРСК. В связи с чем клетки Уего инфицировали либо с помощью штамма ЭЕКУ-1, либо -2, или -3, или -4, в присутствии или в отсутствие тестируемых соединений. На 3-й день после инфицирования клетки лизировали и клеточные лизаты применяли для получения кДНК как для вируса-мишени (3'иТК ОЕ\\'; табл. 2), так и эталонного гена клетки (β-актин, табл. 2). Впоследствии осуществляли дуплексную ПЦР в режиме реального времени на приборе 1зц111сус1ег 480. Генерируемый уровень Ср является обратно пропорциональным по отношению к количеству экспрессируемой РНК этих мишеней. Ингибирование репликации ОЕ\\' с помощью тестируемого соединения привело к сдвигу Ср для гена 3'иТК. С другой стороны, если тестируемое соединение является токсичным по отношению к клеткам, то будет наблюдаться похожий эффект и в отношении экспрессии β-актина. Для вычисления ЕС₅₀ применяют сравнительный способ ДДСр, который основан на относительной генной экспрессии гена-мишени (3'иТК), нормализованного конститутивным геном клетки (β-актин).

Таблица 2

Праймеры и зонды, применяемые для количественной КТ-РСК в реальном времени

Праймер/зонд	Мишень	Последовательность³' ^ь
ЕЗиЬг258	ϋΕΝν з'-итк	5'-СССТТАСАССАСАССССТС-3 '
КЗиЬг425	ϋΕΝν з'-итк	5'-САСАСАССАССАТСТСТССТС-3'
РЗиЬгЗДЗ	ϋΕΝν З'-итк	КАМ-5'-ААССАСТАСАССТТАСАССАСАСССССС-3'-ВВД1
ЕасЫп743	β-актин	5'-ССССАССТСАТСАССАТТ-3'
КасЫп87 6	β-актин	5'-АТСТССАССТСАСАСТТСАТС-3'
РасЫп773	β-актин	НЕХ-5'-ТТССССТССССТСАСССТСТС-3'-ΒΗβΙ

^а Элементы указанных красителей (ЕАМ, НЕХ) и гасителей люминесценции (ВНО1) выделены жирным и курсивом.

^Ь Выбирали нуклеотидную последовательность праймеров и зондов из консервативной области в 3'иТК области генома вируса денге на основании выравнивания 300 нуклеотидных последовательностей четырех серотипов денге, зарегистрированных в ОепЬапк (бонд е, а1., 2013, МеФобз Мо1 Вю1, С11ар1ет 16).

Среда для культивирования состояла из минимальной поддерживающей среды, дополненной 2% термически инактивированной околоплодной сывороткой теленка, 0,04% гентамицином (50 мг/мл) и 2 мМ I.-глутамином. Клетки Уего, полученные из ЕСАСС, суспендировали в среде для культивирования и добавляли по 75 мкл/лунка в 96-луночные планшеты (10000 клеток/лунка), которые уже содержали противовирусные соединения. Как правило, эти планшеты содержали 4-кратное серийное разбавление, состоящее из 9 стадий разбавления тестируемого соединения в 200-кратной конечной концентрации в 100% ^Μ8Ο (500 нл; конечная концентрация варьировала в диапазоне 25-0,00038 мкМ). Кроме того, каждый планшет содержал лунки, которые принимали за вирусные контрольные образцы (содержащие клетки и вирус при отсутствии соединения), клеточные контрольные образцы (содержащие клетки при отсутствии вируса и соединения). После размещения клеток в планшетах планшеты инкубировали в полностью увлажненном инкубаторе (37°С, 5% СО₂) до следующего дня. Затем добавляли штамм

- 37 032362

ТС974#ббб ЭЕКУ-1 при МО1, составляющей 0,6, штамм 16681 1)Е\\^;-2 при МО1, составляющей 0,01, штамм Н87 ^ЕNV-3 при МО1, составляющей 1,0, а также штаммы Н241 ЭЕКУ-4 при МО1, составляющей 0,2, и 8Π/06Κ2270ΌΚ1/2005 при МО1, составляющей 0,16. Следовательно, 25 мкл вирусной суспензии добавляли во все лунки, содержащие тестируемое соединение, и во все лунки, которые принимали в качестве контролей с вирусом. Одновременно к клеточным контрольным образцам добавляли 25 мкл среды для культивирования. Далее планшеты инкубировали в течение 3 дней в полностью увлажненном инкубаторе (37°С, 5% СО₂). Через 3 дня удаляли надосадочную жидкость из лунки и дважды промывали клетки ледяным РВ8 (~100 мкл). Сгустки клеток в 96-луночных планшетах хранили при -80°С в течение по меньшей мере 1 дня. Далее экстрагировали РНК с применением набора для лизирования Се118-1о-СТ™ согласно нормам изготовителя (Аррйеё В1О8у81ечп8). Клеточные лизаты можно было хранить при - 80°С или сразу же применять на стадии обратной транскрипции.

При получении на стадии обратной транскрипции получали смесь А (табл. 3А) и распределяли по 7,57 мкл/лунка в 96-луночном планшете. После добавления 5 мкл клеточных лизатов осуществляли пятиминутную стадию денатурации при 75°С (табл. 3В). Позже добавляли 7,43 мкл смеси В (табл. 3С) и инициировали стадию обратной транскрипции (табл. 3Ό) для образования кДНК.

В результате получали смесь для КТ-цРСК, к смеси С (табл. 4 А), распределенной в 96-луночных планшетах для цРСК 1.ш1пСус1ет, добавляли 3 мкл кДНК и осуществляли цРСК на 1.1д1пСус1ет 480 согласно условиям в табл. 4В.

Используя программное обеспечение ЬщЫСуПег и служебную систему Е1М8, рассчитали кривые зависимости от дозы для каждого соединения и определяли полумаксимальную эффективную концентрацию (ЕС50) и полумаксимальную цитотоксическую концентрацию (СС50).

Таблица 3

Синтез кДНК с использованием смеси А, денатурации, смеси В и обратной транскрипции А. Смесь А

Образцы	828		Об. реакционной смеси (мкл)	20
Элемент смеси	Концентрация	Объем (мкл)
Единица измерения	Исходная	Конечная	1 образец	х образцов
Μί11ί-<2 Н₂О				7,27	6019,56
КЗиЕг425	МКМ	20	0,27	0,15	124,20
К.асЫп87 6	мкм	20	0,27	0,15	124,20
	Объем смесь/лунка (мкл)	7,57
Клеточные лизаты	5,00

В. Стадия денатурации

Стадия	Температура	Время
Денатурация	75°С	5 ’
Удержание	4°С	удержание

- 38 032362

С. Смесь В

Образцы

Элемент смеси	Единица измерения	Исходная	Конечная	1 образец	х образцов
Буфер 2 Ехрапс! ΗΙΕΙ	X	10,00	1,00	2,00	1728,0
МдС1₂	мМ	25,00	3,50	2,80	2419,2
6ΝΤΡ	мМ	10,00	1,00	2,00	1728,0
Ингибитор РНК-азы	и/мкл	40,00	1,00	0,50	432,0
Ехрапс! КТ	и/мкл	50,00	0,33	0,13	112,3
	Общий объем смеси (мкл)	7,43

О. Протокол синтеза кДНК

Стадия	Температура	Время
Обратная транскрипция	42°С	30 '
Денатурация	99°С	5 '
Удержание	4°С	удержание

Таблица 4

Смесь с]РСР и протокол А. Смесь С

Образцы	833		Об. реакционной смеси (мкл)	25
Элемент смеси	Концентрация	Объем (мкл)
Единица измерения	Исходная	Конечная	1 образец	х образцов
Н₂О для РСК от Коске				7,74	6447,42
Смесь Коске 2хММ	X	2	1	12,50	10412,50
Ε3γι·6γ258	МКМ	20	0,3	0,38	316,54
Κ3γι·6γ425	мкм	20	0,3	0,38	316,54
Р3икг343	мкм	20	0,1	0,13	108,29
ЕасЫп743	мкм	20	0,3	0,38	316,54
КасЫп876	мкм	20	0,3	0,38	316,54
РасЫп773	мкм	20	0,1	0,13	108,29

Объем смесь/пробирка 22,02 (мкл) жДНК 3,00

- 39 032362

В. Протокол дРСК3

Стадия	Температура	Время	Скорость изменения
преинкуб./денат.	95°С	10 мин.	4,4
Денатурация	95°С	10 сек.	4,4
ОТЖИГ	58°С	1 мин.	2,2
Элонгация	72°С	1 сек.	4,4
Охлаждение	40°С	10 сек.	1,5

Таблица 6

ЕС₅₀, СС₅₀ и 81 для соединений против серотипа 1 в анализах КТ-дРСК

Протокол А

КТ-рРСВ. серотипа 1 ТС974#666

№ соединения	ЕС₅₀ (мкМ)	N	сс₅₀ (мкМ)	N	31	N
1А	0,00518	6	3,52	6	642	6
2А	0,005853	3	2,92	3	474	3
ЗА	0,007178	3	3, 91	3	545	3
4А	0,004217	3	3,59	3	851	3
5В	0,008894	4	8,38	4	928	4
6А	0,009698	3	4,61	3	476	3
7А	0,003703	3	3, 87	3	904	3
8А	0,006835	3	4,4	3	644	3
9А	0, 01	3	4,04	3	402	3
10В	0,004463	3	5, 14	3	921	3
НА	0,0109	3	4,38	3	402	3
12А	0, 014	3	> 10,00	3	> 870	3
13В
14А	0,001402	4	2,42	3	1682	3
15А	0,003513	1	> 2,50	1	> 712	1
16А	0,003264	4	3, 17	4	970	4
17В	0,000478	4	1, 61	4	2960	3
18А	0,000357	3	3, 01	4	7331	3

N=количество независимых экспериментов, в которых тестировали соединения. NА: не подтверждено.

ΝΏ: не определено.

- 40 032362

Таблица 7 ЕС₅₀, СС₅₀ и 81 для соединений против серотипа 2 в анализах КТ-дРСК

Протокол А

КТ-дРСК серотипа 2 16681

№ соединения	ЕС₅₀ (мкМ)	N	СС₅₀ (мкМ)	N	31	N
1А	0,00083	6	3,84	6	4303	6
2А	0,000856	4	3,84	4	4858	4
ЗА	0,000285	4	4,35	8	20905	5
4А	0,000377	5	4,63	5	12281	5
5В	0,001231	3	7,24	3	5868	3
6А	0,003482	3	4,44	3	1274	3
7А	0,000525	3	5,64	2	7689	2
8А	0,001274	3	5,34	3	4191	3
9А	0,001135	3	5,33	3	4693	3
10В	0,000605	4	4,39	4	6630	4
11А	0,001091	3	4,96	3	4543	3
12А	0,00025	3	> 12,12	3	> 42176	3
13В	0,000675	1	3,71	1	5492	1
14А	0,000567	3	3,54	4	4710	2
15А	0,001021	2	4,62	2	4357	2
16А	0,000188	4	4,35	5	19958	4
17В	9,21Е-05	4	2,51	5	21074	3
18А	0,00014	3	3,2	4	20747	2

Ы=количество независимых экспериментов, в которых тестировали соединения. ЫА: не подтверждено.

ΝΏ: не определено.

Таблица 8

ЕС₅₀, СС₅₀ и 81 для соединений против серотипа 3 в анализах КТ-цРСК

Протокол А

КТ-дРСК серотипа 3 Н87

№ соединени я	ЕС50 (мкМ)	N	СС50 (мкМ)	N	31	N
1А	0,0496	6	2,47	5	50	5
2А	0,0584	3	3,04	3	57	3
ЗА	0,0586	3	3,05	3	52	3
4А	0,0553	3	2,61	3	47	3
5В	0,1001	4	3,05	3	28	3
6А	0,1233	3	4,79	2	43	2
7А	0,0616	3	3,3	3	48	3
8А	0,0821	3	3,93	3	48	3
9А	0,104	3	3,56	3	34	3
10В	0,0554	3	3,24	2	45	2
11А	0,093	3	4,84	3	52	3
12А	0,0738	4	5,6	3	76	3
13В
14А	0,0131	3	2,72	3	241	3
15А	0,0221	1
16А	0,0254	3	4,17	3	164	3
17В	0,007281	3	1,98	3	272	3
18А	0,007543	3	2,52	3	333	3

ΝΏ: не определено.

- 41 032362

Таблица 9

ЕС₅₀, СС₅₀ и 81 для соединений против серотипа 4 в анализах КТ-цРСК

Протокол А

КТ-дРСК серотипа 4 Н241

№ соединения	ЕС50 (мкМ)	N	СС50 (мкМ)	N	31	N
1А	0,1652	7	2,93	7	17	7
2А	0,1225	4	2,49	3	16	3
ЗА	0,1211	7	2,27	7	19	7
4А	0,1308	4	3, 18	4	24	4
5В	0,1864	4	5,48	4	27	4
6А	0,2393	3	2,7	3	11	3
7А	0,1416	4	2,88	4	18	4
8А	0,2482	5	3,55	5	14	5
9А	0,2409	3	3,39	3	14	3
10В	0,1093	4	2,97	4	26	4
НА	0,2256	3	3,51	3	16	3
12А	0,2611	4	> 17,15	3	> 111	3
13В	0,2301	1	2,6	1	11	1
14А	0,0694	5	1, 97	4	27	4
15А	0, 091	2	3,75	1	40	1
16А	0,0801	5	3, 16	5	38	5
17В	0,0213	5	1,8	4	91	4
18А	0,0182	5	1, 89	4	130	4

N количество независимых экспериментов, в которых тестировали соединения. КА: не подтверждено.

	ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110>	Лапззеп РНагтасеиЕ1са1з, 1пс КаЕЬоНеке ип1-уегз1Ее1Е Ьеимеп

<120> ПРОИЗВОДНЫЕ МОНО- ИЛИ ДИЗАМЕЩЕННЫХ ИНДОЛОВ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСОВ ДЕНГЕ

<130>	Т1Р 327 РСТ
<150> <151>	ЕР15151481.7 2015-01-16
<160>	6
<170>	ВгВВАР 1.2
<210> <211> <212> <213>	1 19 ДНК Вирус денге

<220> <221> <222> <223>	источник 1..19 /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК
<400>	1

сддЕЕададд адассссЕс 19

- 42 032362 <210> 2 <211> 21 <212> ДНК <213> Вирус денге <220>

<221> источник <222> 1..21 <223> /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК <400> 2 дадасадсад даВсВсВддВ с 21 <210> 3 <211> 28 <212> ДНК <213> Вирус денге <220>

<221> источник <222> 1..28 <223> /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК <400> 3 ааддасВада ддВВададда дасссссс <210> 4 <211> 18 <212> ДНК <213> Вирус денге <220>

<221> источник <222> 1..18 <223> /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК <400> 4 ддссаддВса ВсассаВВ <210> 5 <211> 21 <212> ДНК <213> Вирус денге <220>

<221> источник <222> 1..21 <223> /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК <400> 5 аВдВссасдВ сасасВВсаВ д <210> 6 <211> 21 <212> ДНК <213> Вирус денге

- 43 032362 <220>

<221> источник <222> 1..21 <223> /организм=вирус денге тип_молекулы=неопределенная ДНК <400> 6

ЕЕссдсЕдсс сЕдаддсЕсЕ с 21

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (I) его стереоизомерная форма или фармацевтически приемлемая соль;

при этом указанное соединение выбрано из группы, где

В₁ представляет собой Б, В₂ представляет собой Б, СН₃ или ОСН₃ и В₃ представляет собой Н,

В₁ представляет собой Н, В₂ представляет собой С1 или Б и В₃ представляет собой СН₃, В1 представляет собой СН3, В2 представляет собой ОСН3, Б или Н и В3 представляет собой Н,

В1 представляет собой Н, В2 представляет собой С1 или Б и В3 представляет собой Н,

В1 представляет собой СН3, В2 представляет собой Н и В3 представляет собой Б,

В1 представляет собой Б, В2 представляет собой Н и В3 представляет собой СН3,

В1 представляет собой Н, В2 представляет собой ОСН3 и В3 представляет собой Н или С1,

В1 представляет собой Н, В2 представляет собой Б и В3 представляет собой Б,

В1 представляет собой СБ3 или ОСБ3, В2 представляет собой Н и В3 представляет собой Н,

В₁ представляет собой С1, В₂ представляет собой ОСН₃ и В₃ представляет собой Н.
2. Соединение или его стереоизомерная форма или фармацевтически приемлемая соль по п.1, где указанное соединение выбрано из группы

- 44 032362

,.ω

- 45 032362

1= Р
3. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать репликацию вируса(вирусов) денге в биологическом образце или у пациента, содержащая эффективное количество соединения формулы (I) или его стереоизомерной формы или фармацевтически приемлемой соли по п.1 или 2 вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями, разбавителями или носителями.
4. Фармацевтическая композиция по п.3, предназначенная для лечения денге.
5. Применение соединения формулы (I) или его стереоизомерной формы или фармацевтически приемлемой соли по п.1 для лечения денге.
6. Применение соединения, представленного следующей структурной формулой (I):

Е его стереоизомерной формы или фармацевтически приемлемой соли;

при этом указанное соединение выбрано из группы, где

К₁ представляет собой Р, К₂ представляет собой Р, СН₃ или ОСН₃ и К₃ представляет собой Н,

К₁ представляет собой Н, К₂ представляет собой С1 или Р и К₃ представляет собой СН₃,

- 46 032362

Κ1 представляет собой СН3, Κ2 представляет собой ОСН3, Г или Н и Κ3 представляет собой Н,

Κ₁ представляет собой Н, Κ₂ представляет собой С1 или Г и Κ₃ представляет собой Н,

Κ₁ представляет собой СН₃, Κ₂ представляет собой Н и Κ₃ представляет собой Г,

Κ₁ представляет собой Г, Κ₂ представляет собой Н и Κ₃ представляет собой СН₃,

Κ1 представляет собой Н, Κ2 представляет собой ОСН3 и Κ3 представляет собой Н или С1,

Κ1 представляет собой Н, Κ2 представляет собой Г и Κ3 представляет собой Г,

Κ1 представляет собой СГ3 или ОСГ3, Κ2 представляет собой Н и Κ3 представляет собой Н,

Κ1 представляет собой С1, Κ2 представляет собой ОСН3 и Κ3 представляет собой Н, для ингибирования репликации вируса(вирусов) денге в биологическом образце или у пациента.
7. Применение по п.6, дополнительно предусматривающее совместное введение дополнительного терапевтического средства, где указанное дополнительное терапевтическое средство выбрано из противовирусного средства, или вакцины против вируса денге, или их обоих.