CN107253979A - 单克隆抗体10b10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用 - Google Patents
单克隆抗体10b10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，是针对7个血清型口蹄疫病毒的一个高度保守的线性表位。抗体检测ELISA结果表明，单克隆抗体10B10识别的表位氨基酸序列及其系列突变体，能够特异性区分A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒的阴阳性血清。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断以及口蹄疫病毒抗体检测中具有应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，本发明还涉及所述口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断或防治中的应用，属于口蹄疫的防治领域。
背景技术
口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouthdisease virus,FMDV)引起的，严重危害偶蹄动物的重要传染病之一，该病可引起幼畜死亡、产奶量下降、肉食减少、肉品下降、动物的生产性能降低等，造成巨大的经济损失。口蹄疫具有极强的传染性，可形成大范围流行，预防和控制口蹄疫的关键是免疫接种以及准确诊断方法的应用。
口蹄疫病毒(FMDV)属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属的成员，为单股正链RNA，其基因组RNA全长约8.5kb。根据免疫原性，口蹄疫病毒有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asial共7个血清型及65个以上的亚型，各血清型之间无交叉免疫保护。目前中国主要流行O、A和Asial型FMD。口蹄疫病毒的抗原结构十分复杂，不同血清型、基因型和分离株的抗原位点和抗原表位都不尽相同，存在广泛的抗原变异。利用单抗逃逸突变株序列分析和交叉中和试验，已鉴定一些不同血清型FMDV的抗原位点，相关的研究主要来自O、A、C和Asia1型FMDV，而某些相对保守的免疫显性表位可诱导机体产生血清型共享型单抗，对于FMDV感染的诊断具有重要价值。因此，研究口蹄疫病毒血清型共享性单克隆抗体以及鉴定所述单克隆抗体所识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，对于口蹄疫的有效防控将具有重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位；
本发明所要解决的第二个技术问题是将单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位应用于口蹄疫的诊断或防治。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
本发明利用灭活并纯化的A型口蹄疫毒株A/JLYS/CHA/2014免疫BALB/c鼠，将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞，经有限稀释法亚克隆，最终筛选获得一株稳定分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系。间接免疫荧光检测结果显示，单抗10B10与A、O、Asia1型毒株均呈阳性反应，表明单抗10B10为FMDV血清型共享性单抗。
本发明将分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系提交专利认可的机构进行保藏，其微生物保藏编号为：CGMCC No.13841；分类命名为：分泌FMDV共享型单克隆抗体的杂交瘤细胞株。保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏时间是2017年4月24日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明进一步公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示；其中，X1-X7为任意一种氨基酸残基。
作为本发明的优选技术方案，X1为亮氨酸L或丙氨酸A，X4为精氨酸R或苯丙氨酸F；更优选的，X1为亮氨酸L，X4为精氨酸R；X2、X3、X5-X7为任意一种氨基酸残基。进一步优选的，X2为亮氨酸L，X3为谷氨酸E，X5为异亮氨酸I，X6为亮氨酸L、蛋氨酸M或缬氨酸V，X7为苏氨酸T；更优选的，X6为亮氨酸L。
本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其氨基酸序列最优选为SEQ ID NO：2所示。
本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，是O型、A型、C型、Asia1型、SAT1型、SAT2型和SAT3型七个血清型口蹄疫病毒的共享性表位。
本发明经Western blot分析表明，单抗10B10识别口蹄疫病毒VP2蛋白的一个线性表位。本发明利用截短表达方法研究表明，单抗10B10所识别的表位基序为8TLLEDRILT16。为进一步分析单抗10B10识别表位中各个氨基酸残基在与单抗结合过程中所起的作用，本发明以单抗10B10识别的表位基序(TLLEDRILT)为基础，合成一系列定点诱变肽并进行Western blot分析，结果表明单抗10B10所识别表位的氨基酸序列中，Thr8和Asp12为关键氨基酸，Leu9和Arg13为重要氨基酸，其余残基的替换对表位活性无影响。
本发明针对FMDV毒株携带该表位肽的氨基酸序列进行比对分析发现，单抗10B10识别的表位在GenBank公示的FMDV毒株的VP2蛋白上是高度保守的，显示它是7个血清型FMDV毒株的共享型表位。该表位氨基酸序列中突变最多的是Leu15，可突变为Met和Val，但其为该表位的非必需氨基酸，突变后对表位活性不会产生影响；而Thr8和Asp12这两个氨基酸残基在所有已发表毒株的该表位氨基酸序列中是绝对保守的。Leu9和Arg13为10B10表位的重要氨基酸，其突变可使表位活性呈现一定程度的下降；序列比对发现，274个毒株VP2蛋白只有3个Leu9至Ala突变和1个Arg13至Phe突变，并且主要局限在非洲型毒株，对该表位活性的影响有限。上述结果表明，单抗10B10识别的表位是针对FMDV 7个血清型毒株的一个高度保守的线性表位。
本发明进一步将单抗10B10识别的FMDV共享表位的氨基酸序列TLLEDRILT进行定点诱变，Leu9突变为Ala(A)，Arg13突变为Phe(F)，Leu15突变为Met(M)或Val(V)，然后将GST融合表达的表位肽及其表位突变肽作为抗原分别包被ELISA板，检测A型、O型和Asia1型FMDV阳性和阴性血清，以检测单抗10B10识别的FMDV表位氨基酸序列及其突变体与A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒抗体的反应能力。结果表明，单抗10B10识别的FMDV表位肽8TLLEDRILT16及其表位突变肽(L15M和L15V)与A型、O型和Asia1型FMDV的阳性血清呈现良好的反应能力，表位突变肽(L9A和R13F)与A型、O型和Asia1型FMDV的阳性血清呈现中等的反应能力；而上述表位肽及表位突变肽与FMDV阴性血清没有反应，能够特异性区分A型、O型和Asia1型FMDV的阴阳性血清。因此，本发明所述单抗10B10识别各血清型FMDV毒株VP2蛋白上的共享性表位8TLLEDRILT16及其系列表位突变肽，在口蹄疫诊断中具有重要的价值和应用潜力，为口蹄疫病毒及其抗体泛检测试剂的开发提供了理论依据和实验材料。
本实验室已有一株针对口蹄疫病毒VP2蛋白上的血清型共享性单抗4B2，其所针对的抗原表位为2KKTEETTLLEDR13。本发明比较了单抗10B10识别的FMDV共享表位8TLLEDRILT16与单抗4B2所识别表位的差异性：Western blot分析显示，单抗10B10只与VP2蛋白上8-16位的8TLLEDRILT16短肽呈现反应，而与VP2蛋白上2-13位的2KKTEETTLLEDR13短肽不呈现任何反应；进一步分析表明，10B10所识别表位的氨基酸序列中，Thr8和Asp12为关键氨基酸，Leu9和Arg13为重要氨基酸，其余残基的替换对表位活性无影响；而4B2所识别表位的氨基酸序列中，Glu11为关键氨基酸，Thr8和Leu10为重要氨基酸。单抗10B10重链类型为IgG2a，轻链为κ类型；而单抗4B2重链类型为IgG1，轻链为κ类型。上述分析结果表明，本发明中单抗10B10所识别抗原表位与4B2识别表位分属于不同的FMDV VP2表位。
本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位能够应用于制备诊断、预防或治疗口蹄疫的试剂或药物。
本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位能够应用于制备口蹄疫病毒抗体检测的试剂。
本发明还公开了一种用于口蹄疫病毒抗体检测的ELISA试剂盒，包括：包被抗原的固相载体、HRP标记的羊抗牛IgG抗体、洗涤液、底物溶液；其中，所述抗原为本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示；其中，X1-X7为任意一种氨基酸残基；优选的，X1为亮氨酸L或丙氨酸A，X4为精氨酸R或苯丙氨酸F；更优选的，X1为亮氨酸L，X4为精氨酸R。进一步优选的，X2为亮氨酸L，X3为谷氨酸E，X5为异亮氨酸I，X6为亮氨酸L、蛋氨酸M或缬氨酸V，X7为苏氨酸T；更优选的，X6为亮氨酸L。最优选的，所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明所述口蹄疫病毒包括：O型、A型、C型、Asia1型、SAT1型、SAT2型或SAT3型口蹄疫病毒中的任意一种或多种。
本发明技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
本发明对单克隆抗体10B10识别的抗原表位进行鉴定，确定单抗10B10识别各血清型FMDV毒株VP2蛋白上的共享性表位8TLLEDRILT16，该表位是七个血清型FMDV毒株的共享型表位。本发明所述单克隆抗体10B10识别的FMDV表位肽8TLLEDRILT16及其系列突变体(L9A、R13F、L15M与L15V)，能够特异性区分A型、O型和Asia1型FMDV的阴阳性血清，在口蹄疫的诊断以及口蹄疫病毒抗体泛检测等领域将具有重要的价值和应用潜力。
附图说明
图1为灭活全病毒与单抗10B10的Western blot分析；
图2为GST融合蛋白的SDS-PAGE(a,c,e)和Western blot分析(b,d,f)；
图3为截短肽GST融合蛋白的SDS-PAGE(a,c)和Western blot分析(b,d)；
图4为丙氨酸扫描突变合成肽的SDS-PAGE(a)和Western blot分析(b)；
图5为10B10表位肽氨基酸序列的保守性分析；
图6为GST融合表达的系列表位突变肽与A型FMDV阳性、阴性、O型FMDV阳性和Asia1型FMDV阳性血清的免疫反应性；
图7为GST融合蛋白的表位肽段8TLLEDRILT16和2KKTEETTLLEDR13的SDS-PAGE(a)和Western blot分析(b)。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本发明的保护范围。
实施例1 单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位的鉴定
1、材料和方法
1.1 细胞系及主要试剂
口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10，由微生物保藏编号为：CGMCC No.13841的杂交瘤细胞系分泌。
ELISA板购自于Corning公司，DAB显色液购自北京中杉金桥生物技术有限公司，BL21感受态购自于天根公司，pGEX-6p-1由本发明人实验室保存。
1.2 衣壳蛋白的截短表达
根据FMDV A/JLYS/CHA/2014株(AJ131665)衣壳蛋白序列，设计9对特异性引物，将蛋白分为9个截短片段进行表达。所有上下游引物均分别引入BamHI、XhoI酶切切位点，引物序列见表1，由Invitrogen公司合成。以病毒RNA反转录的cDNA为模板，9对引物分别用于扩增9个截短基因片段，其分布如表1所示。酶切后的基因片段插入pGEX-6p-1的BamHI和XhoI之间，转化BL21感受态细胞，用PstI酶切鉴定重组质粒，挑取单个阳性菌落过夜培养并测序验证，然后1:100稀释接种于新鲜的液体LB培养基中，37℃震荡培养至OD600nm＝0.6，加入诱导剂IPTG至终浓度为0.1mmol/L，37℃继续培养4h，收集菌体并用适量PBS重悬，融合蛋白分别命名为VP1、VP2、VP3、VP2-1、VP2-2、VP2-3、VP2-4、VP2-5和VP2-6。
表1 用于衣壳蛋白及其截短片段表达的引物序列
1.3 表位肽的GST融合表达
人工合成表位及其单氨基酸逐一截短表位的编码DNA的两条互补寡核苷酸链，上游引入BamHI粘性延伸末端，下游引入终止密码子以及XhoI粘性延伸末端，引物序列见表2、表3和表4。将两条互补链直接退火形成带粘性末端的双链DNA，插入pGEX-6p-1的BamHI和XhoI之间，转化BL21感受态细胞，用PstI酶切鉴定重组质粒。挑取单个阳性菌落过夜培养并测序验证，然后1:100稀释接种于新鲜的液体LB培养基中，37℃震荡培养至OD600nm＝0.6，加入诱导剂IPTG至终浓度为1mmol/L，37℃继续培养4h，收集菌体并用适量的PBS重悬。表达的融合蛋白分别命名为VP2-1-A、VP2-1-B、1-25至1-15、2-25至10-25、TLLEDRILT、T8A、L9A、L10A、E11A、D12A、R13A、I14A、L15A与T16A。
表2 编码截短肽及其截短突变体DNA的互补寡核苷酸链
表3 用于本发明的合成肽及其氨基酸序列
注：a口蹄疫病毒A/JLYS/CHA/2014株VP2的8～16aa肽；
b突变位点氨基酸均加粗并用下划线标出，按左右顺序依次有一个残基用丙氨酸(A)替换。
表4 编码合成肽DNA的互补寡核苷酸链
1.4 系列表位突变肽的GST融合表达
人工合成表位编码DNA的两条互补寡核苷酸链，上游引入BamHI粘性延伸末端，下游引入终止密码子以及XhoI粘性延伸末端，引物序列见表5。将两条互补链直接退火形成带粘性末端的双链DNA，插入pGEX-6p-1的BamHI和XhoI之间，转化BL21感受态细胞，用PstI酶切鉴定重组质粒，挑取单个阳性菌落过夜培养并测序验证，然后1:100稀释接种于新鲜的液体LB培养基中，37℃震荡培养至OD600nm＝0.6，加入诱导剂IPTG至终浓度为1mmol/L，37℃继续培养4h诱导蛋白的表达，收集菌体并用适量的PBS重悬，表达的GST融合蛋白分别命名为L9A、R13F、L15M与L15V。
表5 编码表位突变肽DNA的互补寡核苷酸链
1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot检测
SDS-PAGE电泳(15％Tris-glycine)分离各融合蛋白，转印至硝酸纤维素滤膜上(90V，45min)，用5％脱脂乳-PBS封闭液4℃封闭过夜，与单抗10B10于37℃温1h，与HRP标记的羊抗鼠IgG室温作用1h，DAB(6mg/10mL)显色。
1.6 抗体检测ELISA
用上述1.4中的GST融合表达的表位肽作为抗原包被96孔板，加入100uL 100倍稀释的A型、O型和Asia1型FMDV阳性血清和阴性血清，37℃温育1h后洗涤，加入1:5000稀释的HRP标记的羊抗牛IgG抗体，洗涤后加入底物OPD避光显色10min，于波长492nm测定吸光值。
2、实验结果
2.1 单抗10B10识别表位的初步定位
用单抗10B10对口蹄疫A、O和Asia1型全病毒进行Western blot分析，均显示明显的特异性反应条带(图1)，可见单抗10B10识别不同血清型FMDV毒株的同一个线性表位。
用融合表达的VP1、VP2和VP3进行SDS-PAGE(图2-a)分离，并以1：1000稀释的单抗10B10作为一抗、1:5000稀释的HRP标记的羊抗鼠抗体作为二抗进行Western blot分析(图2-b)，结果显示，10B10所识别的表位位于VP2蛋白上。为了进一步定位10B10识别的表位，将VP2分为6段(VP2-1至VP2-6)截短进行融合表达，SDS-PAGE(图2-c)和Western blot分析(图2-d)显示，10B10所识别的表位位于VP2-1短肽上。为进一步鉴定单抗10B10识别的表位，本发明以上下游引物退火形成目的片段为目的设计2对引物(表2)进行短肽编码基因的GST融合表达。SDS-PAGE(图2-e)与Western blot(图2-f)分析显示，单抗10B10与VP2-1-A短肽呈现反应。
2.2 单抗10B10识别表位的精确定位
为进一步精确鉴定单抗10B10识别的表位，本发明以上下游引物退火形成目的片段为目的进而设计了20对引物(表2)，分别从VP2-1-A短肽的N端和C端以1个氨基酸残基逐步递减，直到C末端或N末端剩下15个氨基酸组成的短肽为止，通过GST融合表达以及SDS-PAGE电泳(图3-a)和Western blot(图3-b)分析显示，单抗10B10与N端的1DKKTEETTLLEDRILTTRNGHTTST25至8TLLEDRILTTRNGHTTST25以及C端的1DKKTEETTLLEDRILTTRNGHTTST25至1DKKTEETTLLEDRILT16发生特异性结合，而与其它融合肽以及GST对照均不反应。上述结果表明，8TLLEDRILT16为单抗10B10识别表位的最小反应活性单元，即单抗10B10识别表位的基序。
2.3 10B10识别表位的关键氨基酸
为进一步了解单抗10B10识别表位中各个氨基酸残基在与单抗结合过程中所起的作用，以10B10表位基序8TLLEDRILT16为基础，用丙氨酸(A)从N端至C端进行逐个氨基酸替换(表3和表4)，8TLLEDRILT16作为阳性对照、GST空载体作为阴性对照。经SDS-PAGE(图4-a)与Western blot分析(图4-b)显示，10B10所识别表位的氨基酸序列中，Thr8和Asp12为关键氨基酸，Leu9和Arg13为重要氨基酸，其余残基的替换对表位活性无影响。
2.4 10B10表位是七个不同血清型FMDV各基因型毒株的保守性表位
为验证10B10表位的保守性，选取GenBank收录的274条FMDV的VP2氨基酸序列进行比对，以其中21条FMDV的VP2氨基酸序列为代表，比对分析结果(图5)显示，10B10表位的氨基酸序列在7种血清型FMDV毒株之间是高度保守的。在序列比对中发现，该表位氨基酸序列中突变最多的是Leu15，可突变为Met和Val，但其为该表位的非必需氨基酸，突变后对表位活性不会产生影响；而Thr8和Asp12作为本发明鉴定的10B10表位的关键氨基酸，这两个氨基酸残基在所有已发表毒株的该表位氨基酸序列中是绝对保守的。本发明在鉴别10B10识别表位关键氨基酸的试验中(图4-b)发现，Leu9和Arg13为10B10表位的重要氨基酸，其突变可使表位活性呈现一定程度的下降，本序列比对中274个毒株VP2蛋白只有3个Leu9至Ala突变和1个Arg13至Phe突变，并且主要局限在非洲型毒株，对该表位活性的影响有限。这些结果表明，10B10表位是针对FMDV7个血清型毒株的一个高度保守的线性表位。
2.5 单抗10B10识别抗原表位及其突变体与口蹄疫病毒抗体阳性血清的特异性反应
在鉴定了单抗10B10所识别的表位基序8TLLEDRILT16后，为确定该抗原表位能否作为诊断抗原来检测A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒抗体阳性血清，本发明首先将10B10识别的FMDV共享表位的氨基酸序列8TLLEDRILT16进行定点诱变：Leu9突变为Ala(A)；Arg13突变为Phe(F)；Leu15突变为Met(M)或Val(V)，以GST融合的方式表达，分别命名为L9A、R13F、L15M和L15V。然后，将这些GST融合的表位肽作为抗原分别包被ELISA板，同时，设立GST空载体作为对照，检测A型、O型和Asia1型FMDV阳性和阴性血清，以检测单抗10B10识别的FMDV表位的氨基酸序列TLLEDRILT及其突变体与A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒抗体的反应能力，由此评价10B10识别的FMDV共享型表位的氨基酸序列TLLEDRILT在口蹄疫诊断中的价值。结果(图6)表明：单抗10B10识别的FMDV共享型表位肽及其表位突变肽(L15M和L15V)与A型、O型和Asia1型FMDV的阳性血清呈现良好的反应能力，表位突变肽(L9A和R13F)与A型、O型和Asia1型FMDV的阳性血清呈现中等的反应能力，而这些表位肽及其表位突变肽与FMDV阴性血清均没有反应，能够特异性区分FMDV的阴阳性血清。这些检测结果，与10B10识别表位鉴定过程中发现的氨基酸残基Thr8和Asp12是该表位活性的关键氨基酸、残基Leu9和Arg13是该表位的重要氨基酸、而其余残基替换对该表位的活性无影响的结果相一致(图4-b)。由此，本发明确定了单抗10B10识别的FMDV表位的氨基酸序列TLLEDRILT及其系列表位突变肽对于建立共享型口蹄疫诊断方法的价值和应用潜力。
2.6 单抗10B10识别抗原表位与单抗4B2识别抗原表位的差异性分析
本实验室已有一株针对口蹄疫病毒VP2蛋白上的血清型共享性单抗4B2，其所针对的抗原表位(2KKTEETTLLEDR13)也已被本实验室所鉴定。为了比较单抗10B10识别的FMDV共享表位8TLLEDRILT16与单抗4B2所识别表位的差异性，将这2个表位进行短肽编码基因的GST融合表达，SDS-PAGE(图7-a)与Western blot(图7-b)分析显示，单抗10B10只与VP2蛋白上8-16位的8TLLEDRILT16短肽呈现反应，而与VP2蛋白上2-13位的2KKTEETTLLEDR13短肽不呈现任何反应；进一步分析表明，10B10所识别表位的氨基酸序列中，Thr8和Asp12为关键氨基酸，Leu9和Arg13为重要氨基酸，其余残基的替换对表位活性无影响。而4B2所识别表位的氨基酸序列中，Glu11为关键氨基酸，Thr8和Leu10为重要氨基酸。进一步分析显示，单抗10B10重链类型为IgG2a，轻链为κ类型；而单抗4B2重链类型为IgG1，轻链为κ类型。上述比较分析结果均表明，本发明中单抗10B10所识别抗原表位与4B2识别表位分属于不同的FMDV VP2表位。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
<120> 单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用
<130> HLJ-2001-170418A
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
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<211> 9
<212> PRT
<213> Foot-and-mouth disease virus
<400> 1
Thr X1 X2 X3 Asp X4 X5 X6 X7
1 5
<210> 2
<211> 9
<212> PRT
<213> Foot-and-mouth disease virus
<400> 2
Thr Leu Leu Glu Asp Arg Ile Leu Thr
1 5
Claims (10)
1.单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其特征在于，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示；其中，X1-X7为任意一种氨基酸残基。
2.按照权利要求1所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其特征在于：X1为亮氨酸L或丙氨酸A，X4为精氨酸R或苯丙氨酸F；优选的，X1为亮氨酸L，X4为精氨酸R。
3.按照权利要求1所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其特征在于：X2为亮氨酸L，X3为谷氨酸E，X5为异亮氨酸I，X6为亮氨酸L、蛋氨酸M或缬氨酸V，X7为苏氨酸T；优选的，X6为亮氨酸L。
4.按照权利要求1所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其特征在于，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。
5.按照权利要求1至4任何一项所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位，其特征在于：所述口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位是O型、A型、C型、Asia1型、SAT1型、SAT2型和SAT3型七个血清型口蹄疫病毒的共享性表位。
6.权利要求1至4任何一项所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在制备诊断、预防或治疗口蹄疫的试剂或药物中的应用。
7.权利要求1至4任何一项所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在制备口蹄疫病毒抗体检测的试剂中的应用。
8.一种用于口蹄疫病毒抗体检测的ELISA试剂盒，包括：包被抗原的固相载体、HRP标记的羊抗牛IgG抗体、洗涤液、底物溶液；其特征在于：所述抗原为权利要求1至4任何一项所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位。
9.按照权利要求8所述的ELISA试剂盒，其特征在于：所述抗原为权利要求4所述的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位。
10.按照权利要求8所述的ELISA试剂盒，其特征在于，所述口蹄疫病毒选自：O型、A型、C型、Asia1型、SAT1型、SAT2型或SAT3型口蹄疫病毒中的任意一种。
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