CN107365866A - 一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 - Google Patents
一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107365866A CN107365866A CN201710785983.8A CN201710785983A CN107365866A CN 107365866 A CN107365866 A CN 107365866A CN 201710785983 A CN201710785983 A CN 201710785983A CN 107365866 A CN107365866 A CN 107365866A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- eml4
- internal standard
- alk
- detection probe
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于检测人类ALK‑EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒，包括：包括一正向引物、一反向引物组、一检测探针组、一内标正向引物、一内标反向引物和一内标检测探针；检测探针组中的检测探针的5’端均修饰有第一荧光报告基团，3’端均修饰有第一荧光猝灭基团；内标检测探针的5’端修饰有与第一荧光报告基团不同的第二荧光报告基团，3’端均修饰有第二荧光猝灭基团。本发明以人类ALK‑EML4基因融合为检测对象，通过特异引物的优化组合以及荧光探针，从而实现准确、简单、快速地同时检测ALK‑EML4基因融合，而且检测融合的能力高达1％。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒。
背景技术
ALK，即人类间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase，ALK)，于1994年首先发现于间变性大细胞淋巴瘤AMS3细胞株中，是由1620个氨基酸组成的跨膜蛋白，属于胰岛素受体家族。EML4是人类棘皮动物微管相关蛋白样4(echinoderm microtubule-associated protein-like 4，EML4)，属于棘皮动物微管相关蛋白样蛋白家族，由N末端碱基区、疏水的棘皮动物微管相关蛋白区(hydrophobic echinoderm microtubule-associated protein-like protein，HELP)及WD重复区三部分构成。该融合基因定位于2号染色体的短臂上(2p21和2p23)，其5’端为EML4的片段，3’端为ALK的片段，由倒置后的EML4基因片段与残余的ALK片段连接。该融合基因拥有EML4基因中的BASIC区域，疏水的棘皮动物微管相关蛋白区及部分WD重复区(后两部分在部分亚型中缺失)和ALK基因中的Kinase功能区。EML4-ALK的信号转导通路为PI3-K/Akt、STAT3/5、Ras-MEK和PLC-γ/PIP2等，这些通路与细胞存活、增殖和迁移密切相关。
克唑替尼是一种酪氨酸激酶受体抑制剂，靶向分子包括ALK、肝细胞生长因子受体(HGFR，c-Met)和ROS1，于2011年获得美国食品和药品管理局(FDA)批准用于治疗间变型淋巴瘤激酶(ALK)基因重排的非小细胞肺癌(NSCLC)。EML4-ALK基因融合可促使ALK基因引起致癌融合蛋白的表达。ALK融合蛋白形成可引起基因表达和信号的激活和失调，进而促使表达这些蛋白的肿瘤细胞增殖和存活。克唑替尼在肿瘤细胞株中对ALK和c-Met在细胞水平检测的磷酸化具有浓度依赖性抑制作用，对表达EML4-ALK或NPM-ALK融合蛋白或c-Met的异种移植荷瘤小鼠具有抗肿瘤活性在NSCLC患者中，ALK重排的阳性率大约为3～5％，在腺癌、从未吸烟或少量吸烟的患者中EML4-ALK融合的几率高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒。
本发明的技术方案如下：
一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒，包括一正向引物、一反向引物组、一检测探针组、一内标正向引物、一内标反向引物和一内标检测探针；检测探针组中的检测探针的5’端均修饰有第一荧光报告基团，3’端均修饰有第一荧光猝灭基团；内标检测探针的5’端修饰有与第一荧光报告基团不同的第二荧光报告基团，3’端均修饰有第二荧光猝灭基团；其中
正向引物为ALK-F，包括如SEQ ID NO 01所示的序列；
反向引物组由ALK-R、EML4-R1、EML4-R2、EML4-R3、EML4-R4、EML4-R5、EML4-R6、EML4-R7和EML4-R8组成，依次包括如SEQ ID NO 02至10所示的序列；
检测探针组由ALK-P1和ALK-P2组成，分别包括如SEQ ID NO 11和12所示的序列；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的组成如下：
正向引物
反向引物组中的至少一反向引物
检测探针组中的一检测探针
内标正向引物
内标反向引物
内标检测探针
1×PCR缓冲液
MgCl2
dNTPs
Taq酶
模板
H2O；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的反应条件均为：95℃预变性5分钟，1个循环；95℃变性25秒，64℃退火20秒，72℃延伸15秒，15个循环；95℃变性25秒，60℃退火35秒，72℃延伸10秒，30个循环；后30个循环在退火时检测荧光信号。
在本发明的一个优选实施方案中，所述内标正向引物为βactin-F，包括如SEQ IDNO 13所示的序列；所述内标反向引物为βactin-R，包括如SEQ ID NO 14所示的序列；所述内标检测探针为βactin-P，包括如SEQ ID NO 15所示的序列。
在本发明的一个优选实施方案中，所述第一荧光报告基团为FAM，所述第一荧光猝灭基团为BHQ1，所述第二荧光报告基团为HEX、ROX或VIC，第二荧光猝灭基团为BHQ1。
上述引物及探针具体序列如下表所示：
| 引物和探针 | 序列(5-3) |
| ALK-F | GCCACACCTGCCACTCT |
| ALK-R | CATGGCCCAGACCCCGAAT |
| EML4-R1 | CCTGGGAAAGGACCTAAAGA |
| EML4-R2 | GGGAGACTATGAAATATTGTA |
| EML4-R3 | GAGAAATAGAGATATGCTGGAT |
| EML4-R4 | TGTGATGCGCTACTCAATAG |
| EML4-R5 | GCTTCCAAATAGAAGTACAGC |
| EML4-R6 | TGCTATTCAGGAATGTTCTC |
| EML4-R7 | GAAAAAAACAGCCAAGCGT |
| EML4-R8 | ATGTCATCATCAACCAAGCGT |
| ALK-P1 | FAM-AAGCTCCGCACCTCGACCA-BHQ1 |
| ALK-P2 | FAM-CGCCGGAAGCACCAGGC-BHQ1 |
| βactin-F | GACTACCTCATGAAGATCCTCA |
| βactin-R | TCTCCTTAATGTCACGCACGAT |
| βactin-P | HEX-CGGCTACAGCTTCACCACC-BHQ1 |
本发明的有益效果：本发明以人类ALK-EML4基因融合为检测对象，通过特异引物的优化组合以及荧光探针，从而实现准确、简单、快速地同时检测ALK-EML4基因融合，而且检测融合的能力高达1％。
附图说明
图1为本发明实施例1中检测ALK-EML4基因融合阴性的样品检测曲线图。
图2为本发明实施例1中检测ALK-EML4基因融合阳性的样品检测曲线图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：包括一正向引物、一反向引物组、一检测探针组、一内标正向引物、一内标反向引物和一内标检测探针；检测探针组中的检测探针的5’端均修饰有第一荧光报告基团，3’端均修饰有第一荧光猝灭基团；内标检测探针的5’端修饰有与第一荧光报告基团不同的第二荧光报告基团，3’端均修饰有第二荧光猝灭基团；优选的，所述第一荧光报告基团为FAM，所述第一荧光猝灭基团为BHQ1，所述第二荧光报告基团为HEX、ROX或VIC，第二荧光猝灭基团为BHQ1，其中，
正向引物为ALK-F，包括如SEQ ID NO 01所示的序列；
反向引物组由ALK-R、EML4-R1、EML4-R2、EML4-R3、EML4-R4、EML4-R5、EML4-R6、EML4-R7和EML4-R8组成，依次包括如SEQ ID NO 02至10所示的序列；
检测探针组由ALK-P1和ALK-P2组成，分别包括如SEQ ID NO 11和12所示的序列；
内标正向引物为βactin-F，包括如SEQ ID NO 13所示的序列；
内标反向引物为βactin-R，包括如SEQ ID NO 14所示的序列；
内标检测探针为βactin-P，包括如SEQ ID NO 15所示的序列；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的组成如下：
正向引物
反向引物组中的至少一反向引物
检测探针组中的一检测探针
内标正向引物
内标反向引物
内标检测探针
1×PCR缓冲液
MgCl2
dNTPs
Taq酶
模板
H2O；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的反应条件均为：95℃预变性5分钟，1个循环；95℃变性25秒，64℃退火20秒，72℃延伸15秒，15个循环；95℃变性25秒，60℃退火35秒，72℃延伸10秒，30个循环；后30个循环在退火时检测荧光信号。
上述引物及探针具体序列如下表所示：
| 引物和探针 | 序列(5-3) |
| ALK-F | GCCACACCTGCCACTCT |
| ALK-R | CATGGCCCAGACCCCGAAT |
| EML4-R1 | CCTGGGAAAGGACCTAAAGA |
| EML4-R2 | GGGAGACTATGAAATATTGTA |
| EML4-R3 | GAGAAATAGAGATATGCTGGAT |
| EML4-R4 | TGTGATGCGCTACTCAATAG |
| EML4-R5 | GCTTCCAAATAGAAGTACAGC |
| EML4-R6 | TGCTATTCAGGAATGTTCTC |
| EML4-R7 | GAAAAAAACAGCCAAGCGT |
| EML4-R8 | ATGTCATCATCAACCAAGCGT |
| ALK-P1 | FAM-AAGCTCCGCACCTCGACCA-BHQ1 |
| ALK-P2 | FAM-CGCCGGAAGCACCAGGC-BHQ1 |
| βactin-F | GACTACCTCATGAAGATCCTCA |
| βactin-R | TCTCCTTAATGTCACGCACGAT |
| βactin-P | HEX-CGGCTACAGCTTCACCACC-BHQ1 |
