CN107354122A - 一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG‑H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液进行第二阶段培养。本发明操作简单易行、成本低，添加乙醇、海水晶和黄腐酸母液后能很好的促进雨生红球藻的生长增殖，诱导雨生红球藻生产虾青素，使虾青素的产量显著增加，从而大大加快雨生红球藻虾青素积累过程，提高虾青素生产的效率。

Description

一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法
技术领域
本发明涉及雨生红球藻培养技术领域，具体是一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法。
背景技术
虾青素是一种酮式类胡萝卜素，是迄今为止发现的自然界中抗氧化能力最强的物质。动物学及临床试验表明天然虾青素具有良好的生物安全性和超强的抗氧化性，具有很好的抗炎症、抗肿瘤、降血脂、延缓衰老、增强免疫力、预防心血管疾病、防止体内代谢和紫外线辐射产生的自由基造成组织和光氧化损伤等功能。此外，虾青素还有具有显著的着色功能，主要作为珍稀水产品、禽蛋、观赏动物的着色剂。由于天然虾青素具有良好的生物活性和生物安全性。因此，天然虾青素在食品、医药化妆品、保健品、软饮料加工及水产品、家禽和家畜(鸡、猪和牛)饲料添加剂等行业具有广阔的市场前景。
目前，虾青素的主要生产方法包括人工合成和生物获取两种方式。人工合成虾青素不仅价格昂贵，而且同天然虾青素在结构、功能、应用、稳定性、吸收效果和生物安全性等方面差别显著。除了人工合成的方法之外，天然虾青素的生物来源一般有3种：水产品加工工业的废弃物、红发夫酵母和微藻(雨生红球藻)。然而，水产品加工工业的废弃物中虾青素含量较低，且提取费用较高，不适于进行大规模生产，天然的红发夫酵母中虾青素平均含量也仅为0.40％，相比之下，雨生红球藻中虾青素含量却高达1.0％～3.0％，因此被看作是天然虾青素的“浓缩品”和最佳生物来源。雨生红球藻虾青素以其高含量、高品质、高的生物活性受到了广大国内外学者的关注，成为近些年来国际上天然虾青素生产的研究热点，培养雨生红球藻已成为未来获取天然虾青素的最佳途径，从而得到各国的大力推进。
虽然雨生红球藻是目前最好的虾青素工业生产来源，但它生长缓慢，培养过程中容易被其他生物污染，为了优化工业生产过程，提高虾青素的产量，需要为天然虾青素的生产提供优良培养方法，以提高工业产量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种简单易行、成本低的促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强2:1～5:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为15-25℃，培养时间为10-20d，总光照强度为1500-2500lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞。
作为本发明进一步的方案：所述步骤(2)培养基中加入的乙醇按体积百分比浓度计为3-5％。
作为本发明进一步的方案：所述步骤(2)培养基中加入的海水晶按质量百分比浓度计为0.5-1.5％。
作为本发明进一步的方案：所述步骤(3)中所述的黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为8-12％。
作为本发明再进一步的方案：所述步骤(3)中黄腐酸母液在培养基中的浓度为4.5-5.5mg/L。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明操作简单易行、成本低，添加乙醇、海水晶和黄腐酸母液后能很好的促进雨生红球藻的生长增殖，诱导雨生红球藻生产虾青素，使虾青素的产量显著增加，从而大大加快雨生红球藻虾青素积累过程，提高虾青素生产的效率。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强2:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为15℃，培养时间为10d，总光照强度为1500lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；加入的乙醇按体积百分比浓度计为3％；加入的海水晶按质量百分比浓度计为0.5％；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞；黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为8％黄腐酸母液在培养基中的浓度为4.5mg/L。
实施例2
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强2.5:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为18℃，培养时间为12d，总光照强度为1800lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；加入的乙醇按体积百分比浓度计为3.5％；加入的海水晶按质量百分比浓度计为0.8％；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞；黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为9％黄腐酸母液在培养基中的浓度为4.8mg/L。
实施例3
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强3:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为20℃，培养时间为15d，总光照强度为2000lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；加入的乙醇按体积百分比浓度计为4％；加入的海水晶按质量百分比浓度计为1％；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞；黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为10％黄腐酸母液在培养基中的浓度为5mg/L。
实施例4
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强4:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为22℃，培养时间为18d，总光照强度为2200lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；加入的乙醇按体积百分比浓度计为4.5％；加入的海水晶按质量百分比浓度计为1.2％；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞；黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为11％黄腐酸母液在培养基中的浓度为5.2mg/L。
实施例5
一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强5:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为25℃，培养时间为20d，总光照强度为2500lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；加入的乙醇按体积百分比浓度计为5％；加入的海水晶按质量百分比浓度计为1.5％；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞；黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为12％黄腐酸母液在培养基中的浓度为5.5mg/L。
本发明操作简单易行、成本低，添加乙醇、海水晶和黄腐酸母液后能很好的促进雨生红球藻的生长增殖，诱导雨生红球藻生产虾青素，使虾青素的产量显著增加，从而大大加快雨生红球藻虾青素积累过程，提高虾青素生产的效率。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。

Claims (5)

1.一种促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BG-H培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；
(2)向培养基中加入乙醇和海水晶，将获得诱导的藻液放入培养基中进行第一阶段培养，采用人工LED光源培养，所用的LED光源发出的单色光的波长范围在450nm带宽30nm和640nm带宽30nm，并按照红光与蓝光光强2:1～5:1的比例同时使用两种上述不同波长的光源，培养温度为15-25℃，培养时间为10-20d，总光照强度为1500-2500lux，获得含有游动细胞的雨生红球藻；
(3)在光照开放式培养的条件下，向培养基中加入黄腐酸母液，将步骤(1)获得的含有游动细胞的雨生红球藻在培养基中进行第二阶段培养，使至少部分游动细胞转化为不动细胞。
2.根据权利要求1所述的促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，其特征在于，所述步骤(2)培养基中加入的乙醇按体积百分比浓度计为3-5％。
3.根据权利要求1所述的促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，其特征在于，所述步骤(2)培养基中加入的海水晶按质量百分比浓度计为0.5-1.5％。
4.根据权利要求1所述的促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述的黄腐酸母液的按质量百分比浓度计为8-12％。
5.根据权利要求1所述的促进雨生红球藻生长增殖和催红的方法，其特征在于，所述步骤(3)中黄腐酸母液在培养基中的浓度为4.5-5.5mg/L。
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