CN107320697A - 一种治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

一种治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的组合物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种食品、保健品或药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：制附子24～36份、生牡蛎24～36份、干姜12～18份、麻黄12～18份、炙甘草8～12份。还公开了前述食品、保健品或药物组合物的制备方法和用途。本发明公开的食品、保健品或药物能显著提高脓毒症致急性呼吸窘迫综合征患者的存活率，有效治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征，具有良好的市场应用前景。

Description

一种治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的组合物及其制备方 法和用途
技术领域
本发明涉及一种治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的食品、保健品或药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术
脓毒症(Sepsis)是由感染引起的全身性炎症反应综合征，是危重病患者常见的临床表现，也是危重病患者常见的死亡原因之一。急性呼吸窘迫综合征(The AcuteRespirarory Distress Syndrome，ARDS)是一种肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞通透性增加引起的非心源性肺水肿，临床表现为严重的急性低氧血症综合症状。ARDS的致病原因包括肺炎、脓毒症及败血症等，由脓毒症导致的ARDS较其他因素导致的ARDS具有更高的病死率。
针对脓毒症致ARDS目前尚无特殊治疗方法，临床传统治疗手段为常规 ARDS的治疗方法，如，保护性的肺通气策略、俯卧位通气、神经肌肉阻滞剂的应用、体外膜式氧合，然而病死率仍居高不下。
脓毒症致ARDS属于传统中医学“厥脱症”的范畴，近年来随着临床研究及动物实验的不断深入，中药治疗ARDS得了较大的成果。王慧琦等，“川芎嗪对脓毒症急性肺损伤的保护作用”，同济大学学报2014年05期公开了川芎嗪可以减轻脓毒症急性肺损伤中炎症反应，减轻肺组织损伤；赵敏等，“黄芪对急性肺损伤大鼠模型肺组织中角质细胞生长因子表达的影响”，中医临床研究2013年05期公开了黄芪具有减轻肺组织病理损伤的作用。
现未见将制附子、生牡蛎、干姜、麻黄和炙甘草5味药物配伍用于治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的报道。
发明内容
本发明提供了一种食品、保健品或药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：制附子24～36份、生牡蛎24～36份、干姜12～18份、麻黄12～18份、炙甘草8～12份。
其中，所述原料的重量配比为：制附子30份、生牡蛎30份、干姜15份、麻黄15份、炙甘草10份。
其中，所述的制附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根经过盐渍、水漂、煮、炒等法炮制后的加工品；所述生牡蛎为牡蛎科动物长牡蛎(OstreaglgasThunberg)、近江牡蛎(Ostrea rivularis Gould)或大连湾牡蛎 (Ostrcatalienwhanensis Crosse)的贝壳生用品。
其中，所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述组合物是以制附子、生牡蛎、干姜、麻黄和炙甘草的原药材、水提物或者有机溶剂提取物为有效成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
其中，所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述制剂为口服制剂。
其中，所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述制剂为散剂、膏剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液或者滴丸。
本发明还提供了一种制备前述食品、保健品或药物组合物的方法，其特征在于：它包含如下步骤：
(1)称取原料药；
(2)原料药直接打粉，或将原料药加水煎煮或有机溶剂提取，提取液浓缩，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。
本发明最后提供了前述组合物在制备治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的食品、保健品或药物中的用途。
本发明药物组合物以附子，辛热，补坎中真阳，真阳为君火之种，补真火即是壮君火也；生牡蛎，有通阴阳之共，共温肾潜阳；干姜温中，助附子以温肾阳，肺为水之上源，以麻黄开宣肺气，通调水道，以助水液归于常道，炙甘草调和诸药，全方共奏温肾潜阳、通调水道之功。
本发明提供的药物组合物配方精当，能显著提高脓毒症致急性呼吸窘迫综合征患者的存活率，有效治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征，组方中各药材配伍，具有较强的实际应用价值。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明：
图1为中药干预后24小时肺组织病理切片，从左到右依次为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。
图2为中药干预后48小时肺组织病理切片，从左到右依次为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组病理切片。
图3为中药干预后24小时肺血管内皮细胞形态切片，从左到右依次为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组病理切片。
图4为中药干预后48小时肺血管内皮细胞形态切片，从左到右依次为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组病理切片。
具体实施方式
实施例1 本发明食品、保健品或药物组合物的制备
称取制附子30g、生牡蛎30g、干姜15g、麻黄15g、炙甘草10g。
先将制附子放入砂锅内，加入2500ml的水，浸泡半个小时。以武火(大火)煮沸1.5小时后，加入生牡蛎，继续武火煮沸0.5小时，加入干姜、麻黄，再继续煮到剩200ml，将煮好的药液倒出于碗中。再加水1500ml至上述所剩药渣中，先武火煮沸0.5小时，文火(小火)煮到剩200ml，前后两次混合服用。
实施例2 本发明食品、保健品或药物组合物的制备
称取制附子24g、生牡蛎24g、干姜12g、麻黄12g、炙甘草8g。
先将制附子放入砂锅内，加入2500ml的水，浸泡半个小时。以武火(大火)煮沸1.5小时后，加入生牡蛎，继续武火煮沸0.5小时，加入干姜、麻黄，再继续武火煮沸0.5小时，再以文火(小火)煮到剩200ml，将煮好的药液倒出于碗中。再加水1500ml至第二步上述所剩药渣中，先武火煮沸0.5小时，文火(小火)煮到剩200ml，前后两次混合服用。
实施例3 本发明食品、保健品或药物组合物的制备
称取制附子36g、生牡蛎36g、干姜18g、麻黄18g、炙甘草12g。
先将制附子放入砂锅内，加入2500ml的水，浸泡半个小时。以武火(大火)煮沸1.5小时后，加入生牡蛎，继续武火煮沸0.5小时，加入干姜、麻黄，再继续煮到剩200ml，将煮好的药液倒出于碗中。再加水1500ml至上述所剩药渣中，先武火煮沸0.5小时，文火(小火)煮到剩200ml，前后两次混合服用。
以下通过具体药效学实验证明本发明的有益效果：
试验例1 本发明食品、保健品或药物组合物治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的验证
1实验材料
1.1受试品与试剂 本发明组合物按照实施例1方法制备的药物。
Anti‐CD31antibody：免疫组化EliVisionTM plus试剂盒(鼠/兔)(货号： KIT‐9901)，DAB染色液(放大聚合物法)(货号：KIT‐0016)(免疫组化相关试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司)。定量反转录试剂(ReverTra Ace qPCR Kit,TOYOBO)；PCR试剂(ABIPower SYBR Green PCR Master Mix，ABI， USA)。
1.2实验动物健康Wistar雄性大鼠80只，体重220‐250g，SPF级别，购自成都达硕实验动物有限公司，许可证号：SCXK(川)2015‐030
1.3仪器Leica EG1150C分体式石蜡包埋机、石蜡切片机，Leica RM2235、脱水机：Leica ASP300S、自动染色机：Leica AutoStainer XL、显微镜：奥林巴斯OlympusBX53.
2实验方法
2.1分组及造模
采用随机、对照动物实验研究，80只健康Wistar雄性大鼠适应性饲养 5‐7天，采用随机数字表法将大鼠随机分为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组，每组16只。模型组、高剂量组、空白组、中剂量组、低剂量组大鼠均给与内皮素(3mg/kg，注射时间5min)尾静脉注射，空白组注射等体积的生理盐水注射。LPS作用2h后，确定造模成功(已进行相关预实验证明：LPS作用2h后，进行肺组织病理切片确定造模成功，且中药干预后的肺损伤程度以48时以后最为明显)。
2.2给药方法
据徐叔云教授《药理实验方法学》公式计算，计算出大鼠与人等效剂量。空白组、模型组立即给予灌服等体积生理盐水，高剂量组中药复苏合剂灌胃剂量为10.5g/kg，中剂量组剂量为7.875g/kg，低剂量组剂量为2.625g/kg。中药灌胃后的24h和48h，每个时间点每个实验组取8只老鼠进行后续的样品采集和相关检测试验。
3实验结果
3.1大鼠存活情况
实验结果如表1所示：
表1 各种大鼠存活情况
组别 存活只数(只) 存活率
空白组 18 100％
模型组 3 16.7％
低剂量组 8 44.4％
中剂量组 12 66.7％
高剂量组 15 83.3％
由表1可知，48小时后大鼠存活情况空白组存活率高达100％，低剂量组、中剂量组、高剂量组存活率分别为44.4％、66.7％、83.3％，模型组存活率仅16.7％，见表1。空白组与高剂量组比较χ2＝25.714，P＝0.000，差异具有显著性差异；模型组与低剂量组比较χ2＝3.273，P＝0.070，差异不具有显著性差异；模型组与中剂量组比较χ2＝9.257，P＝0.002，差异具有显著性差异；模型组与高剂量组比较χ2＝16，P＝0.000，差异具有显著性差异。
3.2肺组织病理切片
实验结果如表2所示：
表2 肺损伤评定
组别 24h肺损伤评分(分) 48h肺损伤评分(分)
空白组 2.89±4.23 3.00±0.28
模型组 7.83±0.60 7.33±0.88
低剂量组 6.00±0.44 5.25±0.25
中剂量组 4.63±0.50 3.5±0.50
高剂量组 3.37±0.32 3.25±0.25
由表2可知，根据肺组织病理表现出的渗出、炎症、出血、肺间隔断裂情况，进行了肺损伤评定，各组肺损伤评定情况见表2。24小时空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组病理切片表现分别如图1所示。48小时空白组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组病理切片表现分别如图 2所示。
24小时：模型组与空白组比较P<0.01；模型组与高剂量组比较P<0.01；模型组与中剂量组比较P<0.01；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P>0.05；高剂量与低剂量组比较P<0.01；中剂量组与低剂量组比较P>0.05；
48小时：模型组与空白组比较P<0.01；模型组与高剂量组比较P<0.01；模型组与中剂量组比较P<0.05；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P>0.05；高剂量与低剂量组比较P<0.01；中剂量组与低剂量组比较P<0.05。
3.3肺血管内皮细胞形态
实验结果如表3所示：
表3 平均微血管
组别 24h平均微血管(条) 48h平均微血管(条)
空白组 8.1±0.3 7.9±0.3
模型组 3.0±0.3 0.0±0.0
低剂量组 7.2±0.5 5.8±0.4
中剂量组 5.9±0.3 5.0±0.4
高剂量组 7.5±0.4 9.0±0.4
由表3可知，空白组24小时及48小时平均微血管7‐9条/视野；模型组 24h平均微血管2‐4条/视野，48h血管破坏较重，抗原漏出较多，着色较杂，未查见微血管；高剂量组24h平均微血管6‐9条/视野，48h平均微血管8‐10 条/视野；中剂量组24h平均微血管5‐7条/视野，48h平均微血管4‐6条/视野；低剂量组24h平均微血管6‐9条/视野，48h平均微血管5‐7条/视野。如图3、图4所示。
24小时：模型组与空白组比较P<0.01；模型组与高剂量组比较P<0.01；模型组与中剂量组比较P<0.01；模型组与低剂量组比较P<0.01；高剂量组与中剂量组比较P<0.01；高剂量与低剂量组比较P>0.05；中剂量组与低剂量组比较P>0.05；
48小时：模型组与空白组比较P<0.01；模型组与高剂量组比较P<0.05；模型组与中剂量组比较P<0.01；模型组与低剂量组比较P<0.01；高剂量组与中剂量组比较P<0.01；高剂量与低剂量组比较P<0.01；中剂量组与低剂量组比较P>0.05。
3.4乙酰肝素酶mRNA变化
实验结果如表4所示：
表4 乙酰肝素酶mRNA
组别 24h乙酰肝素酶mRNA 48h乙酰肝素酶mRNA
空白组 0.0060 0.0062
模型组 0.0046 0.0049
低剂量组 0.0055 0.0071
中剂量组 0.0041 0.0046
高剂量组 0.0045 0.0061
由表4可知，24小时：模型组与空白组比较P<0.05；模型组与高剂量组比较P>0.05；模型组与中剂量组比较P>0.05；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P>0.05；高剂量与低剂量组比较P>0.05；中剂量组与低剂量组比较P<0.05；
48小时：模型组与空白组比较P<0.05；模型组与高剂量组比较P<0.05；模型组与中剂量组比较P>0.05；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P<0.05；高剂量与低剂量组比较P>0.05；中剂量组与低剂量组比较P<0.05。
3.5乙酰肝素酶蛋白水平变化
实验结果如表5所示：
表5 乙酰肝素酶蛋白水平变化
组别 24h乙酰肝素酶蛋白 48h乙酰肝素酶蛋白
空白组 124.58±5.3 114.00±10.95
模型组 167.89±14.1 160.03±13.5
低剂量组 147.40±20.6 148.0±11.4
中剂量组 150.41±28.1 150.88±17.61
高剂量组 156.91±30.8 150.88±17.67
24小时：模型组与空白组比较P<0.05；模型组与高剂量组比较P<0.05；模型组与中剂量组比较P<0.05；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P>0.05；高剂量与低剂量组比较P<0.05；中剂量组与低剂量组比较P>0.05；
48小时：模型组与空白组比较P<0.05；模型组与高剂量组比较P<0.05；模型组与中剂量组比较P<0.05；模型组与低剂量组比较P<0.05；高剂量组与中剂量组比较P>0.05；高剂量与低剂量组比较P>0.05；中剂量组与低剂量组比较P>0.05。
综上，本发明食品、保健品或药物组合物可以通过降低乙酰肝素酶的表达，从而抑制乙酰肝素酶活性可以调控血管内皮表面多糖蛋白复合物的降解，降低大鼠血管通透性，改善肺损伤，促进肺内皮细胞恢复，从而能提高脓毒症致急性呼吸窘迫综合征大鼠的存活率，有效治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征。
本发明提供的组合物配方精当，能显著提高脓毒症致急性呼吸窘迫综合征患者的存活率，有效治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征，具有良好的市场应用前景。

Claims (8)

1.一种食品、保健品或药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：制附子24～36份、生牡蛎24～36份、干姜12～18份、麻黄12～18份、炙甘草8～12份。
2.根据权利要求1所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：制附子30份、生牡蛎30份、干姜15份、麻黄15份、炙甘草10份。
3.根据权利要求1～2任意一项所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述的制附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根经过盐渍、水漂、煮、炒等法炮制后的加工品；所述生牡蛎为牡蛎科动物长牡蛎(Ostrea glgasThunberg)、近江牡蛎(Ostrea rivularis Gould)或大连湾牡蛎(Ostrca talienwhanensis Crosse)的贝壳生用品。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述组合物是以制附子、生牡蛎、干姜、麻黄和炙甘草的原药材、水提物或者有机溶剂提取物为有效成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
5.根据权利要求4所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述制剂为口服制剂。
6.根据权利要求5所述的食品、保健品或药物组合物，其特征在于：所述制剂为散剂、膏剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液或者滴丸。
7.一种制备权利要求1～6任意一项所述的食品、保健品或药物组合物的方法，其特征在于：它包含如下步骤：
(1)称取原料药；
(2)原料药直接打粉，或将原料药加水煎煮或有机溶剂提取，提取液浓缩，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。
8.权利要求1～6任意一项所述的组合物在制备治疗脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的食品、保健品或药物中的用途。
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