CN107213158A - 沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 - Google Patents
沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107213158A CN107213158A CN201710528201.2A CN201710528201A CN107213158A CN 107213158 A CN107213158 A CN 107213158A CN 201710528201 A CN201710528201 A CN 201710528201A CN 107213158 A CN107213158 A CN 107213158A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- complanatoside
- group
- ethanol
- lung tissue
- medicine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- AQUNDBJRKFTQOS-UHFFFAOYSA-N COc(cc1OC(c(cc2)ccc2/[O]=C(\C(C2O)O)/OC(CO)C2O)=C2OC3OC4C(O)OC3O)cc(O)c1C2=[O]C4O Chemical compound COc(cc1OC(c(cc2)ccc2/[O]=C(\C(C2O)O)/OC(CO)C2O)=C2OC3OC4C(O)OC3O)cc(O)c1C2=[O]C4O AQUNDBJRKFTQOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及沙苑子苷在制备治疗肺纤维化的药物中的应用,其中所述沙苑子苷的化学结构式如下式(Ⅰ)所示。本发明所述应用中的药物可以是胶囊剂、片剂或滴丸,其中沙苑子苷的质量百分含量为6.1~26.8%。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域,具体涉及含黄酮苷类化合物的药物。
背景技术
肺纤维化是多种弥漫性肺间质疾病的共同病理改变,临床表现为进行性呼吸困难,肺功能为限制性通气障碍,病情持续进展,最终因呼吸衰竭而死亡。由于发病机制复杂,该病仍无有效治疗措施,因此,肺纤维化治疗药或先导化合物的发现仍具有重要意义。
青天葵为兰科植物芋兰属中的毛唇芋兰Nervilia fordii(Hance)Schltr.的块茎和全草,它的别名众多,分别是天葵、磨地沙、独叶莲、珍珠草等,主要分布在广西、广东、云南、四川等地。青天葵性味甘凉、性寒、无毒,具有清热润肺止咳,解毒散瘀止痛的功效,主治肺热咳嗽,肺痨咯血,瘰疬,疮疡肿毒等症。在我国南方地区特别是岭南地区为治疗急慢性肺炎、气管支气管炎、喘息型慢性支气管炎的常用药,临床应用于肺损伤疾病的治疗。特别是在2003年非典期间,用于重度肺损伤疾病——急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratorydistress syndrome,ARDS)的治疗取得了良好的疗效,是岭南地产“南药”之一。现代研究表明,青天葵的主要药效物质为黄酮类化合物,其中沙苑子苷(complanatuside)是青天葵黄酮类化合物中主要的活性成分,性状为淡黄色结晶,其分子式为C28H32O16,分子量为624。由沙苑子苷化学结构可见,其结构中既有活泼的酚羟基,又有芳香性和一定的疏水性,具有广泛的药理活性,目前发现它具有抗氧化性、抗炎、松弛平滑肌等活性,具有较好的抗肝纤维化、降血脂等作用。
发明内容
本发明的目的在于提供沙苑子苷在制药中的新用途,即在制药中的新应用。
现代医学研究表明,肺纤维化是由多种细胞因子启动和维持的胶原蛋白代谢失衡的结果,众多促纤维化细胞因子中,转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)是公认的与肺纤维化的发生和形成最为密切的介导因子,是迄今发现的最强的对胶原合成最直接和有效的刺激剂,在肺纤维化发生发展的多个环节起作用。基于上述思想,本发明人对青天葵中的黄酮苷类化合物进行了逐一研究,发现沙苑子苷具有抗炎和抑制成纤维细胞增殖活性,除公知的抑制TNF-α、IL-1β等炎症因子的过表达的抗氧化作用外,还具有抑制成纤维细胞的增殖,阻止成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,起到保护细胞的作用。
因此,上述在制药中的新应用即为,沙苑子苷在制备治疗肺纤维化的药物中的应用,其中所述沙苑子苷的化学结构式如下式(Ⅰ)所示:
本发明所述的沙苑子苷可以采用常规的方法从中药青天葵或其它植物中提取得到,也可以由合成或其他方法制得。
上述应用中,所述的药物可以是肠溶胶囊、软胶囊、滴丸、分散片或薄膜衣片,其中沙苑子苷的含量为6.1~26.8%。
本发明所述的应用,其中体现所述用途的化合物沙苑子苷具有抗炎和抑制成纤维细胞增殖双靶活性,一方面显著抑制TNF-α、IL-1β等炎症因子的过表达的抗氧化作用;另一方面还具有抑制成纤维细胞的增殖,阻止成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,从而起到保护肺细胞的作用。
下面通过实验来证明本发明所述化合物沙苑子苷所具有的技术效果。
1、沙苑子苷对小鼠胚胎成纤维细胞增殖抑制作用及其机制的研究
采用TGF-β诱导的小鼠胚胎成纤维细胞36T-Swiss albino,研究沙苑子苷对36T-Swiss albino细胞培养液上清中小鼠Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)分泌量、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)分泌量、炎症因子TNF-α和IL-1β、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,考察本发明所述化合物的抗炎和抗氧化作用,具体实验方法如下所述。
(1)含药培养液的配制
取下述实施例1所得到的沙苑子苷2mg,精密称定,用PBS定容至1ml,得到2mg/ml的沙苑子苷母液,换算得到沙苑子苷母液的浓度为3200μM,倍比稀释得到沙苑子苷系列溶液浓度为20、2、0.2μM。
(2)实验方法
①细胞毒性实验
CCK-8法:用0.25%胰蛋白酶和2‰EDTA 1:1混合消化单层培养细胞,停止消化后,加入PBS液,用弯头吸管反复吹打分散细胞,于800rpm离心5min。弃去上清,加入1mL DMEM高糖培养液重悬,吹打分散细胞后配成单个细胞悬液,以4×105个/mL接种于96孔培养板中,每孔体积100μL。将培养板放入37℃、5%CO2的培养箱中培养24h,待细胞完全贴壁后,加入不同浓度的含药培养液(实验组)、正常培养液(空白对照组),实验组和空白对照组每组设4个复孔,药物对照组(无细胞,仅加入不同浓度的含药培养液)设1个复孔。各组同时培养24h,吸去含药培养基,每孔加入含CCK-8溶液的培养基100μL,继续培养2h后在450nm下检测OD值。
在酶标仪上测各孔OD值,测定波长450nm,记录结果,计算细胞存活率和半数毒性浓度(TC50)。
细胞存活率(%)=(OD实验组/OD空白对照组)×100%
半数毒性浓度(TC50)=Anti log[logB+(50-B)的抑制百分率/(A-B)的抑制百分率×C](A≧抑制50%药物浓度,B≦抑制50%药物浓度,C=log稀释倍数),参照Reed-Muench法。
②对COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的抑制实验
酶联免疫法:取细胞上清液,采用酶联免疫法,用COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β检测试剂盒按说明书操作,在酶标仪上以450nm作为检测波长测定各孔OD值。计算COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的抑制率和药物对COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的半数抑制浓度(IC50)。
沙苑子苷对COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的抑制率(%)=(1-OD实验组/OD空白对照组)×100%
沙苑子苷对COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的半数抑制浓度(IC50)=Anti log[logB+(50-B)的抑制百分率/(A-B)的抑制百分率×C](A≧抑制50%药物浓度,B≦抑制50%药物浓度,C=log稀释倍数),参照Reed-Muench法。
③对SOD和GSH的影响
机体的氧化与抗氧化失衡在肺纤维疾病形成过程中占很重要的位置,而SOD和GSH作为评价氧化与抗氧化的重要指标,检测它的含量变化,能表明氧化与抗氧化是否参与肺纤维化疾病的形成。TGF-β能够刺激小鼠胚胎成纤维细胞增殖,转化为肌成纤维细胞,引起细胞内抗氧化性指标SOD和GSH升高(P<0.05),可以说明成纤维细胞已经受到损伤。表1的实验结果显示,沙苑子苷的预防干预后能显著抑制SOD和GSH指标的升高(P<0.05),起到保护成纤维细胞的作用。
表1沙苑子苷对细胞中SOD和GSH的影响(n=8)
④统计学分析
实验数据以(均数±标准差)表示,统计分析采用SPSS 17.0统计软件。同一化合物在不同浓度组间的OD值,经方差齐性检验后进行单因素方差分析(One-way ANOVA):方差齐时采用LSD法检验;方差不齐时采用Dunnett’s T3法。显著性水准取α=0.05,以P<0.05时,判断组间差异具有统计学意义。
⑤计算治疗指数
对COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α和IL-1β的分泌有明显抑制作用,且抑制率与药物浓度呈典型量效关系的化合物,其体外抗HBV作用治疗指数(TI)评价。
治疗指数(TI)=TC50/IC50,其中TI≧2为有效低毒;1<TI<2为低效有毒;TI≦1为毒性。TI数值越大化合物越安全。
(3)实验结果与讨论
将实验数据经上述统计学处理后,结果如下表2~4所示。
2、沙苑子苷对大鼠肺间质纤维化的作用效果及其机制研究
SPF级雄性SD大鼠(200~220g)共70只,随机分为7组:①正常组;②假手术组:生理盐水(10mL·kg-1);③模型对照组;④阳性药物对照组:醋酸泼尼松片(3.5mg·kg-1);⑤本发明提取物高剂量组(72mg·kg-1);⑥本发明提取物中剂量组(36mg·kg-1);⑦本发明提取物低剂量组(18mg·kg-1);。实验每组各10只。
各组大鼠分笼饲养于不锈钢金属笼内,每笼5只,室温调节在(26±2)℃,湿度控制在40%~70%,自由饮食和摄水。除正常组外,其他各组均注射30mg/kg的BLM(1621158),假手术组注射适量的生理盐水,于模后第2d给药,连续给药14d。14d后,大鼠腹主动脉取血,分离血清,同时取出双肺,计算肺系数;左肺置于福尔马林中,右肺一部分用于试剂盒(HYP、T-AOC和GSH等)的检测,一部分冻于-80℃,留作后续WB和PCR实验检测。所得实验数据用SPSS17.0软件统计处理,用表示。
(1)肺系数(LI)实验
大鼠LI是反应各组大鼠体重和肺重关系的一个指标。肺重大小可以间接反应肺组织是否发生病变以及病变程度。由下表可知,气管内注射盐酸博莱霉素的模型组LI较正常组明显升高(P<0.01),说明肺组织发生病变,结合肺组织肉眼观察结果发现模型组肺组织体积变大,支气管附近有较大的灰色实变区域,肺表面可见肺泡囊肿以及血样斑点。而经过14d的药物干预后,给药组肺组织的LI较模型组有很大的改善,更趋近于正常组(P<0.05)。肉眼观察到各药物组肺组织体积略微变大,支气管附近有少量的灰色实变区域,LI结果见表2。
表2各组大鼠的肺系数(LI)实验结果(n=10)
与正常组比较,#为模型组,p<0.01;*为模型组,p<0.05。
(2)血清中HYP、MPO、T-AOC以及肺组织中HYP、GSH的含量
肺间质纤维化时,肺内主要增加的成分为胶原纤维,羟脯氨酸为胶原纤维所特有,测定羟脯氨酸的含量,可换算成胶原蛋白的含量,以反应肺纤维化的程度。本实验通过测定血清和肺组织中羟脯氨酸的含量来初步反应肺纤维化的程度。实验结果表明,模型组HYP的含量较正常组显著升高(P<0.01),说明肺组织形成纤维化。而经过14d给药,给药组血清和肺组织中的羟脯氨酸的含量较模型组明显下降,且沙苑子苷高、中、低给药组药效呈现一定的剂量依赖性关系(P<0.05),说明沙苑子苷药物减轻模型的纤维化程度,干预肺纤维化形成过程。
T-AOC、MPO和GSH是检测机体氧化与抗氧化失衡最常用的指标。机体氧化应激水平如果遭到破坏,如T-AOC显著降低,MPO大量出现在细胞内,体内重要的抗氧化剂GSH水平急剧下降。本实验通过测定血清中T-AOC和MPO以及组织中GSH的含量判断大鼠肺间质纤维化是否与大鼠体内氧化应激水平失衡有关系。结果表明,模型组大鼠血清中T-AOC与组织中GSH的含量较正常组显著降低(P<0.01),各给药组较模型组有一定程度上的改善,以沙苑子苷高、中剂量组明显(P<0.05)。而较正常组肺组织,模型组大鼠肺组织细胞内MPO大量产生(P<0.01),经过药物治疗后,MPO含量有所下降,更接近正常组(P<0.05),以沙苑子苷高、中剂量组明显,具体结果见表3、4。
表3各组大鼠血清中HYP、MPO和T-AOC的含量(n=8)
与正常组比较,#为模型组,p<0.01;*为模型组,p<0.05.
表4各组大鼠肺组织中HYP和GSH的含量(n=8)
与正常组比较,#为模型组,p<0.01;*为模型组,p<0.05。
(3)组织中炎症因子TNF-α和IL-1β的含量
肺间质纤维化发生是一个缓慢且复杂的过程。肺炎存在于肺纤维化形成过程的始末。炎症因子TNF-α和IL-1β是用来评判炎症常用的指标,而且研究表明这两个炎症因子在肺纤维化形成机制中有重要作用。本实验通过测定肺组织中炎症因子TNF-α和IL-1β含量判断纤维化过程中是否存在肺炎(亦或是纤维化是由肺炎引起)。结果表明,与正常组比较,模型组肺组织中TNF-α和IL-1β的含量较正常组显著升高(P<0.01),TNF-α程度更为显著。而经过沙苑子苷药物治疗后,各给药组肺组织中TNF-α和IL-1β的含量较模型组显著下降(P<0.05),更趋近于正常组,由此可推测出,沙苑子苷药物可能从肺间质纤维化形成的初期干预较好。
表5各组大鼠肺组织中TNF-α和IL-1β含量(n=8)
与正常组比较,#为模型组,p<0.01;*为模型组,p<0.05。
(4)HE染色
正常组和假手术组肺组织结构正常,未见肉芽组织增生和炎症因子的入侵,肺泡结构完整,未见充血、水肿等情况。阳性药组肺组织部分结构破坏,可见少量的肉芽组织、成纤维细胞增生以及炎症因子的入侵,肺泡结构大体完整,未见充血、水肿等情况。沙苑子苷高、中、低剂量组可见局部肺组织结构发生改变,可见肺泡间隔增宽,有肉芽组织、成纤维细胞增生以及大量的炎症因子入侵,部分肺组织出现水肿,以低剂量较为明显。模型组大鼠肺组织出现大面积的结构紊乱破坏,肺泡结构消失,肺泡间隔增宽,似实质化趋势;支气管附近可见大量的炎症因子入侵以及成纤维细胞增生,结构破坏。结果见图2。
参照Szapiel等的方法,对肺组织中肺泡炎进行计分,计分结果与病理图片结果一致,模型组计分最高,各给药组评分有所减少,以沙苑子苷高剂量组减少最为明显,结果见表6。
表6各组大鼠肺组织肺泡炎症计分结果
(5)Masson染色
正常组和假手术组肺组织结构正常,支气管可见少量的胶原纤维(胶原颜色较暗)。阳性药组肺组织部分结构破坏,可见局部肺支气管附近胶原纤维增加,颜色变亮。沙苑子苷高、中、低剂量组可见局部肺组织结构发生改变,可见支气管附近有胶原纤维增生,颜色较亮,区域有所扩大。模型组大鼠肺组织出现大面积的结构紊乱破坏,可见支气管附近有成片的胶原纤维增生,胶原颜色明显变亮,可见少量支气管结构破坏,结果见图3。
采用Ashcroft等和Hübner等的方法,对肺组织中肺纤维化程度进行计分,评分标准分八级,1级计1分,每组8个样本分别评分,并求平均值。平均计分结果与病理图片结果一致,模型组计分最高,各给药组评分有所减少,以沙苑子干高剂量组减少最为明显,结果见表7。
表7各组肺组织中肺纤维化程度评分结果
(6)WB实验
与对照组比较,模型组大鼠肺组织TGF-β、Smad3和Smad4蛋白表达明显上调,Smad7蛋白表达明显下调。与模型组比较,沙苑子苷组能显著抑制大鼠肺组织TGF-β、Smad3和Smad4蛋白的表达,诱导Smad7蛋白表达增加,以沙苑子苷高剂量效果明显(P<0.05),见图4。
(7)PCR实验
与对照组比较,模型组大鼠肺组织TGF-β、Smad3、Smad4mRNA表达显著增加,Smad7、ERK1/2mRNA的表达显著减少。与模型组比较,各给药组不同程度的抑制大鼠肺组织TGF-β、Smad3、Smad4mRNA的表达,升高Smad7、ERK1/2mRNA的表达,以沙苑子苷高剂量组作用明显,结果见图5。
附图说明
图1为沙苑子苷高效液相色谱图。
图2为各组大鼠肺组织HE染色显微图片(×200)。
图3为各组大鼠肺组织Masson染色显微图片(×200)。
图4为沙苑子苷对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β、Smad3、Smad4、Smad7、ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表达影响的效果图,图中的#表示与对照组比较,具有显著性差异P<0.05;*表示与模型组比较,具有显著性差异P<0.05。
图5为沙苑子苷对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β、Smad3、Smad4、Smad7和ERK1/2基因表达影响的效果图,图中的#表示与对照组比较,具有显著性差异P<0.05;*表示与模型组比较,具有显著性差异P<0.05。
具体实施方式
制备沙苑子苷例
例1
取干燥的青天葵2000g,粉碎成粗粉。
取青天葵粗粉,加入20倍量60%乙醇浸泡12小时,在常压下加热提取1.5小时,趁热过滤,药渣再加入15倍量60%乙醇,加热提取1小时,趁热过滤,合并两次乙醇提取液。将乙醇提取液减压浓缩至无醇味,在5℃下以10000rpm离心,取上清液加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂(天津南开大学化工厂生产),以2BV/h(倍柱体积每小时)的流速上大孔吸附树脂柱,待吸附饱和后,先用水以1.0BV/h的流速洗脱树脂柱,至水洗液无色后,再依次以20%、60%、95%乙醇以1.0BV/h的流速洗脱,各乙醇梯度间的递增以上一梯度洗脱液至无色为依据,TLC示踪检测洗脱流份,收集浓度为60%和95%且TLC显示具有沙苑子苷的乙醇洗脱液,减压回收乙醇,浓缩,干燥即得淡黄色粗品。
称取上述沙苑子苷粗品适量,加入95%乙醇至完全溶解,然后缓慢加入适量蒸馏水,边加边搅拌,使混合液中乙醇的终浓度达到20%为止,放置30min后,过滤,即得到淡黄色无定形粉末。
淡黄色无定形粉末(乙醇-水),薄层层析后用10%硫酸-乙醇显色,黄色加深,且365nm下荧光明显增强,表明可能为黄酮类化合物。
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱中,δH 12.57(1H,s),8.16(2H,d,J=9.5Hz)和7.17(2H,d,J=9.5Hz),6.79(1H,d,J=2.0Hz)和6.40(1H,d,J=2.0Hz)等信号,提示与化合物鼠李柠檬素具有相同的结构母核,即A环5,7位二取代,且5位为羟基,B环为对位双取代苯环结构。δH 5.51(1H,d,J=7.5Hz)和5.04(1H,d,J=7.5Hz)进一步证明结构中存在两个六碳糖片断。δH 3.87(3H,s)为-OCH3的特征信号。13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱结合DEPT-135谱,除去与鼠李柠檬素基本一致的信号外,剩余的信号表现出两个葡萄糖的特征,δH 100.7和99.8为糖的端基碳的特征信号,δC 80~60之间表现出十个葡萄糖残基的碳信号。经与文献中complanatuosi[3]d比较,13C-NMR谱数据一致,故鉴定化合物NF-BuOH-5为complanatuoside,即沙苑子苷。
精密称取本实施例所述高纯度沙苑子苷1mg,加甲醇溶解并定容至10mL。进样前以0.22μm微孔滤膜过滤。精密吸取5μL,依选定的色谱条件进样测定,根据标准溶液所得的回归方程计算本发明提取物中沙苑子苷的纯度为98.3%,色谱图见图1。
例2
取干燥的青天葵1000g,粉碎成粗粉。
取青天葵粗粉,加入15倍量80%乙醇浸泡12小时,在常压下加热回流提取1.0小时,趁热过滤,药渣再加入12倍量80%乙醇,加热回流提取1小时,趁热过滤,合并两次乙醇提取液。将乙醇提取液减压浓缩至无醇味,在8℃下以12000rpm离心,取上清液加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂(天津南开大学化工厂生产),以1.5BV/h(倍柱体积每小时)的流速上大孔吸附树脂柱,待吸附饱和后,先用水以1.5BV/h的流速洗脱树脂柱,至水洗液无色后,再依次以20%、60%、95%乙醇以0.5BV/h的流速洗脱,各乙醇梯度间的递增以上一梯度洗脱液至无色为依据,TLC示踪检测洗脱流份,收集浓度为60%和95%且TLC显示具有沙苑子苷的乙醇洗脱液,减压回收乙醇,浓缩,干燥即得沙苑子苷粗品。沙苑子苷粗品用95%乙醇完全溶解,然后缓慢加入适量蒸馏水,边加边搅拌,使混合液中乙醇的终浓度达到20%为止,放置30min后,过滤,即得到高纯度沙苑子苷。沙苑子苷的纯度为99.1%。
例3
取新鲜干燥的青天葵1000g,粉碎成粗粉。
取青天葵粗粉,加入12倍量70%乙醇浸泡12小时,在常压下加热回流提取1.5小时,趁热过滤,药渣再加入10倍量70%乙醇,加热回流提取1小时,趁热过滤,合并两次乙醇提取液。将乙醇提取液减压浓缩至无醇味,在10℃下以8000rpm离心,取上清液加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂(天津南开大学化工厂生产),以1.5BV/h(倍柱体积每小时)的流速上大孔吸附树脂柱,待吸附饱和后,先用水以1BV/h的流速洗脱树脂柱,至水洗液无色后,再依次以20%、60%、95%乙醇以0.6BV/h的流速洗脱,各乙醇梯度间的递增以上一梯度洗脱液至无色为依据,TLC示踪检测洗脱流份,收集浓度为60%和95%且TLC显示具有沙苑子苷的乙醇洗脱液,减压回收乙醇,浓缩,干燥即得沙苑子苷粗品。沙苑子苷粗品用95%乙醇完全溶解,然后缓慢加入适量蒸馏水,边加边搅拌,使混合液中乙醇的终浓度达到20%为止,放置60min后,过滤,即得到高纯度沙苑子苷。沙苑子苷的纯度为98.6%。
制备药物制剂例
例1
将制备例1所得提取物18.3g用适量乙醇稀释后,按照等量递加法分别赋型剂HPMC和微粉硅胶按1:1.5:0.5的比例混合均匀,过6号筛制成颗粒,于60℃温度下干燥3小时。取1#空肠溶胶囊,分别填充以上干燥颗粒,每1粒胶囊0.3g,于囊口处涂一层阿拉伯胶浆,套封胶囊,用干燥纱布擦拭胶囊后,装于密闭棕色瓶内,即得。该制剂的用量为每天两次,每次2粒,口服。
例2
将制备例1所得提取物12.2g与30g花生油混合,加入10g蜂蜡及0.5g吐温-80,再用旋转式扎囊机压制成500粒软胶囊(0.3g/粒)。该制剂的用量为每天两次,每次2粒,口服。
例3
将制备例2所得提取物11.3g与大豆油20g混合,加入5.0g蜂蜡及0.8g吐温-80,再用旋转式扎囊机压制成300粒软胶囊(0.3g/粒)。该制剂的用量为每天两次,每次4粒,口服。
例4
将制备例3所得提取物13.6g用适量乙醇稀释后再与淀粉100g混匀,过120目筛,于60℃下烘干3小时,装胶囊500粒(0.3g/粒)。该制剂的用量为每天两次,每次3粒,口服。
例5
将制备例1提取物88.1g与40g PEG4000及200g PEG6000混合,熔融,滴入冷却剂甲基硅油中即得滴丸(50mg/粒)。该制剂的用量为每天两次,每次1.0g,口服。
例6
将制备例3提取物与1.5倍量的β-环糊精包合,加入60g淀粉,混合,再过80目筛2次,置搅拌机中,加入蒸馏水适量,搅拌10分钟,制软材,过16目筛制粒,湿粒于60℃鼓风干燥箱中干燥,干粒过16目筛整粒。加入羧甲基淀粉钠10g及硬脂酸镁2g,混合均匀,压片,包薄膜衣,得片剂。该制剂的用量为每天三次,每次2片,口服。
例7
将制备例2提取物10.3g与HPMC、乳糖及淀粉按1:0.9:0.9:1.2的比例混合均匀,用95%乙醇20目制粒,50℃以下干燥1小时、16目筛整粒,再加入1%硬脂酸镁混合均匀,压制成片重为0.32g的片剂。即得分散片。该制剂的用量为每天2次,每次3片,温水冲服。
Claims (3)
1.沙苑子苷在制备治疗肺纤维化的药物中的应用,其中所述沙苑子苷的化学结构式如下式(Ⅰ)所示:
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的药物由沙苑子苷和医学上可接受的辅料组成,其中,沙苑子苷在药物中的质量百分含量为6.1~26.8%。
3.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述的药物为胶囊剂、片剂或滴丸。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710528201.2A CN107213158A (zh) | 2017-07-01 | 2017-07-01 | 沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710528201.2A CN107213158A (zh) | 2017-07-01 | 2017-07-01 | 沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107213158A true CN107213158A (zh) | 2017-09-29 |
Family
ID=59951559
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710528201.2A Pending CN107213158A (zh) | 2017-07-01 | 2017-07-01 | 沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107213158A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110420237A (zh) * | 2019-08-20 | 2019-11-08 | 南京中医药大学 | 黄芪花及其提取物在制备防治肺纤维化的药物或保健品中的应用 |
CN113368122A (zh) * | 2021-07-02 | 2021-09-10 | 五邑大学 | 沙苑子苷在制备治疗皮肤炎症的药物中的应用 |
-
2017
- 2017-07-01 CN CN201710528201.2A patent/CN107213158A/zh active Pending
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
侯燕等: "沙苑子总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究", 《中国药理学通报》 * |
刘春宇等: "以沙苑子苷为对照品测定沙苑子总黄酮含量", 《中国野生植物资源》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110420237A (zh) * | 2019-08-20 | 2019-11-08 | 南京中医药大学 | 黄芪花及其提取物在制备防治肺纤维化的药物或保健品中的应用 |
CN113368122A (zh) * | 2021-07-02 | 2021-09-10 | 五邑大学 | 沙苑子苷在制备治疗皮肤炎症的药物中的应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI454269B (zh) | 由文冠果(xanthoceras sorbifolia)單離之化合物、其製備方法以及其用途 | |
RU2700793C2 (ru) | Фармацевтическая композиция, содержащая силибин, витамин е и l-карнитин | |
CN102327368B (zh) | 三白草根茎总有效部位及其制备方法和用途 | |
CN102697982B (zh) | 一种具有辅助降血脂功能的组合物及其制备方法 | |
WO2015192758A1 (zh) | 瓦草五环三萜皂苷类化合物抗肿瘤的药物用途 | |
WO2008145064A1 (fr) | Procédé d'obtention d'un extrait contenant du séquoyitol à partir d'une espèce du genre trifolium, de soja et de ginkgo biloba, et utilisation de celui-ci | |
CN111437310A (zh) | 一种高活性白花蛇舌草总黄酮的制备方法及其在过氧化肝损伤中的应用 | |
CN107213158A (zh) | 沙苑子苷在制备治疗肺纤维化药物中的应用 | |
CN103860638A (zh) | 苦豆子黄酮组合物的制备方法及医药新用途 | |
CN102228535B (zh) | 总皂苷与总黄酮在制备治疗心血管疾病药中的应用 | |
CN108523121A (zh) | 一种抗霾清肺的功能性食品及其制备方法 | |
KR100979459B1 (ko) | 근육세포에서 포도당 흡수를 증가시키는 데이츄 추출물과이로부터 분리한 4h-크로멘-4-온 유도체 | |
CN101948473B (zh) | 新的neo-克罗烷型二萜化合物及其应用 | |
CN103735621B (zh) | 一种具有降血脂和增强免疫力作用的中药组合物 | |
CN103285022B (zh) | 用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物及其制备方法 | |
CN109106930A (zh) | 抗老化黑姜提取物及其制备方法 | |
CN112076249B (zh) | 紫苏叶提取物在制备治疗炎症性肠病药物中的应用 | |
CN106474099A (zh) | 丹酚酸a及其衍生物在防治高原病中的应用 | |
CN110090243A (zh) | 一种用于餐后血糖控制的芡实提取物、制备方法及应用 | |
CN1318034C (zh) | 用桑白皮提取物制备的药物制剂 | |
CN104069312B (zh) | 治疗中风的中药组合物及其制备方法、药物制剂和应用 | |
CN108186747A (zh) | 一种治疗下尿路感染的中药组合物颗粒剂的制备方法 | |
CN113229498A (zh) | 一种有助于降低血压药食同源组合物组方及其制备工艺 | |
JP2022500432A (ja) | メタボリックシンドローム治療するのための生薬組成物とその製剤 | |
CN113876791A (zh) | 一种预防或治疗心肌损伤的药物组合物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170929 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |