CN104840716B - 具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物及其制备方法和其应用，该中药复方组合物由漏芦15～45份，天葵子15～45份，醋柴胡6～18份，天冬10～30份，白毛夏枯草15～45份，八月札10～30份制成。实验结果表明，本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，用药严谨，配比科学合理，具有抗癌解毒、化痰祛瘀、益气养阴等功效，体内外对乳腺癌均具有强的杀灭作用；并可提高肿瘤患者免疫力，改善生存质量，且安全性高，毒副作用低。同时本发明提供的制备方法，质量稳定，提取有效成分含量高，可操作性强，适合工业化大生产。

Description

具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种中药，具体涉及一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物及其制备方法和应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，据资料统计，发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10％，在妇女仅次于子宫癌，它的发病常与遗传有关，以及40—60岁之间，绝经期前后的妇女发病率较高。通常发生在乳房腺上皮组织的恶性肿瘤。是一种严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一。临床上目前治疗乳腺癌的药物主要有化学药品，但由于化疗药物毒性大，在杀死肿瘤细胞的同时也无选择性的杀死白细胞、淋巴细胞等人体自身免疫细胞，导致病人常常由于因自身免疫能力低下并发感染，患者使用不良反应大，且疗程长，费用高，在临床使用中有较大的局限性。

中医药在治疗肿瘤方面具有独特的优势，以中药为代表的天然类药物具有毒副作用小、作用靶点多样、耐受性好等特点，在治疗肿瘤方面愈来愈受到重视。但是目前报道的抗乳腺癌中药复方用药量较大，杂质成分较多，疗效不明显。

因此，研究开发一种抗乳腺癌效果好，用药量少，并且不良反应低的抗乳腺癌中成药具有重要意义。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种配比科学合理，疗效确切，临床使用安全，不良反应低的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物。本发明另一个目的是提供该具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法及其在制备治疗乳腺癌疾病药物中的应用。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：

漏芦15～45份，天葵子15～45份，醋柴胡6～18份，天冬10～30份，白毛夏枯草15～45份，八月札10～30份。

作为优选方案，以上所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦15～30份，天葵子15～30份，醋柴胡6～12份，天冬10～20份，白毛夏枯草15～30份，八月札10～20份。

作为更加优选方案，以上所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦15份，天葵子15份，醋柴胡6份，天冬10份，白毛夏枯草15份，八月札10份。

本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，将各原料药的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取漏芦，天葵子，醋柴胡，天冬，白毛夏枯草，八月札，加入总药材重量6～12倍体积量的乙醇，超声，回流或者连续回流提取2～3次，每次1～3小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～60％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为40～60％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(2)取步骤(1)得到的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

将本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成口服液时,将各原料的提取物加蒸馏水溶解，过滤，加入糖浆，调节pH值,制成口服液。

将本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成片剂时，把各原料的提取物和乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成胶囊剂时把各原料的提取物和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。

本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的各原料的提取物制成颗粒剂时，把各原料的提取物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。

作为优选方案，以上所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，步骤(1)所述的大孔吸附树脂为D101树脂。

本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物在制备抗乳腺癌药物中的应用。

本发明提供的具有抗肺癌活性的中药组合物，根据中医药理论辩证论治筛选组方，方中，漏芦性味：味苦；性寒。归经：归胃经；大肠经；肝经。功效：清热解毒；活血通乳。主治：疮疖肿毒；乳痈；肋腺炎；淋马结结核；痔瘘；疥癣痒疹；目赤肿痛；痢疾；蛔早腹痛；风湿痹痛；闪腰岔气；跌打损伤；产后乳汁不下。

天葵子性味：甘苦，寒；入脾，小肠、膀胱三经。功效：清热解毒，消肿散结，利尿通淋。主治：痈肿，瘰疬，疔疮，淋浊，带下，肺虚咳嗽，疝气，癫痫，小儿惊风，痔疮，跌打损伤。毒蛇咬伤。

醋柴胡味苦，微寒。归肝、胆经。具有和解表里，疏肝，升阳高效。用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子官脱垂，脱肛等症。

方中天门冬性味：甘、苦、寒。归经：归肺经、肾经、胃经、大肠经。功效：养阴生津，润肺清心。主治：用于肺燥干咳、虚劳咳嗽、津伤口渴、心烦失眠、内热消渴、肠燥便秘、败毒抗癌，清势化痰、滋阴润燥。

白毛夏枯草性味：苦甘，寒。归经：入肺经。功能：清肺止咳，利胆退黄，凉肝息风，软坚散结。

主治：治气管炎，吐血，衄血，赤痢，淋病，咽喉肿痛，疔疮，痈肿，跌打损伤。

八月札性味：味苦，性平。归经：归肝、胃经。功效：舒肝理气，活血止痛，除烦利尿。主治：治肝胃气痛，烦渴，赤白痢疾，腰痛，胁痛。

以上诸药合用具有很好的抗癌解毒、化痰祛瘀和益气养阴等功效，具有很好的防治肝郁气滞，痰毒互结、气阴两虚导致的乳腺肿瘤疾病的作用。

有益效果：本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物和现有技术相比具有以下优点：

1、本发明根据中医药理论和乳腺肿瘤疾病的发病特点，采用辨证论治的理论进行中药组方筛选，提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物配比科学合理，用药严谨，具有很好的抑制乳腺癌肿瘤细胞生长和能促进乳腺癌肿瘤细胞凋亡的作用，疗效确切可靠。

2、本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物具有扶正培本和免疫功能促进作用，可促进肿瘤坏死因子(INF)的产生，发挥多靶点，多器官治疗肿瘤的作用，可减少肿瘤患者痛苦，延长生存期，且经长期实验研究表明，本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物安全性高，毒副作用低。

3、本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的提取物可以方便和药学载体制备成多种剂型，临床上服用方便；同时本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，可操作性强，尤其是根据各味药物有效成分化学性质设计提取精制工艺，得到的提取物有效成分含量高，杂质少，且具有吸收快、能迅速发挥药效，临床上用药量少等优点，且工艺稳定，适合工业化大生产。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施列1

1.一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦15克，天葵子15克，醋柴胡6克，天冬10克，白毛夏枯草15克，八月札10克。

2.本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取漏芦15克，天葵子15克，醋柴胡6克，天冬10克，白毛夏枯草15克，八月札10克，加入总药材重量12倍体积量的乙醇，超声提取3次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～60％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为40～60％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(2)取步骤(1)得到的提取物，加入乳糖，玉米淀粉混合均匀，加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。(批号：001)

实施列2

1.一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦30克，天葵子30克，醋柴胡12克，天冬20克，白毛夏枯草30克，八月札20克。

2.本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取漏芦30克，天葵子30克，醋柴胡12克，天冬20克，白毛夏枯草30克，八月札20克，加入总药材重量10倍体积量的乙醇，连续回流提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～60％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为40～60％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(2)取步骤(1)得到的提取物，然后加入稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。(批号：002)

实施列3

1.一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦45克，天葵子45克，醋柴胡24克，天冬30克，白毛夏枯草35克，八月札30克。

2.本发明所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)按重量份数取漏芦45克，天葵子45克，醋柴胡24克，天冬30克，白毛夏枯草35克，八月札30克，加入总药材重量12倍体积量的乙醇，回流提取3次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～60％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为40～60％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(2)取步骤(1)得到的提取物，然后和乳糖，玉米淀粉混合均与，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。(批号：003)

实施列4抗乳腺癌药理实验

(1)对裸鼠体内人乳腺癌(MCF-7)细胞的抑制作用

实验方法：制备人乳腺癌MCF-7细胞悬液，调整细胞浓度，每鼠右前腋皮下接种人乳腺癌MCF-7细胞5×10⁶个/0.2ml，共接种20只，随机分成治疗组(本发明实施例1提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，批号001.灌胃给药，2g/kg)和空白组(等容量生理盐水)，每组10只，24小时后，开始用药，每天一次，连续24天，停药后，处死动物，观察肿瘤生长情况并剖取瘤组织称重，具体实验结果见表1。

表1 对裸鼠体内人乳腺癌(MCF-7)细胞的抑制作用

(2)体外抗乳腺癌活性测试

细胞株：人乳腺癌(MCF-7)细胞；96孔板购自Costar公司；RMPI1640培养基购自Gibco公司；DMEM培养基购自Gibco公司；新生牛血清购自杭州四季青公司；噻唑蓝(MTT)和DMSO购自Amresco公司。

以下实施例所使用的实验仪器如下：

实验仪器：超净工作台(苏州净化型号SW-CJ-IFD)，CO₂培养箱(SANYO型号：XD-101)，酶标仪BIO-RAD(Model NO.550Serial NO.16971)。

以下实施例所使用的实验方法如下：

实验方法：使用改良MTT法对本发明实施例1制备得到的中药组合物进行体外抗人乳腺癌细胞实验：将人乳腺癌(MCF-7)用胰酶进行消化、计数、制成浓度为5×10⁴个/ml的细胞悬液。将96孔板中每孔加入100μl细胞悬液(每孔5×10³个细胞)，然后置于37℃，5％CO₂培养箱中培养24小时；用非完全培养基稀释药物至所需的不同梯度浓度，每孔加入100μL相应的含药培养基，同时设立阴性对照组，溶媒对照组和阳性对照组，再将96孔板置于37℃，5％CO₂培养箱中培养72小时。然后每孔加入20μL MTT(5mg/ml)，继续培养4小时，终止培养，弃去培养基，每孔加入150μL DMSO溶解，摇床10分钟轻轻混匀。在λ＝4570nm、620nm两波长下用酶标仪检测每孔的吸光度即OD值，以各复孔的平均值作为该组细胞的OD值，计算各药物的抑制率。

实验结果显示本发明实施例1制备得到的中药组合物，对人乳腺癌(MCF-7)具有较强的抑制作用，各剂量组呈现了较好的量效关系。实验结果如表2所示。

表2 对人乳腺癌(MCF-7)的抑制作用结果

由以上实验结果表明：本发明提供的具有抗人乳腺癌活性的中药组合物对人乳腺癌裸鼠体内移植具有明显的抑制作用，体外也具有明显抑制人乳腺癌细胞生长的作用。表明本发明提供的具有抗人乳腺癌活性的中药组合物具有很强的抗人乳腺癌的作用，可以用于乳腺癌疾病的治疗。

实施列5具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物对免疫调节作用的实验

(1)对小鼠IgA、IgG、IgM含量的影响

实验方法：取ICR小白鼠36只，体重18～22g，随机分为正常对照组，荷瘤对照组和治疗组，常规接种S180肉瘤，接种后24小时，治疗组灌服本发明具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物(批号001)0.3ml/只(2g/kg)，第15天小白鼠眼球采血。测定IgA、IgG、IgM含量，具体实验结果见表3。

表3 对小鼠IgA、IgG、IgM含量的影响(mg/dl)

*P<0.01(与正常对照组比较)**P<0.05(与荷瘤对照组比较)

由以上表3的实验结果表明：荷瘤小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量明显低于正常对照小鼠；本发明具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物可以明显提高荷瘤小鼠的IgA、IgG、IgM含量，表明本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物具有免疫促进作用，可以提高肿瘤患者自身的免疫功能，从而有利于肿瘤患者生活质量的改善和自身抗乳腺癌作用。

本发明根据中医药理论，根据乳腺癌疾病的发病特点，采用辨证论治的理论进行筛选组方及其用量，用药严谨科学，通过以上实验结果表明，本发明提供的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物具有明显的抑制乳腺肿瘤的生长和转移作用，促使肿瘤细胞的凋亡，并具有免疫力促进功效，且无明显毒副作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：

漏芦15～45份，天葵子15～45份，醋柴胡6～18份，天冬10～30份，白毛夏枯草15～45份，八月札10～30份。

2.根据权利要求1所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦15～30份，天葵子15～30份，醋柴胡6～12份，天冬10～20份，白毛夏枯草15～30份，八月札10～20份。

3.根据权利要求2所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，其特征在于，它由下列重量份数的原料药制成：漏芦15份，天葵子15份，醋柴胡6份，天冬10份，白毛夏枯草15份，八月札10份。

4.根据权利要求1至3任一项所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物，其特征在于，将各原料药的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

5.权利要求1至3任一项所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)按权利要求1至3任一项所述的重量份数取漏芦，天葵子，醋柴胡，天冬，白毛夏枯草，八月札，加入总药材重量6～12倍体积量的乙醇，超声、回流或者连续回流提取2～3次，每次1～3小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩物上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，然后依次用体积浓度为20％～60％乙醇洗脱；收集合并体积浓度为40～60％的乙醇洗脱液，浓缩得提取物；

(2)取步骤(1)得到的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂或片剂剂型的药物。

6.权利要求5所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的大孔吸附树脂为D101树脂。

7.权利要求1至3任一项所述的具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物在制备抗乳腺癌药物中的应用。