CN101622939B - 桦褐孔菌深层培养方法 - Google Patents

桦褐孔菌深层培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101622939B
CN101622939B CN2009100700262A CN200910070026A CN101622939B CN 101622939 B CN101622939 B CN 101622939B CN 2009100700262 A CN2009100700262 A CN 2009100700262A CN 200910070026 A CN200910070026 A CN 200910070026A CN 101622939 B CN101622939 B CN 101622939B
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
medium
fermentation
inonotus obliquus
seed
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2009100700262A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101622939A (zh
Inventor
张泽生
王浩
史佳宁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University of Science and Technology
Original Assignee
Tianjin University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University of Science and Technology filed Critical Tianjin University of Science and Technology
Priority to CN2009100700262A priority Critical patent/CN101622939B/zh
Publication of CN101622939A publication Critical patent/CN101622939A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101622939B publication Critical patent/CN101622939B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种桦褐孔菌深层培养方法，包括：(1)斜面培养；(2)一级、二级、三级种子培养；(3)深层发酵培养，其中深层发酵培养的条件如下：①发酵培养基组成：玉米糖化液0.1-10％、可溶性淀粉0.1-10％、酵母浸粉0.1-5％、蛋白胨0.1-5％、KH2PO4 0.01-1％，MgSO4 0.01-1％；②发酵周期为3-15d；③培养温度为20-35℃；④培养基初始pH为4-8；⑤摇床转速为50-200r/min；⑥接种量为5-20％；⑦装液量为1/10-4/5。本发明运用发酵工程技术生产桦褐孔菌，通过一级、二级、三级种子培养以及深层发酵得到大量繁殖的菌株，弥补了自然菌产量不足的缺陷，具有显著地经济意义，同时发酵在无菌条件下进行，有效避免了菌种被污染，为制备桦褐孔菌提供有利条件。

Description

桦褐孔菌深层培养方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，尤其是一种桦褐孔菌深层培养方法。
背景技术
桦褐孔菌Inonotus obliquus(Fr.)Pilat是十分珍稀而又名贵的药用真菌，又名白桦茸、桦癌褐孔菌、斜生纤孔，在国外也称Inonotus obliquus，Fuscoporia oblique，Chaga，Blackbirchtinder(tuchwood)，birch mushroom，“カバノアナタケ”等，在分类学上属担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、非褶菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科(Polyporaceae)、褐卧孔菌属(Poriahypobrunnea Petch)。
桦褐孔菌(Inonotus obliquus(Fr.)Pilat)野生品种只有在活的桦树上生长10-15年才具有很高的药用价值，大致分布于北半球北纬45°～50°的地区，如北美、芬兰、波兰、俄罗斯、中国(黑龙江、吉林省长白山地区)以及日本(北海道)等国家。桦褐孔菌在俄罗斯、北欧、日本、美国和韩国被广泛用来治疗恶性肿瘤、糖尿病、心血管疾病、肝病和艾滋病。
由于野生桦褐孔菌资源十分有限，远远满足不了日益增长的市场需求；而且，固体栽培存在周期长、污染机率高、易受周围环境限制等缺点。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种栽培周期短、产量高、生产成本低的桦褐孔菌深层培养方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种桦褐孔菌深层培养方法，包括：(1)斜面培养；(2)一级、二级、三级种子培养；(3)深层发酵培养，其中深层发酵培养的条件如下：
①发酵培养基组成：玉米糖化液0.1-10％、可溶性淀粉0.1-10％、酵母浸粉0.1-5％、蛋白胨0.1-5％、KH2PO4 0.01-1％，MgSO4 0.01-1％；
②发酵周期为3-15d；
③培养温度为20-35℃；
④培养基初始pH为4-8；
⑤摇床转速为50-200r/min；
⑥接种量为5-20％；
⑦装液量为1/10-4/5。
而且，所述斜面培养的培养基为PDA固体培养基。
而且，所述一级、二级、三级种子培养基的构成均为：葡萄糖2％、蛋白胨0.4％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.05％，pH自然，各物质单位均为：m/V。
本发明的优点和有益效果为：
1、本发明运用发酵工程技术生产桦褐孔菌，通过一级、二级、三级种子培养以及深层发酵得到大量繁殖的菌株，弥补了自然菌产量不足的缺陷，具有显著地经济意义，同时发酵在无菌条件下进行，有效避免了菌种被污染，为制备桦褐孔菌提供有利条件。
2、本发明确定了桦褐孔菌深层培养的条件，为进一步确定桦褐孔菌产胞外多糖的最佳条件提供基础，为研究和开发桦褐孔菌资源，提供充足的药用或医用原材料具有很大的现实意义。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
实施例1：
本实施例中，以桦褐孔菌的最佳培养条件为主：
一种桦褐孔菌深层培养方法，其培养的步骤是：
(1)斜面培养：取斜面种子于PDA固体培养基上28℃恒温培养箱培养6d。
(2)一级、二级、三级种子培养：将斜面培养基上菌丝刮下接入一级培养基中，静置4h，然后置于140r/min的恒温调速摇瓶柜中振荡培养7d，接入二级培养基中，同样条件培养4d，最后接入三级培养基中，同样条件培养1d，即可用于深层发酵。
其中：一级、二级、三级种子培养基均采用通用的药用真菌培养基，成分为(m/V)：葡萄糖2％、蛋白胨0.4％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.05％，pH自然(一般为5.5)的液体培养基。
(3)深层发酵培养，条件如下：
培养基为：玉米糖化液2.76％、可溶性淀粉1.9％、酵母浸粉0.75％、蛋白胨0.95％、KH2PO4 0.2％，MgSO4 0.05％；菌丝体生物量最佳积累时间为6d；最佳培养温度为28℃；培养基最佳初始pH为5；确定摇床的最佳转速为130r/min；接种量为10％；装液量为每个250mL的三角瓶装70mL培养基。
实施例2：
本实施例中，以桦褐孔菌胞外多糖的最佳培养条件为主：
一种桦褐孔菌深层培养方法，其培养的步骤是：
(1)斜面培养：取斜面种子于PDA固体培养基上28℃恒温培养箱培养6d。
(2)一级、二级、三级种子培养：将斜面培养基上菌丝刮下接入一级培养基中，静置4h，然后置于140r/min的恒温调速摇瓶柜中振荡培养7d，接入二级培养基中，同样条件培养4d，最后接入三级培养基中，同样条件培养1d，即可用于发酵。
其中：一级、二级、三级种子培养基均采用通用的药用真菌培养基，成分为(m/V)：葡萄糖2％、蛋白胨0.4％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.05％，pH(pH 5.5)自然的液体培养基。
(3)深层发酵条件，条件如下：
培养基：玉米糖化液2.1％、可溶性淀粉2.23％、酵母浸粉0.51％、蛋白胨0.41％、KH2PO4 0.2％，MgSO4 0.05％；胞外多糖最佳积累时间为7d；最佳培养温度为28℃；培养基最佳初始pH为6；确定摇床的最佳转速为130r/min；接种量为10％；装液量为每个250mL的三角瓶装70mL培养基。

Claims (1)

1.一种桦褐孔菌深层培养方法，包括：(1)斜面培养；(2)一级、二级、三级种子培养；(3)深层发酵培养，其特征在于：深层发酵培养的条件如下：
①发酵培养基组成：玉米糖化液0.1-10％、可溶性淀粉0.1-10％、酵母浸粉0.1-5％、蛋白胨0.1-5％、KH2PO4 0.01-1％，MgSO4 0.01-1％；
②发酵周期为3-15d；
③培养温度为20-35℃；
④培养基初始pH为4-8；
⑤摇床转速为50-200r/min
⑥接种量为5-20％；
⑦装液量为1/10-4/5；
其中：所述(1)斜面培养：取斜面种子于PDA固体培养基上28℃恒温培养箱培养6d；
所述(2)一级、二级、三级种子培养：将斜面培养的PDA固体培养基上菌丝刮下接入一级种子培养基中，静置4h，然后置于140r/min的恒温调速摇瓶柜中振荡培养7d，接入二级种子培养基中，同样条件培养4d，最后接入三级种子培养基中，同样条件培养1d，即可用于深层发酵培养，一级、二级、三级种子培养基均采用通用的药用真菌培养基，成分为m/V：葡萄糖2％、蛋白胨0.4％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.05％，pH自然的液体培养基。
CN2009100700262A 2009-08-03 2009-08-03 桦褐孔菌深层培养方法 Expired - Fee Related CN101622939B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100700262A CN101622939B (zh) 2009-08-03 2009-08-03 桦褐孔菌深层培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100700262A CN101622939B (zh) 2009-08-03 2009-08-03 桦褐孔菌深层培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101622939A CN101622939A (zh) 2010-01-13
CN101622939B true CN101622939B (zh) 2011-04-20

Family

ID=41519052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009100700262A Expired - Fee Related CN101622939B (zh) 2009-08-03 2009-08-03 桦褐孔菌深层培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101622939B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103146775A (zh) * 2011-12-07 2013-06-12 徐向群 一种表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯液体深层发酵制备的方法
TWI631214B (zh) * 2017-04-27 2018-08-01 天明製藥股份有限公司 用以提高白樺茸中三萜類化合物含量之培養方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102674929B (zh) * 2012-05-12 2014-04-16 福建华尔康生物科技有限公司 一种桦褐孔菌的深层发酵培养基及其深层发酵方法
CN109220537B (zh) * 2017-04-27 2020-11-20 天明制药股份有限公司 用以提高白桦茸中三萜类化合物含量的培养方法
RU2717974C1 (ru) * 2019-07-31 2020-03-27 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский национальный исследовательский технологический университет" (ФГБОУ ВО "КНИТУ") Питательная среда для выращивания гриба чага
CN112208893A (zh) * 2020-10-23 2021-01-12 黑龙江工业学院 一种采用桦褐孔菌为抗菌剂的防潮纸箱

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101368158A (zh) * 2008-10-08 2009-02-18 马宏达 桦褐孔菌深层发酵培养基的制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101368158A (zh) * 2008-10-08 2009-02-18 马宏达 桦褐孔菌深层发酵培养基的制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
冀宏等.野生桦褐孔菌菌株JS-1驯化栽培研究.《北方园艺》.2009,(第2期),第229-232页. *
王振河等.桦褐孔菌液体深层培养研究.《菌物学报》.2006,第25卷(第3期),第461-467页. *
申进文等.桦褐孔菌液体深层发酵条件优化研究.《河南农业科学》.2007,(第8期),第88-92页. *
雷萍等.桦褐孔菌深层发酵培养调节的优化.《西北大学学报(自然科学版)》.2008,第38卷(第6期),第967-970页. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103146775A (zh) * 2011-12-07 2013-06-12 徐向群 一种表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯液体深层发酵制备的方法
TWI631214B (zh) * 2017-04-27 2018-08-01 天明製藥股份有限公司 用以提高白樺茸中三萜類化合物含量之培養方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101622939A (zh) 2010-01-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101622939B (zh) 桦褐孔菌深层培养方法
CN105779299B (zh) 一株产腺苷及甘露醇类物质的蝙蝠蛾拟青霉菌株及应用
CN103483040B (zh) 冬虫夏草规模化液体深层发酵用培养基及其发酵生产方法
CN100368519C (zh) 黑曲霉脂肪酶及其用途
CN104630166A (zh) 微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法
CN102559802B (zh) 一种培养基发酵高产银耳多糖的方法
CN104099385A (zh) 一种深层液态发酵生产桦褐孔菌胞外多糖的方法
CN104630167A (zh) 海洋微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法
CN102286600B (zh) 一种利用木薯渣同时发酵生产乙醇和氢气的方法
CN102399702B (zh) 一种黑曲霉及其应用及发酵制备柠檬酸的方法
CN102093989B (zh) 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法
CN102533570A (zh) 一种黑曲霉及其应用及发酵制备柠檬酸的方法
CN105441334B (zh) 产灰树花多糖的菌株及其应用
CN104087632A (zh) 一种深层液态发酵生产桑黄胞外多糖的方法
CN101790937A (zh) 大红菇菌株的筛选及菌种制备方法
CN101638674B (zh) 一种利用蔗糖水解物发酵法生产柠檬酸的方法
CN104250618B (zh) 一种高产糖化酶、α‑淀粉酶和酸性蛋白酶的亮白曲霉及其应用
CN101570745A (zh) 乳糖酶的制备工艺
CN106035985A (zh) 一种混菌液态发酵黄酒加工废弃物生产单细胞蛋白的方法
CN102851328A (zh) 一种利用固定化黑曲霉发酵玉米糖液制备柠檬酸的方法
CN102061279A (zh) 高密度发酵生产沼泽红假单胞菌发酵液的方法
Souza et al. Prospection of Filamentous Fungi and the Production of Amylase by Aspergillus sp. M1. 7.2
CN102787076B (zh) 一株耐冷玫红假裸囊菌及其在制备冷水纤维素酶中的应用
CN101638675A (zh) 一种蔗糖发酵法生产柠檬酸的方法
CN104711208B (zh) 一种具有高的淀粉分解能力的乳酸菌

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract

Assignee: Zhumadian Huazhong Chia Tai Co., Ltd.

Assignor: Tianjin University of Science & Technology

Contract record no.: 2012410000046

Denomination of invention: Inonotus obliquus deep culture method

Granted publication date: 20110420

License type: Exclusive License

Open date: 20100113

Record date: 20120416

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20110420

Termination date: 20170803

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee