CN107118358A - 二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 - Google Patents
二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107118358A CN107118358A CN201710378107.3A CN201710378107A CN107118358A CN 107118358 A CN107118358 A CN 107118358A CN 201710378107 A CN201710378107 A CN 201710378107A CN 107118358 A CN107118358 A CN 107118358A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- keratin
- solution
- disulfide bond
- protein
- composite micelle
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 94
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 60
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 60
- 239000000693 micelle Substances 0.000 title claims abstract description 59
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 56
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 claims abstract description 143
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 claims abstract description 143
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 90
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 29
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims abstract description 29
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims abstract description 25
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims abstract description 11
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 56
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 39
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 25
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 23
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 claims description 22
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- 108010013296 Sericins Proteins 0.000 claims description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 12
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 claims description 12
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 11
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 11
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 10
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 10
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 7
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims description 7
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 6
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 3
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical class [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VDQVEACBQKUUSU-UHFFFAOYSA-M disodium;sulfanide Chemical compound [Na+].[Na+].[SH-] VDQVEACBQKUUSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 2
- 238000005375 photometry Methods 0.000 claims description 2
- 229910052979 sodium sulfide Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920000469 amphiphilic block copolymer Polymers 0.000 abstract description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 5
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 abstract description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 abstract description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 10
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- -1 biology Substances 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 2
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N dodecane Chemical compound CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 4-(4-diazoniophenyl)benzenediazonium Chemical compound C1=CC([N+]#N)=CC=C1C1=CC=C([N+]#N)C=C1 HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- UQBOJOOOTLPNST-UHFFFAOYSA-N Dehydroalanine Chemical group NC(=C)C(O)=O UQBOJOOOTLPNST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- DHQUQYYPAWHGAR-UHFFFAOYSA-N dibenzyl 2-aminopentanedioate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)C(N)CCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 DHQUQYYPAWHGAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 244000144992 flock Species 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 238000009991 scouring Methods 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MZSDGDXXBZSFTG-UHFFFAOYSA-M sodium;benzenesulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 MZSDGDXXBZSFTG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 108010001535 sulfhydryl oxidase Proteins 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 230000010148 water-pollination Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
- C08J3/02—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques
- C08J3/03—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques in aqueous media
- C08J3/075—Macromolecular gels
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
- C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L89/00—Compositions of proteins; Compositions of derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2389/00—Characterised by the use of proteins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L2205/00—Polymer mixtures characterised by other features
- C08L2205/02—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group
- C08L2205/025—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group containing two or more polymers of the same hierarchy C08L, and differing only in parameters such as density, comonomer content, molecular weight, structure
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法。要解决的技术问题是人工合成高分子胶束的两亲嵌段共聚物在生物体代谢速率慢，会蓄积，部分对生物体还有一定的毒性。本发明包括以下步骤：制备角蛋白溶液；制备天然高分子蛋白溶液；二硫键重建法制备复合胶束：a、将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的天然高分子蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于15‑25℃的恒温中静置3‑12小时；测定混合溶液中巯基含量的具体数值；c、计算应加入氧化剂的量；氧化剂加入后得到复合蛋白胶束。采用上述技术方案后的本发明具有安全无毒、结构稳定、生物相容好、产物可代谢、价格低廉等突出优点。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备天然蛋白复合胶束的方法，具体涉及一种采用二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法。
背景技术
两亲性嵌段共聚物是既含有亲水基团又含有疏水基团的一类聚合物，其在选择性溶剂中通过自组装可以自发形成由疏水性内核及亲水性外壳所组成的高分子胶束。两亲嵌段共聚物凭借其独特的结构特点及潜在的应用性能日益成为高分子科学领域研究的热点，所制备的胶束在医药、生物、化工、材料等领域有着广泛的应用前景。
两亲嵌段共聚物体系包括合成的高分子和天然的高分子体系。目前实际应用中所使用的两亲共聚物嵌段多为人工合成材料，乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚苄基谷氨酸、聚ε–己内酯等作为疏水片段，另外，聚氧乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等可做为亲水片段。其主要可通过光交联、戊二醛，双重氮联苯胺、甲苯二异氰酸酯， 酶交联方式对所形成的胶束进行固定制备。人工合成的两亲嵌段共聚物在生物体代谢速率慢，会蓄积，部分对生物体还有一定的毒性，其中部分固定方式也会有一定的毒性。因此需要进行深入研究及交叉学科引入新材料进行改良。
天然高分子体系包括各种可作为应用胶束的蛋白，主要包括丝素蛋白、丝胶蛋白、各种角蛋白、胶原蛋白、明胶、酪蛋白、白蛋白、清蛋白等等。这些蛋白质本身就是两亲嵌段共聚物，每一种蛋白质因为所含亲水及疏水性氨基酸的种类及比例的不同而呈现出一定的嵌段特性。但目前天然高分子体系所涉及到的各种蛋白作为应用型胶束，基本上都是某种蛋白单一作为应用胶束，其缺点是形貌不可控，粒径及分布不均一，功能有限。
发明内容
本发明要解决的技术问题是人工合成高分子胶束的两亲嵌段共聚物在生物体代谢速率慢，会蓄积，部分对生物体还有一定的毒性，其中部分固定方式也会有一定的毒性；某种天然高分子蛋白单一作为应用胶束，形貌不可控，粒径及分布不均一，功能有限，提供一种安全无毒、结构稳定、生物相容好、产物可代谢、价格低廉的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用下述技术方案：一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括以下步骤：①制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液；②制备质量分数为0.2-5%的天然高分子蛋白溶液；③二硫键重建法制备复合胶束：a、蛋白混合溶液的制备，将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的天然高分子蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液，使角蛋白达到混合后总蛋白质量的10%以上，同时将溶液的pH值调节至两种蛋白的等电点之间；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于15-25℃的恒温中静置3-12小时；使用巯基试剂DTNB通过分光光度法测定两种蛋白的混合溶液中巯基含量的具体数值；c、通过得到的巯基含量的具体数值计算应加入的氧化剂的量；氧化剂加入后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
所述的角蛋白为动物毛发或动物蹄角水解制备的角蛋白，所述的天然高分子蛋白为丝素蛋白、丝胶蛋白、胶原蛋白、酪蛋白、白蛋白、清蛋白、大豆蛋白中的任意一种。
步骤①所述的角蛋白通过Na2S还原、酸沉淀法制备的，方法为：a、将动物毛发或动物蹄角粉末与Na2S按照质量比4:3加入密闭玻璃容器中，加入动物毛发或蹄角粉末质量20倍的水，避光放置7-10天得到角蛋白溶液；b、在角蛋白溶液中20秒内加入浓盐酸，使角蛋白溶液的pH值在30-60秒间内达到2.0-2.5，使角蛋白迅速沉淀；c、待角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀，并用无氧水洗涤2-4次， 5-20℃真空干燥得到白色角蛋白固体粉末。使用Na2S还原法制备角蛋白溶液的原理如下：
采用Na2S还原法制备角蛋白溶液时，Na2S在溶液中发生水解会生成NaOH和SH―，在碱性条件下，角蛋白双硫键发生断裂，生成过硫半胱氨酸残基和脱氢丙氨酸残基，SH―会与脱氢丙氨酸残基发生加成反应，将其转化为半光氨酸，从而得到带有巯基的可溶性角蛋白溶液。
所述的角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀时：先将角蛋白溶液上层所漂浮的色素蛋白取出，弃去上层液体，离心收集下层的角蛋白沉淀，离心转速为3000转/min。
步骤①所述的制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液的方法为：将角蛋白固体粉末加入水中，逐渐加入固体NaOH，加入量为蛋白质量的5%，并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解。
所述步骤①制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液时加入溶液总质量0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身因二硫键引起的交联。
步骤②所述的制备任意一种质量分数为0.2-5%的天然高分子蛋白溶液的方法为：采取碱溶解法进行溶解，制备天然高分子蛋白溶液。
步骤⑤中加入的氧化剂为H202或NaB03•4H20，加入氧化剂的量为通过分光光度法测定的两种蛋白的混合溶液中所含巯基等摩尔的量，得到二硫键重建后的复合胶束溶液，加入后稳定30min；氧化剂可以将巯基氧化成双硫键，反应式如下：
R-SH+R'-SH=R-S-S-R'
最后将二硫键重建后的复合胶束溶液置在去离子水中进行透析以除去多余的氧化剂，最后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
本发明所述二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法主要利用了还原法制备的角蛋白中的巯基，而角蛋白是制备此种复合胶束必须具备的蛋白。另外的一种蛋白可随意选择，只要混合时不发生聚沉。其中二硫键重建的模式模型如图1所示。从图1可以可出，角蛋白组分通过二硫键重建形成了一个空间共价键网络将其它蛋白质穿插固定在网络之中，从而形成了一个新型蛋白复合体胶束的聚集体。
采用上述技术方案的本发明主要利用可作为应用胶束的各种蛋白与含有巯基的角蛋白通过二硫键重建的方法，定量化二硫键重建，在蛋白质组装的基础上制备二硫键固定的各种混合蛋白胶束。通过二硫键重建的方法制备的天然蛋白复合胶束具有粒径一致、形貌可控、功能多样化的优点，具有潜在的科研及应用价值。另外，还可以通过进一步控制组装浓度、温度、调节组装pH值及蛋白质链段比例等手段，进一步制备出粒径一致，具有统一形貌的球形、柱形、梭形的纳米及非纳米应用型复合胶束，此种方法具有安全无毒、结构稳定、生物相容好、产物可代谢、价格低廉等突出优点，可以应用于药物缓释，高分子生物涂膜制备，环境保护等众多领域。
附图说明
图1：二硫键重建法固定复合胶束的原理图；
图2：二硫键重建法制备的角蛋白与丝胶蛋白复合胶束显微图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作详细说明。
本发明所有实施例中所涉及的角蛋白及其溶液的制备方法都是相同的，其它各种蛋白的蛋白溶液根据其特点制备方法都有所不同，具体操作步骤见以下实施例：
实施例1
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①制备质量浓度为0.5%角蛋白溶液；角蛋白通过Na2S还原、酸沉淀法制备的，方法为：a、将脱脂洗净的羊毛或动物蹄角粉末与Na2S按照质量比4:3加入密闭玻璃容器中，加入羊毛或蹄角粉末质量20倍的水，避光放置10天得到角蛋白溶液；b、在角蛋白溶液中20秒内加入浓盐酸，使角蛋白溶液的pH值在30秒内达到2.0-2.5，使角蛋白迅速沉淀；c、待角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀，并用无氧水洗涤2次， 5℃真空干燥得到白色角蛋白固体粉末；角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀时：先将角蛋白溶液上层所漂浮的色素蛋白取出，弃去上层液体，离心收集下层的角蛋白沉淀，离心转速为3000转/min。制备质量浓度为0.5%角蛋白溶液的方法为：将角蛋白固体粉末加入水中，逐渐加入固体NaOH，加入量为蛋白质量的5%，并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入溶液总质量0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身因二硫键引起的交联。
②制备质量分数为0.2-5%的白蛋白溶液；白蛋白采取碱溶解法进行溶解。
③二硫键重建法制备复合胶束：a、蛋白混合溶液的制备，将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的任意一种天然高分子蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液，使角蛋白达到混合后总蛋白质量的10%以上，同时将溶液的pH值调节至两种蛋白的等电点之间，整个过程不能产生蛋白沉淀；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于15℃的恒温中静置3小时；使用巯基试剂DTNB通过分光光度法测定两种蛋白的混合溶液中巯基含量的具体数值；C、通过得到的巯基含量的具体数值计算应加入的氧化剂的量；氧化剂加入后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。加入的氧化剂为NaB03•4H20，加入氧化剂的量为通过分光光度法测定的两种蛋白的混合溶液中所含巯基等摩尔的量，得到二硫键重建后的复合胶束溶液，加入后稳定30min；最后将二硫键重建后的复合胶束溶液置在去离子水中进行透析以除去多余的氧化剂，最后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
实施例2
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①制备质量浓度为5%角蛋白溶液；角蛋白通过Na2S还原、酸沉淀法制备的，方法为：a、将脱脂洗净的羊毛或动物蹄角粉末与Na2S按照质量比4:3加入密闭玻璃容器中，加入羊毛或蹄角粉末质量20倍的水，避光放置7-10天得到角蛋白溶液；b、在角蛋白溶液中20秒内加入浓盐酸，使角蛋白溶液的pH值在60秒内达到2.0-2.5，使角蛋白迅速沉淀；c、待角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀，并用无氧水洗涤4次， 20℃真空干燥得到白色角蛋白固体粉末；角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀时：先将角蛋白溶液上层所漂浮的色素蛋白取出，弃去上层液体，离心收集下层的角蛋白沉淀，离心转速为3000转/min。制备质量浓度为5%角蛋白溶液的方法为：将角蛋白固体粉末加入水中，逐渐加入固体NaOH，加入量为蛋白质量的5%，并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入溶液总质量0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身因二硫键引起的交联。
②制备质量分数为0.2-5%的酪蛋白溶液；酪蛋白采取碱溶解法进行溶解。
③二硫键重建法制备复合胶束：a、蛋白混合溶液的制备，将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的酪蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液，使角蛋白达到混合后总蛋白质量的10%以上，同时将溶液的pH值调节至两种蛋白的等电点之间，整个过程不能产生蛋白沉淀；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于25℃的恒温中静置12小时；使用巯基试剂DTNB通过分光光度法测定两种蛋白的混合溶液中巯基含量的具体数值；C、通过得到的巯基含量的具体数值计算应加入的氧化剂的量；氧化剂加入后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。加入的氧化剂为H202，加入氧化剂的量为通过分光光度法测定的两种蛋白的混合溶液中所含巯基等摩尔的量，得到二硫键重建后的复合胶束溶液，加入后稳定30min；最后将二硫键重建后的复合胶束溶液置在去离子水中进行透析以除去多余的氧化剂，最后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
实施例3
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①制备质量浓度为2.5%角蛋白溶液；角蛋白通过Na2S还原、酸沉淀法制备的，方法为：a、将脱脂洗净的羊毛或动物蹄角粉末与Na2S按照质量比4:3加入密闭玻璃容器中，加入羊毛或蹄角粉末质量18倍的水，避光放置8天得到角蛋白溶液；b、在角蛋白溶液中20秒内加入浓盐酸，使角蛋白溶液的pH值在40秒内达到2.0-2.5，使角蛋白迅速沉淀；c、待角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀，并用无氧水洗涤3次， 20℃真空干燥得到白色角蛋白固体粉末；角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀时：先将角蛋白溶液上层所漂浮的色素蛋白取出，弃去上层液体，离心收集下层的角蛋白沉淀，离心转速为3000转/min。制备质量浓度为5%角蛋白溶液的方法为：将角蛋白固体粉末加入水中，逐渐加入固体NaOH，加入量为蛋白质量的5%，并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入溶液总质量0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身因二硫键引起的交联。
②制备质量分数为3%的清蛋白溶液；清蛋白采取碱溶解法进行溶解。
③二硫键重建法制备复合胶束：a、蛋白混合溶液的制备，将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的清蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液，使角蛋白达到混合后总蛋白质量的10%以上，同时将溶液的pH值调节至两种蛋白的等电点之间，整个过程不能产生蛋白沉淀；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于20℃的恒温中静置18小时；使用巯基试剂DTNB通过分光光度法测定两种蛋白的混合溶液中巯基含量的具体数值；C、通过得到的巯基含量的具体数值计算应加入的氧化剂的量；氧化剂加入后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。加入的氧化剂为H202，加入氧化剂的量为通过分光光度法测定的两种蛋白的混合溶液中所含巯基等摩尔的量，得到二硫键重建后的复合胶束溶液，加入后稳定30min；最后将二硫键重建后的复合胶束溶液置在去离子水中进行透析以除去多余的氧化剂，最后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
实施例4
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①备料：准备角蛋白和大豆蛋白。
②制备角蛋白溶液：制备浓度为1%的角蛋白溶液，具体方法为将角蛋白加入水中，加入固体NaOH并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身的因二硫键引起的交联。
③制备大豆蛋白溶液：制备浓度为0.2%的大豆蛋白溶液，具体方法为将脱脂大豆蛋白加入水中，将水温逐渐升高至80℃，逐渐加入固体氢氧化钠直至大豆蛋白完全溶解，将溶液使用滤纸进行过滤除去不溶成分。
④蛋白混合液的制备：将制备好的两种蛋白溶液按照等体积进行混合，将溶液的pH值调节至4.5，均匀搅拌静置5小时。
⑤二硫键重建法制备角蛋白/大豆蛋白复合胶束：将两种蛋白的混合溶液在25℃中静置5小时后取出，加入H2O2促使二硫键进行重建，加入与角蛋白所含巯基等摩尔量的双氧水或NaB03•4H2O。最后将二硫键重建过的复合胶束溶液置于截留分子量为1KD的透析袋中进行透析以除去多于的氧化剂，得到经过二硫键重建的角蛋白/大豆蛋白复合胶束。
实施例5
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①备料：准备角蛋白和丝胶蛋白。
②制备角蛋白溶液：制备浓度为0.5%的角蛋白溶液，具体方法为将角蛋白加入水中，加入固体NaOH并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入0.05%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身的因二硫键引起的交联。
③丝胶蛋白的提取: 将蚕茧剪碎，用蒸馏水将清洗晾干，按浴比为1:20用500 mL乙醚浸泡24 h(每隔6小时搅拌一次)以除蜡质物，接着用水洗净，加入无水乙醇浸泡24 h除去部分有机物，洗净后晾干。按照质量比1:40的比例将蚕茧放入蒸馏水中煮沸2小时脱胶，脱胶溶液经浓缩干燥后即为丝胶蛋白粉末。
④丝胶蛋白溶液的制备：制备浓度为0.5%的丝胶蛋白溶液，具体方法为将丝胶蛋白粉末加入水中，加入固体NaOH并磁力搅拌直至丝素蛋白完全溶解。
⑤蛋白混合液的制备：将制备好的两种蛋白溶液按照等体积进行混合，将溶液的pH值调节至5.0，均匀搅拌静置6小时。
⑥二硫键重建法制备角蛋白/丝胶蛋白复合胶束：将混合蛋白溶液在25℃中静置2小时后取出，加入角蛋白中巯基等摩尔量的双氧水或NaB03•4H20。最后将二硫键重建过的复合胶束溶液至于截留分子量为1KD的透析袋中进行透析以除去多于的氧化剂，得到经过二硫键重建的角蛋白与丝胶蛋白复合胶束，如图2所示：图中显示的角蛋白与丝胶蛋白复合胶束的组装条件为：角蛋白与丝素蛋白质量比为2:1，温度25℃，组装完后pH值调节至7.0。
实施例6
本发明所述的通过二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束（角蛋白/丝素蛋白复合胶束）的方法包括下述步骤：
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①备料：准备角蛋白和丝素蛋白。
②制备角蛋白溶液：制备浓度为1%的角蛋白溶液，具体方法为将角蛋白加入水中，加入固体NaOH并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身的因二硫键引起的交联。
③丝素蛋白的提取: 将蚕茧打开剪碎用蒸馏水将清洗干净，放入0.5%的NaHCO3溶液中，加入100倍质量的水，在100℃的条件下沸煮60分钟后去离子水冲洗3次，目的是去除丝胶蛋白，将去除丝胶蛋白的蚕丝取出放入恒温干燥箱中在40℃下烘干备用。
④丝素蛋白的溶解：按照CaCl2:CH3CH2OH:H2O摩尔比为1:2:8的比例配置丝素蛋白溶解液，将脱胶后的丝素蛋白加入配置好的溶解液中完全淹没，在70℃的水浴中持续溶解3小时。将溶解得到的丝素蛋白溶液使用滤纸过滤以去没有溶解的丝素蛋白及杂质，再将过滤后的丝素蛋白溶液装入透析袋中（截留分子量为8000）在去离子水中透析48小时以上，持续透析直到透析液的电导率不在变化为止，将丝素蛋白溶液低温真空干燥，得到丝素蛋白固体。
⑤制备浓度为1%的丝素蛋白溶液：具体方法为将丝素蛋白固体加入水中，逐渐加入固体NaOH并磁力搅拌直至丝素蛋白完全溶解。
⑥蛋白混合液的制备：将制备好的两种蛋白溶液按照等体积进行混合，将溶液的pH值调节至4.2，均匀搅拌, 静置10小时。
⑦二硫键重建法制备角蛋白/丝素蛋白复合胶束：将混合蛋白溶液在25℃中静置5小时后取出，加入与角蛋白中所含巯基等摩尔量的H202或NaB03•4H20促使二硫键进行重建。最后将二硫键重建过的复合胶束溶液至于截留分子量为3KD的透析袋中进行透析以除去多于的氧化剂，得到经过二硫键重建的角蛋白/丝素蛋白复合胶束。
实施例7
一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，包括下述步骤：
①备料：准备角蛋白和胶原蛋白。
② 制备角蛋白溶液：制备浓度为2%的角蛋白溶液，具体方法为将角蛋白加入水中，加入固体NaOH并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解，加入0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身的因二硫键引起的交联。
③胶原蛋白蛋白的选取: 本实例选取的胶原蛋白为胶原蛋白的水解物酸性明胶，其等电点为8.5。
④制备浓度为0.5%的胶原蛋白蛋白溶液：具体方法为将酸性明胶固体加入水中，在50℃的水浴中加热并搅拌直至其溶解。
⑤蛋白混合液的制备：将两种蛋白制备好的蛋白溶液按照等体积进行混合，将溶液的pH值调节至7.0，均匀搅拌后静置12小时。
⑥二硫键重建法制备角蛋白/胶原蛋白复合胶束：将混合蛋白溶液在25℃中静置6小时后取出，加入角蛋白中所含巯基等摩尔量的H202或NaB03•4H20促使二硫键进行重建。最后将二硫键重建过的复合胶束溶液至于截留分子量为1KD的透析袋中进行透析以除去多于的氧化剂，得到经过二硫键重建的角蛋白/胶原蛋白复合胶束。
Claims (8)
1.一种二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于，包括以下步骤：①制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液；②制备质量分数为0.2-5%的天然高分子蛋白溶液；
③二硫键重建法制备复合胶束：a、蛋白混合溶液的制备，将步骤①制备的角蛋白溶液和步骤②制备的天然高分子蛋白溶液混合制得蛋白混合溶液，使角蛋白达到混合后总蛋白质量的10%以上，同时将溶液的pH值调节至两种蛋白的等电点之间；b、二硫键的定量重建：将两种蛋白的混合溶液置于15-25℃的恒温中静置3-12小时；使用巯基试剂DTNB通过分光光度法测定两种蛋白的混合溶液中巯基含量的具体数值；C、通过得到的巯基含量的具体数值计算应加入的氧化剂的量；氧化剂加入后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
2.根据权利要求1所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：所述的角蛋白为动物毛发或动物蹄角水解制备的角蛋白，所述的天然高分子蛋白为丝素蛋白、丝胶蛋白、胶原蛋白、酪蛋白、白蛋白、清蛋白、大豆蛋白中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：步骤①所述的角蛋白通过Na2S还原、酸沉淀法制备的，方法为：a、将动物毛发或动物蹄角粉末与Na2S按照质量比4:3加入密闭玻璃容器中，加入动物毛发或蹄角粉末质量20倍的水，避光放置7-10天得到角蛋白溶液；b、在角蛋白溶液中于20秒内加入浓盐酸，使角蛋白溶液的pH值在30-60秒内达到2.0-2.5，使角蛋白迅速沉淀；c、待角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀，并用无氧水洗涤2-4次， 5-20℃真空干燥得到白色角蛋白固体粉末。
4.根据权利要求3所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：所述的角蛋白沉淀后收集下层的角蛋白沉淀时：先将角蛋白溶液上层所漂浮的色素蛋白取出，弃去上层液体，离心收集下层的角蛋白沉淀，离心转速为3000转/min。
5.根据权利要求1所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：步骤①所述的制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液的方法为：将角蛋白固体粉末加入水中，逐渐加入固体NaOH，加入量为蛋白质量的5%，并磁力搅拌直至角蛋白完全溶解。
6.根据权利要求5所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：所述步骤①制备质量浓度为0.5-5%角蛋白溶液时加入溶液总质量0.1%的十二烷基苯磺酸钠用于防止角蛋白自身因二硫键引起的交联。
7.根据权利要求2所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：步骤②所述的制备任意一种质量分数为0.2-5%的天然高分子蛋白溶液的方法为：采取碱溶解法进行溶解，制备天然高分子蛋白溶液。
8.根据权利要求1所述的二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法，其特征在于：步骤③中加入的氧化剂为H202或NaB03•4H20，加入氧化剂的量为通过分光光度法测定的两种蛋白的混合溶液中所含巯基等摩尔的量，得到二硫键重建后的复合胶束溶液，加入后稳定30min；最后将二硫键重建后的复合胶束溶液置在去离子水中进行透析以除去多余的氧化剂，最后得到经过二硫键重建固定好的复合蛋白胶束。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710378107.3A CN107118358B (zh) | 2017-05-25 | 2017-05-25 | 二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710378107.3A CN107118358B (zh) | 2017-05-25 | 2017-05-25 | 二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107118358A true CN107118358A (zh) | 2017-09-01 |
| CN107118358B CN107118358B (zh) | 2020-02-18 |
Family
ID=59729243
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710378107.3A Expired - Fee Related CN107118358B (zh) | 2017-05-25 | 2017-05-25 | 二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107118358B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107603241A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-01-19 | 中原工学院 | 一种梭形纳米胶束的制备方法 |
| CN111330514A (zh) * | 2018-12-19 | 2020-06-26 | 广西科技大学 | 一种持油蛋白的制备方法 |
| CN115785490A (zh) * | 2022-11-29 | 2023-03-14 | 广西医科大学 | 一种交联改性的明胶材料及其制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103102694A (zh) * | 2013-03-07 | 2013-05-15 | 河南鼎大生物科技有限公司 | 再生角蛋白丝素蛋白共混溶液的制备及湿法纺丝的方法 |
| CN103205861A (zh) * | 2013-03-28 | 2013-07-17 | 苏州正业昌智能科技有限公司 | 一种吸附重金属离子的静电纺羊毛角蛋白/丝素复合纤维膜及其制备方法 |
| CN106084256A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-11-09 | 中原工学院 | 一种自组装蛋白纳米复合胶束的制备方法 |
-
2017
- 2017-05-25 CN CN201710378107.3A patent/CN107118358B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103102694A (zh) * | 2013-03-07 | 2013-05-15 | 河南鼎大生物科技有限公司 | 再生角蛋白丝素蛋白共混溶液的制备及湿法纺丝的方法 |
| CN103205861A (zh) * | 2013-03-28 | 2013-07-17 | 苏州正业昌智能科技有限公司 | 一种吸附重金属离子的静电纺羊毛角蛋白/丝素复合纤维膜及其制备方法 |
| CN106084256A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-11-09 | 中原工学院 | 一种自组装蛋白纳米复合胶束的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 万建荣等: "《水产食品化学分析手册》", 30 April 1993, 上海科学技术出版社 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107603241A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-01-19 | 中原工学院 | 一种梭形纳米胶束的制备方法 |
| CN107603241B (zh) * | 2017-09-25 | 2019-09-13 | 中原工学院 | 一种梭形纳米胶束的制备方法 |
| CN111330514A (zh) * | 2018-12-19 | 2020-06-26 | 广西科技大学 | 一种持油蛋白的制备方法 |
| CN115785490A (zh) * | 2022-11-29 | 2023-03-14 | 广西医科大学 | 一种交联改性的明胶材料及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107118358B (zh) | 2020-02-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lim et al. | Marine collagen as a promising biomaterial for biomedical applications | |
| Cao et al. | Processing and characterization of silk sericin from Bombyx mori and its application in biomaterials and biomedicines | |
| US8105629B2 (en) | Collagen gel and process of producing the same | |
| US4268131A (en) | Fiber collagen contact lens | |
| JP5870398B2 (ja) | 高強度コラーゲン線維膜及びその製造方法 | |
| CN107118358A (zh) | 二硫键重建法制备天然蛋白复合胶束的方法 | |
| JP6190911B2 (ja) | 魚皮由来組織修復材料及びその製造方法 | |
| CN105709259A (zh) | 由水母制成的胶体胶原蛋白凝胶 | |
| CN106310366B (zh) | 一种引导牙周组织再生屏障膜及其制备方法与应用 | |
| US10730928B2 (en) | Biofabrication techniques for the implementation of intrinsic tissue geometries to an in vitro collagen hydrogel | |
| CN110234313A (zh) | 具有皮肤护理特性的弹性体制品及其生产方法 | |
| CN103408787B (zh) | 淡水鱼源胶原蛋白海绵材料及其制备方法 | |
| CN105148325B (zh) | 一种新的角膜组织修复材料及其制备方法 | |
| Ghaffari-Bohlouli et al. | Protein by-products: Composition, extraction, and biomedical applications | |
| WO2011149112A1 (ja) | 可溶化コラーゲン繊維及びその製造方法 | |
| CN113425902A (zh) | 可3d打印的可见光交联胶原蛋白生物墨水及其制备方法 | |
| CN104130443B (zh) | 一种医用软胶囊壳用的蚕天然凝胶的制备方法 | |
| EP0214035B1 (fr) | Nouvelles préparations de collagène placentaire, leur procédé d'extraction et leurs applications | |
| Singh | Keratin-based materials in Biomedical engineering | |
| US20200215228A1 (en) | Collagen microfiber scaffolds | |
| CN106902398A (zh) | 阳离子化丝素蛋白材料、其制备方法及应用 | |
| Li et al. | Toxicity study of isolated polypeptide from wool hydrolysate | |
| CN109337383A (zh) | 一种胶原基自修复水凝胶及其制备方法 | |
| CN108158849A (zh) | 免洗面膜的制备方法 | |
| CN105255981B (zh) | 一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 451191 No. 1 Huaihe Road, Shuang Hu Economic and Technological Development Zone, Xinzheng, Zhengzhou, Henan Applicant after: Zhongyuan University of Technology Address before: 451191 No. 1 Huaihe Road, Shuanghu Town Economic and Technological Development Zone, Zhengzhou City, Henan Province Applicant before: Zhongyuan University of Technology |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20200218 |