CN104857436B - 具有抗肝癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物及其制备方法和其应用，该中药复方组合物由醋柴胡6～18份，制香附10～30份，白花蛇舌草20～60份，八月札10～30份，山慈菇15～45份，莪术10～30份制成。实验表明，本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，用药严谨，配比科学合理，具有抗癌解毒、疏肝解郁，止疼等功效，对肝癌具有强的杀灭作用，应用范围广泛；并可提高肿瘤患者免疫力，延长生存质量，且安全性高，毒副作用低。同时本发明提供的制备方法，质量稳定，提取有效成分含量高，可操作性强，适合工业化大生产。

Description

具有抗肝癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种中药，具体涉及一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用。

背景技术

肝癌(liver cancer)是指发生于肝脏的恶性肿瘤，包括原发性肝癌和转移性肝癌两种，原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，根据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌按细胞分型可分为肝细胞型肝癌、胆管细胞型肝癌及混合型肝癌。按肿瘤的形态可分为结节型、巨块型和弥漫型。

肝癌是死亡率仅次于胃癌、食道癌的第三大常见恶性肿瘤，初期症状并不明显，晚期主要表现为肝痛、乏力、消瘦、黄疸、腹水等症状。临床上一般采取西医的手术、放化疗与中药结合疗法。临床上目前治疗肿瘤的药物主要有化学药品，但由于化疗药物毒性大，在杀死肿瘤细胞的同时也无选择性的杀死白细胞、淋巴细胞等人体自身免疫细胞，导致病人常常由于因自身免疫能力低下并发感染，患者使用不良反应大，且疗程长，费用高，在临床使用中有较大的局限性。

中医药在治疗肿瘤方面具有独特的优势，以中药为代表的天然类药物具有毒副作用小、作用靶点多样、耐受性好等特点，在治疗肿瘤方面愈来愈受到重视。但是目前报道的抗肝癌药物用药量较大，杂质成分较多，疗效不明显。

因此，研究开发一种抗肝癌效果好，用药量少，并且不良反应低的抗肝癌中成药具有重要意义。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种配比科学合理，疗效确切，临床使用安全，不良反应低的具有抗肝癌活性的中药复方组合物。本发明另一个目的是提供该具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法及其在制备治疗肝癌疾病药物中的应用。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：

醋柴胡6～18份，制香附10～30份，白花蛇舌草20～60份，八月札10～30份，山慈菇15～45份，莪术10～30份。

作为优选方案，以上所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡6～12份，制香附10～20份，白花蛇舌草20～40份，八月札10～20份，山慈菇15～30份，莪术10～20份。

作为更加优选方案，以上所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡6份，制香附10份，白花蛇舌草20份，八月札10份，山慈菇15份，莪术10份。

本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，将各原料药的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取莪术和制香附，加入药材8～16倍量的水，采用水蒸气蒸馏法提取1～3小时，收集挥发油；

(2)按重量份数取醋柴胡，白花蛇舌草，八月札和山慈菇，加入步骤(1)水蒸气蒸馏后的莪术和制香附药渣，加入总药材重量6～12倍体积量的乙醇，回流或者连续回流提取2～3次，每次1～3小时，合并提取液，50～70摄氏度下减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～70％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为50～70％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(3)取步骤(1)得到的挥发油，步骤(2)得到的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

将本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成口服液时,将各原料的提取物加蒸馏水溶解，过滤，加入糖浆，调节pH值,制成口服液。

将本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成片剂时，把各原料的提取物和乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成胶囊剂时把各原料的提取物和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。

本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成颗粒剂时，把各原料的提取物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。

作为优选方案，以上所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，步骤(1)所述的大孔吸附树脂为D101树脂。

本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物在制备抗肝癌药物中的应用。

本发明提供的具有抗肺癌活性的中药组合物，醋制柴胡，性味：苦，辛，微寒，归经：归肝经、胆经。功效：解表退热，疏肝解郁，升举阳气。

制香附，味辛、微苦、甘，性平。功效：疏肝理气，调经止痛。主治肝气郁滞，胸闷胁痛，胃病，腹痛。

白花蛇舌草苦甘，寒。入心经、肝经、脾经。具有清热解毒；利湿作用，具有治疗肺热喘咳；咽喉肿痛；肠痈；疖肿疮疡；毒蛇咬伤；热淋涩痛；水肿；痢疾；肠炎；湿热黄疸；癌肿功效。

八月札性味：味苦，性平。归经：归肝、胃经。功效：舒肝理气，活血止痛，除烦利尿。主治：治肝胃气痛，烦渴，赤白痢疾，腰痛，胁痛。

山慈菇性味：味甘；微辛；性寒；归肝经；胃经；肺经。具有清热解毒；消肿散结作用，具有治疗痈疽恶疮；瘰疬结核；咽痛喉痹功效。

莪术味辛、苦，温。归肝、脾经。具有破血行气，消积止痛，祛风除湿，消肿止痛功效。用于风湿痛，头风痛，胸胁痛，腹泻痛；外用治跌打损伤，瘀血肿痛治疗。

以上诸药合用具有很好的抗癌解毒、疏肝理气、止疼等功效，具有很好的抑制肝癌细胞生长和能促进肿瘤细胞凋亡的作用。

有益效果：本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物和现有技术相比具有以下优点：

1、本发明根据中医药理论和肝部肿瘤疾病的发病特点，采用辨证论治的理论进行中药组方筛选，提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物配比科学合理，用药严谨，具有很好的抗癌解毒、疏肝理气、止疼等功效。实验结果表明，本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物具有很好的抑制肝癌肿瘤细胞生长和能促进肝癌肿瘤细胞凋亡的作用，疗效确切可靠。

2、本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物具有扶正培本和免疫功能促进作用，可促进肿瘤坏死因子(INF)的产生，发挥多靶点，多器官治疗肿瘤的作用，可减少肿瘤患者痛苦，延长生存期，提高患者生存质量的作用，且经长期实验研究表明，本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物安全性高，毒副作用低。

3、本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的提取物可以方便和药学载体制备成多种剂型，临床上服用方便；同时本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，可操作性强，尤其是根据各味药物有效成分化学性质设计提取精制工艺，得到的提取物有效成分含量高，杂质少，且具有吸收快、能迅速发挥药效，临床上用药量少等优点，且工艺稳定，适合工业化大生产。

具体实施方式：

下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施列1

1.一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡6克，制香附10克，白花蛇舌草20克，八月札10克，山慈菇15克，莪术10克。

2.本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取莪术10克和制香附10克，加入药材15倍量的水，采用水蒸气蒸馏法提取2小时，收集挥发油；

(2)按重量份数取醋柴胡6克，白花蛇舌草20克，八月札10克，山慈菇15克，加入步骤(1)水蒸气蒸馏后的莪术和制香附药渣，加入总药材重量10倍体积量的乙醇，回流提取2次，每次3小时，合并提取液，50～70摄氏度下减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～70％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为50～70％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(3)取步骤(1)得到的挥发油，步骤(2)得到的提取物，加入乳糖，玉米淀粉混合均匀，加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。(批号：001)

实施列2

1.一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡12克，制香附20克，白花蛇舌草40克，八月札20克，山慈菇30克，莪术20克。

2.本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取莪术20克和制香附20克，加入药材12倍量的水，采用水蒸气蒸馏法提取2小时，收集挥发油；

(2)按重量份数取醋柴胡12克，白花蛇舌草40克，八月札10克，山慈菇30克，加入步骤(1)水蒸气蒸馏后的莪术和制香附药渣，加入总药材重量12倍体积量的乙醇，连续回流提取2次，每次2小时，合并提取液，50～70摄氏度下减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～70％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为50～70％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(3)取步骤(1)得到的挥发油，步骤(2)得到的提取物，然后加入稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。(批号：002)

实施列3

1.一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡18克，制香附30克，白花蛇舌草60克，八月札30克，山慈菇45克，莪术30克。

2.本发明所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取莪术30克和制香附30克，加入药材8倍量的水，采用水蒸气蒸馏法提取3小时，收集挥发油；

(2)按重量份数取醋柴胡18克，白花蛇舌草60克，八月札30克，山慈菇45克，加入步骤(1)水蒸气蒸馏后的莪术和制香附药渣，加入总药材重量8倍体积量的乙醇，连续回流提取3次，每次2小时，合并提取液，50～70摄氏度下减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～70％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为50～70％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(3)取步骤(1)得到的挥发油，步骤(2)得到的提取物，然后和乳糖，玉米淀粉混合均与，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。(批号：003)

实施列4抗肝癌药理实验

(1)对裸鼠体内人肝癌(SMMC-7451)细胞的抑制作用

实验方法：制备SMMC-7451细胞悬液，调整细胞浓度，每鼠右前腋皮下接种SMMC-7451细胞5×10⁶个/0.2ml，共接种20只，随机分成治疗组(本发明实施例1提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，批号001.灌胃给药，2g/kg)和空白组(等容量生理盐水)，每组10只，24小时后，开始用药，每天一次，连续24天，停药后，处死动物，观察肿瘤生长情况并剖取瘤组织称重，具体实验结果见表1。

表1对裸鼠体内SMMC-7451细胞的抑制作用

(2)体外抗肝癌活性测试

细胞株：人肝癌(SMMC-7451)；96孔板购自Costar公司；RMPI1640培养基购自Gibco公司；DMEM培养基购自Gibco公司；新生牛血清购自杭州四季青公司；噻唑蓝(MTT)和DMSO购自Amresco公司。

以下实施例所使用的实验仪器如下：

实验仪器：超净工作台(苏州净化型号SW-CJ-IFD)，CO₂培养箱(SANYO型号：XD-101)，酶标仪BIO-RAD(Model NO.550Serial NO.16971)。

以下实施例所使用的实验方法如下：

实验方法：使用改良MTT法对本发明实施例1制备得到的中药组合物进行体外抗人肝癌细胞实验：将人肝癌(SMMC-7451)用胰酶进行消化、计数、制成浓度为5×10⁴个/ml的细胞悬液。将96孔板中每孔加入100μl细胞悬液(每孔5×10³个细胞)，然后置于37℃，5％CO₂培养箱中培养24小时；用非完全培养基稀释药物至所需的不同梯度浓度，每孔加入100μL相应的含药培养基，同时设立阴性对照组，溶媒对照组和阳性对照组，再将96孔板置于37℃，5％CO₂培养箱中培养72小时。然后每孔加入20μL MTT(5mg/ml)，继续培养4小时，终止培养，弃去培养基，每孔加入150μL DMSO溶解，摇床10分钟轻轻混匀。在λ＝4570nm、620nm两波长下用酶标仪检测每孔的吸光度即OD值，以各复孔的平均值作为该组细胞的OD值，计算各药物的抑制率。

实验结果显示本发明实施例1制备得到的中药组合物，对人肝癌(SMMC-7451)具有较强的抑制作用，各剂量组呈现了较好的量效关系。实验结果如表2所示。

表2对人肝癌(SMMC-7451)的抑制作用结果

由以上实验结果表明：本发明提供的具有抗人肝癌活性的中药组合物对人肝癌裸鼠体内移植具有明显的抑制作用，体外具有明显抑制人肝癌细胞生长的作用。表明本发明提供的具有抗人肝癌活性的中药组合物具有很强的抗人肝癌的作用，可以用于肝癌疾病的治疗。

实施列5具有抗肝癌活性的中药复方组合物对免疫调节作用的实验

(1)对小鼠IgA、IgG、IgM含量的影响

实验方法：取ICR小白鼠30只，体重18～22g，随机分为正常对照组，荷瘤对照组和治疗组，常规接种S180肉瘤，接种后24小时，治疗组灌服本发明具有抗肝癌活性的中药复方组合物(批号001)0.3ml/只(2g/kg)，第15天小白鼠眼球采血。测定IgA、IgG、IgM含量，具体实验结果见表3。

表3对小鼠IgA、IgG、IgM含量的影响(mg/dl)

*P<0.01(与正常对照组比较)**P<0.05(与荷瘤对照组比较)

由以上表3的实验结果表明：荷瘤小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量明显低于正常对照小鼠；本发明具有抗肝癌活性的中药复方组合物可以提高荷瘤小鼠已经低下的IgA、IgG、IgM含量，表明本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物具有免疫促进作用，可以提高肿瘤患者自身的免疫功能，从而有利于肿瘤患者生活质量的改善和自身抗肝癌作用。

本发明根据中医药理论，根据肝癌疾病的发病特点，采用辨证论治的理论进行配比组方，用药严谨科学，通过以上实验结果表明，本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物具有明显的抑制肿瘤的生长和转移作用，促使肿瘤细胞的凋亡，并具有免疫力促进功效，且无明显毒副作用，说明本发明提供的具有抗肝癌活性的中药复方组合物可以用于制备抗肝癌新药物。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种具有抗肝癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：

醋柴胡6～18份，制香附10～30份，白花蛇舌草20～60份，八月札10～30份，山慈菇15～45份，莪术10～30份。

2.根据权利要求1所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡6～12份，制香附10～20份，白花蛇舌草20～40份，八月札10～20份，山慈菇15～30份，莪术10～20份。

3.根据权利要求2所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：醋柴胡6份，制香附10份，白花蛇舌草20份，八月札10份，山慈菇15份，莪术10份。

4.根据权利要求1至3任一项所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物，其特征在于，将各原料药的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

5.权利要求1至3任一项所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1) 按权利要求1至3任一项所述的重量份数取莪术和制香附，加入药材8～16倍量的水，采用水蒸气蒸馏法提取1～3小时，收集挥发油；

（2）按权利要求1至3任一项所述的重量份数取醋柴胡，白花蛇舌草，八月札和山慈菇，加入步骤（1）水蒸气蒸馏后的莪术和制香附药渣，加入总药材重量6～12倍体积量的乙醇，回流或者连续回流提取2～3次，每次1~3小时，合并提取液，50～70摄氏度下减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20%～70%乙醇洗脱；收集合并体积浓度为50～70%的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(3)取步骤(1)得到的挥发油，步骤(2)得到的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

6.权利要求5所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述的大孔吸附树脂为D101树脂。

7.权利要求1至3任一项所述的具有抗肝癌活性的中药复方组合物在制备抗肝癌药物中的应用。