CN107349215A - 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用 - Google Patents

王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107349215A
CN107349215A CN201710761223.3A CN201710761223A CN107349215A CN 107349215 A CN107349215 A CN 107349215A CN 201710761223 A CN201710761223 A CN 201710761223A CN 107349215 A CN107349215 A CN 107349215A
Authority
CN
China
Prior art keywords
calcification
angiosteosis
vaccarin
vac
angiogenic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710761223.3A
Other languages
English (en)
Inventor
邱丽颖
孙海建
朱雪雪
龚蕾蕾
蔡维维
周跃涛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201710761223.3A priority Critical patent/CN107349215A/zh
Publication of CN107349215A publication Critical patent/CN107349215A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明为制备抗血管钙化的王不留行黄酮苷的应用，属中药药物制剂领域。将王不留行黄酮苷应用到抗血管钙化的药物开发中，以制备更好的治疗血管钙化的方法。本发明细胞实验结果显示王不留行黄酮苷(VAC)能显著降低钙化诱导培养基引起的血管平滑肌细胞(VSMCs)钙离子沉积和碱性磷酸酶(ALP)活性的升高，同时VAC抑制钙化诱导培养基诱导的钙化相关蛋白Runt相关转录因子2(runt‑related transcription factor 2，Runx2)和骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein 2，BMP‑2)的表达；在体动物实验进一步证实VAC有效治疗维生素D3和尼古丁诱导的钙化模型，证实王不留行黄酮苷能有效改善血管钙化，是治疗血管钙化的一种中药，可以作为新的治疗血管钙化相关疾病的药物、保健品和营养品进行开发，为治疗血管钙化相关疾病提供了一种新的途径和手段。

Description

王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用
技术领域
本发明涉及抗血管钙化中药开发，具体设计王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用，属中药药物开发领域。
背景技术
血管钙化是一种常见的血管病变，与骨发育过程相似，其病理表现主要为血管壁的钙磷过度沉积，导致血管壁僵硬性增加和血管顺应性下降，进而引起心肌缺血缺氧，左心室肥大和心力衰竭，引发血栓形成和板块破裂，血管钙化是心脑血管疾病高死亡率的主要因素。血管钙化受到包括代谢、炎症、氧化应激、凋亡等多种因素的调控，血管钙化是动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、慢性肾病、衰老和血管损伤等心血管疾病的共同病理表现。临床研究发现80％的血管损伤和90％的冠脉疾病中均存在血管钙化，血管钙化是心血管事件和脑卒中的预警指标，但血管钙化的发病机制目前尚未完全阐明，有效预防和治疗血管钙化是将成为21世纪医疗卫生事业的主要挑战。
中药是我国的宝贵资源之一，研究发现传统一些中药在防护血管钙化中发挥一定的作用，但深入探索和筛选具有抗血管钙化的中药仍然是任重道远的巨大任务，阐明中药开血管钙化其作用机制并研究和开发这些中药具有重要的临床意义。我们多年来一直从事王不留行的研究，王不留行为石竹科植物麦蓝菜Vaccaria Segetalis(Neck.)Garcke的干燥成熟种子，是一种常见的中药，具有活血通经、下乳消肿等功效。王不留行主要含有刺桐碱、三萜皂苷、黄酮苷、类脂、环肽、脂肪酸和单糖等成分，王不留行黄酮苷(Vaccarin,VAC)是王不留行的主要有效成分，本实验室研究发现不留行黄酮苷具有促进血管新生，对抗高糖和氧化应激的引起的内皮细胞损伤，降低血压和保护高血压肾病，改善糖尿病脂质代谢紊乱，加快开放性创伤的愈合速度，提示王不留行黄酮苷可能具有心血管保护作用，但目前尚未有报道王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的作用。
发明内容
本发明要解决的是为现有的抗血管钙化药物制备技术领域提供一种新的途径，提供王不留行黄酮苷在抗血管钙化药物中的作用，因此本研究提供的技术方法是将王不留行黄酮苷应用于制备治疗血管钙化的药物。
本发明的有益效果是：王不留行黄酮苷改善血管钙化，将王不留行黄酮苷应用到血管钙化相关药物的开发中，以制备更好的抗血管钙化的新思路，不仅拓展了抗血管钙化药物的选择，也为我国抗血管钙化中药的筛选提供的新的策略和思路。
附图说明
图1：王不留行黄酮苷(VAC)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响。
图2：王不留行黄酮苷(VAC)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化相关蛋白Runx-2和BMP-2的影响。
图3：王不留行黄酮苷(VAC)对血管钙化大鼠模型血管钙离子沉积和ALP活性的影响。
图4：王不留行黄酮苷(VAC)对血管钙化大鼠模型的血管钙化相关关蛋白Runx-2和BMP-2的影响。
具体实施方式
实施例1血管钙化模型的复制
血管钙化模型大鼠制作方法：参考国内外权威期刊，我们采用8周龄雄性SD大鼠肌肉注射维生素D330万单位/kg，同时灌胃尼古丁25mg/kg，9h后再重复给予尼古丁1次，2周后再次给予肌肉注射维生素DB 30万单位/kg，4周后大鼠出现广泛的血管钙化。
实施例2实验分组及王不留行黄酮苷(VAC)干预
将8周龄的SD大鼠随机分三组：
(1)正常对照-生理盐水组：为正常对照组，始终给予正常饮食和饮水，2周后给予生理盐水皮下灌注2周作为王不留行黄酮苷(VAC)的对照；
(2)血管钙化组-生理盐水组采用维生素D3联合尼古丁方法引起血管钙化，2周后给予生理盐水(saline)腹腔注射2周作为王不留行黄酮苷(VAC)的对照；
(3)血管钙化-黄酮苷组(10mg/kg)：采用维生素D3联合尼古丁方法引起血管钙化，2周后给予王不留行黄酮苷(VAC，10mg/kg)腹腔注射2周。
实施例3 von Kossa染色和Alizarin red S染色
参考国内外权威文献，戊巴比妥钠麻醉大鼠，打开胸腔、暴露心脏，经左心室插管至升主动脉，夹壁腹主动脉，左心耳剪开一小出口，快速灌注0.01M PBS(37℃)冲洗至流出液清亮后再灌注预冷(4℃)的4％多聚甲醛固定(先快后慢，在大鼠肢体伸展后减慢速度)。取出胸主动脉，置于4℃的4％多聚甲醛后固定24h，脱水，石蜡包埋，切片，进行常规vonKossa染色和Alizarin red S染色。
实施例4原代血管平滑肌细胞培养及钙化培养基诱导
采用酶消化法培养原代血管平滑肌细胞(VSMCs)，所有实验只用3-6代的原代VSMCs，VSMCs每隔3-4天传代一次，处于对数生长期的VSMCs给予β-glycerophosphate(5mM)和CaCl214天(2.5mM)，每两天换一次液，并在造模期间，分别给予对照PBS和VAC(5μM)处理。
实施例5钙离子浓度测定和碱性磷酸酶(ALP)活性测定
采用钙离子含量测定试剂盒(南京建成)检测钙离子含量，根据碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠，产生游离酚和磷酸，酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉作用经铁氰化钾氧化生成红色醌衍生物，根据红色深浅可以测定酶活力的高低，采用ALP测定试剂盒(南京建成)检测ALP活性。
实施例6蛋白表达检测(Western Blot)
采用Western Blot检测钙化相关蛋白Runt相关转录因子2(runt-relatedtranscription factor 2，Runx2)和骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein 2，BMP-2)的表达。
实验结果如附图1至4中所示：
(1)王不留行黄酮苷(VAC)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响：
与对照组(Control)相比，钙化培养基(Calcification)显著导致钙离子沉积，钙离子浓度增加和ALP活性升高，而王不留行黄酮苷(VAC)显著降低钙化培养基诱导的VSMC钙化，详见图1。
数据均以均值±标准误(mean±SE)表示，每组样本为6，P<0.05为有统计学差异，*与Control组相比，P<0.05；与Calcification组相比，P<0.05。Control，对照组；Calcification，血管钙化组；Calcification+VAC，血管钙化诱导同时给予王不留行黄酮苷的剂量为5μM。
(2)王不留行黄酮苷(VAC)对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化相关蛋白Runx-2和BMP-2的影响：
与对照组(Control)相比，钙化培养基(Calcification)显著升高VSMCs的钙化相关蛋白Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2，Runx2)和骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein 2，BMP-2)的表达，而王不留行黄酮苷(VAC)显著抑制该效应，详见图2。
数据均以均值±标准误(mean±SE)表示，每组样本为6，P<0.05为有统计学差异，*与Control组相比，P<0.05；与Calcification组相比，P<0.05。Control，对照组；Calcification，血管钙化组；Calcification+VAC，血管钙化诱导同时给予王不留行黄酮苷的剂量为5μM。
(3)王不留行黄酮苷(VAC)对血管钙化大鼠模型血管钙离子沉积和ALP活性的影响：
与对照组(Control)相比，von Kossa染色和Alizarin red S染色显示血管钙化模型大鼠的血管出现显著的钙离子沉积，同时血管钙离子浓度增加和ALP活性升高(，而王不留行黄酮苷(VAC)显著降低血管钙化模型大鼠的血管钙化程度，详见图3。
数据均以均值±标准误(mean±SE)表示，每组样本为6，P<0.05为有统计学差异，*与Control组相比，P<0.05；与Calcification组相比，P<0.05。Control，对照组；Calcification，血管钙化组；Calcification+VAC，血管钙化诱导同时给予王不留行黄酮苷的剂量为10mg/Kg。
(4)王不留行黄酮苷(VAC)对血管钙化大鼠模型的血管钙化相关关蛋白Runx-2和BMP-2的影响：
与对照组(Control)相比，血管钙化模型大鼠血管的钙化相关蛋白Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2，Runx2)和骨形成蛋白2(Bonemorphogenetic protein 2，BMP-2)的表达显著升高，而王不留行黄酮苷(VAC)显著抑制该效应，详见图4。
数据均以均值±标准误(mean±SE)表示，每组样本为6，P<0.05为有统计学差异，*与Control组相比，P<0.05；与Calcification组相比，P<0.05。Control，对照组；Calcification，血管钙化组；Calcification+VAC，血管钙化诱导同时给予王不留行黄酮苷的剂量为10mg/Kg。

Claims (2)

1.王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用。
2.根据权利要求1所述，其特征在于王不留行黄酮苷抗血管钙化应用的产品形式包括保健品、营养品和药物制剂。
CN201710761223.3A 2017-08-30 2017-08-30 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用 Pending CN107349215A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710761223.3A CN107349215A (zh) 2017-08-30 2017-08-30 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710761223.3A CN107349215A (zh) 2017-08-30 2017-08-30 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107349215A true CN107349215A (zh) 2017-11-17

Family

ID=60288330

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710761223.3A Pending CN107349215A (zh) 2017-08-30 2017-08-30 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107349215A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113143943A (zh) * 2021-06-15 2021-07-23 西南医科大学附属医院 Thonningianin A在制备作为L-型钙离子通道激活剂的药物中的应用
CN113874052A (zh) * 2019-05-22 2021-12-31 生物相容性创新责任有限公司 用于在生物基质中防止钙化沉积物形成和使异种抗原失活的方法
CN115433776A (zh) * 2022-09-30 2022-12-06 中国医学科学院阜外医院 Ccn3在调控血管平滑肌细胞钙化中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103948619A (zh) * 2014-05-12 2014-07-30 江南大学 一种具有抗氧化抗高糖损伤的王不留行黄酮苷的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103948619A (zh) * 2014-05-12 2014-07-30 江南大学 一种具有抗氧化抗高糖损伤的王不留行黄酮苷的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张晓敏等: "血管钙化相关抑制因子的研究进展", 《中华高血压杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113874052A (zh) * 2019-05-22 2021-12-31 生物相容性创新责任有限公司 用于在生物基质中防止钙化沉积物形成和使异种抗原失活的方法
CN113143943A (zh) * 2021-06-15 2021-07-23 西南医科大学附属医院 Thonningianin A在制备作为L-型钙离子通道激活剂的药物中的应用
CN115433776A (zh) * 2022-09-30 2022-12-06 中国医学科学院阜外医院 Ccn3在调控血管平滑肌细胞钙化中的应用
CN115433776B (zh) * 2022-09-30 2023-12-22 中国医学科学院阜外医院 Ccn3在调控血管平滑肌细胞钙化中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102670864B (zh) 治疗心脑血管疾病和糖尿病的抗氧化功能的药物组合物
CN107349215A (zh) 王不留行黄酮苷在制备抗血管钙化药物中的应用
CN103919854B (zh) 密蒙花及其提取物在制备药物中的应用
Ou et al. Gut Flora: Novel therapeutic target of Chinese medicine for the treatment of cardiovascular diseases
CN104147345B (zh) 一种治疗心脏自主神经病变的中药组合物
CN107073059A (zh) 包含天然混合物提取物作为活性成分的预防或治疗糖尿病并发症和血管性水肿的药物组合物
CN107158225A (zh) 一种生脉饮组合物及其制备方法和应用
CN104586865B (zh) 一种治疗心血管疾病的药物组合物
CN104740054B (zh) 一种防治心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途
CN100484563C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法
CN105687251A (zh) 蟾酥提取物在制备治疗人脑胶质瘤药物中的应用
US20190247406A1 (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating ischemia-reperfusion injury, containing bile acid
CN105833184B (zh) 一种中药组合物、其制备的发酵药液及制备方法与应用
Yang et al. Guanxintai exerts protective effects on ischemic cardiomyocytes by mitigating oxidative stress
CN101474195A (zh) 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物
CN108619158A (zh) 丹参酮ⅱa磺酸钠在制备促进血管新生的药物中的应用
Lv et al. Effect of WenXin KeLi on Improvement of Arrhythmia after Myocardial Infarction by Intervening PI3K‐AKT‐mTOR Autophagy Pathway
CN108210487A (zh) 鱼腥草素钠在制备治疗心力衰竭和/或心律失常药物中的应用
CN106890189A (zh) 重楼皂苷在制备抗肿瘤药物增敏剂中的应用
Wei et al. Mechanism involved in Danshen-induced fluid secretion in salivary glands
CN104116731A (zh) 一种预防动脉硬化的药物组合物及其制备方法
CN108210595A (zh) 治疗慢加急性肝衰竭的中药组合物及其制备方法和应用
CN109674817B (zh) 三氧化二砷在制备治疗晚期动脉粥样硬化药物中的用途
CN106319009A (zh) 一种细胞外基质蛋白肽及其提取方法和应用
Zhang et al. Cardiovascular Disease Traditional Chinese and Western Medicine Combined Treatment Science and Standardized Drug System Research

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20171117

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication