CN107184912A - 一种养正消积复方制剂及其应用 - Google Patents

一种养正消积复方制剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种养正消积复方制剂及其应用。该养正消积复方制剂按重量计，由以下原料制成：枸杞10～20 g，党参10～20 g，杜仲6～15 g，肉豆蔻1～10 g，黄芪20～30 g，柴胡12～15 g，白芍10～15 g，莪术10～15 g，郁金10～15 g，大枣20～30 g，当归10～20 g，猪苓10～20 g，炙甘草6～10 g。本发明可单独应用于肝癌和肺癌的治疗，组方针对性强、主治病证较为专一，而且疗效显著，无毒副作用；与原方用药相比，在给药剂量相同的情况下，本发明对肝癌和肺癌的治疗效果更佳，具有良好的临床应用前景。

Description

一种养正消积复方制剂及其应用
技术领域
本发明涉及中药技术领域，更具体地，涉及一种养正消积复方制剂及其应用。
背景技术
随着生态恶化和社会压力等各种外部环境的影响，恶性肿瘤给人们带来越来越多的麻烦。现代西医治疗肿瘤多采用化疗或放射性疗法，在杀死癌细胞的同时，也将人体许多正常细胞一起消灭，引起肝肾功能减退、骨髓造血功能衰退等副作用，给患者带来巨大的痛苦和心理压力。
传统医学认为肾虚血瘀是癌症产生的根本原因。“邪之所凑，其气必虚”。《内经》提出这一发病学原理，指出正气虚是疾病发生的内在根据。恶性肿瘤属于中医的“积聚”、“症瘕”的范畴。明代张景岳说：“凡脾肾不足及虚弱之人，多有积聚之病”。“积之成也，正气不足而后邪气踞之。”(《医宗必读·积聚篇》)这一论断指明外因(邪气)通过内因(正虚)而起致癌作用。目前公开上市的中药类抗肿瘤药物，多以攻伐为治疗原则，这种降低人体免疫功能的做法，不仅会损伤人体的正气，对体质差的患者也不适宜。
原来发明人通过对“内因三环”的研究，根据“养正积自消”的理论，研发出了林氏养正消积丹，该林氏养正消积丹以补为主，通过动员和强化机体防御技能，改变癌细胞在体内的生长环境，从而抑制肿瘤细胞的生在，再加强机体的免疫系统的能力，从而加强多肿瘤细胞的修正作用，在针对脑力劳动者的癌症预防和癌症治疗方面有良好的治疗效果。但是，该方主要通过益气健脾来调节或改善癌症患者的病情，需要配合手术、西药或其他中药复方制剂(复方木鸡冲剂)使用，才能达到较好的治疗癌症的目的。因此，需要开发出一种疗效更为显著的处方，以使其能够单独应用于癌症的临床治疗。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，对现有的林氏养正消积丹的用药进行优化与改进，在此基础上，提供一种可以单独服用、组方针对性强、主治病证较为专一、而且治疗效果显著的养正消积复方制剂。
本发明的另一目的是提供一种养正消积复方制剂的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种养正消积复方制剂，按重量计，由以下原料制成：枸杞10～20g，党参 10～20g，杜仲6～15g，肉豆蔻1～10g，黄芪20～30g，柴胡12～15g，白芍 10～15g，莪术10～15g，郁金10～15g，大枣20～30g，当归10～20g，猪苓 10～20g，炙甘草6～10g。
优选地，所述的养正消积复方制剂还包括：露蜂房2.4～4.5g，蜈蚣1～5条。露蜂房和蜈蚣与本方中的其他草药联合使用，能够使药物快速地作用于治疗目标，起效快，作用强，在治疗早期能有效控制病情继续恶化。
优选地，所述的养正消积复方制剂，按重量计，由以下原料制成：枸杞15g，党参15g，杜仲10g，肉豆蔻5g，黄芪25g，柴胡12g，白芍12g，莪术12g，郁金13g，大枣25g，当归15g，猪苓15g，炙甘草8g，露蜂房3g，蜈蚣2条。
优选地，所述复方制剂为口服制剂。
优选地，所述复方制剂为缓释制剂。
更优选地，所述口服制剂选自汤剂、酒剂、口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸剂、糖浆剂、合剂、露剂、茶剂。
本发明还提供了前述养正消积复方制剂在制备治疗肿瘤疾病的药物中的应用。
优选地，所述肿瘤疾病为肝癌或肺癌。
本发明的养正消积复方制剂与现有技术相比，具有如下有益效果：
本发明在原药方的基础上，在中医的“养正积自消”理论及多年临床应用经验的指导下对原方用药进行改良，君臣佐使合理搭配，针对由气滞血瘀，瘀血与宿瘀结聚而为的肝癌与肺癌，本发明在治疗上以健脾滋阴、散结消积为主，辅以活血理气、扶正固本，可以有效治疗肝癌和肺癌，组方针对性强、主治病证较为专一。本发明可以单独使用，而且疗效高，无毒副作用，与原方用药相比，在给药剂量相同的情况下，本发明对肝癌和肺癌的治疗效果更佳，具有良好的临床应用前景。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1
(1)药物处方：一种养正消积复方制剂，按重量计，它是由以下原料制成：
枸杞20g，党参10g，杜仲15g，肉豆蔻1g，黄芪30g，柴胡12g，白芍 15g，莪术10g，郁金15g，大枣20g，当归20g，猪苓10g，炙甘草10g。
(2)其制备方法如下：
S1.按照上述配比选取原料，放入超微粉碎机制备纳米粉剂；
S2.将步骤S1的纳米粉剂进行超声混合10min，得到原料药的混合物；
S3.向原料药的混合物中加入8倍量75％乙醇溶液浸泡12h，加热回流提取 3次，每次1h；
S4.合并提取液，50℃减压浓缩至需要的浓度，得到原料药的浓缩液，备用；
S5.按相应生产工艺将步骤S4的浓缩液制成胶囊剂。
典型病例：王某某，男，62岁，因脘腹胀满，肝区隐痛，嗳气不适，食欲不振，肢倦乏力入院就诊。检查显示：肝肋下1.5cm，剑突下8cm，质较硬，表面不平，硬结节约6×3cm，稍有压痛。脾脏未触及。左锁骨上淋巴结微扪及。腹水阴性。超声波检查，肝肋下吸气时2cm，剑突下8cm，脐上7cm，肝区波形较密、微小波。甲胎蛋白(AFP)1280ng/mL(RIA)，谷丙转氨酶＞40单位，乙肝表面抗原(HBsAg)阴性(－)。诊断为原发性肝癌。来诊时舌苔黄腻，舌质偏暗，脉弦。服用本实施例的药物3个月后，肝区肿块明显缩小，脘腹胀满消失，胃纳亦佳。但患者仍肢倦乏力，舌苔薄腻，舌质偏暗，脉弦。根据病情继续服用一年后复查，肝脏同位素扫描：未见明显占位性病变，甲胎蛋白(AFP)30ng/mL。肝波：较密微波。随访2年未见复发。
实施例2
按上述方法制备的养正消积复方制剂，其中第一步，各原料的重量配比如下：
枸杞10g，党参20g，杜仲6g，肉豆蔻10g，黄芪20g，柴胡15g，白芍 10g，莪术15g，郁金10g，大枣30g，当归10g，猪苓20g，炙甘草6g。
典型病例：陈某某，男，52岁。右上腹胀痛、恶心两个月，大便常燥结。入院检查，肝大肋下10cm，剑突下10cm，质硬，结节状。身体进行性消瘦。入院检查三次AFP均为阳性，诊断为继发性肝癌。入院时，舌淡苔薄白，脉沉细弦，为脾肾阳虚寒瘀毒结的典型症状。服用本实施例的药物1个月后，肝大明显缩小，继续服用3个月，一切不适症状消失，能参加农业劳动。过两个月后复诊，肝基本触不到，检查AFP阴性，肝扫描未见异常。随访2年未见复发。
实施例3
按上述方法制备的养正消积复方制剂，其中第一步，各原料的重量配比如下：
枸杞15g，党参15g，杜仲10g，肉豆蔻5g，黄芪25g，柴胡12g，白芍 12g，莪术12g，郁金13g，大枣25g，当归15g，猪苓15g，炙甘草8g，露蜂房3g，蜈蚣2条。
典型病例：李某某，女，65岁，患者感冒后咳血。家人次日带其体检时， CT检查发现肺部有一3cm×4cm圆形阴影，诊断为肺癌。服用本实施例的复方制剂25天后，咳血停止，感冒症状消失。后继续服用一年，再次复查，CT检查结果为肺部阴影缩小，病情稳定，病人自我感觉良好，精神转佳，生活自如。随访2年未见复发。
由实施例1、实施例2和实施例3可知，与原来的林氏养正消积丹比较，在不配合其他药物使用的情况下，采用本发明单独治疗，也能明显缓解和改善肝癌及肺癌患者的病情，对肝癌和肺癌有较好的治疗效果，说明本发明疗效显著，可以单独使用。
实施例4药效学评价
1、对小鼠肝癌H22细胞的影响
收集接种有鼠源肝癌H22细胞的小鼠腹水，生理盐水稀释2×106细胞/ml，将H22细胞悬液接种于雄性昆明种小鼠右腋下皮下组织内，0.2mL/只，注射瘤细胞后，每日观察小鼠状态。选取成瘤小鼠50只随机分为5组，每组10只。分别为阴性对照组(生理盐水，0.9％NaCl水溶液)、阳性对照组(原林氏养正消积丹组)、实施例1组、实施例2组、实施例3组，将原林氏养正消积丹、实施例1、实施例2和实施例3的各原料药分别按实施例1的方法配制成生药含量为 0.2g/mL的浓缩液，然后以0.3mL/只的剂量灌胃给药，每天1次，共30天，记录各组肿瘤体积变化情况如下(表1)。
表1肝癌H22细胞瘤小鼠肿瘤体积变化情况
由实验结果可知，实施例1、实施例2和实施例3的养正消积处方均能够有效抑制肝癌H22细胞瘤小鼠肿瘤组织的生长，并且比原林氏养正消积丹(阳性对照组)具有更好的疗效，其中实施例3的抑制生长效果最佳。
2、对人体肿瘤细胞的影响
采用MTT法测定本发明上述三个实施例及原林氏养正消积丹(阳性对照组) 对人肝癌细胞Huh7和HepG2、人肺癌细胞A549的半数抑制浓度(IC50)的影响。具体步骤如下：
S11.配制培养液：悬浮细胞：RPMI-1640培养粉一袋，新生牛血清100mL，青霉素溶液0.5mL，链霉素溶液0.5mL，加三蒸水溶解后，用5.6％的NaHCO3溶液调PH值至7.2，最后定容至1000mL。过滤灭菌。贴壁细胞：同上，再加入NaHCO3 2.00g，HEPES 2.38g。
S12.配制PBS缓冲液：NaCl 8.00g，KCl 0.40g，Na2HPO4·12H2O 0.06g， KH2PO40.06g，NaHCO3 0.35g。高压灭菌。
S13.配制胰蛋白酶液：利用PBS缓冲液配成浓度为0.5％胰蛋白酶液。过滤除菌。
S14.配制实验药物：将原林氏养正消积丹(阳性对照组)、实施例1、实施例2、实施例3的各原料药分别按实施例1的方法配制成生药含量为0.2g/mL的浓缩液，然后分别加入少量的DMSO配成储备液(DMSO在培养液中的浓度不宜过大，加药后的每孔细胞悬液中DMSO的终浓度一般不超过0.05％～0.1％)。储备液保存于-20℃冰箱中备用。
S15.人肝癌细胞Huh7和HepG2、人肺癌细胞A549的培养：均为贴壁生长细胞，常规培养于RPMI-1640培养液内(含10％小牛血清、100U/mL链霉素)，置37℃、5％CO2培养箱中培养，每隔3天传代一次。传代时先弃去原培养液，再用PBS缓冲液洗涤；然后用0.5％胰蛋白酶消化1min，加入少量新鲜培养液终止消化；吹打，使贴壁细胞从培养瓶壁上脱落下来；移取适量至新鲜培养瓶中，再补充新鲜培养液至原体积(培养液体积约为培养瓶容量的1/10)。
S16.细胞孵育：取对数生长期的肿瘤细胞，调细胞悬液浓度为1.5×105个 ml-1。在96孔培养板中每孔加细胞悬液100μL，置37℃、5％CO2培养箱中培养 24h。培养24h后，分别按设计加入药液。
S17.加药：将测试药液按照最终浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设6个平行孔。实验分为药物试验组(分别加入不同浓度的测试药)、对照组(只加培养液和细胞，不加测试药)和空白组(只加培养液，不加细胞和测试药)。将加药后的96孔板置于37℃、5％CO2培养箱中培养48h。阳性对照药物的活性按照测试样品的方法测定。
S18.存活细胞的测定：在培养了48h后的96孔板中，每孔加MTT 40μL (用PBS缓冲液配成4mg/mL)。在37℃放置4h后，移去上清液。每孔加150 μL DMSO，振荡5min，使蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)溶解。最后，利用酶标仪在570nm波长处检测各孔的光密度。
S19.抑制率的计算：细胞生长的抑制率按照下列公式计算：
生长抑制率＝(1－存活率)×100％＝[1－(OD1－OD3)/(OD2－OD3)]×100％
OD1表示测试药物组的平均光密度，OD2表示对照组的平均光密度，OD3表示空白组的平均光密度。半数抑制浓度(IC50)定义为当50％的肿瘤细胞存活时的药物浓度。根据测定的光密度，制作细胞生长抑制率的标准曲线，在标准曲线上求得其对应的药物浓度。测得的IC50见表2示。
表2本发明对肿瘤细胞的抑制IC50值
结果表明：本发明的养正消积复方药物和原林氏养正消积丹药物对人肝癌细胞Huh7和HepG2都有不同程度的抑制作用，但是本发明的养正消积复方药物对人肝癌细胞Huh7和HepG2的IC50值更低，表明在给药剂量相同的情况下，本发明提供的药物比阳性对照药(原林氏养正消积丹)对人肝癌细胞Huh7和HepG2 的抑制作用更强。并且在本实验中，阳性对照药(原林氏养正消积丹)对人肺癌细胞A549没表现出明显的抑制作用，而本发明提供的药物对人肺癌细胞A549 显示明显的抑制作用，说明与原林氏养正消积丹相比，本发明提供的药物对肝癌和肺癌细胞的抑制效果更为显著。
综上所述，本发明可以单独使用，而且疗效高，无毒副作用，与原方用药相比，在给药剂量相同的情况下，本发明对肝癌和肺癌的治疗效果更佳，具有良好的临床应用前景。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种养正消积复方制剂，其特征在于，按重量计，由以下原料制成：枸杞10～20 g，党参10～20 g，杜仲6～15 g，肉豆蔻1～10 g，黄芪20～30 g，柴胡12～15 g，白芍10～15 g，莪术10～15 g，郁金10～15 g，大枣20～30 g，当归10～20 g，猪苓10～20 g，炙甘草6～10g。
2.根据权利要求1所述的养正消积复方制剂，其特征在于，按重量计，还包括以下原料：露蜂房2.4～4.5 g，蜈蚣1～5条。
3.根据权利要求2所述的养正消积复方制剂，其特征在于，按重量计，由以下原料制成：枸杞15 g，党参15 g，杜仲10 g，肉豆蔻5 g，黄芪25 g，柴胡12 g，白芍12 g，莪术12 g，郁金13 g，大枣25 g，当归15 g，猪苓15 g，炙甘草8 g，露蜂房3 g，蜈蚣2条。
4.根据权利要求1所述的养正消积复方制剂，其特征在于，所述复方制剂为口服制剂。
5.根据权利要求1所述的养正消积复方制剂，其特征在于，所述复方制剂为缓释制剂。
6.根据权利要求4所述的养正消积复方制剂，其特征在于，所述口服制剂选自汤剂、酒剂、口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸剂、糖浆剂、合剂、露剂、茶剂。
7.权利要求1至6任一项所述的养正消积复方制剂在制备治疗肿瘤疾病方面的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤疾病为肝癌或肺癌。
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