CN107290473A - 一种山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药鉴别领域，尤其涉及山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，采用随行药材的水溶性成分直接对照，对其配方颗粒进行专属性薄层鉴别；山药、麸炒山药配方颗粒差异性鉴别，即对山药、麸炒山药配方颗粒采用特定浓度的乙醇提取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒中以皂苷和氨基酸为代表的活性成分，以特定种类、比例的展开剂进行薄层展开，利用色谱差异可以区别山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒。

Description

一种山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法
技术领域
本发明属于中药鉴别领域，尤其涉及山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法。
背景技术
山药又称薯蓣、土薯、山薯蓣、怀山药、淮山、白山药，是《中华本草》收载的草药，药用来源为薯蓣科植物山药干燥根茎。山药具有滋养强壮，助消化，敛虚汗，止泻之功效，主治脾虚腹泻、肺虚咳嗽、糖尿病消渴、小便短频、遗精、妇女带下及消化不良的慢性肠炎。麸炒山药薯为山药霜降后采挖，切厚片，麸炒，可减少药物的刺激性，增强疗效。麸炒山药与山药都具有淀粉等化学成分、皂苷、氨基酸等化学成分，在药理作用上都具有很多相似性。
随着中国中药产业的不断发展，中药各种剂型也相应得到广泛推广，中药药品质量保证问题也愈来愈受到药品生产企业的重视，中药鉴别无疑是保证药品质量的一项重要手段，在显微鉴别、红外鉴别、指纹图谱鉴别等多种中药鉴别技术当中，薄层鉴别作为其中一种中药鉴别手段，具有高效、快速、准确的优点。
山药和麸炒山药从外观上易于分辨，然而山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒从外观特征上难于分辨。目前，还没有山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒鉴别方法。本发明弥补了山药配方颗粒鉴别技术领域的一项空缺，可作为山药、麸炒山药配方颗粒的专属鉴别方法。
发明内容
本发明提供了一种山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，包括对山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒中所含皂苷类成分和氨基酸类成分进行鉴别的方法：
一、对该产品所含皂苷类成分进行显色，包括以下步骤：
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【(10-20):(6-12):(1-3)】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰,麸炒山药薄层色谱在Rf为0.8-0.9处比山药配方颗粒薄层色谱相应位置多出一个斑点。
二、对该产品所含氨基酸类成分进行显色，包括以下步骤：
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【(20-30):(10-20):(6-8)】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰,麸炒山药薄层色谱在(b2)处比山药配方颗粒薄层色谱相应位置(b1)处少一个斑点，麸炒山(a2)位置显黄色斑点，山药配方颗粒(a1)位置显紫红色斑点。
本发明还针对所使用的山药配方颗粒提供了两种薄层鉴别方法，包括对山药配方颗粒中所含皂苷类成分和氨基酸类成分进行鉴别的方法。
一、对该产品所含皂苷类成分进行薄层鉴别，包括以下步骤：
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加50-95％乙醇20ml超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【(10-20):(6-12):(1-3)】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰,山药药材薄层色谱和山药配方颗粒薄层色谱在Rf为0.2-0.4的对应位置具有一个相同的斑点，山药皂苷薄层色谱相应位置无所述斑点。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明采用特定浓度的乙醇提取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒中以皂苷和氨基酸为代表的活性成分，以特定种类、比例的展开剂进行薄层展开，利用色谱差异可以区别山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，弥补了山药配方颗粒鉴别技术领域的一项空缺，可作为山药、麸炒山药配方颗粒的专属鉴别方法；
(2)本发明还针对所使用山药配方颗粒的真伪提供了薄层鉴别方法，同样以山药对照药材和山药配方颗粒中皂苷为代表的活性成分为突破口，以特定比例的展开剂进行薄层展开，利用色谱差异可以有效的鉴别山药配方颗粒的真伪，即经过标准的配方颗粒生产工艺制备而成，而不是采用山药皂苷提取物制粒后以次充好；
(3)本发明准确、快速，重现性好，为将来在山药配方颗粒，麸炒山药配方颗粒生产以及质量控制领域奠定了坚实的基础。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明：
图1：实施例1中山药、山药配方颗粒薄层色谱图；
图2：实施例1中山药配方颗粒、麸炒山药配方颗粒薄层色谱图(对该产品所含皂苷类成分进行薄层鉴别)；
图3：实施例1中山药配方颗粒、麸炒山药配方颗粒薄层色谱图(对该产品所含氨基酸类成分进行薄层鉴别)。
具体实施方式
下面结合具体实施和附图对本发明作进一步的说明：
实施例1
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加95％乙醇20ml超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液、山药皂苷溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【20:9:2】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰，山药药材薄层色谱和山药配方颗粒薄层色谱在Rf为0.2-0.4的对应位置具有一个相同的斑点，山药皂苷薄层色谱相应位置无所述斑点。
说明：图1中1、2、3分别代表山药皂苷溶液、山药药材、山药配方颗粒。
实施例2
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加80％乙醇20ml超声20分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加80％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【26:14:8】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例3
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加70％乙醇20ml超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【18:12:2】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例4
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加50％乙醇20ml超声20分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加80％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【24:14:8】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例5
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加60％乙醇20ml超声20分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加80％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【24:14:8】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例6
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【(10-20):(6-12):(1-3)】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例7
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加85％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【18:8:2】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例8
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加75％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【20:12:1】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例9
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【20:6:2】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例10
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加60％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【10:9:2】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例11
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水【14:7:3】在2～10℃下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例12
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【20:10:6】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例13
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【30:20:8】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
实施例14
(1)供试品溶液：取山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒，加50-95％乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(2)薄层分析：吸取供试品溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水【25:15:7】为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
本发明通过实施例1中的薄层色谱方法，可以鉴别山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒的差别：
如图1所示，1、2、3分别代表山药皂苷提取物薄层色谱图、山药药材薄层色谱图、山药配方颗粒薄层色谱图。山药皂苷提取物薄层色谱图、山药药材薄层色谱图、山药配方颗粒薄层色谱图相应的位置上显相同颜色的斑点，故山药药材薄层色谱图、山药配方颗粒薄层色谱图均含有山药皂苷。通过实施例1，利用色谱差异可以有效的鉴别山药配方颗粒的真伪，为后期山药配方颗粒、麸炒山药配方颗粒的鉴别做了铺垫。
本发明通过实施例6中的薄层色谱方法，对该产品所含皂苷类成分进行薄层鉴别：
如图2所示，1、2分别代表山药配方颗粒薄层色谱图和麸炒山药配方颗粒薄层色谱图。麸炒山药配方颗粒薄层色谱图相比于山药配方颗粒薄层色谱图在b2处多出一个斑点上，明显不同于山药配方颗粒薄层色谱图，故通过所含皂苷类成分可以鉴别区分山药配方颗粒和麸炒山药配方颗粒。
本发明通过实施例12中的薄层色谱方法，对该产品所含氨基酸类成分进行薄层鉴别：
如图3所示，1、2分别代表山药配方颗粒薄层色谱图和麸炒山药配方颗粒薄层色谱图。色谱图中b1位置山药配方颗粒有明显斑点，而麸炒山药配方颗粒相应位置b2无明显斑点，色谱图中a1、a2位置在色谱图中都有斑点，但是麸炒山a2位置显黄色斑点，山药配方颗粒a1位置显紫红色斑点。
以上实施例并非仅限于本发明的保护范围，所有基于本发明的基本思想而进行的修改或变动都属于本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于：1)对山药配方颗粒、麸炒山药配方颗粒与随行药材中所含皂苷类成分和氨基酸类成分进行薄层色谱比对鉴别；2)山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒，经乙醇与丙酮混合溶液处理后，利用薄层色谱差异进行区分鉴别。
2.根据权利要求1所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对照药材溶液：取山药细粉，加水回流提取1h，过滤，取滤液，蒸干，残渣加50-95％乙醇20ml超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
(2)供试品溶液：取山药配方颗粒2g，加乙醇超声30分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
(3)吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
3.根据权利要求2所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：吸取步骤(1)和步骤(2)所得供试品溶液、对照药材溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，上行展开约8cm，取出，晾干，喷以茚三酮显色，在105℃下加热至斑点显色清晰。
4.根据权利要求2或3所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于：
(1)所述的三氯甲烷-甲醇-水展开剂，其各组分比例为【(10-20):(6-12):(1-3)】；
(2)所述的正丁醇-冰醋酸-水展开剂，其各组分比例为【(20-30):(10-20):(6-8)】。
5.根据权利要求3所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于：所述乙醇为体积分数为50-95％的乙醇。
6.根据权利要求3所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于：所述三氯甲烷-甲醇-水展开剂为在2～10℃下放置分层后的下层溶液。
7.根据权利要求2所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于，以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，喷以10％硫酸乙醇显色后：
(1)山药药材薄层色谱和山药配方颗粒薄层色谱在Rf为0.2-0.4的对应位置具有一个相同的斑点，山药皂苷薄层色谱相应位置无所述斑点；
(2)麸炒山药薄层色谱在Rf为0.8-0.9处比山药配方颗粒薄层色谱相应位置多出一个斑点。
8.根据权利要求3所述山药配方颗粒与麸炒山药配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于：以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，喷以茚三酮显色显色后，麸炒山药薄层色谱在(b2)处比山药配方颗粒薄层色谱相应位置(b1)处少一个斑点，麸炒山(a2)位置显黄色斑点，山药配方颗粒(a1)位置显紫红色斑点。
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