实施例1
本发明以人类ALK-EML4基因融合为检测对象，通过特异引物的优化组合以及荧光探针，从而实现准确、简单、快速地同时检测ALK-EML4基因融合，而且检测融合的能力高达1％。
野生型细胞系H460的RNA逆转录cDNA为野生型模板，以ALK-EML4融合基因COSF463质粒为阳性对照模板，建立多重荧光PCR检测ALK-EML4基因COSF463突变的反应体系。此方法主要包括以下步骤：
(1)根据Cosmic数据公布的ALK基因和EML4基因的野生型cDNA基因序列和融合突变基因序列，设计高特异性引物和检测探针。待检测的突变为肺癌患者ALK-EML4基因8种常见突变，具体相见下表：
(2)多重荧光PCR扩增反应体系配制并上机检测。
(3)检测荧光信号，以达到设定的阈值时所需要的循环次数Ct值作为结果判断的标准。
步骤(1)中根据Cosmic数据公布的ALK基因和EML4的野生型基因序列和融合突变基因序列，设计引物和检测探针，具体序列详见实施例1的表。
步骤(2)的多重荧光PCR扩增反应体系之一为：
以上试剂组分：1×PCR缓冲液，MgCl2，Taq酶，dNTP均购自中国大连宝生物公司。
所述荧光PCR的反应条件是95℃预变性5分钟，1个循环；95℃变性25秒，60℃退火20秒，72℃延伸10秒，15个循环；95℃变性25秒，60℃退火35秒，72℃延伸10秒，30个循环，后30个循环在退火时检测FAM和HEX或ROX荧光信号。
步骤(3)检测FAM和HEX荧光信号的Ct值，是采用Mx3000P荧光PCR扩增仪或Mx3005P荧光PCR扩增仪或ABI 7500荧光PCR扩增仪。一次可检测96份样品(包括阴阳性对照)。根据荧光PCR扩增仪显示的Ct值判断结果：检测反应体系的FAM和HEX荧光强度，以HEX信号达到设定阈值(Ct＞18)时表明上样DNA量在允许范围内，FAM信号结果可信；以FAM达到设定的阈值时所需要的循环次数Ct值作为阴阳性判断的标准，Ct值为0或30：阴性；Ct小于30：阳性。检测ALK-EML4基因融合阴性的样品的结果如图1所示，检测ALK-EML4基因融合阳性的样品的结果如图2所示。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。
序列表
<110> 厦门飞朔生物技术有限公司
<120> 一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒
<160> 15
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 17
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 1
gccacacctg ccactct 17
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 2
catggcccag accccgaat 19
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 3
cctgggaaag gacctaaaga 20
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 4
gggagactat gaaatattgt a 21
<210> 5
<211> 22
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 5
gagaaataga gatatgctgg at 22
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 6
tgtgatgcgc tactcaatag 20
<210> 7
<211> 21
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 7
gcttccaaat agaagtacag c 21
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 8
tgctattcag gaatgttctc 20
<210> 9
<211> 19
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 9
gaaaaaaaca gccaagcgt 19
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 10
atgtcatcat caaccaagcg t 21
<210> 11
<211> 19
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 11
aagctccgca cctcgacca 19
<210> 12
<211> 17
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 12
cgccggaagc accaggc 17
<210> 13
<211> 22
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 13
gactacctca tgaagatcct ca 22
<210> 14
<211> 22
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 14
tctccttaat gtcacgcacg at 22
<210> 15
<211> 19
<212> DNA
<213> 人(Homo sapiens)
<400> 15
cggctacagc ttcaccacc 19
Claims (3)
1.一种用于检测人类ALK-EML4基因融合的多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：包括一正向引物、一反向引物组、一检测探针组、一内标正向引物、一内标反向引物和一内标检测探针；检测探针组中的检测探针的5’端均修饰有第一荧光报告基团，3’端均修饰有第一荧光猝灭基团；内标检测探针的5’端修饰有与第一荧光报告基团不同的第二荧光报告基团，3’端均修饰有第二荧光猝灭基团；其中
正向引物为ALK-F，包括如SEQ ID NO 01所示的序列；
反向引物组由ALK-R、EML4-R1、EML4-R2、EML4-R3、EML4-R4、EML4-R5、EML4-R6、EML4-R7和EML4-R8组成，依次包括如SEQ ID NO 02至10所示的序列；
检测探针组由ALK-P1和ALK-P2组成，分别包括如SEQ ID NO 11和12所示的序列；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的组成如下：
正向引物
反向引物组中的至少一反向引物
检测探针组中的一检测探针
内标正向引物
内标反向引物
内标检测探针
1×PCR缓冲液
MgCl2
dNTPs
Taq酶
模板
H2O；
该多重荧光PCR检测试剂盒的每一反应体系的反应条件均为：95℃预变性5分钟，1个循环；95℃变性25秒，64℃退火20秒，72℃延伸15秒，15个循环；95℃变性25秒，60℃退火35秒，72℃延伸10秒，30个循环；后30个循环在退火时检测荧光信号。
2.如权利要求1所述的多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：所述内标正向引物为βactin-F，包括如SEQ ID NO 13所示的序列；所述内标反向引物为βactin-R，包括如SEQ IDNO 14所示的序列；所述内标检测探针为βactin-P，包括如SEQ ID NO 15所示的序列。
3.如权利要求1所述的多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：所述第一荧光报告基团为FAM，所述第一荧光猝灭基团为BHQ1，所述第二荧光报告基团为HEX、ROX或VIC，第二荧光猝灭基团为BHQ1。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710785983.8A CN107365866A (zh) | 2017-09-04 | 2017-09-04 | 一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710785983.8A CN107365866A (zh) | 2017-09-04 | 2017-09-04 | 一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107365866A true CN107365866A (zh) | 2017-11-21 |
Family
ID=60311687
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710785983.8A Pending CN107365866A (zh) | 2017-09-04 | 2017-09-04 | 一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107365866A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108148912A (zh) * | 2018-03-08 | 2018-06-12 | 四川大学 | 肿瘤的生物标志物、应用和肿瘤检测试剂盒 |
| CN109022581A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-12-18 | 上海佰臻生物科技有限公司 | Eml4-alk融合基因荧光定量pcr检测的试剂盒 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104818318A (zh) * | 2014-07-02 | 2015-08-05 | 厦门艾德生物医药科技有限公司 | 一次性检测肺癌多重基因的引物、探针、检测体系和试剂盒 |
| CN105039580A (zh) * | 2015-09-06 | 2015-11-11 | 武汉海吉力生物科技有限公司 | 人类alk融合基因检测引物组及检测试剂盒 |
| CN106978497A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-07-25 | 武汉友芝友医疗科技股份有限公司 | Eml4‑alk融合基因突变的检测引物、探针及检测试剂盒 |
-
2017
- 2017-09-04 CN CN201710785983.8A patent/CN107365866A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104818318A (zh) * | 2014-07-02 | 2015-08-05 | 厦门艾德生物医药科技有限公司 | 一次性检测肺癌多重基因的引物、探针、检测体系和试剂盒 |
| CN105039580A (zh) * | 2015-09-06 | 2015-11-11 | 武汉海吉力生物科技有限公司 | 人类alk融合基因检测引物组及检测试剂盒 |
| CN106978497A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-07-25 | 武汉友芝友医疗科技股份有限公司 | Eml4‑alk融合基因突变的检测引物、探针及检测试剂盒 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108148912A (zh) * | 2018-03-08 | 2018-06-12 | 四川大学 | 肿瘤的生物标志物、应用和肿瘤检测试剂盒 |
| CN109022581A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-12-18 | 上海佰臻生物科技有限公司 | Eml4-alk融合基因荧光定量pcr检测的试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Park et al. | Discordance of molecular biomarkers associated with epidermal growth factor receptor pathway between primary tumors and lymph node metastasis in non-small cell lung cancer | |
| CN104531854B (zh) | 检测西妥昔单抗治疗转移性结直肠癌耐药的试剂盒 | |
| EP3218518B1 (en) | Determining tumor load and biallelic mutation in patients with calr mutation using peripheral blood plasma | |
| EP2487250A1 (en) | Method for detecting fusion gene | |
| CN105256021B (zh) | 基于Sanger测序灵敏检测人类EGFR基因突变的方法及其试剂盒 | |
| CN104328164A (zh) | 荧光探针杂交法检测人egfr基因突变试剂盒 | |
| Walther et al. | Analysis of GNAS1 mutations in myxoid soft tissue and bone tumors | |
| WO2023179053A1 (zh) | 一种用于靶基因拷贝数检测的方法 | |
| CN106048008A (zh) | 一种egfr基因超低频突变检测试剂盒 | |
| CN111363810A (zh) | 检测egfr基因多个突变位点的检测剂组合物及试剂盒 | |
| CN107365866A (zh) | 一种用于检测人类alk‑eml4基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 | |
| CN104774963A (zh) | 检测pik3ca基因突变的试剂盒及其检测方法 | |
| Liu et al. | EGFR mutation types and abundance were associated with the overall survival of advanced lung adenocarcinoma patients receiving first-line tyrosine kinase inhibitors | |
| CN108148912B (zh) | 肿瘤的生物标志物、应用和肿瘤检测试剂盒 | |
| CN110373454A (zh) | 一种联合检测egfr基因突变的试剂盒及方法 | |
| CN106520994B (zh) | 一种用于检测egfr基因突变的多重荧光pcr检测试剂盒 | |
| US20180112271A1 (en) | Kit For Detecting PIK3CA Gene Mutation | |
| CN107937524A (zh) | 人类kras基因突变检测试剂盒及检测方法 | |
| JP2007000053A (ja) | ７Ｓグロブリンαサブユニット欠失ダイズの検出方法 | |
| KR20160125155A (ko) | 신규한 황반변성 진단용 마커 및 황반변성 진단방법 | |
| CN104073563A (zh) | 一种用于检测alk融合基因的荧光定量pcr方法及检测试剂盒 | |
| CN107354225A (zh) | 一种用于检测人类ros1基因融合的多重荧光pcr检测试剂盒 | |
| Nakhaee et al. | The prevalence of mediterranean mutation of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) in Zahedan | |
| Zhang et al. | The investigation of mutation and single nucleotide polymorphism of receptor tyrosine kinases and downstream scaffold molecules in acute myeloid leukemia | |
| EP3927848A1 (en) | Process for classification of glioma |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20171121 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |