CN107312721B - 一种双孢蘑菇母种培养基及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种双孢蘑菇母种培养基，该培养基的组成成分及其质量百分比为：纤维素0.1％～0.5％，可溶性淀粉0.4％～3.8％，马铃薯全粉0.5％～3％，蛋白胨0.1％～0.5％，琼脂粉1.5％，溶剂为水。双孢蘑菇菌种在本发明培养基上发菌速度快，长势旺；其次，本发明培养基配制简单，不需要煮土豆或调pH值；另外加入纤维素可以诱导分泌纤维素酶。

Description

一种双孢蘑菇母种培养基及其应用
技术领域
本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种双孢蘑菇母种培养基，还涉及该培养基的制备方法。
背景技术
双孢蘑菇(Agaricus bisporus)又称白蘑菇、蘑菇或洋蘑菇等，属于蘑菇属(Agaricus)，双孢蘑菇颜色洁白，菌褶粉红，色美味鲜，质地脆嫩，营养丰富，是世界性栽培和消费的菇类，有“世界菇”之称。
目前，双孢蘑菇的母种培养基主要是PDA培养基(见GB19171-2003双孢蘑菇菌种)和MMP培养基(其组成成分及其比例为：麦芽提取物1％，真菌蛋白胨0.5％，KMOPS 10mM，pH7.0,琼脂粉1.5％)。PDA培养基是食用菌通用的培养基，配制比较简单，但是双孢蘑菇在PDA培养基上生长较慢，长势较差。MMP培养基是欧美人发明的双孢蘑菇培养基，双孢蘑菇在MMP比PDA上生长快些，但是MMP培养基配制麻烦，真菌蛋白胨和KMOPS较难购买，并需要调节pH值。因此，绝大多数国内的双孢蘑菇生产使用PDA培养基制作母种，很少用MMP培养基。
发明内容
本发明目的在于提供一种双孢蘑菇母种培养基。
本发明另一目的在于提供上述母种培养基的制备方法。
本发明第三目的在于提供上述母种培养基的用途。
本发明第四目的在于提供利用上述母种培养基制备双孢蘑菇母种的方法。
为实现上述目的，本发明采取如下技术方案：
一种双孢蘑菇母种培养基，其组成成分及其质量百分比为：纤维素0.1％～0.5％，可溶性淀粉0.4％～3.8％，马铃薯全粉0.5％～3％，蛋白胨0.1％～0.5％，琼脂粉1.5％，溶剂为水。
上述双孢蘑菇母种培养基，所述纤维素的质量百分比优选为0.2％。
上述双孢蘑菇母种培养基，所述可溶性淀粉的质量百分比优选为2.7％。
上述双孢蘑菇母种培养基，所述马铃薯全粉的质量百分比优选为0.5％。
上述双孢蘑菇母种培养基，所述蛋白胨的质量百分比优选为0.2％。
上述双孢蘑菇母种培养基的制备方法，包括按照比例将纤维素、可溶性淀粉、马铃薯全粉、蛋白胨和琼脂粉加入到少量水中，摇匀，再按比例补齐水，封口膜封口，在121℃下灭菌30min，制得双孢蘑菇母种培养基。
上述双孢蘑菇母种培养基中的纤维素、可溶性淀粉、马铃薯全粉、蛋白胨和琼脂粉皆可于市场上购买。
上述双孢蘑菇母种培养基在制备双孢蘑菇母种上的应用。
利用上述双孢蘑菇母种培养基制备双孢蘑菇母种的方法，包括在无菌条件下将已活化的双孢蘑菇平板菌种用直径5mm打孔器打成菌块，将菌块转接到上述母种培养基的中央，用封口膜封上培养皿边缘，在23℃-25℃下避光培养15-18天。
与现有技术相比，本发明具有的优点和有益效果：(1)在本发明母种培养基上，双孢蘑菇菌种发菌速度快，长势旺。(2)本发明母种培养基配制简单，不需要煮土豆(如PDA培养基)或调pH值(如MMP培养基)。(3)双孢蘑菇的最适碳源是纤维素和淀粉，本发明母种培养基以淀粉为主要碳源，以营养丰富的马铃薯全粉和蛋白胨为氮源，马铃薯全粉又可以补充矿物质和维生素，另外加入纤维素可以诱导分泌纤维素酶。
附图说明：
图1.双孢蘑菇W192在Difco PDA培养基上培养15天的菌落照片。
图2.双孢蘑菇W192在MMP培养基上培养15天的菌落照片。
图3.双孢蘑菇W192在本发明培养基1上培养15天的菌落照片。
图4.双孢蘑菇W192在本发明培养基2上培养15天的菌落照片。
图5.双孢蘑菇W192在本发明培养基3上培养15天的菌落照片。
图6.双孢蘑菇W192在本发明培养基4上培养15天的菌落照片。
图7.双孢蘑菇W192在本发明培养基5上培养15天的菌落照片。
图8.双孢蘑菇W192在本发明培养基6上培养15天的菌落照片。
图9.双孢蘑菇W192在本发明培养基7上培养15天的菌落照片。
图10.双孢蘑菇W192在本发明培养基8上培养15天的菌落照片。
具体实施方式：
以下通过实施例对本发明作进一步的解释和说明，但是对本发明的保护范围不构成任何限制。
实施例1双孢蘑菇在本发明母种培养基上菌丝生长速度对比试验
(一)试验菌种：本试验所用的双孢蘑菇品种为W192，是福建省农业科学院食用菌研究所近几年培育的蘑菇新品种；对照双孢蘑菇品种为As2796(全国栽培范围最大的品种，约占栽培量的80％)。
(二)本发明双孢蘑菇母种培养基的制备
(1)取500ml三角瓶8个，按配制400ml培养基计，按照重量百分比(见表1)称取纤维素、可溶性淀粉、马铃薯全粉、蛋白胨、琼脂粉和水。其中可溶性淀粉、蛋白胨、琼脂粉采用分析纯试剂，水为蒸馏水，纤维素购自复纳新材料科技(上海)有限公司。将各组分倒入三角瓶中，加入少量水摇匀，加水补齐至400ml，再摇匀，硅胶塞封口。
表1本发明双孢蘑菇母种培养基的组成成分及其比例
Figure BDA0001365390660000031
(2)对照培养基：
Difco PDA培养基，每1000ml水加入39g培养基粉。
MMP培养基：10g麦芽提取物(malt extract),5g真菌蛋白胨(mycologicalpeptone),10mM KMOPS，pH7.0,15g琼脂粉，水1000ml。
按以上配方，取2个500ml三角瓶，各配制400ml培养基，摇匀，硅胶塞封口。
(3)将以上10瓶培养基，在121℃灭菌30min，制得培养基。在无菌条件下，将以上培养基趁热摇晃均匀，倒入适量(约20ml)培养基到直径9cm培养皿里，凝固后待用。
(三)试验方法
在无菌条件下，将已活化的平板菌种双孢蘑菇W192(来自福建省农业科学院食用菌研究所)用直径5mm打孔器打成菌块，将菌块转接到步骤(一)中制备的母种培养基中央，用封口膜封上培养皿边缘，在23℃～25℃下避光培养15天，每个处理5个重复，然后测量菌落直径和观察菌丝长势。
表2双孢蘑菇W192在本发明培养基上培养15天菌落直径(cm)
重复1 重复2 重复3 重复4 重复5 平均值
PDA 5.5 5.3 5.3 5.0 5.0 5.22
MMP 5.5 5.6 5.6 5.7 5.6 5.60
培养基1 6.5 6.5 6.7 6.8 6.63
培养基2 5.8 5.8 5.6 5.7 5.8 5.74
培养基3 5.3 5.2 5.3 5.3 5.28
培养基4 7.2 7.2 6.6 6.5 6.88
培养基5 7.6 7.5 7.3 7.3 6.9 7.32
培养基6 7.1 7.1 7.2 7.2 7.15
培养基7 5.8 5.8 5.5 5.6 5.6 5.66
培养基8 6.7 6.4 6.7 6.7 6.63
注明：重复5上数据缺失的，为菌种污染。
表3双孢蘑菇W192在本发明母种培养基与对照培养基上长速增降比例
平均值 与PDA比较 与MMP比较
培养基1 6.63 26.9％ 18.3％
培养基2 5.74 10.0％ 2.5％
培养基3 5.28 1.1％ -5.8％
培养基4 6.88 31.7％ 22.8％
培养基5 7.32 40.2％ 30.7％
培养基6 7.15 37.0％ 27.7％
培养基7 5.66 8.4％ 1.1％
培养基8 6.63 26.9％ 18.3％
PDA 5.22 0 -6.8％
MMP 5.60 7.3％ 0
结果(见图1-图10)双孢蘑菇W192的菌落直径(见表2)从大到小的顺序为：培养基5>培养基6>培养基4>培养基1>培养基8>培养基2>培养基7>MMP>培养基3>PDA。其中双孢蘑菇W192在培养基5上的菌落直径比PDA培养基上增加了40.2％，比MMP增加了30.7％，即在本发明母种培养基5上的长速和长势明显优于目前最常用的MMP和PDA培养基(见表3)。
双孢蘑菇W192在Difco PDA上生长较弱(见图1)，在营养最丰富的培养基3上生长最差(见图5)。总的来说，在培养基5(见图7)上最佳，生长最快，菌丝最旺，其次是培养基6(见图8)。
上述试验结果说明双孢蘑菇菌种在本发明母种培养基上生长速度快、长势强，明显优于目前常用的MMP和PDA培养基。

Claims (3)

1.一种双孢蘑菇母种培养基，其特征在于其组成成分及其质量百分比为：纤维素0.1％～0.5％，可溶性淀粉0.4％～3.8％，马铃薯全粉0.5％～3％，蛋白胨0.1％～0.5％，琼脂粉1.5％，溶剂为水。
2.根据权利要求1所述的双孢蘑菇母种培养基，其特征在于其组成成分及其质量百分比为：纤维素0.2％，可溶性淀粉2.7％，马铃薯全粉0.5％，蛋白胨0.2％，琼脂粉1.5％，溶剂为水。
3.权利要求1所述的双孢蘑菇母种培养基在制备双孢蘑菇母种上的应用。
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