CN107278909A - 一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方 - Google Patents

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张启帆
胡燕花
李沛灵
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

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Abstract

本发明是一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，该配方包括三个培养阶段所使用的培养基：种子萌发培养基、增殖培养基、生根培养基。利用本发明的培养基配方进行碱性蒲公英种苗的生产，具有生产能力强、培养周期短、增殖系数高、种苗抗性强等特点，并且所使用的培养基原料市场上较容易采购、培养基配制简单。

Description

一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方
技术领域
本发明涉及药用植物组织培养领域，尤其涉及一种碱性蒲公英快速繁殖培养基。
背景技术
碱性蒲公英为药用蒲公英的一种，为清热解毒中药，用于治疗乳痈、疔疮、肿瘤、目赤、喉痛等。药理实验表明，蒲公英具有抗菌消炎、利胆保肝和免疫促进作用。近年来的商品药材调查表明，碱地蒲公英为蒲公英的主流品种之一。目前主要采用野外采集供应市场需求，随着人们对碱性蒲公英的不断研究和产品开发，必将会出现供不应求的现象。本发明利用植物组织培养进行碱性蒲公英的种苗培养，公开了三个培养阶段的培养基配方，为蒲公英的研究与种苗的生产提供了技术支持。目前还没有碱性蒲公英组织培养的相关报道。
发明内容
为了达到碱性蒲公英组织培养快速繁殖的目的，本发明提供了一种碱地蒲公英快速繁殖的培养基的配方。
为了达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明是一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.05-0.5mg/L+Ga3 0.2-1.0mg/L +蔗糖10~40g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.2-0.8mg/L+NAA 0.05-0.2mg/L+蔗糖15~40g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.3-1.0mg/L+AC 0.1-0.5g/L+蔗糖20~50g/L。
优选的，所述的一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.1-0.3mg/L+Ga3 0.3-0.8mg/L +蔗糖25-35g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.05-0.15mg/L+蔗糖25~35g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.4-0.6mg/L+AC 0.2-0.4g/L+蔗糖30~45g/L。
优选的，所述的一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.启动培养基：MS+6-BA 0.2mg/L+Ga3 0.5mg/L +蔗糖30g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.5mg/L+AC 0.3g/L+蔗糖40g/L。
优选的：Ga3为赤霉素、6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、NAA为萘乙酸、AC为活性炭。
优选的：三个培养阶段的培养基PH均为6.4-7.0。
优选的：启动培养所使用的外植体为碱地蒲公英种子。
优选的：三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。
本发明的有益效果是：利用本发明的培养基配方进行碱性蒲公英种苗的生产，具有生产能力强、培养周期短、增殖系数高、种苗抗性强等特点，由于采用组织培养的无性繁殖技术，不但能够保持母本的优良性状，而且能够获得脱毒种苗，可以作为原种使用，所使用的培养基原料市场上较容易采购、培养基配制简单。
附图说明
图1是本发明碱地蒲公英种子萌发图。
图2 是本发明碱性蒲公英增殖培养情况图。
图3是本发明碱性蒲公英在组培瓶中生根情况图。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面将结合附图和实施例对本发明作进一步详细描述，该实施例仅用于解释本发明，并不对本发明的保护范围构成限定。
如图1-3所示，本发明是一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，培养基配方包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.05-0.5mg/L+Ga3 0.2-1.0mg/L +蔗糖10~40g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.2-0.8mg/L+NAA 0.05-0.2mg/L+蔗糖15~40g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.3-1.0mg/L+AC 0.1-0.5g/L+蔗糖20~50g/L。
其中：所述Ga3为赤霉素、6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、NAA为萘乙酸、AC为活性炭；
所述三个培养阶段的培养基PH均为5.8~6.0；
所述启动培养所使用的外植体为碱地蒲公英种子；
所述三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。
实施例1
（1）外植体：碱性蒲公英种子
（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的启动培养基中，培养基配方为MS+6-BA 0.2mg/L+Ga3 0.5mg/L +蔗糖30g/L+琼脂5.5 g/L pH 6.4；
（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗1-3厘米去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5 g/L pH6.8；
（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2MS+NAA 0.4-0.6mg/L+AC 0.2-0.4g/L+蔗糖30~45g/L +琼脂5.5g/L，pH 7.0，45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；
（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000LX、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。
实施例2
（1）外植体：碱性蒲公英种子
（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的萌发培养基中，培养基配方为MS+6-BA 0.1mg/L+Ga3 0.3mg/L +蔗糖25g/L +琼脂5.5 g/L pH 6.4；
（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗（1-3厘米）去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L +琼脂5.5 g/L pH 6.8；
（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2MS+NAA 0.4mg/L+AC 0.2g/L+蔗糖30g/L，pH 7.0。45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；
（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000LX、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。
实施例3
（1）外植体：碱性蒲公英种子
（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的萌发培养基中，培养基配方为MS+6-BA 0.3mg/L+Ga3 0.8mg/L +蔗糖35g/L +琼脂5.5 g/L pH 6.4；
（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗（1-3厘米）去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为MS+6-BA 0.6mg/L+NAA 0.15mg/L+蔗糖35g/L +琼脂5.5 g/L pH 6.8；
（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2MS+NAA 0.6mg/L+AC 0.4g/L+蔗糖45g/L，pH 7.0，45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；
（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000LX、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。

Claims (7)

1.一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述培养基配方包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.05-0.5mg/L+Ga3 0.2-1.0mg/L +蔗糖10~40g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.2-0.8mg/L+NAA 0.05-0.2mg/L+蔗糖15~40g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.3-1.0mg/L+AC 0.1-0.5g/L+蔗糖20~50g/L。
2.根据权利要求1所述一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述培养基配方包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.1-0.3mg/L+Ga3 0.3-0.8mg/L +蔗糖25-35g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.05-0.15mg/L+蔗糖25~35g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.4-0.6mg/L+AC 0.2-0.4g/L+蔗糖30~45g/L。
3.根据权利要求1所述一种兰科植物快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述培养基配方包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：
a.萌发培养基：MS+6-BA 0.2mg/L+Ga3 0.5mg/L +蔗糖30g/L
b.增殖培养基：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L
c.生根壮苗培养基：1/2MS+NAA 0.5mg/L+AC 0.3g/L+蔗糖40g/L。
4.根据权利要求1或2或3所述一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述Ga3为赤霉素、6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、NAA为萘乙酸、AC为活性炭。
5.根据权利要求1或2或3所述一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述三个培养阶段的培养基PH均为5.8~6.0。
6.根据权利要求1或2或3所述一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述启动培养所使用的外植体为碱地蒲公英种子。
7.根据权利要求1或2或3所述的一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，其特征在于：所述三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。
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